苯甲酸雌二醇对去卵巢脑缺血大鼠NOS及AChE的影响

目的探讨苯甲酸雌二醇对去卵巢脑缺血大鼠的脑保护作用及其可能机制。方法采用改良4-VO方法将去卵巢雌性大鼠制备成脑缺血模型,应用水迷宫检测大鼠学习记忆能力,取脑组织测定一氧化氮合酶（NOS）及乙酰胆碱酯酶（AChE）的活力变化,同时观察海马区病理学改变。结果与假手术组比较,缺血组海马区神经元损伤明显,学习记忆能力明显减退（P〈0.01）,脑组织中NOS活力明显下降（P〈0.01）,AChE的活力明显增加（P〈0.01）;与缺血组比较,治疗组海马区神经元损伤较轻,学习记忆能力有明显改善（P〈0.01）,NOS活力增强（P〈0.05）,AChE活力有所降低（P〈0.05）。结论苯甲酸雌二醇可以减轻因去卵巢脑缺血所致的大鼠认知功能障碍,可能与改变脑组织中NOS和AChE的活性有关。     

大鼠慢性脑灌注不足脑内小胶质细胞活化和脑的病理改变

目的：探讨慢性脑灌注不足脑内小胶质细胞活化规律与脑病理改变的关系。方法：利用大鼠双侧颈总动脉持久性结扎所致慢性脑灌注不足的动物模型,用OX18抗MHC I类抗原和OX6抗MHC Ⅱ类抗原的免疫组化染色,观察不同脑区小胶质细胞变化规律;用光镜观察脑的病理改变。结果：慢性脑灌注不足可引起脑内小胶质细胞的活化,随着缺血时间的延长,小胶质细胞在皮层和白质的活化有所增加;缺血后脑的病理改变以神经细胞变性、固缩和退变,皮层下白质的神经纤维和髓鞘溃变为主,普遍存在胶质细胞增生,形成胶质小结。经环孢素A治疗后以上变化明显减轻。结论：慢性脑灌注不足所致脑内小胶质细胞的活化与脑内病理改变有关,免疫抑制剂环孢素A对此有一定的治疗作用。     

大鼠脑缺血再灌注时脑组织损伤病理改变观察

目的　观察大鼠局部脑缺血再灌注脑组织的病理改变特点。方法　建立鼠脑缺血再灌注模型 ,采用HE染色 ,观察缺血部位、组织学改变、神经功能缺损。采用TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果　缺血2h后再灌流 1h有梗死灶、1 2h梗死灶面积扩大 ,4 8h神经细胞凋亡最重。结论　神经细胞缺血性损伤与再灌注时间有关。     

雌二醇对去卵巢大鼠血清一氧化氮的影响

目的：观察雌二醇对去卵巢大鼠血清一氧化氮的影响。方法：采用去卵巢大鼠模型,通过肌注苯甲酸雌二醇2周,测量不同雌激素状态下大鼠血清一氧化氮（NO）的浓度,用镉还原法测NO2／NO3的量来反映NO浓度。结果：切除卵巢三周后,血浆雌二醇浓度显著下降（P＜0,05）,NO浓度轻度下降,但无统计学差异（P＞0．05）,当补充大剂量雌二醇后,发现去卵巢大鼠血清NO显著升高（P＜0．05）,血清E2水平也极显著升高（P＜0．01）。结论：雌二醇可促进去卵巢大鼠血清NO水平增加,这可能是雌激素抑制动脉粥样硬化和降低女性绝经后冠心病发病危险的重要机制之一。     

