miR-9-3p对HepG2细胞脂蛋白调节因子ABCA1蛋白表达的影响

目的 评估miR-9-3p对ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-bindingcassettetransporterA1,ABCA1基因及蛋白表达的影响。方法 采用HepG2细胞，应用细胞培养、miR-9-3pmimics转染、实时定量PCR技术（qRT-PCR）以及Westernblotting免疫印迹等实验技术，分析miR-9-3p对细胞ABCA1mRAN及蛋白表达水平的影响。结果 (1) miR-9-3p转染组miR-9-3p水平较对照组显著升高，差异有统计学意义（P<0.001），证明转染成功；(2)两组ABCA1mRNA水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；(3) miR-9-3p转染组ABCA1蛋白水平较对照组显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 miR-9-3p能够抑制细胞内ABCA1蛋白表达，但对转录水平未见显著影响。     

miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响及机制

目的探讨miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响以及潜在的作用机制。方法设置miR-con组、miR-219a-5p组、anti-miR-con组、anti-miR-219a-5p组、miR-219a-5p+pcDNA组、miR-219a-5p+pcDNA-SMC4组、miR-con+SMC4-WT组、miR-con+SMC4-MT组、miR-219a-5p+SMC4-WT组、miR-219a-5p+SMC4-MT组,转染均用脂质体法。qRT-PCR检测miR-219a-5p和SMC4 mRNA表达水平;Western Blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于人正常皮肤细胞HaCaT,皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2、Colo-16、SCL-1中SMC4 mRNA和蛋白表达水平显著升高,miR-219a-5p表达水平显著降低(P<0.05)。过表达miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡;促进Caspase-3蛋白表达,抑制Cyclin D1蛋的表达;抑制Wnt/β-catenin信号通路激活。miR-219a-5p靶向负调控SMC4的表达,转染SMC4野生型表达载体的HSC-2细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05);而转染SMC4突变型表达载体的HSC-2细胞荧光素酶活性差异不显著。且过表达miR-219a-5p,SMC4表达水平显著降低;抑制miR-219a-5p表达,SMC4表达水平显著升高。过表达SMC4能逆转miR-219a-5p对皮肤鳞状细胞癌细胞HSC-2的增殖抑制和凋亡促进的作用。结论 miR-219a-5p可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与Wnt/β-catenin及SMC4信号通路有关,将为皮肤鳞状细胞癌的预防和治疗提供新靶点。     

宫颈癌患者血清miR-329-3p和miR-34a-5p水平检测及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清miR-329-3p和miR-34a-5p水平检测及临床意义。方法选取2011年3月-2014年8月义乌市中心医院宫颈癌患者154例为观察组,分别于手术前以及术后3～4周采集全血,另选健康体检者123例为对照组,体检时采血,测定其血清miR-329-3p和miR-34a-5p及癌胚抗原(CEA)表达水平。结果术前观察组miR-329-3p、miR-34a-5p水平低于对照组,CEA水平高于对照组(P0. 05);术后观察组miR-329-3p、miR-34a-5p水平高于术前观察组,CEA水平低于术前观察组(P0. 05);不同年龄、肿瘤最大径、肿瘤数目特征组中血清miR-329-3p、miR-34a-5p水平相近(P0. 05);而病理学分级越高、TNM分期越高、有淋巴血管间隙浸、有淋巴结转移、有复发,血清miR-329-3p、miR-34a-5p表达水平越低(P0. 05); CEA与miR-329-3p、miR-34a-5p呈负相关(P0. 05); miR-329-3p、miR-34a-5p两者AUC相近(P0. 05),两者诊断结宫颈癌的灵敏度、特异度相近(P0. 05); miR-329-3p、miR-34a-5p阳性组3年生存率及生存期均明显高于miR-329-3p、miR-34a-5p阴性组(P0. 01)。结论 miR-329-3p、miR-34a-5p在宫颈癌患者血清的表达量降低,miR-329-3p、miR-34a-5p在宫颈癌的发生发展过程中起抑制作用,miR-329-3p、miR-34a-5p高表达可提高宫颈癌患者预后; miR-329-3p、miR-34a-5p具有较高的灵敏度、特异度,可作为诊断宫颈癌的生物学标志物。     

