照射后TGF-α、EGF及其受体EGF-R表达在小鼠小肠上皮细胞再增殖过程中的作用

目的探讨ＴＧＦα、ＥＧＦ及其受体ＥＧＦＲ在小鼠小肠上皮受照射后再增殖中的作用。材料与方法雄性Ｃ３Ｈｆ／Ｋａｍ小鼠５Ｇｙ全身一次性照射后，不同时间杀死小鼠取出空肠，常规ＨＥ染色高倍下计数隐窝细胞数和分裂相；并以免疫组化法定量测定隐窝区和绒毛区ＴＧＦα、ＥＧＦ和ＥＧＦＲ的表达。结果照射后３～４天小鼠小肠上皮隐窝细胞及分裂相均达到高峰；而ＴＧＦα、ＥＧＦ和ＥＧＦＲ在照射后第１天即在隐窝区达到高峰，随之下降，其表达变化时间上领先于细胞分裂。结论ＴＧＦα、ＥＧＦ和ＥＧＦＲ的表达可能在小鼠小肠上皮受照射后的再增殖过程中起着重要的作用。     

照射后TGF—α,EGF及其受体EIGF—R表达在小鼠小肠上皮细胞再 …

目的 探讨ＴＧＦ－α、ＥＧＦ及其受体ＥＧＦ－Ｒ在小鼠小肠上皮受照射后再增殖中的作用。材料与方法 雄性Ｃ３Ｈｆ／Ｋａｎ小鼠５Ｇｙ全身一次性照射后，不同时间杀死小鼠取出空肠，常规ＨＥ染色离突下计数隐窝细胞数和分裂相；并以免疫组化法定量测定隐窝区和绒毛区ＴＧＦ－α、ＥＧＦ和ＥＧＦ－Ｒ的表达。结果 照射后３￣４天小鼠上皮隐窝细胞及分裂相均达到高峰；而ＴＧＦ－α、ＥＧＦ和ＥＧＦ－Ｒ在照射后第１天即在隐窝区达     

EGF、TGF-α及其受体在垂体瘤中的表达

垂体瘤的形成受多步骤多信号途径调节.由于许多生长因子参与细胞的生长分化及功能调节[1],所以生长因子及其受体的异常可能有助于垂体瘤的发展.本研究旨在证明垂体瘤中有表皮生长因子受体(epidermolgrowthfactorreceptor,EGFR)及其配体EGF、TGF α的表达和它们的自分泌/旁分泌刺激机制可能对垂体瘤的发生、发展的作用.     

垂体瘤中EGF、TGF-α及其受体的表达

目的：揭示垂体瘤中生长因子的生长刺激机制,为其受体拮抗剂的治疗应用提供实验依据。方法：用免疫组织化学方法研究了３０例垂体瘤中ＥＧＦＲ及其配体ＥＧＦ、ＴＧＦ－α的表达。结果：大部分功能性腺瘤及所有非功能性腺瘤均有ＥＧＦＲ的表达,大部分腺瘤中有ＥＧＦ、ＴＧＦ－α表达,但它们的表达呈多相性,即免疫阳性细胞的分布疏密不一、细胞免疫染色浓淡不一、ＥＧＦＲ及其配体在不同瘤中的表达方式不一;免疫组化结果与肿瘤的     

C-kit受体在肿瘤中的表达及其作用

C-kit酪氨酸激酶是细胞外信号传递到细胞内的重要枢纽,它在信号传导、细胞增殖、分化以及各种调节机制中发挥重要作用,并在多种恶性肿瘤中过度表达.     

细胞凋亡与增殖失衡在小鼠大肠癌诱发过程中的作用

目的:观察小鼠大肠癌不同阶段中细胞增殖与凋亡的变化规律,探讨细胞增殖-凋亡失衡在大肠不同阶段中的作用.方法:利用二甲肼(DMH)皮下注射诱发昆明种小鼠实验性大肠癌动物模型,分别于诱癌12、18、24、32周分批处死动物,以DNA末端标记(TUNEL)和免疫组化PCNA染色分别标记凋亡细胞和增殖细胞,多阶段动态观察增殖细胞和凋亡细胞的分布和密度变化.结果:小鼠正常粘膜中凋亡细胞全部位于表层,增殖细胞位于基底,数量均很少.诱癌早期增殖细胞和凋亡细胞轻度增多,二者比值变化不大;诱癌中期二者密度均显著升高,比值变化不显;诱癌晚期非癌粘膜增殖和凋亡细胞密度高于其它时段,不典型增生粘膜中增殖细胞增多,且随其程度递增,而凋亡细胞虽有升高,但不随其程度变化,二者比值则随其程度呈下降趋势.结论:1)在动物模型上证实了小鼠大肠癌发生过程中存在细胞增殖-凋亡失衡;2)诱癌早期低增殖、低凋亡,中期高增殖、高凋亡,晚期(癌)极高增殖、低凋亡;3)增殖细胞随不典型增生程度递增,凋亡细胞变化不显,二者比值呈递增趋势;4)癌变阶段最本质的变化为凋亡/增殖比值极度降低.以上结果支持我们以前在人类大肠癌研究中提出的"细胞选择性增殖"假说.     

