极化停搏液用于离体大鼠心脏保存的实验研究

目的:研究Na 通道阻滞剂河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)极化停搏液对离体大鼠心脏的保护作用.方法:20只Wis-tar大鼠随机均分入St.Thomas去极化停搏组(对照组,Ⅰ组),TTX极化停搏组(Ⅱ组).建立离体心脏Langendorff和Neely灌注模型,搏动稳定后,灌注30min后停搏.将鼠心置于相应配伍的停搏液中,7℃保存5h后重新灌注心脏30min.观察各组心脏保存前后左心室收缩末压力(LVESP)和压力变化速率(±dp/dt)的恢复率、心肌酶漏出量、ATP含量和心肌超微结构等方面的改变.结果:恢复灌注后,TTX极化停搏组血流动力学各项指标恢复率明显高于去极化组(P＜0.01),CPK和LDH漏出量(P＜0.05)明显低于去极化组,ATP含量维持在较高的水平(P＜0.01),心肌超微结构得到较好保护.结论:极化停搏心脏保存液对离体大鼠心脏的保护作用优于去极化停搏液,在长时间供体心脏保存中显示出明显的优势.     

持续低温微量灌注丹参和1,6-二磷酸果糖对离体大鼠心脏的保护作用研究

目的观察附加丹参注射液（SM）和1,6-二磷酸果糖（FDP）的St.Thomas液持续低温微量灌注离体大鼠心脏的保护作用.方法SD大鼠24只,随机分为4组（n=6）：对照组、SM组、FDP组、SM＋FDP组.离体大鼠心脏用冰冷的St.Thomas液停搏后,用Langendorff方式灌注K-H液30min,测定心功能：左心室压力变化速率最大值（±dP/dtmax）、左心室发展压（LVDP）、心率（HR）和冠脉流量（CF）,然后分别用St.Thomas液、St.Thomas液＋SM、St.Thomas液＋FDP、St.Thomas液＋SM＋FDP停搏心脏,并在4℃条件下持续灌注（20μL/min）保存6h,再以Langendorff方式复灌30min,再次测定心功能指标,最后分析持续灌注保存液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）活性以及心脏含水量.结果SM组、FDP组和SM＋FDP组的＋dP/dtmax恢复率和FDP组的LVDP恢复率均明显高于对照组;SM组、FDP组、SM＋FDP组的LDH活性和FDP组、SM＋FDP组的CK活性均明显低于对照组（P〈0.05）;在心功能和酶学测定结果中,SM、FDP分别单用与两者合用相比较无明显差异（P〉0.05）.结论应用低温持续微量灌注保存方法,在St.Thomas液中单独添加SM或FDP均可改善心脏保存效果,两者伍用效果与单用比较无明显差别.     

Na^＋通道阻滞极化停搏液在离体大鼠心脏保存中的保护作用

目的研究含Na^＋通道阻滞剂河豚毒素（TTX）极化停搏液在离体大鼠心脏保存中的心肌保护作用.方法20只Wistar大鼠随机均分入StThomas去极化停搏组（对照组,Ⅰ组）和TTX极化停搏组（Ⅱ组）.建立离体心脏灌注模型,灌注10 min后,分别用St.Thomas和TTX极化停搏液2 ml经主动脉插管注入,使心脏停搏.随后将鼠心置于相应配伍的停搏液中,10℃保存7 h后重新灌注心脏30 min.观察两组心脏保存前后在左心室收缩末压力和压力变化速率恢复率、心肌酶漏出、ATP含量和心肌超微结构等方面的改变.结果再灌注后,TTX极化停搏组血流动力学各项指标恢复率明显高于Ⅰ组（P＜0.01）,肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶漏出量低于Ⅰ组（P＜0.05）,ATP含量维持在较高水平（P＜0.01）,心肌超微结构得到较好保护.结论在离体大鼠心脏低温保存过程中TTX极化停搏液心肌保护作用优于STH液.     

