益气活血通络方对db/db小鼠胰腺组织JNK信号通路及IL-1β、TNF-α表达的影响

目的:观察益气活血通络方对db/db小鼠胰腺组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路及炎症因子表达的影响,探讨益气活血通络方对胰岛细胞炎性损伤的保护作用及其机制。方法:用自发性2型糖尿病C57BL/Ks J-db/db小鼠为动物模型,将db/db小鼠随机分成模型组、硫辛酸组(0.078g/kg)、益气活血通络方6.4、3.2、1.6g/kg剂量组,另取10只db/m小鼠为正常对照组,连续灌胃给药8周,模型组给予生理盐水。药前、药后4周和8周测定小鼠血糖。实验结束后,摘取胰腺组织,HE染色法观察病理变化,ELISA法检测小鼠胰腺组织胰岛素含量,Western bloting与免疫组织化学法检测IL-1β、TNF-α、JNK、p-JNK蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组胰岛细胞出现严重的病理性损伤,药后4周和8周血糖、胰腺组织中IL-1β、TNF-α、P-JNK蛋白的表达水平明显高于正常组;与模型组比较,益气活血通络方组胰岛细胞病理损伤程度减轻,血糖降低,胰腺组织胰岛素含量升高,胰腺组织IL-1β、TNF-α、P-JNK蛋白表达水平显著下降。结论:益气活血通络方能够减轻db/db小鼠胰岛细胞损伤,可能与降低炎症因子表达,抑制JNK信号通路过度激活有关。     

血脂康通过葡萄糖感受器影响db/db小鼠胰岛分泌功能的研究

目的探讨血脂康对db/db小鼠胰岛内葡萄糖转运蛋白-2(GLUT-2)和葡萄糖激酶(GCK)表达的影响。方法将40只8周龄清洁级雄性C57BL/Ks J-db/db小鼠随机分为血脂康组和db/db组,每组20只,分别给予300 mg/(kg·d)血脂康和等剂量安慰剂(0.5%纤维素钠)灌胃;选取20只同周龄同窝C57BL/Ks J-db/m小鼠作为非糖尿病对照组(db/m组),给予安慰剂灌胃。各组小鼠均连续灌胃8周后行腹腔葡萄糖耐量试验,以离体胰岛灌流法评价胰岛分泌功能,分别采用qRT-PCR和Western blot方法检测胰岛β细胞葡萄糖感受器GLUT-2和GCK mRNA及蛋白表达水平。结果在糖负荷后30,60,120 min,血脂康组血糖水平均明显低于db/db组(P均<0.05),但均高于db/m组(P均<0.05);在糖负荷后30 min,血脂康组血浆胰岛素水平明显高于db/db组(P<0.05)。与db/db组比较,血脂康组在2.8 mmol/L低糖灌流时胰岛素分泌无明显升高,而给予16.7 mmol/L高糖刺激1 min后胰岛素分泌明显升高(P<0.05),但仍低于db/m组(P<0.05)。db/db组GLUT-2和GCK mRNA及蛋白表达水平均明显低于db/m组(P均<0.05),血脂康组GLUT-2和GCK mRNA及蛋白表达水平均明显高于db/db组(P均<0.05)。结论血脂康能通过增加胰岛β细胞GLUT-2和GCK的表达改善胰岛分泌功能。     