微小核糖核酸-371a-5p靶向调控X相关凋亡抑制蛋白在滋养层细胞凋亡和复发性流产中的作用分析

目的探讨微小核糖核酸-371a-5p(miR-371a-5p)靶向调控X相关凋亡抑制蛋白(XIAP)在滋养层细胞凋亡、复发性流产中的作用。方法滋养层JEG-3细胞经过细胞培养、转染后,分为空白组(Control)、阴性对照组(ND)、miR-371a-5p mimics组及miR-371a-5p inhibitor组。实时荧光定量PCR检测miR-371a-5的表达观察滋养层细胞凋亡能力,免疫印迹(Western blot)检测XIAP、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-3)表达,采用实时荧定量PCR检测XIAP、caspase-3基因。结果Control组miR-371a-5p mRNA表达水平为(1.50±0.09),NC组miR-371a-5p mRNA表达水平为(1.44±0.05),miR-371a-5p mimics组miR-371a-5p mRNA表达水平为(1.23±0.08),miR-371a-5p inhibitor组miR-371a-5p mRNA表达水平为(1.86±0.05),miR-371a-5p mimics组表达低于Control、NC、miR-371a-5pinhibitor组;miR-371a-5p inhibitor组表达高于Control、NC、miR-371a-5p mimics组(F=31.759,P<0.05)。Control组转染48 h后细胞凋亡率为(1.74±0.04)%,NC组转染48 h后细胞凋亡率为(1.76±0.06)%,miR-371a-5p mimics组转染48 h后细胞凋亡率为(3.51±0.09)%,miR-371a-5p inhibitor组转染48 h后细胞凋亡率为(1.33±0.16)%,滋养层细胞转染48 h后miR-371a-5p mimics组细胞凋亡率高于NC、Control及miR-371a-5p inhibitor组;miR-371a-5p inhibitor组低于NC、Control及miR-371a-5p mimics组(F=47.027,P<0.05)。miR-371a-5p mimics组XIAP相对表达量低于NC、Control及miR-371a-5p inhibitor组;miR-371a-5p inhibitor组XIAP相对表达量高于miR-371a-5p mimics、NC及Control组(F=33.541,P<0.05)。miR-371a-5p mimics组caspase-3相对表达量低于NC、Control及miR-371a-5p inhibitor组;miR-371a-5p inhibitor组caspase-3相对表达量高于miR-371a-5p mimics、NC及Control组(F=43.728,P<0.05)。结论miR-371a-5p靶向调控XIAP参与滋养层细胞凋亡的过程,在复发性流产起到重要作用。     

咪唑安定联合miR-135a-5p影响宫颈癌细胞HeLa增殖 迁移及侵袭的机制研究

目的 探讨咪唑安定对宫颈癌细胞HeLa增殖、迁移及侵袭的影响及分子机制。方法 以RPMI-1640培养基对HeLa细胞常规培养，分别用25、50、100μmol/L的咪唑安定处理，记为低、中、高剂量组，常规培养的细胞作为NC组；将miR-135a-5p抑制剂及阴性对照转染至HeLa细胞，记为anti-miR-135a-5p组、anti-miR-NC组；miR-135a-5p抑制剂及阴性对照转染至HeLa细胞后用100μmol/L的咪唑安定处理，记为anti-miR-135a-5p+高剂量组、anti-miR-NC+高剂量组。CCK-8检测细胞活性；Western blot法检测蛋白表达；克隆形成实验检测细胞克隆；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-135a-5p表达水平；Transwell检测细胞迁移和侵袭。结果 不同剂量咪唑安定处理后，HeLa细胞活性、CyclinD1、MMP2、MMP9表达、细胞克隆、迁移和侵袭数量、miR-135a-5p表达降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)。下调miR-135a-5p降低HeLa细胞活性、MMP2、CyclinD1、M...     

宫颈癌患者血清miR-329-3p和miR-34 a-5p水平检测及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清miR-329-3 p和miR-34 a-5 p水平检测及其临床意义。方法选取2017年2月至2018年2月在鄂东医疗集团黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)手术切除的39例宫颈癌组织标本为研究对象。根据癌旁黏膜组织有无癌前病变将其分组。利用免疫组化对39例标本中的p 53、c-erbB-2、bax表达进行检测。结果 miR-329-3 p和miR-34 a-5 p在宫颈癌组织中表达水平明显低于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌低分化标本miR-329-3 p和miR-34 a-5 p表达水平明显低于分化较好组,差异有统计学意义(P<0.05)。有高危人乳头瘤病毒感染或淋巴转移的宫颈癌标本中miR-329-3 p和miR-34 a-5 p表达水平更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-329-3 p和miR-34 a-5 p可作为宫颈癌患者预后判断的重要参数指标,其对判断宫颈癌的发展有重要意义。     