葛根素与雌二醇对去卵巢大鼠子宫的影响

目的观察长期联合使用葛根素、雌二醇对去卵巢大鼠子宫组织结构的影响。方法将40只健康雌性5月龄SD大鼠随机分为5组(n=8):假手术组、去卵巢模型组、葛根素组、雌二醇组、葛根素-雌二醇组。假手术组大鼠只切除其卵巢旁的一小块脂肪垫;其余4组建立去卵巢大鼠骨质疏松症模型。1周后,葛根素组大鼠皮下注射葛根素50mg/kg,1次/d;雌二醇组大鼠皮下注射雌二醇200μg/kg,2次/周;葛根素-雌二醇组大鼠皮下注射葛根素(25mg/kg,1次/d)的同时还皮下注射雌二醇(100μg/kg,2次/周)。药物干预20周后取各组大鼠血清和子宫组织,观察血清雌二醇水平和子宫组织的形态学表现。结果雌二醇组大鼠血清雌二醇水平、子宫管径、子宫内膜面积、肌层面积和子宫腺面积明显高于去卵巢模型组、葛根素组及葛根素-雌二醇组(P<0.05)。葛根素-雌二醇组与葛根素组比较,前者大鼠血清雌二醇水平、子宫管径、子宫内膜面积、肌层面积和子宫腺面积有增加趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论小剂量雌二醇与葛根素联合或较大剂量葛根素对子宫的促增生作用较弱。     

针刺对更年期脑缺血大鼠垂体雌激素受体mRNA表达及雌二醇的影响

目的:研究针刺对更年期脑缺血大鼠不同时间点血清雌激素水平(E2)及垂体雌激素受体mRNA(ERmRNA)表达的影响,探讨针刺机理.方法:选用自然更年期雌性SD大鼠,采用右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型建立不同时间点脑缺血动物模型,电针刺治疗后,用放免法检测血清E2水平,原位杂交法检测ERmRNA表达.结果:更年期脑缺血模型大鼠血清E2水平及垂体ERmRNA表达均有不同程度降低,针刺治疗后有不程度提高.结论:针刺可以提高更年期脑缺血模型大鼠血清雌二醇(E2)水平,调节垂体ERmRNA表达,从而防治脑缺血.     

雌二醇对去卵巢大鼠延髓毛细血管超微结构的影响

目的 :观察雌激素对去卵巢大鼠延髓毛细血管超微结构的影响。　方法 :30只雌性成年SD大鼠随机分为去卵巢组 (A组 )、雌二醇组 (B组 )和假手术对照组 (C组 )。A组和B组大鼠卵巢切除后 10天起 ,分别皮下注射等渗盐水 0 .1ml/d、17 β雌二醇 2 0 μg/ (kg·d) ;C组只剖开腹膜 ,不切除卵巢。手术后 10天起 ,皮下注射等渗盐水0 .1ml/d。各组动物连续用药 6周后观察结果。　结果 :①血清雌二醇的浓度 :A组明显低于C组 (P <0 .0 1) ,B组明显高于A组 (P <0 .0 1) ,而B组和C组比较无统计学意义。②电镜观察 :A组延髓毛细血管有明显的损伤表现 ,内皮细胞肿胀变形 ,线粒体明显肿胀、嵴断裂 ,血管内皮外基膜增厚 ,部分结构不完整 ;B组的毛细血管损伤明显减轻 ;C组延髓毛细血管形态正常。　结论 :雌激素对去卵巢大鼠延髓毛细血管有明显的保护作用。     

雌二醇对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经生长因子蛋白表达的影响

目的：观察雌二醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经生长因子（NGF）蛋白表达的影响,探讨雌激素在脑缺血再灌注损伤中的脑保护作用机制。方法：72只Wistar大鼠随机分为假手术组（n=8）、手术对照组（n=32）、雌二醇治疗组（n=32）,后2组又分为3、6、12、24h4个时点。手术对照组和雌二醇治疗组采用线栓法制作脑缺血再灌注损伤模型,假手术组仅分离血管,不插尼龙线。制作模型前,雌二醇治疗组腹腔注射17-β雌二醇7d,其余2组腹腔注射等量花生油7d。缺血2h分别再灌注3、6、12、24h后断头取脑,应用连续切片免疫组织化学方法检测脑组织中NGF蛋白的表达情况。结果：缺血2h再灌注6h及12h后,手术对照组脑组织NGF阳性细胞百分率较假手术组升高（P均〈0.05）;再灌注6、12、24h后雌二醇治疗组NGF阳性细胞百分率均高于假手术组（P均〈0.05）,且12、24h时亦高于手术对照组（P均〈0.05）。结论：雌二醇可以使脑缺血再灌注损伤后NGF表达增加,从而起脑保护作用。     

