D-松醇对慢性哮喘小鼠模型肺组织转化生长因子β1表达的影响

目的:观察D-松醇对慢性哮喘小鼠模型转化生长因子(TGF-β1)的影响?方法:18只BALB/c小鼠按随机原则分成正常对照组?哮喘模型组?D-松醇干预组,每组6只,末次抗原激发24 h后,检测各组小鼠的肺功能,HE染色观察气道炎症变化;Masson三色染色观察气道纤维化的改变;real-time PCR观察肺组织TGF-β1 mRNA的表达;采用ELISA观察支气管肺泡灌洗液中TGF-β1的表达?结果:哮喘模型组小鼠气道炎症?气道高反应性和气道重塑明显加重,而D-松醇能显著抑制慢性哮喘模型小鼠的气道炎症和气道高反应性,且D-松醇干预后哮喘模型小鼠肺组织TGF-β1 mRNA和肺泡灌洗液中TGF-β1表达也显著降低?结论:D-松醇能抑制慢性哮喘模型小鼠的气道重塑,其机制可能通过抑制肺组织TGF-β1的表达而实现?     

TGF-β/Smad信号转导通路在哮喘气道重构中的作用研究

哮喘是一种慢性气道炎症性疾病,伴有气道高反应性和气道重构。多种细胞和炎性介质及细胞因子参与了哮喘的发生发展过程。近年来,转化生长因子-β（Transforminggrowth factor-β,TGF—β）与哮喘的关系研究越来越得到学者们的关注,     

穴位埋线对哮喘豚鼠气道病理形态学改变和TGF-β1的影响

目的:观察穴位埋线对哮喘豚鼠模型病理形态学改变和支气管肺组织TGF-β1蛋白表达的影响.方法:健康FMMU豚鼠32只,雌雄各半,随机分为4组:空白组,模型组,地塞米松组和穴位埋线组.处理结束后,取病理切片经苏木精-伊红染色后在光镜下观察气道病理结构的改变,并采用免疫组织化学法检测支气管肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达.结果:模型组豚鼠小气道中WA/Pi2、平滑肌面积/Pi2、支气管壁厚度d/Pi均较空白组以及穴位埋线组和地塞米松组显著增加(P<0.05,P<0.01);模型组支气管肺组织TGF-β1阳性细胞指数显著高于空白组以及穴位埋线组和地塞米松组(P<0.01,P<0.05).结论:穴位埋线可能通过下调TGF-β1蛋白的表达,抑制哮喘豚鼠的嗜酸粒细胞性炎症,减轻炎症对气道壁的损伤,达到干预气道重构的效果.     

转化生长因子-β1在哮喘血管重构中的作用

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在哮喘血管重构中的作用。方法40只小鼠随机均分为对照组、早期布地奈德治疗组(早期组)、延迟布地奈德治疗组(晚期组)和哮喘组4组。常规检测各项反映气道炎症、气道重构和血管重构的参数,采用Western印迹法测定肺组织中TGF-β1的表达水平。结果哮喘组气道血管的管壁厚度和胶原纤维面积均较对照组明显提高(P值均<0．01),且分别与气道平滑肌厚度和气道周围胶原纤维面积呈正相关(r=0．83、0．92,P值均<0．01)。早期治疗能明显降低上述指标;而晚期治疗仅能降低气道炎症反应,对气道和血管重构无明显改善。3组致敏小鼠肺组织中TGF-β1的表达均较对照组明显增多(P值均<0．01),TGF-β1的表达水平与血管厚度和血管周围胶原纤维面积呈正相关(r=0．75、0．82,P值均<0．01)。结论在哮喘的重建过程中有明显的血管重建——管壁增厚和血管旁胶原纤维增生,这一过程与TGF-β1的表达增加有关。早期糖皮质激素治疗能通过抑制TGF-β1表达水平改善哮喘的血管重构。     

辛伐他汀对哮喘气道重构小鼠肺组织TGF-β1表达的影响

目的:探讨辛伐他汀对哮喘气道重构小鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:采用随机分组的方法,将60只雌性SPF级BALB/C小鼠分为哮喘组、辛伐他汀组、对照组,每组20只。观察和比较各组小鼠肺组织和气管的病理改变,同时采用图像分析软件测量各组小鼠肺组织中支气管壁面积(WAi)、平滑肌层面积(WAm)和支气管基底膜周长(Pbm);使用Real time PCR和Western blot方法分别检测小鼠肺组织TGF-β1 mRNA和TGF-β1蛋白表达。结果:哮喘组小鼠肺组织病理改变程度最严重,辛伐他汀组病理改变程度虽高于对照组,但较哮喘组减轻;哮喘组小鼠支气管壁厚度及平滑肌层厚度高于辛伐他汀组和对照组;哮喘组小鼠肺组织TGF-β1 mRNA水平高于辛伐他汀组和对照组,哮喘组小鼠肺组织TGF-β1蛋白水平高于辛伐他汀组和对照组,差异均有统计学意义。结论:辛伐他汀可能通过减少肺组织TGF-β1表达而抑制哮喘气道重构。     