miR-374a-3p靶向Syk对ox-LDL诱导内皮细胞损伤及炎症反应的影响

目的探讨miR-374a-3p对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤及炎症反应的影响及作用机制。方法实验分为ox-LDL组、对照(Con)组、miR-NC组、miR-374a-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-374a-3p组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-374a-3p组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-Syk组、ox-LDL+miR-374a-3p+pcDNA3.1组、ox-LDL+miR-374a-3p+pcDNA3.1-Syk组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-374a-3p表达水平;蛋白质印迹(Western Blot)检测脾酪氨酸激酶(Syk)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量水平;荧光素酶报告实验检测miR-374a-3p和Syk的靶向关系。结果 ox-LDL作用的HUVEC中miR-374a-3p低表达,Syk高表达;细胞活性显著降低,细胞凋亡率显著升高,TNF-α、IL-6含量显著升高(P<0.05)。过表达miR-374a-3p和抑制Syk表达抑制ox-LDL作用的HUVEC凋亡和炎症因子TNF-α、IL-6的释放。miR-374a-3p靶向调控Syk,过表达Syk逆转了miR-374a-3p对ox-LDL作用的HUVEC损伤及炎症因子释放的抑制作用。结论过表达miR-374a-3p可抑制HUVEC凋亡和炎症因子的释放,保护ox-LDL引起的HUVEC损伤及炎症反应,其机制可能与Syk有关。     

miR-335-3p通过靶向FOXD1发挥对骨肉瘤细胞肿瘤生物学行为的抑制作用

目的 探讨miR-335-3p通过靶向调控FOXD1基因抑制骨肉瘤(osteosarcoma, OS)细胞的增殖和迁移的作用及机制。方法 使用RT-PCR法评估miR-335-3p在OS组织和临近组织，正常人成骨细胞系(hFOB1.19f)和OS细胞系(SAOS2、U2OS、MG63)中的表达；使用细胞增殖实验测定研究miR-335-3p过表达对U2OS、MG63的活力的影响；EDU染色和DAPI染色评估miR-335-3p过表达对U2OS、MG63迁移和侵袭的影响；荧光素酶报告基因测定法确定miR-335-3p靶向调控FOXD1编码基因发挥作用；蛋白质免疫印迹法检测OS细胞中FOXD1蛋白表达；pcDNA-FOXD1转染OS细胞，并评估细胞增殖、迁移和侵袭的水平。结果 miR-335-3p在OS癌组织和细胞中低表达；利用miR-335-33p mimic转染细胞后，可在体外抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭；miR-335-3p通过直接结合FOXD1 mRNA的3′-UTR发挥抑制作用，从而负面调节FOXD1的表达；miR-335-3p通过靶向调节FOXD1的表达，进而抑制OS癌细胞的增殖...     

miR-485-5p靶向Toll样受体4调控巨噬细胞的炎症反应

目的 探究miR-485-5p对Toll样受体4(TLR-4)的靶向作用，研究其在巨噬细胞炎症反应中的调控作用。方法 合成miR-485-5p模拟物(mimics)及其抑制剂(inhibitors),分别转染HEK-293T细胞，RT-PCR检测miR-485-5p的表达水平。根据miRNA靶向作用预测数据分析选定TLR-4作为研究的靶基因，构建TLR-43’UTR及其突变体萤火虫-海肾双荧光素酶报告基因系统，通过检测在细胞模型中过表达/抑制表达miR-485-5p后对荧光素酶活力的影响，验证miR-485-5p与TLR-4之间的靶向关系，Western blot检测TLR-4蛋白质表达水平。构建巨噬细胞模型，将miR-485-5p mimics及inhibitors分别转染巨噬细胞，RT-PCR检测靶基因TLR-4 mRNA的表达水平，ELISA检测上清中下游致病因子IL-6、 IL-17、IL-18的表达。结果 与对照组比较，转染miR-485-5p mimics后miR-485-5p表达水平升高，转染miR-485-5p inhibitors后miR-485-5p表达水平降低(P...     