17β-雌二醇降低大鼠慢性低灌注诱导的空间记忆损伤及其分子机制

目的:观察慢性低灌注3个月大鼠空间学习?记忆能力的变化及17β-雌二醇 (E2)的长期保护作用,揭示血管性痴呆进行性病变的分子机制?方法:永久性结扎成年雄性SD大鼠双侧颈总动脉,诱导慢性低灌注模型,并随机分为假手术(sham)组?安慰剂(placebo,Pla)组及E2处理组;采用免疫荧光染色或Western blot技术检测海马CA1区神经元及突触相关蛋白的变化,采用Morris水迷宫检测大鼠空间记忆能力?结果:①Morris水迷宫结果显示,Pla组大鼠发现水下平台所用时间与sham组大鼠相比无显著差异,而探索试验中在平台原所在象限探索的时间较sham组大鼠显著降低;②与sham组相比,Pla组大鼠海马CA1区NeuN阳性染色细胞数及微管相关蛋白 (microtubule-associated protein,MAP)-2的蛋白表达水平无显著差异,而髓鞘碱性蛋白 (myelin basic protein,MBP)-2的蛋白表达水平显著降低;③Pla组大鼠海马CA1区突出后致密蛋白95 (post-synaptic density protein 95,PSD95) 及突触小泡蛋白的蛋白表达水平较sham 组显著降低;④长期给予E2可显著治疗双侧颈总动脉结扎造成的以上变化?结论:双侧颈总动脉结扎 3个月可导致大鼠空间记忆能力降低,长期给予E2可能通过上调海马CA1区神经元MBP2?PSD95?突触小泡蛋白的蛋白表达,从而阻断血管性痴呆的进行性病变?     

雌激素对颅脑创伤大鼠皮质神经细胞c-fos表达及凋亡的影响

目的探讨雌激素在颅脑创伤中的作用。方法按照Marmarou方法建立大鼠创伤性脑损伤（TBI）模型，采用硫代巴比妥酸法测定氧自由基中间产物丙二醛（MDA），免疫组化方法检测细胞凋亡相关基因c—fos的表达，原位末端标记（TUNEL）法检测凋亡细胞。结果雌激素治疗组皮质MDA和c—fos的表达及TUNEL阳性细胞均低于模型组。结论大鼠脑创伤后雌激素通过抗氧化作用抑制神经细胞凋亡而起到脑保护作用。     

雌二醇对大鼠脑缺血/再灌注损伤脑组织bcl-2、caspase-3表达的影响

目的：观察雌二醇时大鼠脑缺血／再灌注损伤脑组织hcl-2．capase-3表达的影响。方法：Wistar大鼠72只，随机分为假手术组、局灶性脑缺血2h／再灌注3h、6h．12h、24h组及雌二醇治疗(100μg／kg) 脑缺血2h／再灌注3h、6h、12h、24h组，每时间点8只，假手术组8只。采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血／再灌注损伤模型，采用连续切片免疫组化技术检测脑组织中bel-2、caspase-3表达部位及数量。结果：雌二醇治疗组皮层bcl-2免疫阳性细胞数与脑缺血／再灌注及似手术组比较，在再灌注后12h、24h增高，而纹状体bcl-2免疫阳性细胞数与脑缺血／再灌注组及假手术组比较筹异无统计学意义。假手术组无caspase-3表达，雌二醇治疗组caspase-3阳性细胞数，在皮层12h、24h明显减少．纹状体区caspase-3阳性细胞数治疗组各时间点稍减少，但与脑缺血／再灌注组比较无统计学意义。结论：雌二醇治疗可以诱导皮层bcl-2表达及下调caspase-3活性。     

