过氧化物酶体增殖活化受体γ激动剂对呼吸机相关肺损伤大鼠肺胶原合成的影响

早期肺纤维化的发生、发展是急性呼吸窘迫综合征（ARDS）病情恶化的重要原因，新近的研究显示，呼吸机相关性肺损伤时高机械张力可促进肺成纤维细胞合成胶原蛋白。过氧化物酶体增殖活化受体γ（PPAR-γ）是核激素受体蛋白超家族成员，PPAR-γ在调节肝纤维增生中有重要作用，但能否抑制肺纤维的增生尚不明确。本组研究应用PPAR-γ的激动剂15d-前列腺素J2（PGJ2），探讨PPAR-γ对呼吸机相关肺损伤肺胶原合成的影响。     

罗格列酮对慢性阻塞性肺疾病患者过氧化物酶体增殖物激活受体-γ信号通路的影响

目的 探讨罗格列酮对COPD患者过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、核因子-κB及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.方法 2010年4-11月,选择COPD急性加重期患者30例,其中男22例,女8例,年龄54～87岁,平均(72±9)岁;健康体检者(对照组)24例,其中男18例,女6例,年龄52 ～80岁,平均(69±10)岁.抽取受试者空腹肘静脉血10 ml,分离培养外周血单个核细胞(PBMCs).将30例COPD患者的PBMCs均分为3份,分别根据不同的药物干预分为非干预组、罗格列酮干预组(罗格列酮组)和罗格列酮联合GW9662干预组(联合干预组),对照组PBMCs不加任何药物干预.采用实时荧光定量PCR检测PBMCs中PPAR-γ和核因子-κB的mRNA表达,细胞免疫荧光法结合激光扫描共聚焦显微镜检测PPAR-γ和核因子-κB蛋白表达及核转位,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中TNF-α含量.多组间比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,相关性分析采用Pearson检验.结果 mRNA(2-ΔΔCt值)和蛋白表达(荧光强度值):非干预组PPAR-γ(0.52±0.10和55±11)低于对照组(1和85±9),核因子-κB(1.69±0.07和145±17)高于对照组(1和118±7);罗格列酮组PPAR-γ(4.47±0.11和204±12)高于非干预组,核因子-κB(0.33±0.04和59±14)低于非干预组;联合干预组PPAR-γ(2.25±0.31和142±23)低于罗格列酮组,高于非干预组,核因子-κB(0.64±0.02和90±10)高于罗格列酮组,低于非干预组;组间比较差异均有统计学意义(F值为29.21～567.42,均P＜0.01).TNF-α浓度(μg/L):非干预组(96.2±1.4)高于对照组(85.3±1.0),罗格列酮组(63.0±2.5)低于非干预组,联合干预组(83.3±1.9)高于罗格列酮组,低于非干预组,组间比较差异有统计学意义(F值为293.72,P＜0.01).非干预组PPAR-γ蛋白主要位于细胞质,核因子-kB蛋白主要位于细胞核;对照组PPAR-γ和核因子-κB蛋白在PBMCs细胞质和细胞核中均有表达;罗格列酮组PPAR-γ蛋白转位于细胞核,核因子-kB蛋白转位于细胞质;联合干预组PPAR-γ蛋白转回细胞质,核因子-κB蛋白部分转移至细胞核.相关分析结果表明,PPAR-γ蛋白表达与核因子-κB蛋白表达及TNF-α浓度均呈负相关(r值分别为-0.935和-0.924,均P＜0.01),核因子-κB蛋白表达与TNF-α的浓度呈正相关(r=0.846,P＜0.01).结论 COPD的炎症可能与PPAR-γ表达及活性不足有关,罗格列酮能通过上调PPAR-γ表达和活性抑制核因子-kB,进而抑制TNF-α分泌,在COPD炎症中起着重要作用.     