六味地黄丸基于SIRT6/NF-κB信号通路对糖尿病伴肝损伤的保护作用

目的:从炎症角度探讨六味地黄丸对糖尿病伴肝损伤的保护机制。方法:选取自发性2型糖尿病动物模型db/db雄性小鼠18只,按空腹血糖(FBG)随机分模型组、六味地黄丸组(9. 75 g·kg-1·d-1,1次/d)、白藜芦醇组(42. 6 mg·kg-1·d-1,1次/d); 12只同窝野生型db/m小鼠,按FBG随机分正常组和六味地黄丸对照组(9. 75 g·kg-1·d-1,1次/d),正常组和模型组等量蒸馏水灌胃,各组给药16周后内眦静脉取血后处死小鼠,检测FBG,甘油三酯(TG)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)等变化,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理改变,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织沉默信息调节因子6(SIRT6),核转录因子-κB p65(NF-κB p65),单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),血管细胞黏附因子-1(VCAM-1)和细胞间黏附因子-1(ICAM-1)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠FBG,TG和ALT显著升高(P 0. 01),NF-κB p65,MCP-1,VCAM-1和ICAM-1蛋白表达显著升高(P 0. 01),SIRT6蛋白表达显著降低(P 0. 01);与模型组比较,六味地黄丸组和白藜芦醇组血FBG,TG显著降低(P 0. 01),NF-κB p65,MCP-1和VCAM-1蛋白表达明显降低(P 0. 05,P 0. 01),SIRT6蛋白表达明显升高(P 0. 05),改善小鼠肝组织的肝细胞脂肪变性及炎细胞浸润。结论:六味地黄丸对糖尿病小鼠伴肝脏损伤有保护作用,其机制与调节血脂代谢,抑制炎症反应有关。     

砒霜对狼疮鼠脾Th细胞及分泌细胞因子的影响

目的:探讨砒霜(Arsen ic Trioxide,As2O3)对体外MRL/lpr狼疮小鼠脾Th细胞及分泌相关细胞因子IFN-γ和IL-10的调节作用。方法:通过免疫磁珠分别分选MRL/lpr和C57BL小鼠脾Th细胞,Th细胞随机分PHA组和空白组,采用酶联免疫吸附反应(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法比较MRL/lpr和C57BL小鼠Th细胞分泌IFN-γ和IL-10及其mRNA水平的差异,然后观察As2O3对MRL/lpr小鼠Th细胞分泌IFN-γ和IL-10及其mRNA水平的影响。细胞计数试剂盒(CCK-8)观察不同浓度(0.5、1.0、1.5、2.0μmol/L)及作用时间As2O3对Th细胞增殖的影响。结果:(1)与C57BL相比,MRL/lpr小鼠各组Th细胞分泌的IFN-γ和IL-10水平显著增高,1.0μmol/L的As2O3能明显抑制MRL/lpr小鼠各组上述因子的分泌;(2)PHA组的IL-10 mRNA和IFN-γmRNA水平在MRL/lpr小鼠中表达均高于C57BL小鼠,As2O3能抑制MRL/lpr小鼠Th细胞空白组和PHA组中IL-10mRNA和IFN-γmRNA的高表达;(3)除0.5μmol/L的As2O3能刺激Th细胞的增殖,≥1.0μmol/L的As2O3能抑制Th细胞的生长,但浓度增加对细胞存活率有明显的影响。结论:适当浓度的砒霜能有效下调Th细胞因子IL-10和IFN-g mRNA的异常分泌及而影响因子的表达,但并不产生过度的免疫抑制,并能下调MRL/lpr狼疮小鼠脾脏Th细胞的异常增殖而不影响其存活率,从而调节狼疮鼠的异常免疫功能,可能是砒霜治疗SLE的重要机制之一。     

中药复方汉唐平改善db/db T2DM小鼠肝脂肪变性的作用及机制研究

目的 观察中药复方汉唐平(经验方)对db/db T2DM小鼠肝脂肪变性的作用，并探讨其是否通过调控PPARγ/FATP4/CD36通路抑制脂肪酸的摄取，从而改善T2DM肝脂肪变性小鼠的糖脂代谢紊乱、炎症状态。方法 24只db/db小鼠，9只C57小鼠。药物干预前以小鼠空腹血糖≥7.0mmol/L,及随机抽取3只db/db小鼠和3只C57正常小鼠行肝脏油红O染色，以判断T2DM肝脂肪变性模型是否成立。模型成立后，将剩余的db/db小鼠随机分成模型组、汉唐平组、二甲双胍组，每组各7只；另外6只C57 BL/6J小鼠为对照组。每周记录小鼠体重，取材后计算各组小鼠的肝脏脏器指数；检测小鼠血清空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)水平；对肝脏进行油红O染色，以观察脂质累积情况。用ELISA法检测各组小鼠炎症因子水平，包括肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素6(IL6)和白介素1β(IL-1β)的水平。免疫印迹法检测PPARγ、FATP4、CD36蛋白的表达。结果 三组db/db小鼠的体重显著高于对照组小鼠(P<0.05),汉唐平治疗4周后，小鼠体重增长逐渐趋缓，并有逐渐...     

