邻苯二甲酸二(2-乙基)己基酯影响白细胞介素-4蛋白的机制初探

目的 通过研究钙调神经磷酸酶(CaN)在邻苯二甲酸二(2-乙基)己基酯(DEHP)影响白细胞介素(IL)-4蛋白表达中的作用,初步探讨DEHP的免疫毒性机制.方法 以10μg/T佛波酯(PMA)及0.5 mg/L离子霉素(Ion)为激活剂,用10、50 μmol/L DEHP染毒脾淋巴细胞72及96 h,同时用0.5 μmol/L CaN抑制剂FK506进行干预.实验终点检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出、用酶联免疫吸附试验测定细胞上清液中CaN蛋白及IL-4蛋白含量.结果 与PMA+Ion组比较,10、50 μmol/L DEHP均使细胞上清液中LDH漏出明显升高;50 μmol/L DEHP作用细胞72及96 h,使CaN蛋白表达分别增加3.83倍及3.91倍.实验72 h,50 μmol/L DEHP与PMA+Ion组比较明显促进IL-4蛋白表达,且FK506能抑制淋巴细胞分泌IL-4蛋白.结论 CaN在DEHP调控IL-4蛋白表达中具有重要作用.     

DEHP对小鼠淋巴细胞分泌IL-2影响

目的 通过邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)影响小鼠淋巴瘤细胞(EL4)分泌白细胞介素-2(IL-2)蛋白影响机制研究,探讨DEHP对辅助性T细胞1(Th1)型细胞因子影响.方法 不同浓度DEHP染毒以25 ng/mL佛波酯(PMA)+1μg/mL离子霉素(Ion)激活的EL4细胞,并用钙调神经磷酸酶抑制剂FK506进行干预;实验6 h用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测活化T细胞核因子(NFAT)的mRNA表达;实验48 h用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中IL-2蛋白表达.结果 与激活剂组的(72.59±9.05)pg/mL比较,10,50 μmol/L DEHP染毒组的IL-2蛋白分泌量为(36.00±5.10),(32.00±1.86)pg/mL,明显降低EL4细胞分泌IL-2蛋白(P<0.01);50μmol/L DEHP明显升高了EL4细胞中NFAT2 mRNA相对含量,且降低了NFAT1 mRNA相对含量(P<0.05);0.05,0.5 μmol/L FK506未明显影响IL-2蛋白表达;Spearman相关分析表明,DEHP影响IL-2蛋白与NFAT mRNA表达元相关.结论 DEHP可能是通过NFAT非依赖途径影响EL4细胞分泌IL-2蛋白.     

活化T细胞核因子在DEHP调控IL-4表达中作用

目的 通过研究活化T细胞核因子(NFAT)在邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯(DEHP)影响白细胞介素-4(IL-4)表达中的作用,探讨DEHP的免疫毒性机制.方法 以佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)为激活剂,用10、50 μmol/L DEHP染毒激活的脾淋巴细胞4h,同时用0.5μmol/L钙调神经磷酸酶抑制剂他克莫司(FK506)进行干预,最后分别检测IL-4、NFATp、NFATc mRNA表达与NFATp和NFATc蛋白表达.结果 以10 ng/mL PMA+0.5 mg/mL Ion为激活剂时,激活组的IL-4 mRNA表达相对值为(2.53±0.42),50μmol/L DEHP染毒组的相对值为(18.21±1.67),差异有统计学意义(P＜0.01);而FK506干预组的IL-4 mRNA表达相对值为(9.85±1.24),与50μmol/L DEHP染毒组比较,差异有统计学意义(P ＜0.01);50μmol/L DEHP染毒组的NFATc mRNA表达相对值为(2.00±0.32),激活组的相对值为(1.37±0.10),差异有统计学意义(P＜0.05);同时DEHP促进NFATc蛋白在细胞质和细胞核里表达;染毒4h后,与激活组NFATp mRNA表达相对值(2.51±0.45)比较,10、50 μmol/L DEHP染毒组的相对值分别为(5.14 ±0.28)和(5.38±0.60),差异均有统计学意义(P＜0.01);但DEHP降低了细胞质和细胞核里NFATp蛋白表达.结论 NFAT在DEHP调控IL-4表达中具有重要作用.     