过氧化物酶体增殖因子活化受体γ在大鼠慢性阻塞性肺疾病模型中的表达及意义

目的研究过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPAR)γ在大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型中的表达及意义。方法 SD大鼠24只,随机分为对照组(A组)和实验5 w组(B组)和实验10 w组(C组),每组8只。实验组采用气管内注入胰蛋白酶和熏香烟的方法,建立大鼠COPD模型。从开始实验起,实验第5周处死实验B组;第10周处死C组。应用病理学及肺功能检查评价COPD动物模型,免疫组化RT-PCR和Western印迹方法检测大鼠肺组织PPARγmRNA及蛋白的表达水平。结果 B组与A组比较,炎症反应明显,已形成慢性阻塞性肺气肿,并于第10周形成明显的肺气肿。PPARγ在正常肺组织与患慢性阻塞性肺气肿的肺组织均有表达,主要定位在炎性浸润细胞的核和核周围区,比较大鼠肺组织PPARγ在COPD中的表达(吸光度值A值):A组为0.497±0.078,B组PPARγ在肺组织中表达减弱(0.329±0.024),C组PPARγ在肺组织中表达明显减弱(0.216±0.049),差异均有统计学意义(P<0.01)。PPARγmRNA表达随着COPD病程的进展逐渐降低,A组光密度比值为(1.06±0.10);B组为(0.50±0.02);C组为(0.27±0.02),与A组比较,B、C组差异有统计学意义(均P<0.01)。Western印迹也表明COPD模型B组和C组比A组PPARγ蛋白表达降低,且B组蛋白表达降低的更为明显。结论 PPARγ在COPD的发生及进展中起重要作用,并且随着病程的发展,蛋白表达降低更为显著,因此该蛋白有望成为未来COPD治疗的新靶点。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ调控抗氧化系统与慢性阻塞性肺疾病

氧化/抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)主要发病机制之一.过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)是一种配体依赖性核受体,具有抗氧化作用.PPARγ的一些配体和辅激活因子PGC-1α能调控活性氧的代谢和抗氧化酶的表达,而它们均通过激活PPARγ而发挥抗氧化作用.PPARγ对抗氧化系统这种重要的调控作用,为COPD的发病和治疗的研究提供了一种新的可行性思路.     

嗜酸粒细胞趋化因子、白细胞介素8在支气管哮喘及慢性阻塞性肺疾病患者痰中的变化

近来报道支气管哮喘（简称哮喘）、慢性阻塞性肺疾病（COPD）气道炎症存在相似之处。我们利用诱导痰技术对嗜酸粒细胞及嗜酸粒细胞趋化因子（eotaxin）、中性粒细胞及白细胞介素8（IL-8）在哮喘、COPD发病中的作用进行了对比研究。     

单侧输尿管梗阻大鼠肾脏过氧化物酶体增生物激活受体-γ的表达及其意义

目的：观察不同时限单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾皮质过氧化物菌体增生物激活受体(PPAR)γ的表达变化及其与巨噬细胞浸润的关系。方法：用免疫组化、RT-PCR以及Western blotting的方法检测UUO大鼠梗阻3天、7天、14天的PPARγ在核酸水平和蛋白质水平的表达量变化以及表达位置的改变，其与ED-1阳性巨噬细胞浸润数的关系。结果：假手术对照组PPARγ主要表达于肾脏内髓集合管，而UUO状态下肾小管上皮细胞出现PPARγ的表达。半定量分析显示UUO后3天PPARγ的表达开始有增高趋势，7天时PPARγ的mRNA和蛋白质水平达到峰值(与对照组相比分别为3．33倍和4．36倍)，而梗阻后14天其表达已开始下降。病理学和免疫组化结果显示，UUO7天时巨噬细胞浸润明显，但纤维化改变尚不显著。UUO14天时炎性细胞积聚明显，但巨噬细胞浸润数下降，出现明显的小管萎缩和间质纤维化。UUO后PPARγ的表达与巨噬细胞浸润显著相关。结论：UUO模型大鼠肾皮质中PPARγ的表达量增加，并在肾小管部位出现PPARγ的表达。PPARγ的表达与肾间质巨噬细胞浸润显著相关。     