咳喘六味合剂对RSV感染哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察咳喘六味合剂对RSV感染哮喘小鼠肺组织中气道炎症的影响。方法:将40只雄性Balb/C小鼠随机分为4组,每组10只。PBS组为非OVA致敏和不感染RSV的对照组。OVA组应用OVA注射和OVA气道雾化吸入致敏。OVA/RSV组和咳喘六味合剂组(KLH组)在应用OVA致敏后用RSV滴鼻,复制急性病毒性哮喘模型。咳喘六味合剂组(KLH组)还用咳喘六味合剂治疗。处死动物,RT-PCR检测肺组织中白细胞介素13(IL-13)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-17A(IL-17A)mRNA的表达;HE染色观察肺病理变化。结果:HE染色显示咳喘六味合剂能显著改善RSV感染哮喘小鼠气道炎症。与PBS组相比,OVA组IFN-γ降低,IL-13、IL-17A增高(P<0.05,P<0.01);OVA/RSV组IL-13、IL-17A增高(P<0.01),IFN-γ虽降低,但无统计学意义(P>0.05),且IFN-γ、IL-13均较OVA组增高(P<0.05,P<0.01)。较OVA/RSV组相比,KLH组能显著升高IFN-γ(P<0.05,P<0.01);降低IL-13、IL-17A mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:咳喘六味合剂可抑制气道炎症,改善肺组织中炎性因子的表达,达到控制哮喘的目的。     

益肾养阴合剂对MRL/lpr小鼠免疫调节机制的研究

目的探讨益肾养阴合剂对MRL/lpr小鼠中的CD4+、CD8+、IFN-γ、IL-l0的影响。揭示益肾养阴合剂对MRL/lpr小鼠免疫紊乱发挥疗效作用的调节。方法将C57BL/6雄性小鼠分2组,第1组生理盐水对照;第2组正常中药组(益肾养阴合剂)。再将MRL/1pr雄性小鼠随机分为4组:第3组为生理盐水对照组;第4组为中药组(益肾养阴合剂);第5组为中西药组(益肾养阴合剂+醋酸泼尼松片);第6组为西药组(醋酸泼尼松片)。各组小鼠均为10只。予每日灌胃连续治疗4周。4周后处死,取各组小鼠(每组取5只)新鲜脾脏组织进行研磨、淋巴细胞分离后,用流式细胞术检测CD4+、CD8+细胞比例;再取余下各组5只小鼠新鲜脾脏组织为两部分,一部分用ELISA法检测组织IL-10、IFN-γ浓度;另一部分运用RT-PCR实验检测IL-10、IFN-γmRNA含量。结果 1.4组MRL/1pr小鼠CD4+较C57BL/6小鼠低且治疗后以中药加激素组升高明显(P0.05);4组MRL/1pr小鼠CD8+较C57BL/6小鼠高,在治疗后,中药加激素组较MRL/1pr小鼠生理盐水组降低(P0.05);CD4+/CD8+的比值中4组MRL/1pr小鼠与C57BL/6治疗前无差异且MRL/1pr比值最低,给予治疗后以MRL/1pr中药配合激素组升高最为明显(P0.05)。2.MRL/1pr小鼠IL-10较C57BL/6小鼠有不同程度升高,经治疗后以中药配合西药组降低明显(P0.05);MRL/1pr小鼠IFN-γ较C57BL/6小鼠有不同程度降低,经治疗后以中药配合西药组升高明显(P0.05);IL-10 mRNA、IFN-γmRNA的表达6组间比较差异性与蛋白变化(ELISA结果)一致。结论益肾养阴合剂可通过对CD4+、CD8+、IFN-γ、IL-10的调节缓解MRL/1pr小鼠病情,且治疗调节了CD4+/CD8+比例,说明益肾养阴合剂对调节MRL/1pr小鼠免疫紊乱具有一定疗效。     