Na+通道阻滞极化停搏液在离体大鼠心脏保存中的保护作用

目的 研究含Na⁺通道阻滞剂河豚毒素(TTX)极化停搏液在离体大鼠心脏保存中的心肌保护作用。方法 20只Wistar大鼠随机均分入St.Thomas去极化停搏组(对照组,Ⅰ组)和TTX极化停搏组(Ⅱ组)。建立离体心脏灌注模型,灌注10min后,分别用St.Thomas和TTX极化停搏液2ml经主动脉插管注入,使心脏停搏。随后将鼠心置于相应配伍的停搏液中,10℃保存7h后重新灌注心脏30min。观察两组心脏保存前后在左心室收缩末压力和压力变化速率恢复率、心肌酶漏出、ATP含量和心肌超微结构等方面的改变。结果 再灌注后,TTX极化停搏组血流动力学各项指标恢复率明显高于Ⅰ组(P<0.01),肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶漏出量低于Ⅰ组(P<0.05),ATP含量维持在较高水平(P<0.01),心肌超微结构得到较好保护。结论 在离体大鼠心脏低温保存过程中TTX极化停搏液心肌保护作用优于STH液。     

心麻痹液在缺血预处理产生心肌保护效应中的作用研究

目的：利用Langendorff离体灌注模型研究缺血预处理（IPC）单独应用和与心麻痹液联合应用对兔未成熟心脏全心缺血再灌注的影响,以了解心麻痹液在IPC心肌保护效应中的作用。方法：新西兰幼兔,体重220g~280g,兔龄14d~21d。麻醉及肝素化后,快速开胸取出心脏,浸入4℃Krebs-Henseleit缓冲液,30s内主动脉插管行Langendorff灌注,用39℃经混合气（O2：CO2=9%：5%）平衡的Krebs-Henseleit缓冲液灌注。32只兔未成熟心脏随机分为四组：对照组Ⅰ（conⅠ,n=8）,全心接受30min缺血、40min再灌注;IPC组（IPC,n=8）,接受5min缺血、10min再灌注预处理（IPC）和30min缺血、40min再灌注;对照组Ⅱ（conⅡ,n=8）,接受4℃的St.ThomasⅡ心麻痹液使心脏停跳和45min缺血、40min再灌注;IPC复合心麻痹液（IPC＋St.Ⅱ,n=8）,接受IPC、St.Ⅱ灌注和45min缺血、40min再灌注。记录心脏停跳前平稳灌注时冠脉流量（CF）、心率（HR）、左室发展压（LVDP）、左室压力最大上升和下降速度率（±dp/dtmax）作为基础值,并分别把再灌注后5、10、20、30、40min的CF、HR、LVDP、±dp/dtmax测定值表达为对其相应基础值的恢复率。记录IPC组与conⅠ在主动脉停灌后心脏缺血跳动时间,测定各组再灌注后冠脉流出液中肌酸激酶同工酶（CK-MB）及再灌注末心肌组织ATP含量。结果：复灌后IPC组与对照组Ⅰ相比在冠脉流出量（CF）、心率（HR）、左室发展压（LVDP）、左室最大上升和下降速度率（±dp/dtmax）恢复率无明显差别,肌酸激酶同工酶（CK-MB）漏出量有增多趋势（但P〉0.05）;IPC组在全心停灌后心脏缺血跳动时间明显延长（P〈0.01）,再灌注末心肌ATP含量显著减少（P〈0.001）。而在IPC复合心麻痹液组HR、CF、LVDP及±dp/dtmax恢复率较对照组Ⅱ明显得以改善,且保存心肌ATP含量,肌酸激酶同工酶（CK-MB）漏出减少。结论：IPC在单独应用时不足以保护经历全心缺血再灌注损伤的兔未成熟心脏,反而有可能导致心肌细胞的损伤;而在与心脏停搏液合用时,IPC对经历全心缺血再灌注的兔未成熟心肌具有明显的保护作用。因此,在Langendorff离体灌注心脏模型,本研究首次观察到IPC心肌保护效应的获得需要心麻痹液的参与。     