邻苯二甲酸二乙基己酯和镉对大鼠睾丸

研究邻苯二甲酸二乙基己酯[BF](DEHP)及镉(Cd)对大鼠睾丸巨噬细胞(TM)[BFQB]分泌细胞因子IL-1β的影响? 方法 利用贴壁法提取大鼠睾丸巨噬细胞?以0.1%二甲基亚砜(DMSO)为对照组,用50 μg/ml脂多糖(LPS)作为激活剂,以1 μmol/L?10 μmol/L?100 μmol/L的DEHP或CdCl2单独及各自半量联合处理,作用24 h后用ELISA法检测上清液中细胞因子IL-1β的含量;用CCK8法测定各浓度DEHP或CdCl2单独处理对细胞活性的影响? 结果 LPS可明显促进巨噬细胞分泌细胞因子IL -1β;0.5 μmol/L DEHP+0.5 mol/L Cd和5 μmol/L DEHP+5 μmol/L Cd联合染毒可显著抑制细胞分泌功能,但IL-1β分泌量仍明显高于对照组,并介于两单独作用组之间;50 μmol/L DEHP+50 μmol/L Cd的联合处理可非常显著抑制细胞分泌功能,与对照组相比差异无统计学意义?随着剂量增加,DEHP或Cd单独作用都能抑制细胞分泌功能和细胞活性,但对两者抑制程度存在较大差异? 结论 DEHP和Cd联合处理抑制大鼠TM分泌IL-1β表现出一定交互作用,对细胞活性的抑制可部分解释DEHP和Cd对细胞分泌功能的抑制效应?     

环孢霉素A对不明原因反复自然流产患者外周血Th1/Th2比例转换的研究

目的 探讨环孢霉素A(CsA)对不明原因反复自然流产(URSA)患者外周血Th1/Th2模式的作用.方法 利用CsA作用反复自然流产患者外周血单核细胞( PBMC)的体外实验模型, 以流式细胞仪分析对Th1/Th2 模式的转化.结果 实验组加入CsA培养72 h后可上调IL-4水平,并下调IFN-γ的表达水平.IFN-γ/ IL -4的比值明显低于对照组, 两者差异有统计学意义(P<0.05).CsA 10 μg /mL组与1 μg/mL组IFN/ IL-4的比值, 差异无统计学意义(P>0.05).结论 CsA有利于调控Th1/Th2模式趋向Th2型偏倚,可使URSA患者外周血有利于妊娠维持的Th2型细胞因子(IL-4)表达水平升高,同时降低不利于妊娠维持的Th1型细胞因子(TNF-γ )的表达.从而诱导母胎免疫耐受,使妊娠成功.     

砷暴露对小鼠脾脏炎症反应及Th1/Th2的影响

目的探讨慢性饮水砷暴露对小鼠脾脏的炎症反应及Th1/Th2细胞因子和转录因子表达的影响。方法将30只健康SPF级雌性昆明小鼠根据体重按照随机数字表分为对照组和25、50 mg/L NaAsO_2染毒组,每组10只。采用自由饮水方式染毒,染毒6个月后,测定小鼠脾脏组织中炎症因子IL-12和IL-6的mRNA水平。采用Real-time PCR方法分别检测脾脏Th1和Th2的转录因子T-bet、Gata3和细胞因子Ifn-γ、IL-4的mRNA表达水平。同时用Western blot法观察Nrf2、NQO1和GSTO1/2的蛋白表达水平。结果与对照组比较,随着染毒剂量的上升,各染毒组小鼠脾脏炎症因子IL-12和IL-6的mRNA水平均上升,除IL-12的25 mg/L剂量组外,差异均具有统计学意义(P0.05);各染毒组小鼠脾脏细胞因子Ifn-γ和IL-4的转录水平呈上升趋势;Nrf2及其调控的下游蛋白NQO1和GSTO1/2的表达水平明显增加。结论慢性砷暴露小鼠免疫器官脾脏的炎症相关因子IL-12和IL-6明显增加,同时上调Th1和Th2特异性细胞因子的表达水平,调节CD4~+T淋巴细胞亚群的分化,从而发挥对小鼠脾脏的免疫调节效应。     

梅归参颗粒对变应性鼻炎豚鼠的治疗效果及其对血清IgE和Th1/Th2的影响

目的探讨梅归参颗粒对变应性豚鼠鼻炎(AR)的治疗作用及其作用机制。方法采用卵清蛋白(OVA)致敏法构建豚鼠AR模型,造模成功后给药治疗21 d,每7天记录豚鼠行为学得分,并采用ELISA法测定末次给药1.5 h后血清中的OVA-Ig E、IFN-γ、IL-4的含量。结果与模型组相比,梅归参各剂量组均能显著降低豚鼠鼻炎行为学分数,显著升高IFN-γ含量,显著降低IL-4、Ig E含量,Th1/Th2(IFN-γ/IL-4)比值显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论梅归参颗粒治疗变应性鼻炎的机理可能是通过提高IFN-γ水平,抑制IL-4和Ig E的分泌,最终使得Th1/Th2比值提高而实现的。     