桂附地黄丸对移植物抗宿主病小鼠IFN-γ表达影响的研究

目的:观察中药桂附地黄丸对移植物抗宿主病小鼠IFN-γ表达的影响,探讨桂附地黄丸对移植物抗宿主病的作用及机理。方法:以SPF级Balb/c雄性小鼠作为供鼠,以SPF级C57BL/6雌性小鼠作为受鼠,移植前进行直线加速器全身照射,剂量为9.0Gy,照射后4小时内尾静脉输注骨髓细胞8×107个/只+脾细胞8×107个/只,建立GVHD模型。然后分为桂附地黄丸组和空白组,每组20只。C57BL/6雌性小鼠在移植前两周饮用含庆大霉素(3.2×105U/L)和红霉索(250mg/L)的灭菌水,无菌饲养。观察期间记录小鼠的一般生存状况、每天的体重以及存活时间,移植后第14天及第30天,分别杀鼠取材,运用ELISA法检测小鼠血清IFN-γ,Western Blot法检测小鼠脾脏IFN-γ蛋白的表达。结果:空白组在移植后14天全部死亡,死亡率100%,平均生存时间是26.95天;桂附地黄丸组死亡5只,存活率75%,平均生存时间是10天,差异显著(P<0.01)。移植后给药第14天,桂附地黄丸组小鼠血清中IFN-γ浓度较空白组降低,说明移植物抗宿主病的发生的严重程度与小鼠IFN-γ的表达呈正相关,具有统计学意义(P<0.01)。给药后第30天,其值继续下降,比值显著低于空白组(P<0.01)。结论:桂附地黄丸可以通过降低血清中的IFN-γ的浓度有效地预防和降低异体移植小鼠移植物抗宿主病的发生和发生后的严重程度。     

番石榴叶提取物对db/db小鼠骨骼肌AMPK-PGC-1α-FNDC5信号通路的影响

目的:探讨番石榴叶提取物对糖尿病 db/db 小鼠骨骼肌 AMPK-PGC-1α-FNDC5信号通路的影响。方法:实验共纳入24只6周龄雄性db/db小鼠及6只同龄雄性C57BL/6J小鼠,适应性喂养两周后,6只C57BL/6J雄性小鼠作为正常组,db/db小鼠检测空腹血糖≥7.0 mmol/l者视为造模成功,并随机分为模型组和番石榴叶提取物高、中、低剂量组,每组各6只。番石榴叶提取物按高剂量14 mg/kg、中剂量7 mg/kg、低剂量3.5 mg/kg每日进行灌胃,正常组小鼠灌服等量蒸馏水,干预4周。每周监测小鼠进食量、体重和空腹血糖。 实验结束后,将小鼠空腹脱臼处死,并从眼眶取血,测定血浆胰岛素水平。Western-blot检测AMPK-α、p-AMPK-α、PGC-1α、FNDC5蛋白在骨骼肌中的表达,以及PGC-1α、UCP-1在脂肪组织中的表达。结果:番石榴叶提取物高剂量组小鼠相比模型组小鼠体重、血糖均显著降低,中剂量组小鼠在第2周血糖也出现明显下降,高、中剂量组小鼠的胰岛素水平均降低。检测蛋白表达结果显示,番石榴叶提取物干预的小鼠骨骼肌P-AMPK-α、PGC-1α、FNDC5蛋白和脂肪组织PGC-1α、UCP-1蛋白的表达均明显高于模型组。结论:番石榴叶提取物可通过增强骨骼肌的AMPK-PGC-1α-FNDC5信号通路传导,诱导白色脂肪组织棕色化,以实现降低血糖、减轻体重。     

黄芪皂甙Ⅳ在C57BL/6小鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨黄芪皂甙Ⅳ对C57BL/6小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用。方法:将24只SPF级C57BL/6小鼠随机分为四组:对照组(C组)、阴性治疗组(S组)、肾脏缺血再灌注组(I组)、肾脏缺血再灌注损伤治疗组(IA组)。肾脏缺血再灌注损伤模型采用双侧肾动脉夹闭的方法制作。四组小鼠均分离双侧肾动脉,C组:尾静脉给予生理盐水;S组:尾静脉给予黄芪皂甙Ⅳ(2mg/kg);I组:夹闭双层肾动脉,尾静脉给予生理盐水;IA组:夹闭双侧肾动脉,尾静脉给予黄芪皂甙Ⅳ(2mg/kg)。生理盐水和黄芪皂甙Ⅳ每天1次,连续给予7天。用肾功能检测、组织损伤评分、Western blot法检测PUMA的表达,ELISA法检测肾组织TNF-α、IL-6的表达。结果:与C组、S组比较,I组小鼠血清BUN、Scr、炎症因子TNF-α、IL-6及肾组织中PUMA均明显升高(P0.05);经黄芪皂甙Ⅳ预处理,与I组比较,IA组中小鼠血清中BUN、Scr、炎症因子TNF-α、IL-6及肾组织中PUMA均明显降低(P0.05)。结论:黄芪皂甙Ⅳ通过阻止PUMA上调和TNF-α、IL-6的表达来保护肾脏缺血再灌注损伤。     