卡托普利对小鼠在肺部照射后TGF-β1、TNF-α水平的影响

目的：探讨卡托普利在小鼠放射性肺损伤中对血清转化生长因子-β1（TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的干预影响。方法：雄性C57／BL小鼠，设对照组、右肺单次照射10Gy组、右肺单次照射10Gy＋卡托普利组，于照射后36h、7d、15d、30d采集血液标本，ELISA法测血清中TGF-β1及TNF-α；同期取右肺组织以HE染色制成病理学标本。结果：10Gy照射组在照射后不同时段血清中TGF-β1水平及TNF-α水平均较对照组升高；而单次照射10Gy＋卡托普利组则表现为在不同时段均较对照组水平降低。析因分析结果为时间因素间、处理因素间、交互作用间均有统计学差异（P〈0．05）。病理结果显示10Gy照射组出现进行性加重的炎症改变，而单次照射10Gy＋卡托普利组则与对照组比较无明显区别。结论：卡托普利可以减低小鼠肺照射时TGF-β1、TNF-α等细胞因子浓度，并抑制放射性肺损伤的发生。     

小鼠肾发育过程中肝细胞生长因子及其受体的表达

目的观察肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）及其受体（c-Met）在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨其与肾发育的关系。方法采用免疫组织化学技术结合体视学方法对不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织HGF和c-Met的表达及其含量变化进行系统观察和定量分析。结果HGF和c-Met在各期的肾小体、皮质肾小管及集合管均有表达,且随胚（日）龄增加在各期肾小体、皮质肾小管及集合管的表达是先增后减。结论推测HGF和c-Met可能对肾各结构的发育以及成熟肾的形态维持起重要作用。     

FLNA在肝癌中的表达及其对细胞增殖、侵袭转移的作用

摘 要：［目的］ 探讨细丝蛋白A（FLNA）在肝癌组织中的表达及过表达对肝癌细胞生物表型的影响。［方法］ 采用免疫组织化学方法、Western Blot检测75例肝癌组织及距其癌组织边缘2cm以上的镜下未见癌浸润的37例正常肝脏组织中FLNA的表达情况。采用慢病毒转染建立FLNA过量表达的肝癌HepG2细胞株。荧光定量PCR及Western Blot检测FLNA转染后肝癌HepG2细胞株中FLNA表达含量的变化。MTT法、Transwell检测FLNA过量表达对肝癌细胞增殖及细胞侵袭转移的影响。［结果］ 免疫组织化学结果表明,FLNA蛋白在肝癌组织及正常肝脏组织中的表达阳性率分别为37.3%、89.2%,差异有统计学意义（P＜0.05）。Western Blot结果表明,FLNA 蛋白在肝癌组织的相对表达量较正常肝脏组织明显降低,两者比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。FLNA蛋白表达水平与肝癌有无淋巴结转移、临床分期以及组织学分级有关（P＜0.05）,而与患者年龄、性别、肝癌病理类型及T分期无关（P＞0.05）。FLNA高表达的肝癌细胞其增殖能力明显减弱、侵袭转移能力降低,MMP-9蛋白的表达量明显下调。［结论］ 肝癌组织中FLNA蛋白表达明显下降,可能是正常肝脏组织恶性转变的重要生物学标志,对预测肝癌发生、浸润转移有重要意义。     

