氯霉素所致再生障碍性贫血发病机理的研究

用造血细胞GM-CFU、F-CFU培养及淋巴细胞姐妹染色体互换(SCE)研究了11例氯霉素所致再障贫血(CAP-AA)的发病机理。所有病人的GM-CFU、F-CFU明显低于正常(P<0.01),多数不生长。1例检出有抑制正常GM-CFU生长的细胞活性。病人SCE频率明显高于正常(P<0.01)。证实CAP-AA的发病机理系CAP在遗传素质敏感个体中直接损伤细胞DNA,使造血干细胞和微环境联合缺陷所致。     

非亲缘非清髓造血干细胞移植成功治疗急性淋巴细胞白血病首例报告

为探讨非亲缘非清髓异基因造血干细胞移植（URD－NAPBSCT）在治疗急性白血病中（AL）的作用，1例HLA完全相合的急性淋巴细胞白血病病人接受了URD－NAPBSCT治疗。结果病人顺利度过造血抑制期并获得完全性植入，移植后发生了皮肤Ⅱ度GVHD和间质性肺炎，经治疗后痊愈。结果初步表明，URD－NAPBSCT较简便安全，可为急性白血病提供新的有效治疗手段。     

创伤局部微环境对大鼠真皮多能干细胞生物学性状的影响

目的：研究创伤局部微环境对大鼠真皮多能干细胞生物学性状的影响。方法：将大鼠真皮多能干细胞经荧光染料DAPI标记后，植入受损的皮肤组织，荧光显微镜观察标记细胞的植入情况；体外四唑盐（MTT）法和划痕实验检测急性皮肤创伤伤口液对大鼠真皮多能干细胞增殖和迁移的影响。进一步将大鼠真皮多能干细胞置入透析袋中并植入大鼠背部伤口作用3d，免疫组化法检测碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)，神经生长因子（NGF），一种生长因子的辅受体syndecan-1的表达。结果：移植14d后，DAPI标记的真皮多能干细胞主要位于真皮和皮下组织；体积分数为10％的伤口液在体外促进真皮多能干细胞的增殖和迁移的能力最强；大鼠背部伤口局部微环境作用3d后，真皮多能干细胞高表达bFGF,NGF等生长因子和syndecan-1。结论：创伤局部微环境可通过诱导真皮多能干细胞的增殖，运动和分化而直接参与修复，同时还可通过调控生长因子和辅助受体的表达而间接促进修复。     

非清髓异基因造血干细胞移植治疗急性白血病的临床研究

采用非清髓预处理（环胞霉素A、环磷酰胺、阿糖胞苷及CD3单克隆抗体或抗淋巴细胞球蛋白）的异基因外周造血干细胞移植治疗急性白血病5例。5例病人均顺利度过造血抑制期并移植成功。2例例经嵌合性植入转为完全植入,另3例为嵌合性植入。5例中2例发生Ⅱ～Ⅲ度GVHD,经治疗后治愈。5例中4例仍无病存活。结果表明,非清髓异基因造血干细胞移植简便安全,并发症少,疗效较好,为急性白血病的治疗提供了新手段。     

非清髓异基因造血干细胞移植治疗重症再生障碍性贫血4例

为探讨非清髓性异基因外周血造血干细胞移植（NAPBSCT）在治疗重症再生障碍性贫血（SAA）中的作用。4例HLA完全相合的重症再生障碍贫血病人（2例肝炎相关性重症再生障碍性贫血,2例重症再生障碍性贫血）接受了NAPBSCT,结果4例均顺利度过造血抑制期并移植成功（完全性植入3例,嵌和性植入1例）,外周血象及骨髓造血功能快速恢复正常。4例均无急性移植物抗宿主病和间质性肺炎等并发症。本结果初步表明：NAPBSCT简单、安全、并发症轻、造血功能重建快,为SAA的治疗开辟了一条新途径。     