大黄酸对db/db小鼠早期相胰岛素分泌的影响

目的探讨大黄酸对db/db小鼠的降血糖作用及对胰岛素分泌的影响。方法 30只4周龄db/db小鼠随机分为2组各15只,对照组给予1%纤维素钠,治疗组给予120 mg/kg大黄酸,连续鼻饲灌胃给药8周。投药结束后行经腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT)并测定相应胰岛素水平,其曲线下面积(AUC)代表胰岛素分泌水平,并通过计算IPGTT的0～30 min胰岛素曲线下面积评估早期相胰岛素分泌功能。结果与对照组相比,治疗组糖负荷后0,30,60和120 min的血糖水平明显下降,而30,60和120 min的胰岛素水平明显升高,尤其是早期相胰岛素水平升高更明显。结论早期大黄酸治疗可以明显改善db/db小鼠的葡萄糖耐量,恢复早期相胰岛素分泌功能。大黄酸的这一作用可能使之成为一种新的针对糖尿病的预防或治疗手段。     

玉壶汤对db/db小鼠糖尿病的药效学研究

目的 观察玉壶汤对db/db小鼠的降糖调脂作用,并比较党参代替人参后新方与原方的药效。方法 取12周龄自发性2型糖尿病db/db小鼠,将血糖值大于16.7 mmol·L-1的小鼠按血糖水平分层随机分为模型组、玉壶汤组、玉壶汤新方组、消渴丸组,另设野生型雄性db/db小鼠为正常对照组。给药8周后,以生化仪检测小鼠血糖、总胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）;酶标仪检测小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、胰岛素、白介素-6（IL-6）含量。结果 与模型组比较,玉壶汤组小鼠血清中血糖、CHOL、TG、MDA和IL-6含量显著降低,SOD活力、胰岛素水平显著升高（P＜0.05,P＜0.01）;玉壶汤新方组小鼠血清中血糖、CHOL、TG和IL-6含量显著降低,SOD活力、胰岛素水平显著升高（P＜0.05, P＜0.01）。结论 玉壶汤对2型糖尿病有较好的降糖调脂作用,以党参代替人参入方后的新方与原方的药效相当。     

Indigofera arrecta prevents the development of hyperglycaemia in the db/db mouse

Genetically obese diabetic and nondiabetic mice, and their lean littermates were used to evaluate an aqueous extract of Indigofera arrecta which is used for the treatment of diabetes. Control animals were given water instead of the extract over a 90 day period, and measurements of blood glucose and body weight were done at approximately 30-day intervals. The development of hyperglycaemia associated with the diabetic mice over a time period was absent when the mice were on the extract. Blood glucose levels of littermates of both mutant strains, and the mild hyperglycaemia of the obese nondiabetic mice were not affected. The extract significantly lowered the body weight of both types of obese mutant mice but did not affect the body weight of the littermates.     

Anti-diabetic effect of cinnamon extract on blood glucose in db/db mice

The anti-diabetic effect of Cinnamomi cassiae extract (Cinnamon bark: Lauraceae) in a type II diabetic animal model (C57BIKsj db/db) was studied. Cinnamon extract was administered at different dosages (50, 100, 150 and 200 mg/kg) for 6 weeks. It was found that blood glucose concentration is significantly decreased in a dose-dependent manner (P<0.001) with the most in the 200 mg/kg group compared with the control. In addition, serum insulin levels and HDL-cholesterol levels were significantly higher (P<0.01) and the concentration of triglyceride, total cholesterol and intestinal alpha-glycosidase activity were significantly lower after 6 weeks of the administration. These results suggest that cinnamon extract has a regulatory role in blood glucose level and lipids and it may also exert a blood glucose-suppressing effect by improving insulin sensitivity or slowing absorption of carbohydrates in the small intestine.     