艾司洛尔作为停搏液对离体猪心保护作用的实验研究

目的探讨艾司洛尔作为停搏液对离体猪心的保护作用及可能的机制。方法建立Langendorff猪离体心脏灌注模型。健康家养猪18头,雌雄不拘。随机分为KHB组（KHB液组）、ST组（St．ThomasⅡ停搏液）、ES组（艾司洛尔组）,每组6只。开胸立即取出心脏,置于Langendorff灌注装置上,用充氧的KHB液平衡灌注20min后,分别用两种不同的停搏液[艾司洛尔1mmol／L＋（95％O2＋5％CO2）和St．ThomasⅡ]液灌注,每隔10min灌注一次,灌注压为75mmHg（1mmHg=0．133Kpa）,温度37℃,时间为60min。停止停搏液灌注后,即恢复KHB再灌注60min。连续监测血流动力学的变化。在KHB灌注20min和KHB再灌注30min后记录心率（HR）。在KHB灌注20min、停搏液灌注30min、60min和KHB再灌注30min后留取5ml的灌注液检测心肌肌酸激酶同功酶（CK—MB）、肌钙蛋白I（cTnI）。KHB液再灌注60min后切取两小块心肌组织分别用于测湿干重比和测定ATP含量。结果KHB灌注20min时各组之间比较,心率无统计学意义（P〉0．05）;再灌注30min后,KHB组的心率明显低于ST组和ES组（P〈0．05）。ES组心肌含水量、CK—MB、cTnI和左心室舒张末压（LVEDP）均明显低于KHB组（P〈0．05）;而冠状动脉流量（CF）、心肌组织中ATP含量均显著高于KHB组（P〈0．05）。ES组与St．ThomasⅡ组相比,上述指标的变化差异无统计学意义（P〉0．05）。结论艾司洛尔可作为停搏液对离体猪心有良好的保护。     

卡立泊来德复合心脏停跳液对兔未成熟心肌的保护作用

目的 比较选择性钠氢离子交换阻断剂卡立泊来德（Cariporide）联合不同心脏停跳液（St．Thomas液与HTK液）对未成熟心肌缺血／再灌注损伤的保护作用。方法32只新西兰幼兔（2-3周龄）,建立Langendorff离体心脏灌注模型后,随机分为4组,每组8只：对照组（st组,St．Thomas液）、HTK组（HTK液）、St＋C组（St．Thomas液中添加Cariporide）和HTK＋C组（HTK液中添加Cariporide）。所有心脏均30℃全心缺血120min,37℃KH液再灌注60min。记录心功能参数：左室发展压（LVDP）、左室最大收缩变化率（＋dp／dtmax）、左室最大舒张变化率（-dp／dtmax,）及冠脉流量（CF）;测定冠脉流出液中磷酸肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌三磷酸腺苷（ATP）、丙二醛（MDA）、心肌细胞内钙（iCa）及心肌含水量（WC）。结果 HTK组LVDP、＋dp／dtmax、-dp／dtmax,、CF恢复率及ATP含量均明显高于St组（P〈0．05）,CK-MB、MDA、WC和iCa明显低于St组（P〈0．05）;St＋C组、HTK＋C组各指标分别优于st组、HTK组,且HTK＋C组各指标则优于st＋C组;而st＋C组与HTK组比较显示,St＋C组-dp／dt-、CF恢复率和ATP高于HTK组（P〈0．05）,而MDA高于HTK组（P〈0．05）,其余指标两组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Cariporide能提高St．Thomas液及HTK液对未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用。     

吗啡对大鼠离体工作心脏延迟性保护作用的实验研究

目的研究吗啡预处理对大鼠离体工作心脏缺血再灌注的延迟性保护作用,并探讨其机制。方法48只Wistar大鼠随机分为6组,每组8只,即对照组、吗啡组、纳络酮组、格列本脲组、吗啡 纳络酮组和吗啡 格列本脲组。腹腔注射给药24h后,建立离体工作心脏模型,4℃St.Thom asⅡ停搏液诱导心脏停搏30min,复灌45min。观察心脏缺血再灌注前后血流动力学恢复率、心肌酶及心肌超微结构的变化。结果吗啡组的心排出量(CO)恢复率、左室发展压(LVDP)恢复率、左室压力微分(±dp/dtmax)恢复率及乳酸脱氢酶(LDH)漏出量均优于对照组(P<0.05);30min缺血再灌注后心肌超微结构损伤明显减轻;纳络酮和格列本脲可以完全阻断吗啡的作用,而单独使用纳络酮或格列本脲对大鼠心脏不产生影响。结论吗啡预处理对缺血心肌可以产生延迟性保护作用,其作用与阿片受体和心肌细胞ATP敏感性钾通道(KATP通道)介导有关。     