人神经干细胞在宿主鼠脑内分化成神经元呈脑位点特征

目的研究人胎脑神经干细胞植入年幼大鼠脑后的成神经元分化作用,探讨神经干细胞替代治疗小儿脑病的可行性。方法自孕16周的胎脑组织分离培养出神经干细胞球,在小儿脑脊液中培养诱导分化以证明其分化潜能。将培养14d的神经干细胞球移植10d龄鼠的侧脑室内,于移植后第4、7、14天杀鼠取脑,切片,行人神经丝特异性标志的免疫荧光分析,显示神经元的分布和细胞形态。结果培养获得典型神经干细胞球,呈漂浮生长,在小儿脑脊液中能分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。用抗人神经丝混合单抗检测移植物的成神经元分化,移植后的第4天,观察到阳性反应细胞在颗粒层表现为颗粒性细胞,锥体细胞层则出现长突起的锥体细胞,还有连接神经元样中间神经元,小脑内有单层排列的浦肯野细胞。对比各时间点的观察结果,阳性细胞分布位置未变。随着移植后天数的后延,阳性细胞数量呈减少趋势,但锥体细胞的突起明显加长。结论体外培养获得的人神经干细胞脑室途径移植年幼大鼠,在脑内发生迁移,并分化成形态上与其临近宿主细胞一致的神经元。提示宿主脑组织局部微环境在引导移植物分化成神经元中发挥了重要作用。     

全军放射病中心 解放军第三零七医院血液科简介

解放军第三零七医院血液科（血液病移植科）组建于1959年，是医院的重点学科，也是国内为数不多的能同时开展血液病多手段诊断（细胞、免疫、分子生物和细胞遗传学等）和多层次系统特色治疗（化学药物、免疫抑制剂、造血干细胞移植、细胞／免疫治疗）的优势学科。该科在国内率先开展的非清髓异基因造血干细胞移植，安全简便，并发症少，年龄及病种明显扩大，病人存活质量高，花费少，为血液病病人提供了新的更好的治疗。     

骨髓间充质干细胞的活体标记示踪技术及其研究进展

骨髓基质干细胞因具有不断自我更新和向多种细胞分化的能力而备受关注.通过干细胞移植并诱导其向各种受损组织细胞分化,可促进受损组织的再生和修复,为疾病的治疗开辟了新途径.为更深入认识移植细胞实现其修复功能的机制,需要有效的标记方法追踪移植细胞在受者体内的分布、迁移、增殖和分化情况.     

同种异基因胎肝造血干细胞移植治疗急性淋巴细胞白血病一例报告

1959年Thomas首次报告骨髓功能衰竭患者经胎肝细胞输注治疗,未见到任何副作用。随后一些作者将胎肝细胞输注用于临床治疗再障和急性白血病,部分患者的病情有不同程度的改善。近年来,国外少数作者对急性白血病试用胎肝造血干细胞移植(FLT)。在移植前给以强烈化疗和全身照射,争取杀灭更多白血病细胞,严重抑制免疫功能,以期胎肝造血干细胞有可能植上。目前,国内胎肝来源较组织配型(HLA)相配的骨髓移植供者易于获得,且极少发生     

再生障碍性贫血发病机制的探讨

本文对26例再障的发病机制分别用GM-CFU、CFU-F及BFU-E培养方法进行了研究.发现在发病机制上多因素同时存在的复合型明显多于一个因素的单纯型;有干细胞缺损的病例最多,微环境缺陷者亦不少见;有细胞抑制的两例,其抑制可能来自单核巨噬细胞.在CFU-F减低组中循环免疫复合物(CIC)升高的病例不比CFU-F正常组中CIC升高的病例明显增多,未能说明CIC升高和造血微环境缺陷有关.在干细胞缺损型的再障中,同时存在两种祖细胞的异常(GM-CFU;BFU-E),提示其缺陷乃发生在多向造血祖细胞水平或其以上的水平.最后还对现用的4组分型法在再障发病机制研究中的作用进行了评价,并提出进一步研究的意见.     

非骨髓清除性、无关供者脐血移植(/输注)治疗重型再生障碍性贫血Ⅱ型

重型再生障碍性贫血(简称重再障SAA)Ⅱ型系由慢性再生障碍贫血(简称慢再障CAA)恶化而来[1]病情重、预后差,无特殊治疗方法.尽管异基因骨髓造血干细胞移植(Allo-BMT),抗淋巴细胞球蛋白/抗胸腺细胞球蛋白(ALG/ATG),环胞菌素A(CSA),细胞因子(HGFS)等有一定的疗效,但往往因为此类患者病程长,年龄偏大,反复输血,恶化后疗效差,死亡率高[2],自1994年5月以来,对3例SAA-Ⅱ型病人进行了非骨髓清除性(简称非清髓性),非血缘关系(无关供者)胎盘脐带血(简称脐血)移植(NM-UCBT)/输注,并进行了6年的随访,取得了较良好的效果.     