罗格列酮对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺组织氧化应激的影响

目的探讨罗格列酮对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织氧化应激的影响。方法将健康SD大鼠24只随机分为3组。被动吸烟和气管内滴入脂多糖(LPS)复制COPD大鼠模型,模型组不进行治疗,罗格列酮组灌胃罗格列酮,对照组为正常大鼠。结果制备肺组织匀浆,用试剂盒测定肺组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)含量。罗格列酮组大鼠肺组织中MDA含量较模型组明显降低,治疗组大鼠肺组织中SOD、NO含量较模型组明显增加。结论过氧化物酶体增生剂激活的受体(PPARγ)激动剂罗格列酮可明显减轻COPD大鼠肺组织的氧化应激反应,并提高其抗氧化能力。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ及其配体调节大鼠肺纤维化的作用机制

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）及其配体在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化中的作用及参与机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分为4组,即生理盐水对照组、罗格列酮对照组、博莱霉素组、罗格列酮干预组,经气管内注射博莱霉素建立肺纤维化模型。采用Masson染色观察肺组织形态学变化;碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸含量;免疫组化及荧光定量RT-PCR检测PPARγ、MMP-9和TGF-β1的表达。结果气管内注入博莱霉素后,肺组织中羟脯氨酸含量、胶原沉积、MMP-9、TGF-β1及PPARγ表达较生理盐水对照组增加（P均〈0.05）;给予罗格列酮干预后,除PPARγ表达进一步增加,上述指标均下降（P均〈0.05）。相关性分析显示,博莱霉素组PPARγ蛋白水平与MMP-9和TGF-β1mRNA表达分别呈负相关（P均〈0.05）。结论 PPARγ参与了肺纤维化的发生;PPARγ及其配体罗格列酮可能通过抑制TGF-β1、MMP-9转录,从而减少胶原沉积,延缓博莱霉素诱导的肺纤维化进程。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ配体对诱导大鼠肝癌的抑制作用

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome pronferatorsactivated receptor gamma，PPARγ)是一种核受体，与基因转录调节及脂类代谢有关。有研究报告PPARγ配体处理癌细胞后可以引起细胞分化和凋亡，提示其可能是一种化学防癌剂而具有潜在应用价值。本研究使用3种PPARγ配体，以了解PPARγ在大鼠肝癌模型中的防癌作用。     

丝裂原活化蛋白激酶、蛋白激酶B和γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中的表达

我们前期研究表明，γ谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）是体内重要抗氧化剂谷胱甘肽（GSH）的限速酶，在慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病中起重要作用。我们观察COPD患肺组织中γ-GCS与蛋白激酶的表达，探讨丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）蛋白激酶B（PKB）信号通路与γ-GCS在COPD发病中的作用。     

糖基化终产物对内皮细胞过氧化物酶体增生物活化受体表达的影响

目的 探讨糖基化终产物(AGEs)对内皮细胞过氧化物酶体增生物活化受体(PPAR)表达的影响。方法 以体外培养的人内皮细胞系(ECV)-304为研究对象，应用RT-PCR、Western印迹方法观察不同浓度AGEs对内皮细胞PPARa、PPAR7表达的影响。结果 ECV-304有PPAR7、PPARa的基础表达，AGEs可使PPAR7的mRNA及蛋白表达上调。结论 AGEs对PPAR表达具有上调作用，可能参与糖尿病致动脉粥样硬化的病理过程。     

丝裂原活化蛋白激酶与γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病肺组织中的表达

我们前期的研究表明了γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GSC)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)和支气管哮喘(简称哮喘)中的重要作用。本组实验探讨细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-p38与γ-GCS在大鼠COPD中的作用。     