哮喘大鼠血清、支气管肺泡灌洗液及肺组织中转化生长因子-β1与哮喘气道重塑

目的 观察哮喘大鼠模型血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量及肺组织中TGF-β1的表达,分析其相关性及与哮喘气道重塑的关系,为临床哮喘的诊断和治疗提供理论依据.方法 Wistar大鼠随机分为2组,正常对照组和哮喘模型组,每组20只.用卵蛋白(OVA)致敏和激发制成哮喘大鼠模型,用Elisa法测定血清及BALF中TGF-β1的含量,免疫组化法测定肺组织中TGF-β1的表达,Masson染色观察胶原沉积的情况,计算机图像分析系统评价呼吸性细支气管平滑肌厚度及上皮损伤程度评分等气道重塑指标.结果 造模后,与对照组相比模型组血清中TGF-β1的含量明显减低(P<0.05);BALF中TGF-β1的含量增加(P<0.01);肺组织中TGF-β1的表达增多(P<0.01).哮喘大鼠气道黏膜上皮损害、气道平滑肌厚度、气道胶原蛋白的沉积较对照组明显增加.结论 BALF中TGF-β1的含量增加、肺组织中TGF-β1的表达增加,加重了哮喘气道重塑;血清中TGF-β1含量减少,提示可以通过检测血清中TGF-β1为哮喘的诊断提供依据、间接了解气道重塑.     

吸入糖皮质激素对哮喘大鼠气道炎症和气道重构的影响

目的观察早期和晚期吸入糖皮质激素对哮喘大鼠气道炎症和气道重构的影响.方法 32只Wistar大鼠随机分为4组:A对照组8只,B卵蛋白(OVA)致哮喘组8只,C 早期激素治疗组8只,D晚期激素治疗组8只.各组大鼠肺组织切片HE、胶原染色、免疫组化NGF、TGF-β1染色,借助计算机图像分析软件测量各项指标.结果 B组气道壁炎性细胞计数、气道平滑肌面积、气道内壁面积、胶原沉积面积及NGF、TGF-β1表达均明显高于A组,两组比较差异有统计学意义(P<0.01),C组各项指标均明显低于B组,差异有统计学意义(P<0.01、P<0.05),C组与A组比较各项均有升高,差异有统计学意义(P<0.01、P<0.05),D组仅气道壁炎性细胞计数、NGF表达低于B组,差异有统计学意义(P<0.05),C组各项与D组比较差异均有统计学意义(P<0.01、P<0.05).结论早期吸入激素可明显抑制气道炎症和气道重构,晚期吸入仅能部分抑制炎症反应,不能逆转已经形成的气道重构.     

姜黄素对支气管哮喘大鼠气道重塑和核因子-κB的影响

目的:探讨姜黄素对支气管哮喘大鼠气道重塑及核因子-κB(NF-κB)的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、姜黄素组,各10只;采用卵蛋白(OVA)致敏复制大鼠哮喘模型。观察3组大鼠气道炎症、气道壁厚度、胶原沉积及NF-κB和转化生长因子(TGF-β1)表达情况。结果:哮喘组大鼠炎性细胞浸润、胶原沉积、气道壁厚度、NF-κB、TGF-β1表达与对照组比较有显著性差异(P<0.01),而姜黄素组较哮喘组明显减轻(P<0.01);NF-κB与TGF-β1表达、气道炎症、气道壁厚度、胶原沉积变化成正相关(P<0.01)。结论:姜黄素可抑制哮喘大鼠NF-κB活性以干预其气道重塑。     