VEGF-C及其受体VEGFR3在乳腺癌的表达、定位及其在淋巴结转移中的作用

目的:研究VEGF-C及其VEGFR3在乳腺癌组织及癌周组织中的表达情况、分布定位及其在乳腺癌淋巴结转移中的作用。方法:采用免疫组化SP法检测70例患者乳腺癌组织及其癌周组织中VEGF-C和VEGFR3的表达情况,CK19染色检测腋窝淋巴结微转移情况。结果:乳腺癌70例,VEGF-C在乳腺癌组织阳性表达率为78.6%,在癌周组织中的表达率为54.3%(P<0.01)。VEGFR3阳性的脉管数在乳腺癌组织为7.90±5.57,瘤周组织中为10.31±6.52(P<0.01)。VEGFR3的表达主要受乳腺癌细胞VEGF-C表达的影响,两者具有明显的相关性(r=0.66,P<0.05)。乳腺癌淋巴管主要定位于癌周组织及肿瘤间质内,癌巢内未发现成熟淋巴管。VEGF-C在乳腺癌组织内的阳性表达率淋巴结微转移阳性组为87.5%,在淋巴转移阴性组为71.1%,两组差异有统计学意义(P<0.01)。VEGFR3阳性脉管数在乳腺癌瘤周组织中淋巴转移阳性组为12.48±6.51,淋巴转移阴性组为8.47±6.02,两组差异有统计学意义(P<0.01)。结论:VEGF-C在乳腺癌组织肿瘤细胞中呈高表达,而其受体VEGFR3则表达乳腺癌间质和癌周组织的淋巴内皮细胞;乳腺癌新生淋巴管主要定位于癌周及间质;VEGF-C在乳腺癌组织、VEGFR3在癌周组织的表达与乳腺癌淋巴浸润和淋巴结转移密切相关。     

HIF-1在TGF-β介导的ANGPTL4表达上调过程中的作用

目的 通过RNA干扰技术沉默A549细胞中乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,初步探讨HIF-1在TGF-β介导的血管生成素样基因4(ANGPTL4)表达上调过程中的作用.方法 转染了HIF-1α-shRNA 的A549细胞(实验组)、转染空质粒的A549细胞(对照组)以及未转染的A549细胞(空白组)分别给予不同时间的TGF-β1干预,采用RT-PCR检测各组细胞中的HIF-1α与ANGPTL4的mRNA水平,Western blot检测各组细胞中HIF 1α与ANGPTL4蛋白的表达变化.结果 TGF-β1处理0、12、24、48 h后,相比于对照及空白组,实验组中HIF-1α与ANGPTL4的mRNA及蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),且对照组及空白组中HIF-1α与ANGPTL4的mRNA及蛋白水平均与TGF-β1干预具有显著的时效相关性(P＜0.05).而实验组内HIF-1α与ANGPTL4未观察到上述变化趋势.结论 HIF-1可能是ANGPTL4的上游调控基因,并且参与TGF-β-Smad信号通路介导的ANGPTL4表达上调.     

小鼠后肾集合管水通道蛋白表达及其上皮细胞超微结构研究

目的观察小鼠后肾集合管水通道蛋白(AQP)-4的表达及其上皮细胞超微结构变化。方法应用透射电镜、免疫组织化学及图像分析技术观察并检测小鼠后肾不同发育阶段集合管的超微结构及AQP-4表达。结果小鼠胚龄18 d见发育早期集合管主细胞,生后7 d～21 d,其形态结构发育基本完善。A型闰细胞于胚胎18 d出现,B型闰细胞生后21天出现。AQP-4于胚龄14 d始见表达,分布于集合管管壁上皮细胞侧基底细胞膜,随胚龄增加表达逐渐增强,生后1 d达高峰。结论集合管管壁上皮细胞于胚胎时出现,但其形态结构在生后才逐渐完善。AQP-4对小鼠胚胎时期肾水平衡调节可能起重要的作用。     

血管内皮生长因子及其受体在白血病中的表达及作用

血管内皮生长因子(VEGF)及其受体的表达,在白血病细胞的增殖和存活中发挥了重要作用.几乎所有类型的白血病均可见VEGF及其受体的表达,VEGF及其受体与白血病的预后及分期等密切相关.     

盘状结构域受体2及其在肿瘤中的表达和作用

盘状结构域受体2(DDR2)是一种受体酪氨酸激酶(RTK),可以被多种胶原(Ⅰ～Ⅲ、X型)激活.近年来研究发现DDR2在人类多种肿瘤中呈差异性表达,提示其可能参与肿瘤的发生和发展过程,DDR2将来可能作为肿瘤基因治疗的一个潜在靶点.     

EGF、EGF－R在卵巢浆液性良、恶性及交界性肿瘤中的表达

应用免疫组织化学ＡＢＣ方法，检测５２例卵巢浆液性良、恶性及交界性肿瘤中ＥＧＦ、ＥＧＦ－Ｒ的表达。结果显示：ＥＧＦ、ＥＧＦ－Ｒ在卵巢浆液性囊腺瘤中分别为５０％、３７％，交界性病变中分别为６２．５％、１００％。其中ＥＧＦ－Ｒ检测良恶性及交界性病变阳性表达率有显著性差异，Ｐ＜０．０５，提示ＥＧＦ、ＥＧＦ－Ｒ在卵巢发生发展中起不同调节作用，有利于病理的诊断和临床估计预后。     