Th1/Th2细胞在EMT患者外周血中的表达及其意义

目的:探讨子宫内膜异位症(EMT)患者外周血T辅助淋巴细胞(Th细胞)分泌干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL-2、4、10)水平异常的意义。方法:选取EMT确诊病例40例作为EMT组,正常女性为对照组。分别分离出两组外周血清中的Th细胞,采用双抗夹心Elisa法检测其IFN-γ以及IL-2、4、10的水平,并计算IFN-γ/IL-4,IL-2/IL-10的比值。结果:EMT组外周血IFN-γ、IL-2的水平都显著低于对照组(P0.01),IL-4、10的水平都显著高于对照组(P0.05),IFN-γ/IL-4,IL-2/IL-10的比值都显著低于对照组(P0.01)。结论:EMT组患者外周血中Th细胞中由Th1细胞群分泌IFN-γ、IL-2的水平下降,而由Th2细胞群分泌的IL-4、10的水平上升,导致IFN-γ/IL-4,IL-2/IL-10比值降低,揭示Th1和Th2细胞比例失衡。这些变化导致子宫内膜异位种植,可能是造成该病的始动因素之一。     

褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞Th1/Th2细胞因子谱影响的体内外研究

目的研究褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞Th1/Th2细胞因子谱的影响。方法体内实验:分别设阴性对照组和两个褐藻胶组(0.50g/kgbw和1.50g/kgbw),每组各5只C57BL/6小鼠,分别经口给予纯净水和褐藻胶,30天后分离脾淋巴细胞,培养48h后取上清采用流式微球分析术(CBA)方法分析白细胞介素(IL-2、IL-4、IL-5)、肿瘤坏死因子(TNF)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。体外实验:分离C57BL/6种小鼠脾淋巴细胞,与褐藻胶(25mg/ml和50mg/ml)培养48h后取上清采用CBA方法分析IL-2、IL-4、IL-5、TNF和IFN-γ水平。结果体内实验:0.5g/kgbw和1.5g/kgbw褐藻胶组IFN-γ表达水平明显高于阴性对照组(P<0.01),而IL-2和IL-4表达水平下降(P<0.01,P<0.05)。体外实验:25mg/ml和50mg/ml褐藻胶组TNF、IL-2和IL-4表达均明显高于阴性对照组(P<0.05,P<0.01),50mg/ml褐藻胶组IL-5表达水平明显高于阴性对照组(P<0.01)。结论无论是在体内还是体外实验条件下,褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞分泌的Th1/Th2细胞因子谱均有影响。     

不同负荷运动对急性心理应激大鼠Th1/Th2平衡的影响

目的研究不同负荷运动对急性心理应激大鼠外周血T辅助细胞(Th)Th1/Th2平衡的影响(通过IFN-γ/IL-4的比值)。方法 8周龄SD大鼠56只,随机分为7组。进行12周的游泳训练,最后施加一次15min的心理应激,并在心理应激后1h内测定血清Th1型(γ干扰素、IFN-γ)和Th2型(白介素4、IL-4)细胞因子的含量,最后比较IFN-γ/IL-4的比值。结果 (1)与对照组相比,心理应激组大鼠血清IFN-γ/IL-4比值明显升高(P﹤0.05);(2)与心理应激组相比,应激+运动组大鼠血清IFN-γ/IL-4比值都升高,其中应激+60min运动组显著高于应激组(P﹤0.01)。结论急性心理应激显著影响了大鼠的Th1/Th2平衡,使大鼠Th1/Th2细胞功能由Th2向Th1偏移,提高了大鼠的细胞免疫功能;中小负荷运动可以进一步促进这种偏移作用,中等负荷的运动与小负荷的运动相比效果更显著。     

Th1/Th2亚群与感染性疾病

1型/2型免疫模式(Th1/Th2)最初是由Parish于20世纪70年代初提出的。这个概念与传统的1~4型过敏反应无关。Parish在研究迟发型超敏反应(DTH)时得出结论:在一个免疫反应中,抗原物质的量固定时,生成抗体的水平与产生细胞介导的免疫水平呈反比。20世纪80年代初,人们发现T淋巴细胞由两个主要亚型组成:辅助型T淋巴细胞(T helper,Th)和细胞毒T淋巴细胞(T cytotoxic lympho-cyte,Tc)。Th表达膜蛋白CD4 ,主要功能是诱导B淋巴细胞生成抗体;而Tc表达CD8 膜标志物,它的主要功能是介导对细胞内病原体感染的自体细胞的细胞溶解作用。1986年,在阐…     