苯甲酸钠多次给药对大鼠肝肾功能的影响

目的:研究食品防腐剂苯甲酸钠多次给药对大鼠肝肾功能的影响。方法:选取50只健康SPF级SD大鼠,分为5组,每组10只,苯甲酸钠低、中、高剂量组分别灌胃给予苯甲酸钠(0.1、0.2、0.4 g/kg),阳性对照组给予山梨酸钾(0.2 g/kg),空白对照组给予生理盐水,1次/d,连续4周。检测末次给药后大鼠血清学指标(ALT、AST、ALP、GGT、TP、ALB、TBIL、BUN、Cre、UA),并观察肝肾组织病理学改变。结果:与空白对照组相比,苯甲酸钠低、中、高剂量组大鼠的各项血清生化学指标均有一定的异常,高剂量组最为显著(P均<0.05)。苯甲酸钠高剂量组大鼠肝脏出现了明显病理学异常,各组大鼠肾脏均未见病理学改变。结论:苯甲酸钠多次给药对大鼠肝肾,尤其是肝脏有一定的损害。     

男性血管性痴呆血浆雌二醇与脑血流量变化的研究

目的探讨男性血管性痴呆(VD)与血浆性激素及局灶脑血流量(rCBF)的关系.方法采用放射免疫分析法测定41例男性VD患者血浆雌二醇(E2)、孕酮(Prog)、泌乳素(PRL)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、酮(T)、的含量变化,采用133Xe吸入法测定rCBF变化.结果脑梗死痴呆组、脑梗死非痴呆组E2水平较对照组均有降低,痴呆组E2水平较非痴呆组降低更明显.两组Prog,PRL,FSH,LH和T与对照组比较无显著差异;脑梗死痴呆组、脑梗死非痴呆组rCBF较对照组均有降低,痴呆组rGBF较非痴呆组降低更显著.结论血浆E2水平降低,则rCBF下降愈严重,VD的发生率越高.     

L-精氨酸对大鼠血管球囊损伤后病理学变化的影响

目的:探讨Ｌ－精氨酸(Ｌ－Arg)对大鼠血管球囊损伤后病理学变化,细胞周期依赖性激酶2(CDK２)、细胞周期蛋白E(CyclinE)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达和血小板颗粒膜蛋白(GMP－140)、D－二聚体(D－dimer)含量的影响。方法:63只大鼠,随机分为对照组(n＝7),手术组(n＝28)和Ｌ－Arg组(n＝28),监测以上各项指标。结果:①对照组动脉腔内无新生内膜;手术组动脉腔内有明显新生内膜;Ｌ－Arg组新生内膜明显减轻。新生内膜面积及内膜/中膜面积,Ｌ－Arg组较手术组分别降低59．1%及62．9%(均为P＜0.01)。②对照组COK2、CyclinE和PCNA表达呈阴性,手术组均呈强阳性,Ｌ－Arg组表达减少。③手术组血浆NO水平低于对照组及Ｌ－Arg组(P均＜0．01),而血浆GMP-140和D-dimer显著高于对照组(P＜0．001)和Ｌ－Arg组(P＜0．01)。④血浆GMP-140与D－dimer含量与新生内膜面积及内膜/中膜面积比均呈显著正相关,r分别为0.89(P＜0.01)、0.86(P＜0．05)和0.79、0．84(P＜0．05)。结论:Ｌ－Arg能有效抑制血管内膜损伤后的内膜增生,其机制可能与逆转CDK2、CyclinE的过度表达和抑制血小板活化、血栓形成有关。     

雌激素对大鼠血小板聚集性的影响

目的研究大鼠人工绝经及补充雌激素（ｅｓｔｒｏｇｅｎ,Ｅ）后血小板聚集性的变化及其部分机制。方法将２４只ＳＤ雌性大鼠随机分为３组：假手术组、单纯去势组、去势＋补充雌激素组。观察其血小板聚集性、一氧化氮（Ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅ, ＮＯ）、前列环素（Ｐｒｏｓｔａｃｙｃｌｉｎ,ＰＧＩ_２）、血栓烷 Ａ_２（Ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ Ａ_２ ＴＸＡ_２）及血栓烷Ａ_２与前列环素的比值（ＴＸＡ_２／ＰＧＩ_２）的变化。结果单纯去势组大鼠血小板聚集性较假手术组明显增加,去势＋补充雌激素组较单纯去势组下降;单纯去势后雌性大鼠ＴＸＡ_２／ＰＧＩ_２上升．补充雌激素组下降;去势后雌性大鼠ＮＯ明显降低,补充雌激素后升高。结论绝经后补充雌激素可通过降低ＴＸＡ_２／ＰＧＩ_２、升高ＮＯ抑制血小板聚集,对绝经后妇女冠心病有防治作用。     