再生障碍性贫血发病机理的体外研究

再生障碍性贫血(下称再障)是以骨髓功能衰竭、全血细胞减少为特征的临床综合症。其发病机理至今不甚明了。近年来的临床和实验研究提示其发病机理可分为造血细胞,微环境及免疫缺陷三种类型,一些作者体外骨髓粒系造血祖细胞(GM—CFU)培养证实,部分再障确系造血干细胞缺陷和免疫功能失调所致,但对个体病人有微环境缺陷者尚属推测,临床上尚缺乏一种较普遍接受对个体病人发病机理进行可靠分析的方法。近年来,我们以骨髓基质成纤维细胞(F—CFU)体外生长特点作为造血微环境的指标,比较研究了再障骨髓     

干细胞分子影像标记示踪技术现状

干细胞具有自我更新和多向分化潜能,能分化成神经细胞、心肌细胞、胰岛细胞、成骨细胞、肝细胞和造血祖细胞等,是细胞治疗的理想资源[1].例如,神经干细胞能向受损脑组织迁移,分化成神经元和神经胶质细胞,且基因修饰后能表达治疗性分子;移植骨髓间充质干细胞、血管内皮祖细胞和胚胎干细胞能改善缺血损伤心脏功能[2].细胞分子影像技术能在活体状态下对移植干细胞进行纵向研究,示踪细胞迁移,评价治疗效果,帮助优化细胞应用和选择合适治疗窗口[3].     

骨髓基质细胞移植治疗股骨头缺血性坏死的实验研究

目的:探讨骨髓基质细胞移植治疗股骨头坏死的疗效和治疗机制。方法:选用日本大耳白兔60只,随机分为A、B、C和D四组,各组制成激素性股骨头坏死模型。A组为对照组;B组为髓心减压组;C组为直接干细胞移植组;D组为倍增干细胞移植组。B组仅钻孔髓心减压;C组抽取骨髓分离后直接植入坏死的股骨头内;D组抽取骨髓分离、培养倍增后植入股骨头内。各组动物于治疗后8周处死,处死前后分别进行各种指标检测,包括钼靶X线摄影、CT扫描、MR扫描、骨密度测量、常规HE染色切片。结果:股骨头骨髓干细胞移植后8周,骨质密度X线改变不明显,CT和MR明显好转,骨密度增加。病理组织学表现空骨陷窝减少,成骨细胞增多,新骨形成。骨髓基质细胞移植治疗后显示股骨头修复效果明显,而倍增基质细胞移植效果更佳。结论:骨髓基质细胞移植治疗股骨头坏死能加速兔股骨头的修复进程,对股骨头坏死具有较高的治疗价值。     

异基因造血干细胞移植治疗儿童血液病

目的造血干细胞移植可以根治白血病、再生障碍性贫血、血红蛋白病及先天性免疫缺陷等疾病,通过临床观察,分析研究异基因造血干细胞移植对儿童血液病的治疗效果。方法采用异基因造血干细胞移植治疗15例儿童血液病,其中非血缘脐血移植9例,同胞脐血移植3例,同胞外周血干细胞移植2例,同胞骨髓移植1例。采用白消安、环磷酰胺或环磷酰胺、全身照射为基础的预处理的方案。结果14例患者植入,1例于移植后15d死亡,未达植入标准。白细胞的植入时间各组间没有明显差异;脐血移植血小板的植入明显较骨髓或外周血延迟（P〈0．05）。主要并发症为巨细胞病毒感染和复发,11例患者生存;其中10例无病存活,占66．7％,存活最长时间为6年。Kaplan-Meier生存曲线提示：1年生存率为76．6％,预计5年生存率为57．4％。结论脐血移植具有移植物抗宿主疾病轻、较容易控制、搜寻时间短等优点,对儿童患者具有广泛的应用前景。提出了儿童脐血移植的选择策略。     