原发性干燥综合征患者血液中miR-146a-5p、miR-4484和miR-4687-5p的表达

目的通过检测3种原发性干燥综合征(PSS)相关的miRNA(miR-4687-3p、miR-4484、miR-146a-5p)在PSS患者和健康人群中的差异表达水平,探讨其在PSS诊断和临床检验中的作用和意义。方法采用荧光定量PCR(q PCR)法检测28例患者和30例健康志愿者血清中3种miRNA的差异表达水平,利用诊断价值评价使用受试者工作特征曲线(ROC)分析miRNA的敏感性和特异性。结果经过q PCR验证,PSS治疗前组与对照组比较miR-146a-5p、miR-4484和miR-4687-5p表达均上调(P0.05),治疗前组和治疗后组比较,miR-146a-5p和miR-4484表达均下调(P0.05),而miR-4687-5p表达依然上调(P=0.9930.05)。3种miRNA的灵敏性和特异性分别为miR-4484miR-4687-5pmiR-146a-5p。结论 miR-4687-3p、miR-4484、miR-146a-5p表达异常可能参与了PSS的发生和发展,miR-4484可能成为PSS的早期辅助诊断指标。     

LINC00943靶向调控miR-125a-5p对幽门螺杆菌诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响

目的 探讨LINC00943对幽门螺杆菌(Hp)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响及其分子机制。方法 将GES-1细胞分为Control组、Hp组、Hp+si-NC组、Hp+si-LINC00943组、Hp+miR-NC组、Hp+miR-125a-5p组、Hp+si-LINC00943+anti-miR-NC组和Hp+si-LINC00943+anti-miR-125a-5p组,实时荧光定量PCR检测LINC00943和miR-125a-5p表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;免疫蛋白印迹检测凋亡蛋白表达;酶联免疫吸附法检测白细胞介素-8(IL-8)和IL-1β、乳酸脱氢酶(LDH)水平;双荧光素酶报告基因实验检测LINC00943和miR-125a-5p靶向关系。结果 与Control组比较,Hp组LINC00943表达、凋亡率、Bax蛋白、IL-8、IL-1β、LDH升高,miR-125a-5p表达、Bcl-2蛋白降低(P<0.05);敲减LINC00943或过表达miR-125a-5p可减轻Hp诱导的GES-1细胞损伤;LINC00943靶向调控miR-125a-5p...     

miR-15-5p靶向调控SMAD5表达抑制子宫内膜腺癌细胞上皮间质转化的研究

目的探讨miR-15-5p抑制人子宫内膜腺癌细胞(HEC-1-A)上皮间质转化(EMT)的机制。方法构建SMAD53'-UTR-荧光素酶报告载体,通过双荧光素酶报告基因检测,观察miR-15-5p对SMAD53'-UTR荧光素酶活性的影响,鉴定SMAD5是否为miR-15-5p的靶基因。将miR-15-5p模拟物(agomir)与miR-15-5p抑制物(antagomir)及其对应的对照组分别转染至HEC-1-A细胞中,并进行EMT诱导培养,分别采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western Blot检测各组细胞SMAD5在mRNA及蛋白水平的相对表达量;了解miR-15-5p对EMT标志物的表达影响。结果双荧光素酶报告基因实验结果表明,miR-15-5p可以结合在SMAD5的3'-UTR区域,而不能结合在SMAD3的3'-UTR区域,表明miR-15-5p的靶基因应为SMAD5。正常HEC-1-A细胞转染miR-15-5p的模拟物或抑制物后,SMAD5表达显著下调或上调,也表明miR-15-5p的靶基因是SMAD5。结论SMAD5是miR-15-5p的靶基因,miR-15-5p可通过靶向调控SMAD5的表达抑制人子宫内膜腺癌HEC-1-A细胞的EMT。     