地塞米松对哮喘小鼠气道平滑肌细胞增殖及转化生长因子β1表达的影响

目的探讨地塞米松干预对哮喘小鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖及转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响。方法建立哮喘小鼠气道重塑模型,实验分为对照组、哮喘组和地塞米松组。测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞（EOS）计数及活性TGF-β1表达的变化,行HE染色及PCNA、TGF-β1免疫组化染色,图像分析测定管腔基底膜周长（Pbm）、气管壁总面积（WAt）、气道平滑肌面积（WAm）、ASMC核数（N）及TGF-β1在ASMC的灰度值。结果哮喘组EOS计数明显升高,出现管壁、平滑肌层明显增厚及ASMC增殖等气道重塑的特征,与TGF-β1的表达呈正相关。地塞米松组与哮喘组比较炎症反应减轻,管壁、平滑肌层增厚及ASMC增殖减少（P均小于0.05）,TGF-β1表达减弱（P〈0.05）。与对照组间比较差异无显著性（P均大于0.05）。结论反复的变应原吸入可导致气道重塑尤其是ASMC增殖,TGF-β1在ASMC增殖中可能具有重要作用,地塞米松干预可减缓气道重塑尤其是ASMC增殖的发生。     

哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1在气道重塑的表达

目的 观测小鼠哮喘激发后TGF-β1,MMP-9和TIMP-1在气道重塑的表达,探讨TGF-β1,MMP-9和TIMP-1在哮喘气道重塑中的的机制。方法 哮喘组：40 只健康小鼠,分为4组,用卵蛋白超声雾化激发哮喘,分为激发前组、激发2周、激发4周和激发8 周,观察4组气道形态学参数、哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1有无统计学差异及相关性。 结果 哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1比较,差异有显著性( P&amp;amp;amp;amp;lt;0.01);气道形态学参数比较,差异有显著性(P&amp;amp;amp;amp;lt;0.05)。哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1含量与气道形态学参数呈正相关,哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1含量亦呈正相关。 结论 哮喘小鼠肺组织TGF-β1,MMP-9和TIMP-1可能参与了哮喘的病理生理过程,并参与了哮喘气道重塑。     

银杏叶提取物对哮喘大鼠气道重塑及转化生长因子-β_1表达的影响

目的探讨银杏叶提取物对支气管哮喘大鼠气道重塑的影响。方法 30只雌性SD大鼠,随机分为三组（每组10只）：对照组、哮喘组和治疗组。采用卵蛋白腹腔注射和雾化吸入激发法复制哮喘大鼠模型。在末次激发24h后取动物肺组织行HE染色和Mas-son观察病理学改变;免疫组化测定转化生长因子β1（TGF-β1）表达。结果与对照组比较,哮喘组大鼠气道纤维化明显,TGF-β1表达增高（P〈0.05）;与哮喘组比较,银杏叶提取物治疗组中大鼠气道纤维化程度及TGF-β1表达减轻（P〈0.05）。结论银杏叶提取物可抑制哮喘大鼠气道重塑的发生,其机制有可能是通过抑制TGF-β1的表达而实现的。     

麻芍平喘汤对哮喘大鼠气道重塑及TGF-β1、PDGF-BB的影响

[目的]探讨麻芍平喘汤对哮喘大鼠气道重塑及转化生长因子(TGF-β1)、血小板源性生长因子BB型(PDGF-BB)的影响。[方法]将70只SD大鼠随即分为正常组(A)、模型组(B)、麻芍平喘低剂量组(C)、麻芍平喘中剂量组(D)、麻芍平喘高剂量组(E)、地塞米松组(F)、阳和平喘组(G)。卵白蛋白(OVA)多点致敏激发大鼠制作哮喘气道重塑模型,在实验第28~42天,正常组与模型组分别予生理盐水灌胃,其余各组予相应药物干预。实验结束后HE染色观察哮喘大鼠肺组织病理形态改变及气道形态学变化;免疫组织化学染色法检测支气管肺组织TGF-β1、PDGF-BB的蛋白表达。[结果]麻芍平喘汤能够减轻哮喘大鼠气道炎性细胞浸润及气道重塑;与A组比较B组大鼠TGF-β1、PDGF-BB的蛋白含量均明显升高(P0.01);与B组相比,中药组和西药组TGF-β1、PDGF-BB水平明显降低(P0.01);与F组相比,E组TGF-β1、PDGF-BB水平降低明显(P0.05);与G组相比,E组效果更好(P0.01)。[结论]麻芍平喘汤能延缓哮喘气道重塑,控制炎症,其中TGF-β1、PDGF-BB与气道重塑呈正相关。     