缺血预处理联合停搏液对未成熟兔心脏的保护作用

目的 利用Langendorff模型研究缺血预处理(1schemic Preconditioning，IPC)联合高钾停搏液对兔未成熟心脏缺血再灌注损伤的影响。方法 幼兔(14—21d)离体灌注心脏，经历5min缺血、10min再灌的IPC处理后，使用St．ThomasⅡ号液使其停跳，观察其在生理体温(39℃)下接受45min缺血、40min再灌注后血流动力学、冠脉流出液心肌酶及心肌能量变化。结果 IPC联合高钾停搏液组较单纯高钾停搏液组再灌注后心事(HR)、冠脉流出量(CF)、左室发展压(LVDP)及左室最大上升和下降速率(土dp／dt)的恢复率明显改善，井保存了心肌ATP含量，减少了肌酸磷酸激酶同工酶(CK—MB)漏出。结论 对于未成熟心肌IPC联合高钾停搏液较单纯高钾停搏液能够提供更加有效的心肌保护作用。     

缺血预处理及复合浅低温晶体停搏液保护下未成熟心肌细胞内Ca2+的分布

目的观察缺血预处理(IP)复合32℃浅低温及晶体停搏液保护对缺血再灌注损伤未成熟心肌细胞内Ca2+分布的影响.方法应用Langendorff离体心脏灌注模型,IP采用2次5 min缺血、5 min再灌注,实验分为IP+32℃浅低温组和单纯32℃浅低温组.心脏灌注St.ThomasⅡ停搏液,缺血30 min,37℃再灌注30 min.进行血流动力学测定、焦锑酸钾沉淀Ca2+染色及心肌细胞体积密度(Vvi)测定.结果再灌注30min,IP组左心室发展压(LVDP)、左心室压力最大上升及下降速率(+dp/dtmax、-dp/dtmax)恢复率明显高于单纯32℃浅低温组(P＜0.05),IP组受损严重心肌细胞Vvi显著小于对照组(P＜0.05)再灌注后,细胞核Ca2+沉积随细胞损伤程度加重而增加,其中32℃浅低温组细胞核Ca2+沉积较为明显.结论缺血再灌注期间,未成熟心肌细胞内Ca2+分布异常与超微结构的改变有密切关系.IP+32℃浅低温复合晶体停搏液对未成熟心肌有较好的心肌保护作用.     

心脏移植心肌保护策略

目的总结63例原位心脏移植的心肌保护的管理经验。方法供心心肌保护为从主动脉根部灌注冷4℃St.Thom as液1 000mL使供体心脏迅速停搏,再经主动脉根部一次灌注4℃威斯康星大学心脏保护液（UW液）或康斯特心脏保护液（HTK液）2 000 mL进行脏器保护,升主动脉开放前灌注温血低钾停搏液。结果热缺血时间（7.2±1.3）m in,冷缺血时间（165.7±52.4）m in,体外循环时间（178.3±31）m in,体外循环并行辅助时间（75.3±28.9）m in,其中38例为升主动脉开放后自动复跳,术后机械通气时间（26.7±25）h,其中41例24内拔除气管插管,最短者术后2 h在手术室拔除气管插管,外科术后隔离监护室时间（9±4）天,术后一个月患者生活能自理,超声心动图显示左室射血分数55%～73%（63.6±6.0）%。所有患者均存活。结论有效的供体心脏保护措施对心脏移植的成功起着非常关键的作用。     