三七皂苷Fc对2型糖尿病db/db小鼠的肾脏保护作用研究

目的:研究三七皂苷Fc对2型糖尿病db/db小鼠肾脏的保护作用。方法:8周龄雄性db/db及其同窝对照db/m小鼠分为db/m对照组,db/db模型组及db/db模型+三七皂苷Fc治疗组,每组5只。三七皂苷Fc组给予三七皂苷Fc 5 mg/(kg·d)橄榄油溶液灌胃,db/m对照组,db/db模型组给予等量橄榄油灌胃,连续8周。灌胃8周末测定小鼠体质量、血糖,收集24 h尿液,并留取血液及肾脏组织,检测尿白蛋白浓度、血肌酐及肾脏病理损伤,并采用免疫组织化学方法检测肾组织整合素连接酶(Integrin Linked Kinase,ILK)表达。结果:与db/db模型组比较,三七皂苷Fc组尿白蛋白明显降低(P<0.05),HE染色显示三七皂苷Fc可明显改善肾脏病理损伤。此外,三七皂苷Fc还可明显下调db/db小鼠肾组织ILK表达。结论:三七皂苷Fc可降低2型糖尿病db/db小鼠尿蛋白,延缓肾脏病变进展,具有肾脏保护作用。     

黄连-肉桂对db/db小鼠肠道菌群及内毒素影响的研究

目的研究黄连-肉桂对db/db小鼠血糖、肠道菌群及脂多糖(LPS)的影响。方法取6只db/m小鼠为正常组,将30只db/db小鼠随机分成模型组、二甲双胍组、黄连组、肉桂组、黄连-肉桂组各6只。正常组和模型组给予生理盐水灌胃,其余组给予相应药物灌胃8周。灌胃前(0周)及灌胃后每周测量各组小鼠的体重,在灌胃前及灌胃4周、8周后分别测量各组小鼠的血糖;灌胃8周后采集各组小鼠粪便,16S-rDNA高通量测序对肠道菌群进行基因测序;眼球采血,酶联免疫法检测血清中LPS含量。结果各药物组小鼠体重增长趋势均减缓,黄连-肉桂组体重增长减缓最明显。各药物组小鼠血糖呈明显下降趋势,黄连-肉桂组血糖下降趋势最明显;灌胃8周后黄连组和黄连-肉桂组小鼠血糖均明显低于二甲双胍组和肉桂组(P均<0.05),黄连组和黄连-肉桂组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组及二甲双胍组比较,黄连组、肉桂组、黄连-肉桂组小鼠粪便中后壁杆菌门(Firmicutes)丰度明显下降,其中黄连-肉桂组下降最明显;黄连-肉桂组拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、变形杆菌门(Proteobacteria)及疣微菌门(Verrucomicrobia)丰度明显增加。灌胃8周后各药物组血清LPS含量均较模型组明显降低(P均<0.05),各药物组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05),但黄连-肉桂组最低。结论黄连-肉桂可以有效降低db/db小鼠血糖,其降糖机制可能与有效调节小鼠肠道菌群及减少LPS释放入血有关。     

糖肾方对db/db小鼠肾脏纤维化的保护作用

目的:观察糖肾方(Tang Shen Fang,TSF)对于自发性2型糖尿病肾病db/db小鼠肾脏纤维化的保护作用。方法:8周龄雄性db/db小鼠随机分为2组,分别为模型组(db/db)和观察组(db/db+TSF),每组9只;8周龄雄性db/m小鼠为正常对照组(db/m),顺应性喂养2周后,给予糖肾方干预12周,处死小鼠,分离小鼠肾脏用于后续检测。利用PAS和Masson染色观察肾脏病理;利用Western Blotting、Real-time PCR和免疫组化等技术检测肾脏组织纤维化TGF-β1/Smad3通路以及miRNA21和miRNA29b的表达。结果:糖肾方可以改善db/db小鼠尿微量白蛋白水平,减轻小鼠肾脏损伤;Western Blotting、Real-time PCR和免疫组化结果显示,糖肾方可下调db/db小鼠肾脏中纤维化标志分子TGF-β1、Smad3、CollagenⅠ和Fibronectin的表达;下调db/db小鼠肾脏miRNA 21的表达,上调miRNA 29b的表达。结论:糖肾方可作用于TGF-β1/Smad3信号通路抑制肾脏纤维化。     