川芎嗪对哮喘大鼠气道壁平滑肌增殖及TGF-β1表达的影响

目的观察川芎嗪对哮喘大鼠气道壁平滑肌增殖及转化生长因子(TGF-β1)表达的影响.方法32只SD大鼠均分为正常对照组、以卵蛋白致敏制备的哮喘模型组以及给予不同剂量川芎嗪进行干预的小剂量、大剂量川芎嗪干预组共4组,采用免疫组织化学和计算机图像分析方法测定各组大鼠气道壁TGF-β1含量、平滑肌层厚度及内外径.结果模型组气道壁TGF-β1含量和平滑肌层厚度较正常组均显著增加(均为P<0.001),气道内外径比值较正常组减小(P<0.001).两种剂量川芎嗪干预组平滑肌层厚度均较模型组变薄(均为P<0.001),TGF-β1含量均较模型组减低(均为P<0.001),气道内外径比值均高于模型组(均为P<0.001),两种剂量川芎嗪干预组间平滑肌厚度无差别(P>0.05),大剂量组对TGF-β1表达抑制较小剂量组强(P<0.01).气道壁平滑肌层厚度与TGF-β1表达呈正相关(rs=0.5878,P<0.01).结论川芎嗪能减轻哮喘大鼠气道壁平滑肌层的增厚并抑制TGF-β1表达.     

儿童咳嗽变异性哮喘气道炎症研究

咳嗽变异性哮喘的发病机制及病理生理与典型哮喘相似,均以持续气道炎症、气道高反应性和气道重构为特点,平均约有30％的患儿最终发展为典型哮喘.近年来随着病理学的发展,发现哮喘患者发作期和缓解期均存在气道内炎症细胞浸润和炎性介质增多,提出了哮喘是一种气道慢性炎症性疾病的概念.气道炎症是气道重塑等病理发展的关键,现代医学研究认为,咳嗽变异性哮喘气道炎症机制复杂.明确有关炎症细胞及炎性介质在气道炎症机制中所起的作用或影响,可提高对本病的认识,及早干预,阻止病情进一步发展.     

大鼠哮喘模型中转化生长因子-β1对气道重构调节作用的研究

目的 观察哮喘大鼠模型气道重构的病理特点，探讨转化生长因子－β1（TGF－β1）与气道重构的关系以及激素干预对气道重构的影响。方法 建立大鼠哮喘模型。实验分成对照组、哮喘组及激素处理组，其中每组各分成1周、2周二个时段。图像分析肺内支气管平滑肌厚度。苦味酸天狼猩红染色，在偏振光显微镜下观察胶原沉积情况，图像分析胶原厚度。免疫组化方法检测TGF－β1的表达，定量光密度值。结果 （1）哮喘组诱喘1周后出现管壁增厚、平滑肌增生以及胶原沉积等气道重构的特征，2周后上述改变加重，与TGF－β1的表达呈正相关；（2）激素组与哮喘组比较，炎症反应轻微，平滑肌增生、胶原沉积不明显，TGF－β1表达不强；与对照组间差异无显著性。结论 反复的变应原吸入可导致气道重构，而TGF－β1在气道重构中可能起重要作用，激素的干预可能减缓气道重构的发生。     

RSV感染哮喘小鼠气道炎症及重构与激素抵抗的研究

目的 观察小鼠哮喘模型感染呼吸道合胞病毒(respiratary syncytial virus,RSV)气道炎症及重构与哮喘治疗激素敏感性之间的联系.方法 50只BALB/c小鼠随机分对照组,单纯卵蛋白(OVA)致敏哮喘组(A组)、OVA致敏哮喘+地塞米松(DEX)组(B组)、OVA致敏哮喘+RSV感染组(C组)、OVA致敏哮喘+RSV感染+DEX组(D组),每组10只;酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、转化生长因子β1(TGF-β1)及γ干扰素(IFN-γ)浓度;病理切片行HE染色、Van Gieson 氏染色,显微镜下观察气管外周炎性分级和气道胶原沉积情况.结果 A、C、D组与对照组比较IL-4、IL-5及TGF-β1浓度升高,气道胶原沉积、炎症浸润加重,差异有统计学意义(P＜0.05);D组与C组比较,C组与A组比较,TGF-β1浓度升高,差异有统计学意义(P＜0.05),气道炎症及气道胶原沉积加重.结论 RSV感染哮喘小鼠可引起明显的Th2细胞炎性反应及气道重构;应用激素干预治疗后,气道炎症及重构进一步加重,表明RSV感染哮喘小鼠对激素治疗敏感性差.     