miR-203a-3p靶向调控VEGF-C表达对卵巢癌恶性生物学特征的影响

目的 探究miR-203a-3p通过靶向调控血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达影响卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制.方法 收集2019年2月至10月在清华大学第一附属医院就诊的20例卵巢癌患者手术切除的癌组织及对应癌旁组织.使用实时荧光定量聚合酶链式反应检测20例手术切除的卵巢癌组织及对应癌旁组织中miR-203a-3p的表达.体外培养SKOV3细胞,将miR-203a-3p和pc-VEGF-C单独或者共同转染于SKOV3细胞,实验分为:Control组、miR-203a-3p组、pc-VEGF-C组和miR-203a-3p+pc-VEGF-C组.在miRNA靶向数据库TargetScanHuman中,对miR-203a-3p与VEGF-C的靶向关系进行预测,并利用双荧光素酶报告基因实验对其靶向关系进行验证;利用克隆形成实验检测各组SKOV3细胞的克隆形成率以观察其体外增殖活性,并利用Western blot实验检测增殖标志蛋白PCNA相对表达水平;利用划痕实验检测各组24h内划痕愈合率以观察其迁移能力;Transwell实验检测侵袭能力;Western blot检测侵袭、迁移相关蛋白表达.结果 卵巢癌组织中miR-203a-3p表达(0.47±0.10)较正常癌旁组织中miR-203a-3p表达(0.99±0.09)显著下调(t=17.112,P<0.05).miR-203a-3p与VEGF-C存在可结合的位点,相比Control组,miR-203a-3p组VEGF-C蛋白相对表达水平、荧光素酶活性显著降低(q值分别为12.430、5.047,P<0.05);miR-203a-3p组卵巢癌细胞克隆形成率、PCNA蛋白相对表达水平均显著降低(q值分别为11.773、12.246,P<0.05);miR-203a-3p组单位面积细胞侵袭数和细胞愈合率均显著降低(q值分别为6.258、5.325,P<0.05);miR-203a-3p组E-cadherin表达显著升高,Vimentin、N-cadherin表达均显著降低(q值分别为4.082、7.746、7.570,P<0.05).结论 miR-203a-3p可以通过靶向调控V EG F-C表达抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移,其机制可能与抑制增殖相关蛋白和调控上皮间质化过程相关.     

LncRNA PTPRG-AS1通过靶向miR-5590-3p调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的探讨LncRNA PTPRG-AS1对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法以正常乳腺上皮细胞MCF-10A为对照,qRT-PCR法检测乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D和BT549)中 LncRNA PTPRG-AS1 和 miR-5590-3p 表达。分别转染 si-LncRNA PTPRG-AS1、miR-5590-3p mimics、共转染si-LncRNA PTPRG-AS1与anti-miR-5590-3p至乳腺癌MCF-7细胞,用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell检测检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法检测细胞中CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA PTPRG-AS1和miR-5590-3p的调控关系。结果与MCF-10A细胞比较,乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D和BT549)中LncRNA PTPRG-AS1表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),miR-5590-3p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。敲减LncRNA PTPRG-AS1或过表达miR-5590-3p后,MCF-7细胞增殖活性、迁移数、侵袭数及细胞中CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。LncRNA PTPRG-AS1靶向负调控miR-5590-3p。敲减miR-5590-3p逆转了敲减LncRNA PTPRG-AS1对MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论 LncRNA PTPRG-AS1可能靶向下调miR-5590-3p促进乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

miR-454-3p调控肺癌细胞活性及对CBX7蛋白表达的影响

目的:探究miR-454-3p对肺癌细胞活性的调控及对CBX7蛋白表达的影响。方法:体外培养正常肺上皮细胞293T细胞和人肺癌细胞A549细胞,把肺癌A549细胞分为三组,空白组、miR-NC组(转染miR-NC)和miR-454-3p组(转染miR-454-3p mimics),用CCK-8法检测三组细胞增殖情况;用...     

微小RNA-15a-3p通过肿瘤蛋白D52增强Hela细胞放射敏感性的实验研究

目的 研究微小RNA-15a-3p(microRNA-15a-3p,miR-15a-3p)的表达与Hela细胞放射敏感性的关系，探讨肿瘤蛋白D52(Tumor protein D52,TPD52)参与调节的机制。方法 设立空白对照组、放射组、miR-15a-3p mimics组和IR+miR-15a-3p mimics组。各组细胞培养结束后，采用CCK-8试剂盒测定细胞活力，结晶紫染色测定单克隆形成数目，FACScan流式细胞仪检测凋亡，Transwell室测定细胞侵袭水平，RT-PCR法及蛋白印迹法测定miR-15a-3p、TPD52 mRNA和蛋白水平。结果 与宫颈癌Hela细胞组比较，IR组、miR-15a-3p mimics组、IR+miR-15a-3p mimics组OD值、存活率、单克隆形成数目、穿膜数、TPD52 mRNA和蛋白降低（t=10.965、8.321、9.654、10.215、14.654、12.698、17.632、10.214、9.874、13.658、17.987、20.321、23.214、14.474、16.214、18.695、17.459、19....     