缺血预处理对未成熟心肌的保护作用

目的研究单纯缺血预处理对未成熟心肌缺彬再灌注损伤的保护作用。方法20只健康新西兰幼兔（3—4周龄）,利用Langendorff灌注装置灌注其离体心脏,建立全心缺血／再灌注模型。KH液自主动脉逆行灌注心脏,向球囊缓慢注入生理盐水,调整至左室舒张末压（LVEDP）为10mmHg（1 mmHg=0．133kPa）,平衡灌注心脏15min,随机等分为两组：对照（Control）组：继续灌注15min;缺血预处理（IPC）组：缺血5分钟,再灌注10分钟。然后两组心脏均st．Thomas停搏液诱导停跳,常温（37℃）缺血60min（保湿保温）,再灌注60min。记录冠脉流量（CF）,多导生理记录仪记录左心功能指标,硫代巴比妥酸法测定心肌细胞内丙二醛（MDA）,高压液相色谱测心肌细胞内三磷酸腺甘（ATP）含量,自动生化分析仪测量冠脉流出液中磷酸肌酸激酶（CK）、磷酸肌酸激酶同工酶（CK—MB）、乳酸脱氢酶（LDH）含量,计算心肌含水量（WC）。结果除IPC组再灌注60min时点的CF恢复率与对照组相近,其余再灌注时点IPC组的LVDP恢复率、＋dp／dtmax恢复率、-dp／dtmax恢复率和CAF恢复率均优于对照组。IPC组LDH、心肌含水量、MDA低于对照组,而ATP高于对照组。结论单纯预处理能减轻未成熟心肌缺血／再灌注损伤。     

激活线粒体钙激活钾通道加强心脏停搏液心肌保护作用的观察

目的:探讨线粒体钙激活钾通道(mitochondrial Ca2+-activated K+channels,mitoKCa)的激活是否加强改良St.Thomas心脏停搏液的心肌保护作用。方法:采用离体大鼠心脏灌流方法,全心停灌30 min和复灌60 min复制局部缺血/再灌注损伤模型;实验分单纯缺血复灌组、改良St.Thomas停搏液组、改良St.Thomas停搏液+NS1619组和改良St.Thomas停搏液+NS1619+Paxilline组,观察各组心室力学指标、冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及心肌含水量的变化。结果:与单纯缺血/复灌组比较,改良St.Thomas停搏液组左心室舒张末期压力抬高程度下降(P<0.01),做功增加(P<0.01),冠状动脉流量增加(P<0.05),心肌含水量减少(P<0.01),LDH释放减少(P<0.01);与St.Thomas停搏液组比较,线粒体钙激活钾通道激动剂NS1619能进一步降低St.Thomas停搏液灌注时LDH的释放(P<0.01),心肌含水量进一步降低,促进左心室功能的恢复(P<0.01);线粒体钙激活钾通道阻断剂Paxilline取消了NS1619的作用(P<0.05~P<0.01)。结论:线粒体钙激活钾通道的激活可加强心脏停搏液的心肌保护作用。     

自体冷血心脏停搏液对未成熟心肌细胞三磷酸腺苷及二磷酸腺苷的影响

目的通过对比自体冷血心脏停搏液与含血停搏液、St.Thomas液、HTK液对未成熟心肌细胞三磷酸腺苷(ATP)及二磷酸腺苷(ADP)含量的影响,提示自体冷血心脏停搏液对未成熟心肌细胞的保护作用。方法年龄≤12个月行体外循环室间隔缺损修补术的患儿80例,随机分成自体冷血停搏液组(A组)、冷血停搏液组(B组)、St.Thomas液组(C组)和HTK液组(D组),每组各20例。于主动脉阻断前、主动脉开放后30 min取右心耳标本50 mg,用HPLC法测定心肌ATP、ADP含量。结果主动脉阻断前各组患儿心肌ATP与ADP含量无统计学差异(P0.05);各组患儿主动脉开放后30 min心肌ATP与ADP含量均较阻断前显著减少(P0.01);A组患儿主动脉开放后30 min心肌ATP与ADP含量较B组显著增高(P0.01)。结论自体冷血停搏液可显著提升体外循环心内直视手术术后未成熟心肌细胞ATP含量,效果明显优于含血停搏液、St.Thomas液以及HTK液。     