支气管哮喘患者血清IL-17,TGF-β1表达水平的临床研究

目的 探讨IL-17,TGF-β1表达水平在哮喘气道炎症中的作用.方法 急性发作期哮喘患者57例(轻度组27例,中重度组30例),健康对照组27例.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中IL-17,TGF-β1水平.结果 急性发作期哮喘患者血清中IL-17,TGF-β1水平高于健康对照组.血清中IL-17与TGF-β1水平呈正相关(r=0.801).结论 哮喘患者血清中IL-17,TGF-β1水平升高,说明IL-17,TGF-β1参与了哮喘气道炎症和气道重塑的发生、发展.     

甲基强的松龙对支气管哮喘患者痰细胞TGF-β1的影响

目的 观察不同程度的哮喘患者诱导痰细胞转化生长因子-β1（TGF-β1）以及甲基强的松龙（Methylprednisolone,MP）的影响,探讨TGF-β1在哮喘气道炎症和重构中的可能作用.方法 选择非急性发作期哮喘患者22例（临床缓解期8例,慢性持续期14例）以及健康人10例.每例痰细胞分2份,1份不加MP为空白组,以观察细胞因子的自发释放;1份加MP为MP干预组;用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法 测定培养上清液中的TGF-β1的浓度.分析其在慢性持续期哮喘、临床缓解期哮喘与健康人之间、以及MP组与空白组之间的差异.结果 慢性持续期与临床缓解期哮喘痰细胞体外培养后自发释放TGF-β1浓度显著高于健康人（P＜0.05）.慢性持续期哮喘与临床缓解期哮喘相比TGF-β1水平显著降低（P＜0.05）.痰细胞经MP干预后,慢性持续期与临床缓解期哮喘TGF-β1水平无显著变化（P＞0.05）.结论 哮喘患者诱导痰细胞在体外培养能自发释放高浓度的TGF-β1.MP体外干预不能明显抑制痰液TGF-β1的释放,甲强龙在控制中性粒细胞炎症及气道重构方面存在局限性.     

TGF-β1/Smads通路在哮喘大鼠气道重塑模型中的动态变化

[摘要] 目的 探讨TGF-β1/Smads通路在哮喘大鼠气道重塑模型中的动态变化,及其在哮 喘发病中的可能机制。方法　以卵蛋白雾化复制哮喘模型, 在激发哮喘2 、4、8周后处死,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 检测TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平, 用免疫组织化学染色法检测支气管肺组织TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4、Smad7的蛋白表达,同时用图像分析法测量大鼠气道形态学参数。结果　大鼠哮喘激发后2 周开始出现气道平滑肌增厚, 随着激发时间的延长,其气道平滑肌逐渐增厚。同时,哮喘大鼠支气管肺组织TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4的蛋白表达以及TGF-β1、α-SMA的mRNA表达水平逐渐升高, 而Smad7的蛋白表达逐渐下降,呈现一定的动态变化。结论　哮喘气道重塑的改变是一个动态的过程,TGF-β1/Smads通路在哮喘大鼠气道重塑模型中呈现动态变化过程,其中TGF-β1、α-SMA、Smad3、Smad4与气道重塑呈正相关,而Smad7则与气道重塑呈负相关。     

哮喘气道重塑与氧化应激的实验研究

目的探讨大鼠支气管哮喘模型的慢性气道炎症、气道重塑特征以及与氧化应激的关系。方法以卵蛋白为过敏原致敏,反复多次激发以模拟临床反复发作过程,建立大鼠慢性哮喘模型。64只SD大鼠随机分为正常对照组和哮喘组,每组再进一步划分4、8、12、16周4个时间段。观察指标:①肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)细胞计数与分类;②肺组织病理观察:进行支气管周围炎性细胞浸润及杯状细胞增殖评分,测定支气管壁的平滑肌面积、胶原沉积面积,及肺组织TGF-β1的积分光密度值(IOD值);③测定12周大鼠肺组织匀浆MDA含量、SOD活性及肺组织TGF-β1蛋白含量。结果①各时间段哮喘组的BALF细胞计数与正常对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。其中中性粒细胞百分比、黏液指数随时间推移呈增加趋势。②4周哮喘组即有气道管壁增厚、平滑肌增生、胶原沉积增多、管腔变小、TGF-β1的表达增多等气道重塑的特征,与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.01),并随时间推移呈增加趋势,以16周哮喘组最明显。③与对照组比较,哮喘组的MDA含量、TGF-β1含量均明显升高(均P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01)。结论通过延长卵蛋白激发时间可以成功制备SD大鼠慢性哮喘气道重塑模型;哮喘气道重塑在早期即出现,中性粒细胞及氧化应激可能参与哮喘的气道重塑。