芳香烃受体在肿瘤发生发展过程中的作用

芳香烃受体(AHR)不仅介导二恶英、多环芳烃及多氯联苯等环境有机污染物的致癌/促癌作用,在正常生理条件下,它也常过表达并结构性活化于人或动物多种恶性肿瘤中,能抑制关键抑癌基因的表达与功能,促使干细胞转化,与雌激素受体相互作用,并干扰细胞周期、凋亡、接触性抑制、胞外基质代谢、细胞-基质相互作用、血管生成及炎症等生理或病理过程,促进癌症的发生、发展及转移,是人体或动物潜在的致癌基因。本文重点介绍AHR在肿瘤发生、发展及转移等病理过程中的作用和机制研究的新进展。     

细胞凋亡与增殖细胞核抗原在小鼠生后肾脏皮质发育中的表达

目的观察小鼠出生后肾脏皮质发育过程中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear anti-gen,PCNA)的表达及细胞凋亡的特征,探讨出生后小鼠肾脏皮质发育过程中细胞增殖与凋亡的规律及其关系。方法应用免疫组织化学技术和原位末端标记法(TUNEL法)分别检测出生后1、3、7、14、21、28和70天小鼠肾脏皮质中PCNA阳性的细胞和凋亡细胞。结果(1)小鼠生后肾脏皮质发育中PCNA的表达有一定的规律,早期PCNA阳性表达丰富,随着肾脏发育成熟表达逐渐减弱直至成年基本消失。(2)小鼠出生后肾脏皮质发育中也存在着大量细胞凋亡现象,且凋亡高峰一般出现在增殖高峰之后。结论细胞增殖与凋亡在小鼠生后肾脏皮质发育的整个过程中普遍存在,早期细胞增殖旺盛,增殖高峰之后出现凋亡高峰,晚期两者活动均减弱。     

TGF-βⅡ型受体、Smad4与Smad7蛋白在胃癌中的表达

目的通过检测转化生长因子TGF-βⅡ型受体(TβR-Ⅱ)、Smad4与Smad7蛋白在胃癌组织中的表达,研究它们与胃癌发生、发展的关系。方法应用S-P免疫组化检测方法,对10例正常胃黏膜、10例早期胃癌与45例进展期胃癌组织的TβR-Ⅱ、Smad4与Smad7蛋白的表达进行检测。结果TβR-Ⅱ与Smad4蛋白在正常胃黏膜和早期胃癌中的表达明显高于进展期胃癌,且胃癌分化程度越低,阳性表达率越低(P<0.05)。Smad7蛋白在进展期胃癌中的表达明显高于正常胃黏膜和早期胃癌(P<0.05)。TβR-Ⅱ、Smad4及Smad7蛋白的表达均与淋巴结转移相关。结论TβR-Ⅱ、Smad4与Smad7蛋白三者表达的异常可能与胃癌的发生、发展和转移相关,可能成为研究胃癌分化与转移的生物学标记物。     

转化生长因子β1表达在小鼠放射性肺纤维化形成过程中的作用

目的探讨转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）在小鼠放射性肺纤维化形成过程中表达变化及作用。方法雄性Ｃ５７ＢＬ小鼠,全肺１次照射１３Ｇｙ,不同时间取肺组织ＨＥ染色、Ｍａｓｏｎ染色、ＶＧ染色观察肺纤维化形成。逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）方法测定肺组织内ＴＧＦβ１的表达。结果照射后８个月局部灶性纤维化形成。照射后３６小时ＴＧＦβ１表达下降;照射后２个月ＴＧＦβ１表达升高;至照射后８个月,略呈下降趋势,但仍高于正常对照。结论ＴＧＦβ１的表达在肺纤维化形成过程中起重要作用。     

M-CSF可溶性受体在烟草中的表达及其抗M-CSF作用研究

目的:在烟草中高效表达人M-CSF可溶性受体并研究其抗M-CSF活性.方法:采用基因重组技术构建表达C端含组氨酸标签和内质网滞留信号的M-CSF可溶性受体植物表达载体,通过根瘤土壤杆菌转化烟草,获得转基因植株.PCR、蛋白印迹实验鉴定转基因植株,ELISA方法测定重组蛋白表达水平,集落形成实验测定重组蛋白活性.结果:获得50余株转基因烟草植株,PCR证实目的基因已整合到烟草基因组中,蛋白印迹实验证实转基因植株表达目的蛋白;M-CSFsR在烟草中获得高效表达,但不同转基因植株的表达水平存在差异,其中表达水平最高的一株M-CSFsR占叶片可溶性蛋白的1.92%;集落形成实验证明M-CSFsR可以抑制J6-1细胞的集落形成.结论:在烟草中高效表达有生物学活性的重组人M-CSFsR.