供者同后造血干细胞输注在非清髓异基因造血干细胞移植中的应用

为探讨供者造血干细胞输注 (DSI)在非清髓异基因外周血干细胞移植 (NAPBSCT)中的作用 ,6例NAPBSCT患者分别在移植后 +7～ +90天进行DSI治疗 ,共输注单个核细胞 (MNC) (0 .6～ 7.6 )× 10 8/kg ,CD34 + 细胞 (0 .3～ 3.4)× 10 6/kg ,CD3+ 细胞 (0 .3～ 5 .1)× 10 8/kg。 6例中 5例有明显促进植入的作用 ,其中 3例由嵌合体转为完全性植入。 4例有较明确的移植物抗白血病效应 (GVL) ,均未见造血抑制等并发症。初步结果表明 ,DSI能促进NAPBSCT后供者嵌合体的增加 ,有利于NAPBSCT后供者细胞植入并具较好的GVL效应 ,而且并发症少 ,在NAPBSCT中具有较好的应用前景。     

STR—PCR定量检测供受者嵌合体方法的建立及临床应用

利用STRs的高度多态性等特性,用竞争性聚合酶链反应（PCR）结合聚丙烯凝胶电泳、染色和凝胶成像分析等技术,建立定量检测异基因造血干细胞移植后供受者嵌合体的方法,用无关个体的DNA混合实验进行可行性和准确性研究,并同时做染色体分带进行对照,以此基础上对2例非清髓异基因造血干细胞移植病人的植入情况进行动态检测。结果显示,扩增产物中供受者DNA含量的百分比同扩增前混合样本的比例呈显著直线相关,STR－PCR检测嵌合体方法简单、快速、可靠、敏感性高,所需标本量少且不受性别限制,是检测NAST供受者嵌合体的新方法。     

脊髓损伤的细胞疗法进展

脊髓损伤(SCI)通常导致灾难性的神经功能障碍,是目前研究的热点之一。近年来,以干细胞为代表的细胞移植治疗在SCI中取得较大进展,本文综述了脊髓损伤的细胞疗法进展。文献显示,SCI是一个多阶段、多因素参与的病理过程,最终的解决之道可能在于采用多种方法联合的治疗策略,包括干细胞移植、减少胶质瘢痕、清除抑制分子、免疫调控及组织工程支架桥接损伤区等,而干细胞移植联合免疫学调控干预SCI是令人期待的方法之一。而如何在损伤脊髓组织营造一种有利于干细胞存活并向神经元分化的微环境,如何调控免疫干预的时效性将可能是未来研究的主要方向。     

NK细胞在异基因造血干细胞移植中的作用和应用研究进展

NK细胞是异源反应性免疫细胞,它不仅具有直接的细胞杀伤作用,而且可以分泌多种细胞因子参与免疫细胞的调节。众多临床移植资料和动物实验证据提示,NK细胞对于异基因造血干细胞移植预后具有诸多有利影响：通过参与继发细胞免疫应答促进残存宿主细胞的清除,识别和攻击宿主白血病细胞发挥移植物抗白血病（graft versus leukiemia,GVL）效应,调节抗原提呈细胞（antigen present cells,APC）从而降低移植物抗宿主病（graft versus host disease,GVHD）的发生率和移植后白血病的复发率。由于上述现象的发现,目前NK细胞输注已开始用于异基因造血干细胞移植后的治疗,初步结果显示NK细胞治疗是安全的。为此我们对NK细胞在异基因造血干细胞移植中的作用和临床应用的研究进展作一综述。     

非清髓异基因外周血造血干细胞移植后供体细胞植入证据的研究

采用染色体荧光原位杂交（FISH）并结合常规染色体和染色体分带等方法,观察并比较了4例血液病人非清髓异基因外周血干细胞移植（NAPBSCT）后的植入情况。结果4例病人均有不同程度的植入,全部形成混合性嵌合体,其中2例转化为完全植入。统计结果分析表明,FISH分析中期分裂相与间期细胞的结果无统计学差异。与常规染色体检测结果相比较,FISH分析中期分裂相或间期细胞的植入率高,但无统计学差异。但FISH具有操作简单、实验周期短、结果敏感可靠等优点,适合用于性别不合的NAPBSCT后植入证据检测。