氯沙坦对慢性阻塞性肺疾病患者血液流变学的影响

慢性阻塞性肺疾病(COPD)伴低氧血症患者普遍存在继发性红细胞增多、红细胞压积(HCT)增高和血液高黏状态。本研究旨在观察氯沙坦对COPD病人HCT和血液流变学的影响。1对象与方法1.1研究对象病例选择符合以下条件:(1)中华医学会1997年制定的COPD诊断标准[1];(2)动脉血氧分压(PaO2)<60mmHg。将符合上述条件的住院患者80例,随机分为观察组40例,男17例,女13例,平均年龄70 11岁,平均PaO252.1±4.2mmHg;对照组40例,男26例,14例,平均年龄68 9岁,平均PaO253.6±3.9mmHg。两组年龄、构成和PaO2经统计学检验,无显著性差异(P>0.05)。1.2治疗…     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ对糖基化终产物诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

目的观察吡格列酮对糖基化终产物（AGEs）刺激下大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的作用及对过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）基因及蛋白表达水平的影响,探讨PPARγ在AGEs诱导VSMCs增殖中的作用。方法（1）MTY法观察不同浓度、不同时间的AGEs对VSMCs增殖的影响及吡格列酮（1．0、10、100μmol／L）与AGEs共孵育对VSMCs增殖的干预作用。（2）用半定量逆转录聚合酶链反应测定VSMCs中PPARγ mRNA的表达。（3）用Western blot法检测PPARγ的蛋白表达。结果AGEs作用导致VSMCs增殖,AGEs抑制PPARγ mRNA和蛋白表达水平,这种抑制作用随着AGEs干预的时间延长和浓度的增加而增强（P〈0．05）。PPARγ激活剂吡格列酮通过增加PPARγ的表达,抑制AGEs诱导的VSMCs增殖。结论PPARγ表达的下降可能是糖尿病易患动脉粥样硬化的重要原因之一。     

匹格列酮激活过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR-γ)提高伴有主要心血管危险因素的非糖尿病病人内皮依赖舒张功能

研究背景:伴有心血管危险因素的患者有内皮功能障碍,是导致动脉粥样硬化发病机制的关键因素之一, 在糖尿病患者中应用四氢噻唑产生了多种抗动脉粥样硬化的作用,本研究证实匹格列酮在伴有心血管危险因素的非糖尿病病人中提高内皮功能的假设。方法和结果:研究采用随机,双盲,安慰剂对照,交叉设计。入选80 名同时伴有高血压和高胆固醇血症的患者。胰岛素敏感性用定量胰岛素敏感检测指数(QUICK)评价。进一步将患者分为胰岛素敏感和胰岛素抵抗,在每个治疗阶段,患者每天服用匹格列酮45 mg或安慰剂共八周,在每8 周末,进行实验室检查。应用匹格列酮组血浆胰岛素水平显著下降,QUICK胰岛素敏感指数升高,HDL升高,甘油三酯、自由脂肪酸,和C-反应蛋白水平降低。匹格列酮治疗显著提高缓激肽的内皮依赖性舒张功能而不影响对硝普钠的反应。多变量分析显示:只有总胆固醇的变化预示匹格列酮提高内皮活性。结论:伴有心血管危险因素的非糖尿病病人中,匹格列酮治疗提高胰岛素敏感性,降低C-反应蛋白,提高内皮血管扩张功能。这些结果并不密切相关,提示匹格列酮对血管的有益作用独立于其对胰岛素敏感性和炎性的作用。     

活化蛋白-1及糖皮质激素受体在慢性阻塞性肺疾病中的表达及意义

糖皮质激素对慢性阻塞性肺疾病（COPD）的治疗效果不太理想,其中的发生机制尚不清楚.我们对比观察了COPD患者与支气管哮喘患者、健康人（对照组）外周血细胞中糖皮质激素受体两个亚型（hGRα和hGRβ）及活化蛋白-1（AP-1）两个亚基（c-fos和c-jun）的表达水平,旨在探讨COPD对激素反应较差的可能的分子机制.     