清化颗粒对db/db小鼠胰高血糖素样肽-1合成和分泌的影响

目的:探讨清化颗粒对db/db小鼠肠道胰高血糖素样肽-1(GLP-1)合成和分泌的影响。方法:选取db/m小鼠为空白对照组,db/db糖尿病小鼠随机分为模型对照组和清化颗粒(低、中、高剂量)组,干预4周,观察小鼠糖代谢变化;ELISA法分析小鼠血清GLP-1的水平;qRT-PCR法检测小鼠回肠胰高血糖素原和激素原转化酶1/3(PC1/3)的mRNA水平;Western blot法检测小鼠回肠PC1/3的蛋白表达水平;组织病理学观察小鼠回肠组织形态变化。结果:与模型对照组比较,清化颗粒降低db/db糖尿病小鼠的空腹血糖(FBG)(P0.01);提高血清GLP-1的浓度(P0.01);上调小鼠回肠组织胰高血糖素原和PC1/3酶的mRNA水平(P0.01);上调小鼠回肠组织PC1/3的蛋白表达水平(P0.01);并具有剂量依赖效应。另外,清化颗粒明显改善db/db糖尿病小鼠回肠组织形态。结论:清化颗粒能够降低db/db糖尿病小鼠的血糖水平,提高血清GLP-1水平,上调胰高血糖素原和PC1/3的mRNA水平,促进肠道GLP-1的合成和分泌,改善回肠组织形态。     

血脂康对db/db糖尿病小鼠胰岛微环境的影响

目的探讨血脂康对db/db糖尿病小鼠胰岛微环境的影响。方法将40只db/db小鼠分为血脂康组和db/db组,另取20只db/m小鼠作为正常对照组,分别给予血脂康和安慰剂灌胃。每周监测代谢指标,8周后每周取10只小鼠行腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT),离体胰岛灌流评价胰岛分泌功能,免疫组织化学标记并半定量分析胰岛β细胞含量、胰岛微环境与超微结构的变化。结果与db/db组比较,血脂康组代谢指标明显改善,胰岛分泌功能增强,胰岛β细胞数量、质量明显改善,血管内皮细胞标志物CD31明显增多,且线粒体形态损伤趋势明显缓解。结论血脂康能通过增加胰岛血管内皮细胞密度、修复超微结构的损伤、减少β细胞凋亡而改善胰岛微环境及胰岛素分泌功能。     

复方鱼腥草合剂对db/db小鼠糖尿病肾损伤的保护作用

目的:比较复方鱼腥草合剂水提物、醇提物、挥发油以及完整成分对db/db小鼠肾损伤的作用,并探索其可能机制。方法:选取8只db/m小鼠为正常组;48只db/db小鼠分为模型组、盐酸二甲双胍组、复方鱼腥草合剂水提物组、醇提物组、挥发油组以及完整成分组,每组8只,给药8周,记录小鼠体质量以及血糖,8周后检测小鼠血糖、肾功能指标及肾脏指数,ELISA试剂盒法检测血清胰岛素水平、TGF-β1、FN、GLP-1、GIP水平,HE染色观察小鼠肾脏病理变化。结果:与模型组相比,醇提物、挥发油、完整成分组小鼠血清胰岛素水平、胰岛素敏感指数升高,BUN、Scr水平有所改善,差异无统计学意义。血清TGF-β1,FN,GIP水平降低(P<0.05),GLP-1含量升高(P<0.05)。肾脏组织病理改善明显,且以完整成分组改变最为显著。结论:复方鱼腥草合剂对糖尿病所致肾损伤有一定改善作用,其保护机制可能与下调TGF-β1、FN水平,减少ECM沉积,调节GLP-1、GIP分泌有关。