阜外极化停搏液大鼠离体心肌保护效果研究

目的研究阜外极化停搏（FWP）液对大鼠离体心肌保护的效果。方法SD大鼠24只,随机分为四组,对照组,STH-2液（St.ThomasⅡ）组,HTK液（histidine-trptophan-ketoglurate）组和FWP液（fuwai polarizing）组。除对照组,其他各组心脏均在4℃心肌保护液中保护1 h。观察左心室功能恢复情况、冠状动脉流量（CF）、冠状静脉引流液中肌酸激酶同工酶（CKMB）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌钙蛋白I（cTnI）含量以及心肌细胞的超微结构等。结果各实验组心功能指标均有不同程度下降。FWP组和HTK组LVDP,CF和-dp/dtmax显著高于STH-2组（P〈0.01）;FWP组dp/dtmax显著高于HTK组和STH-2组（P〈0.01）;FWP组和HTK组心肌酶CKMB、LDH和cTnI含量显著低于STH-2组。心肌超微结构显示FWP组和HTK组超微结构保存较好,损伤比对照组小。结论FWP液组对心肌保护效果明显优于STH-2液组,与HTK液相似。     

左旋卡尼汀预处理对离体兔心缺血/再灌注致心肌损伤及MDA、SOD的影响

目的观察左旋卡尼汀（L-CN）预处理对离体兔心缺血/再灌注致心肌损伤及丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的影响。方法采用离体兔心Langendorff灌注实验模型,离体兔心12只随机分成缺血/再灌注组（I/R组）和L-CN预处理组,每组6只。I/R组灌注K-H液25 min,（兔心）4℃标准St.Thomas停搏液（K＋16 mmol/L）至心脏停搏,45 min后恢复K-H液灌注20 min;L-CN预处理组灌注K-H液10 min,再予L-CN续灌15 min,余步骤同I/R组。测定再灌注末心肌组织中MDA、SOD的活性;2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色测定心肌存活面积百分比。结果L-CN预处理组SOD活性明显高于I/R组（P〈0.01）,MDA含量明显低于I/R组（P〈0.05）。L-CN预处理组心肌存活面积百分比高于I/R组（P〈0.05）。结论L-CN预处理对高钾停搏离体兔缺血/再灌注心脏具有抑制氧化应激、提高抗氧化能力的作用,可减轻心肌损伤。     

改良心肌保存液热缺血冷保存对猪心保护的作用

目的 研究改良心肌保存液在心脏移植术中对热缺血冷保存猪供心的心肌保存效果.方法 16对供猪随机分为2组,建立猪同种异体原位心脏移植模型.A组以St Thomas 液、B组以自制液作为停搏液、灌注冲洗液和保存液.供心心脏停搏热缺血5 min后,以停搏液灌注,切取心脏,4 ℃灌注冲洗并低温浸泡保存4 h,施行同种异体原位心脏移植.观察移植后心脏复搏的一般情况及血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)变化,常规苏木精-伊红、PAS染色,光镜观察心肌组织.结果 浸泡保存后B组心肌含水量低于A组,复灌后CK-MB含量也低于A组(t=2.89～3.38,P<0.05).B组PAS糖原染色评分高于A组(T=24,P<0.01).结论 改良的新型心肌保存液能较好恢复热缺血冷保存的猪供心心脏功能,减轻复灌后的心肌再灌注损伤,减少保存期间细胞内糖原的消耗,其对心肌的保护明显优于St Thomas液.     

预处理早发和延迟时相重叠保护心脏的实验研究

目的探讨以单磷酯A预处理的延迟时相与以腺苷预处理的早发时相重叠对心脏保护效果的影响.方法大白兔以单磷酯A预处理24 h后制成离体心脏,再以腺苷预处理(MA)组,4℃改良St.Thomas液诱导心脏停搏低温保存4 h,复灌1 h.观察心功能恢复率、心肌ATP和MDA含量、Ck-mb释放量等.另设单磷酯A预处理延迟时相(M组)、腺苷预处理早发时相(A组)、单纯改良St.Thomas液保护(C)组.结果MA、A、M、C组的心功能恢复率( 10-3μmol/wet·g max,%)分别为(70.97±17.92),(64.36±16.10),(65.54±22.62)和(39.07±13.78),MA组高于A、M、C组,并与C组的差异有显著性(P＜0.01).MA组心肌ATP含量(10-3Llmol/wet g)为(5.46±1.37),高于M组(3.97±1.04)、C组(2.07±0.74)和A组(4.45±1.29),差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01).结论以腺苷预处理的早发时相与单磷酯A预处理的延迟时相重叠可以部分增强心脏保护作用.