miR-15a-5p/SALL4在乳腺癌患者组织中的表达及临床意义

目的探讨miR-15a-5p/人类婆罗双数样基因4(SALL4)在乳腺癌患者组织中的表达及临床意义。方法2016年3月—2019年7月在温州市中心医院采集62例首次确诊乳腺癌患者的癌旁组织及癌组织标本,通过实时荧光定量PCR及免疫印迹法检测各组织标本中miR-15a-5p、SALL4基因及其蛋白的表达,探讨miR-15a-5p表达水平与患者临床病理特征的关系,分析癌组织中miR-15a-5p与SALL4的相关性,验证二者之间的靶向关系。结果与癌旁组织比较,乳腺癌组织中miR-15a-5p表达水平显著降低,SALL4 mRNA和蛋白表达水平均显著增加,差异均有统计学意义(t=17.458、17.634、14.714,均P<0.05),乳腺癌组织中miR-15a-5p与SALL4表达呈显著负相关(r=-0.787,P<0.05),且SALL4是miR-15a-5p的直接靶基因;肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期及雌激素受体/孕激素受体(ER/PR)呈阴性表达,miR-15a-5p低表达的比例明显较高,差异均有统计学意义(χ^(2)=7.839、11.088、6.798,均P<0.05)。结论在乳腺癌组织中,miR-15a-5p呈低表达,SALL4呈高表达,二者之间存在靶向关系,miR-15a-5p低表达与乳腺癌患者肿瘤直径、TNM分期及ER/PR表达有关,可见miR-15a-5p/SALL4有望成为乳腺癌治疗的潜在靶点。     

MicroRNA miR-34a-5p通过靶向MDM4抑制巨噬细胞氧化应激损伤的研究

目的 探究MicroRNA miR-34a-5p通过靶向MDM4抑制巨噬细胞氧化应激损伤的机制。方法 本研究内容为MicroRNA miR-34a-5p能通过MDM4抑制ox-ldl诱导的巨噬细胞凋亡和氧化应激,将其分为空白对照组(THP-1人单核细胞组)、AS对照组(ox-ldl),miR-34a-5p质粒转染组、miR-34a-5p质粒转染组+oxldl,采取RT-qPCR检测microRNA miR-34a-5p和mRNA MDM4表达,采取TUNEL染色检测巨噬细胞的凋亡,采取western blot检测MDM4、ROS、MDA和SOD蛋白,采取红油O染色法评价巨噬细胞内脂质沉积,评价mi R-34a-5p是否靶向调控MDM4、MDM4抑制巨噬细胞氧化应激损伤诱导的凋亡、ox-ldl诱导巨噬细胞内脂质沉积变化情况。结果 mi R-34a-5p质粒转染组、miR-34a-5p质粒转染组+ox-ldl的microRNA miR-34a-5p表达、mRNA MDM4表达高于空白对照组、AS对照组(P<0.05);miR-34a-5p质粒转染组、miR-34a-5p质粒转染组+ox-ldl下miR-34a-5p表达、ROS水平、MDM4水平、MDA水平、SOD水平高于空白对照组、AS对照组(P<0.05);油红O染色法检测中,5ug/mL LDL下细胞内红染脂滴轻度增加,200mg/mL LPS细胞内红染颗粒显著增多,加入10ng/mL RPMI-1640能明显减少脂质聚集。结论 MicroRNA miR-34a-5p能通过MDM4抑制ox-ldl诱导的巨噬细胞凋亡和氧化应激,为调控AS的发生发展提供基础研究证据,为AS诱发的心脑血管疾病诊断和治疗方面提供依据。     

血清miR-1207-5p和miR-96-5p表达水平与绝经后女性股骨头坏死的关系

目的探讨绝经后女性股骨头坏死的发生与血清miR-1207-5p和miR-96-5p表达水平的关系。方法连续选择30例绝经后女性股骨头坏死患者(观察组)和30例绝经后女性健康志愿者(对照组),采用反转录PCR(RT-PCR)法检测外周循环miR-1207-5p和miR-96-5p表达水平,ELISA法检测循环骨形成蛋白(BMP)-2和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。结果观察组血清miR-1207-5p表达水平明显高于对照组,miR-96-5p表达水平低于对照组,miR-1207-5p上调率和miR-96-5p下调率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组血清BMP-2和VEGF表达水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 miR-1207-5p和miR-96-5p表达异常可能与绝经后女性股骨头坏死的发生有关,影响BMP-2和VEGF的表达水平可能是其发生机制。