参附注射液对血管性痴呆大鼠空间学习记忆功能和海马组织病理学改变的作用

目的 探讨参附注射液(SF)对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆功能及海马组织病理学的影响。方法 对健康雄性SD大鼠采用双侧颈总动脉反复夹闭再通同时腹腔注射硝普钠降压方法制作VD模型,选出造模成功者随机分为模型组及药物组,另以条件匹配的大鼠为假手术组。各组再随机分为7、15 d、1月时间点亚组。药物组每日腹腔注射SF(10 mL/kg),模型组和假手术组每日注射等量生理盐水。Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,HE染色、尼氏染色和透射电镜检测海马CA1区组织病理学改变。结果 模型组大鼠各时间点的逃逸潜伏期(EL)均明显延长(P<0.01);药物组大鼠各时间点的EL较模型组明显缩短(P<0.05),但仍长于假手术组(P<0.01)。光镜下模型组大鼠各时间点的海马锥体细胞减少甚至脱失,残存锥体细胞明显肿胀,出现核固缩等。经SF治疗后上述病理损伤程度减轻。Nissl染色显示模型组大鼠海马组织锥体细胞尼氏体减少或消失。药物组比模型组有所改善,胞浆中尼氏体较丰富。模型1月组大鼠海马组织超微结构完整性破坏,突触前膜内小泡数量减少,SF治疗组突触结构和数量明显改善。结论 SF可以改善VD大鼠的学习记忆功能障碍和组织病理学损害,改善痴呆症状。     

雌二醇对大鼠脑缺血/再灌注损伤脑组织BDNF表达的影响

目的:观察雌二醇对大鼠脑缺血 /再灌注损伤脑组织脑源性神经营养因子 (BDNF)表达的影响。方法:64只Wistar大鼠随机分为局灶性脑缺血 2h/再灌注 3h、6h、12h、24h(A组)组及雌二醇治疗(100μg/kg) +脑缺血 2h/再灌注 3h、6h、12h、24h组(B组),每个时点 8只。2组采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血 /再灌注损伤模型。采用免疫组织化学法检测各组脑组织中BDNF蛋白的表达。结果:B组缺血再灌注后 3h、6h、12h、24h大脑皮层及纹状体BDNF阳性神经纤维密度较A组相应时点均明显增加 (P均 <0. 01);B组与A组比较,大脑皮层及纹状体BDNF阳性细胞数在再灌注后 6h开始增加, 12h明显增高 (P均 <0. 01), 24h恢复 (P>0. 05)。结论:雌二醇可以使大鼠脑缺血 /再灌注后脑组织内源性BDNF表达增加,而起到脑保护作用。     

骨髓基质细胞源内皮细胞移植对血管性痴呆大鼠行为及VEGF蛋白表达的影响

目的 探讨骨髓基质细胞（BMSCs）向血管内皮细胞诱导分化后移植对血管性痴呆（VD）大鼠行为及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的影响.方法 采用2-AO法制作VD大鼠模型;经Y型电迷宫筛选健康SD大鼠随机分为假手术组（n=8）、PBS移植组（n=8）、BMSCs移植组（n=8）、BMSCs源内皮细胞移植组（VECs移植组,n=8）;移植30天后Y型电迷宫检测大鼠学习记忆能力;处死大鼠,大鼠脑切片检测VEGF蛋白表达、海马CA1区锥体细胞数.结果 VECs移植组、BMSCs移植组、PBS移植组大鼠学习记忆能力均较假手术组下降（P〈0.05）.移植后30天各组神经功能均有不同程度的恢复,VECs移植组大鼠的学习记忆能力显著优于BMSCs移植组（P〈0.05）;VECs移植组VEGF阳性细胞多于BMSCs移植组（P〈0.05）;VECs移植组海马CA1区锥体细胞数高于BMSCs移植组（P〈0.05）.结论 BMSCs源内皮细胞移植町改善VD大鼠学习记忆能力,增加VEGF蛋白表达和保护海马区神经元,显著优于BMSCs移植.