Th1/Th2失衡与妊娠高血压综合征

妊娠时母胎界面的母体淋巴细胞被激活且可产生各种细胞因子 ,细胞因子在母胎界面局部网络的相对平衡对正常妊娠的维持有重要作用。近年来的研究发现妊娠高血压综合征患者外周血Th1/Th2细胞因子的失衡与其发病有密切关系 ,因此可从妊娠高血压综合征时Th1/Th2失衡的角度考察PIH的发病原因及采取相应的免疫防治措施     

辅助性T细胞亚群失衡与结核病的关系

目的通过检测结核病患者外周血和局部病灶的辅助性T细胞亚群细胞因子的表达,探讨结核病患者的免疫失衡.方法收集活动性结核病患者20例,其中肺结核15例,淋巴结结核5例;同时选取正常对照组15例.应用流式细胞仪在单个核细胞水平检测结核病患者外周血和局部病灶Th细胞内的细胞因子.结果结核病组20例外周血中Th1细胞较正常对照组普遍偏低(P=0.000),而Th2细胞较正常对照组无显著性差异(P＞0.05).其中5例淋巴结结核患者淋巴结活检标本中的Th1、Th2细胞和正常对照组相比均无显著性差异(P＞0.05),和其外周血相比均有显著性差异(P＜0.05).结论结核病的发生、发展与Th细胞亚群的失衡有密切关系,主要表现为Th1细胞数量低下.结核患者的Th1细胞低下主要表现在外周血,而局部病灶中的Th1细胞并未减少.在外周血Th1细胞低下的同时有Th2细胞的增加.     

复发性念珠菌性阴道炎与Th1/Th2失衡

外阴阴道念珠菌病是育龄妇女常见的生殖道感染性疾病,目前认为局部Th1和Th2型细胞因子协调作用决定了机体对真菌的易感性.现有的治疗手段包括局部和系统用药,对防止复发作用均有限,免疫治疗有望为复发性外阴阴道念珠菌病的治愈带来希望.     

Graves眼病患者Thl/Th2细胞因子的偏移

目的：研究Graves眼病（GO）患者血清中TNF-α、IL-6的表达水平及其在免疫反应中的作用,以探讨细胞因子对GO的影响。方法：对45例G raves病未经治疗的非突眼患者、36例Graves眼病（GO）患者及36例正常者（对照组）检测了血清中TNF-α、IL-6的表达水平和甲状腺激素及相关抗体水平。TNF-α、IL-6测定及抗甲状腺球蛋白抗体（TgAb）、抗甲状腺微粒体抗体（TmAb）测定采用放射免疫分析法（RIA）;血清总T3（TT3）、总T4（TT4）、促甲状腺激素（TSH）测定采用化学发光免疫分析法。结果：与正常对照组比较,各组TNF-α、IL-6显著增高（P〈0.01）。GO、GD非突眼组中TNF-α和TNF-α/IL-6比值与TgAb、TmAb存在正相关（P〈0.01）。结论：TNF-α、IL-6共同参与Graves病的发生。GD非突眼患者以IL-6升高为主,提示Th2所介导的体液免疫占优势;GO患者TNF-α、IL-6均增高,TNF-α/IL-6比值与对照组无统计学差异,提示GO的免疫反应呈Th0型,细胞免疫和体液免疫共同参与眼病的发生。     

Th1/Th2/Th17型细胞因子在非小细胞肺癌治疗过程中的临床意义

目的探讨Th1/Th2/Th17型细胞因子在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗过程中的临床意义。 方法收集56例初步诊断为NSCLC患者化疗前、第1~4次化疗的外周血标本,用流式细胞术微球阵列法(flow cytometry microsphere array,CBA)检测其血清中Th1/Th2/Th17型细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α、IFN-γ)水平,并分析上述指标与NSCLC患者各个治疗阶段的关系。 结果在第4次化疗后,IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α水平显著上升,与前3次差异有统计学意义(P<0.05)。IL-6、IL-17水平均有显著下降,并与化疗前差异有统计学意义(P<0.05)。IFN-γ水平在化疗阶段存在波动,其第2~4次化疗均相较于第1次化疗存在显著性差异(P<0.05)。 结论Th1/Th2/Th17型细胞因子水平随着NSCLC化疗病情的缓和达到趋势性稳定,说明研究细胞因子失衡导致的免疫紊乱在NSCLC诊疗中有重要意义。     