核因子相关因子2及其蛋白激酶与γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织的表达

本室前期研究结果显示，γ谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）作为体内重要抗氧化剂谷胱甘肽的限速酶，在慢性阻塞性肺疾病（COPD）的抗氧化机制中发挥了重要的作用。红系衍生的核因子相关因子2（NRF2）是新近发现的氧化应激反应重要的转录激活因子，在氧化应激反应中处于核心地位。国外报道蛋白激酶B（PKB）、非典型蛋白激酶c（aPKC）信号通路可能在不同的角度对NRF2的生物学功能进行调节。目前对NRF2的信号转导通路的研究很少涉及到整体的模型，不同实验室在不同的组织细胞中所得结果不同。我们通过检测COPD大鼠肺组织中PKB、aPKCλ/l、NRF2和γ-GCS的表达及相关作用，以探讨其在COPD抗氧化机制中的作用。     

慢性阻塞性肺疾病患者痰中性粒细胞弹性蛋白酶和基质金属蛋白酶9的表达及其与气流受限的关系

慢性阻塞性肺疾病（COPD）的发病机制主要为蛋白酶-抗蛋白酶失衡。我们通过痰诱导探讨COPD急性加重期及稳定期患者痰中中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）和基质金属蛋白酶9（MMPO）、基质金属蛋白酶抑制物1（TIMP-1）的表达及其与气流受限的关系。     

衰老对大鼠心肌过氧化物酶体增殖物激活型受体γ表达水平的影响

目的观察衰老对大鼠心肌过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(peroxlsome proliferator activated receptor γ,PPARγ)表达水平的影响及阿托伐他汀的干预作用。方法选择30只20月龄的Wistar大鼠,随机分为老年组、大剂量阿托伐他汀处理组(大剂量组,10 mg·kg~(-1)·d~(-1))和小剂量阿托伐他汀处理组(小剂量组,1mg·kg~(-1)·d~(-1),每组10只;另选10只3月龄Wistar大鼠为青年组。小剂量组和大剂量组大鼠每天给予相应剂量的阿托伐他汀灌胃,共4个月。老年组给予相同体积的生理盐水灌胃,共4个月,青年组未灌胃。采用RT-PCR方法检测大鼠心肌PPARγ mRNA含量,用Western blot方法检测大鼠心肌PPARγ蛋白表达水平。结果与青年组比较;老年组大鼠心肌PPARγ mRNA含量和蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与老年组比较,小剂量组和大剂量组大鼠PPARγ mRNA含量和蛋白表达水平显著增加(P<0.01),并呈剂量依赖性。结论衰老大鼠心肌PPARγ表达水平显著降低,阿托伐他汀可显著上调老年大鼠心肌PPARγ的表达。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对TGF-β1诱导肾成纤维细胞细胞外基质表达的影响水

目的：研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂对转化生长因子β1（TGF-β1）致肾间质纤维化作用的影响，探讨其抗肾间质纤维化的潜在作用。方法：体外培养大鼠肾成纤维细胞株（NRK／49F），利用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）观察PPARγ配体15d-PGJ2及其激动剂曲格列酮和齐格列酮对TGF-β1诱导的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结缔组织生长因子（CTGF）、纤维连结蛋白（FN）和Ⅲ型胶原（ColⅢ）mRNA表达的影响，利用Western Blot方法观察PPARγ激动剂对TGF-β1诱导的FN蛋白表达的影响。结果：TGF-β1能显著增加NRK／49F细胞CTGF、FN和ColⅢmRNA表达，并呈剂量依赖和时间依赖效应。与TGF-β1刺激组相比，10μM 15d-PGJ2、曲格列酮和齐格列酮预处理组叶SMA、CTGF、FN和ColⅢmRNA表达量显著减少，FN蛋白表达量显著下降。结论：PPA脚激动剂可抑制TGF-β1，诱导的肾间质成纤维细胞CTGF表达和细胞外基质（ECM）合成。