ICS联合LABA对哮喘患者外周血Th1、Th2、Th17的影响

目的探讨ICS联合长效β2受体激动剂(LABA)对哮喘患者外周血Th1、Th2、Th17的影响。方法将80例哮喘患者分为对照组与实验组各40例,均给予氟替卡松治疗,实验组另给予沙美特罗治疗。观察两组治疗前后的PEFRv、FEV1%及外周血T细胞亚群比例变化情况,临床疗效及不良反应。结果实验组临床总有效率显著高于对照组,不良反应率显著低于对照组,PEFRv、FEV1%以及Th2、Th17细胞比例改善程度显著优于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论对哮喘患者采取ICS与长效β2受体激动剂可取得较好的疗效,减轻炎性反应,改善肺功能,值得临床推广。     

Dietary (n-3) polyunsaturated fatty acids modulate murine Th1/Th2 balance toward the Th2 pole by suppression of Th1 development

We showed that dietary long-chain (n-3) PUFAs present in fish oil (FO) affect CD4(+) T cell proliferation and cytokine production in C57BL/6 mice. To test the hypothesis that the anti-inflammatory effect of dietary (n-3) PUFAs could be due to the indirect suppression of T helper (Th)1 cells by cross-regulation of enhanced Th2 activation, mice were fed a wash-out control diet [5% corn oil (CO), (n-6) PUFA] for 1 wk, followed by the control diet or a fish oil diet [1% CO + 4% FO, (n-3) PUFA] for 2 wk. Splenic CD4+ T cells were cultured under both neutral and Th2 polarizing conditions for 2 d. Cells were reactivated and analyzed for interleukin-4 and interferon-gamma by intracellular cytokine staining. Dietary fish oil significantly increased the percentage of Th2 polarized cells and suppressed Th1 cell frequency under neutral conditions. However, under Th2 polarizing conditions, although the suppression of Th1 cells was maintained in FO-fed mice, no effect was observed in Th2 cells. Dietary fish oil increased the Th2/Th1 ratio in the presence of homologous mouse serum under both neutral (P = 0.0009) and Th2 polarizing conditions (P = 0.0185). The FO diet did not significantly affect proliferation under Th2 polarizing conditions. Thus, the anti-inflammatory effects of FO may be explained in part by a shift in the Th1/Th2 balance, due to the direct suppression of Th1 development, and not by enhancement of the propensity of CD4+ T cells to be polarized toward a Th2 phenotype, at least in vitro.     

Effects of polyphenols on human Th1 and Th2 cytokine production

BACKGROUND: Numerous phenolic compounds are consumed in the diet in a range of foods. There are very few studies of the effects of these compounds on the production of lymphocyte-derived cytokines. AIM OF THE STUDY: To investigate the effects of five phenolic compounds on cytokine production by cultured human lymphocytes. METHODS: Human whole blood cultures were stimulated with the T cell stimulant concanavalin A for 48 h in the presence of phenolic compounds (vanillic acid, syringic acid, kaempferol, oleuropein and tyrosol) at concentrations up to 10(-4) M. Interleukin (IL)-2, IL-4 and interferon-gamma (IFN-gamma) concentrations were measured in the culture supernatants by ELISA. RESULTS: IFN-gamma concentration was significantly lower in cultures containing 10(-4) M kaempferol than in cultures with kaempferol at 10(-7), 10(-6)and 10(-5) M or without kaempferol. The other phenolic compounds did not affect IFN-gamma concentration and none of the phenolics tested affected IL-2 or IL-4 concentrations. CONCLUSIONS: Some, but not all, phenolic compounds can decrease IFN-gamma production by stimulated human whole blood cultures.     

矽肺和矽肺结核患者体内Th1/Th2类细胞因子的研究

目的 探讨矽肺和矽肺结核患者体内是否存在Th1/Th2失衡.方法 选择69名矽肺和矽肺结核患者作为研究对象,另以24名健康人为对照,使用酶联免疫吸附试验对血清白细胞介素(IL)4、IL-10以及肿瘤坏死因子-αTNF-α)进行检测和统计分析.结果 矽肺和矽肺结核组血清TNF-α低于对照组,而血清IL-10和IL-4明显高于健康对照组.矽肺、矽肺结核组IL-4、IL-10以及TNF-α与健康对照组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01).结论 矽肺和矽肺结核患者机体细胞免疫功能低下,存在Th1反应减弱,Th2反应增强.