广谱基质金属蛋白酶抑制剂对高血压肾纤维化的影响

目的 研究多西环素(DOX)对卒中易感型自发性高血压大鼠(SHR-SP)肾脏基质金属蛋白酶(MMPs)及金属蛋白酶组织型抑制剂(TIMPs)活性的影响,探讨DOX对高血压肾纤维化病理转归的作用机制.方法 选用7周龄雄性SHR-SP随机分为药物干预组和对照组,定期观察大鼠体重、测量无创鼠尾压、尿量、尿肌酐、尿蛋白变化.观察终止时进行血流动力学分析;测定血清肌酐、尿素氮浓度;采用组织病理、明胶酶谱和逆明胶酶谱等方法观察各组大鼠肾脏组织学改变和MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2等活性变化.结果 收缩压、脉压、血清肌酐浓度在DOX组与对照组之间无统计学差异,但DOX组有升高趋势;从19周龄起,DOX组大鼠尿蛋白浓度与尿肌酐浓度比值即高于对照组[(8.3±6.4 vs 3.3±2.0)mg/μmol,P＜0.05];病理染色显示肾小管损伤平均指数和胶原容积分数均高于对照组(损伤平均指数:3.14±0.47 vs 2.69±0.38,P＜0.05;胶原容积分数:10.5%±2.7% vs 6.6%±1.9%,P＜0.01);与血压正常大鼠相比,高血压大鼠肾脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的活性升高;药物干预后MMP-2、MMP-9活性降低(MMP-2:2.62±0.75 vs 3.39±0.92;MMP-9:2.89±1.13 vs 4.01±0.91,P＜0.05),而TIMP-1、TIMP-2活性则显著升高(TIMP-1:2.89±1.76 vs 1.54±0.86,P＜0.05;TIMP-2:1.69±0.47 vs 1.06±0.47,P＜0.01).结论 广谱基质金属蛋白酶抑制剂DOX可以抑制SHR-SP肾脏中MMP-2、MMP-9活性,加重高血压造成的肾脏损害.在肾脏损害发生后,抑制MMPs活性可能会加重高血压肾脏纤维化的进展.     

广谱基质金属蛋白酶抑制剂对高血压肾纤维化的影响

目的研究多西环素(DOX)对卒中易感型自发性高血压大鼠(SHR-SP)肾脏基质金属蛋白酶(MMPs)及金属蛋白酶组织型抑制剂(TIMPs)活性的影响,探讨DOX对高血压肾纤维化病理转归的作用机制。方法选用7周龄雄性SHR-SP随机分为药物干预组和对照组,定期观察大鼠体重、测量无创鼠尾压、尿量、尿肌酐、尿蛋白变化。观察终止时进行血流动力学分析;测定血清肌酐、尿素氮浓度;采用组织病理、明胶酶谱和逆明胶酶谱等方法观察各组大鼠肾脏组织学改变和MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2等活性变化。结果收缩压、脉压、血清肌酐浓度在DOX组与对照组之间无统计学差异,但DOX组有升高趋势;从19周龄起,DOX组大鼠尿蛋白浓度与尿肌酐浓度比值即高于对照组[(8·3±6·4vs3·3±2·0)mg/μmol,P<0·05];病理染色显示肾小管损伤平均指数和胶原容积分数均高于对照组(损伤平均指数:3·14±0·47vs2·69±0·38,P<0·05;胶原容积分数:10·5%±2·7%vs6·6%±1·9%,P<0·01);与血压正常大鼠相比,高血压大鼠肾脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的活性升高;药物干预后MMP-2、MMP-9活性降低(MMP-2:2·62±0·75vs3·39±0·92;MMP-9:2·89±1·13vs4·01±0·91,P<0·05),而TIMP-1、TIMP-2活性则显著升高(TIMP-1:2·89±1·76vs1·54±0·86,P<0·05;TIMP-2:1·69±0·47vs1·06±0·47,P<0·01)。结论广谱基质金属蛋白酶抑制剂DOX可以抑制SHR-SP肾脏中MMP-2、MMP-9活性,加重高血压造成的肾脏损害。在肾脏损害发生后,抑制MMPs活性可能会加重高血压肾脏纤维化的进展。     

广谱基质金属蛋白酶抑制剂多西环素对血压大鼠主动脉结构的影响

目的利用多西环素的非特异性基质金属蛋白酶抑制剂特性,研究该药对高血压性主动脉重塑的影响。方法80只7周龄雄性卒中易感型自发性高血压(SHR-SP)大鼠随机分为药物干预组和对照组,同时饲养同周龄雄性WKY大鼠。药物干预组每天经自由饮水给予多西环素30mg/(kg.d)。观察6个月后处死动物留取主动脉,一部分组织用于制备石蜡切片并进行HE、维多利亚蓝(弹力纤维特异性染色)和vonKossa银(异常钙沉积染色)染色,另一部分组织用于交联胶原测定和明胶酶谱分析。结果两组高血压大鼠的主动脉内膜周长、外膜周长和血管中膜面积差异无显著性。采用明胶酶谱法,在各组均未检测到基质金属蛋白酶9活性;与对照组比较,药物干预组基质金属蛋白酶2活性显著降低(2.43±0.14比3.15±0.23,P<0.05)。维多利亚蓝动脉弹力纤维染色分析显示,与对照组比较,药物干预组弹力纤维占中膜面积百分比显著降低[3.46%±1.62%比5.72%±3.87%,P<0.05]。药物干预组交联胶原浓度与对照组比差异无统计学意义(26.4±7.0mg/g比28.0±8.7mg/g,P>0.05)。与对照组比较,药物干预组钙沉积占中膜面积百分比虽无统计...     

多西环素对内毒素性急性肺损伤小鼠模型MMP-9及TIMP-1mRNA表达的影响

目的研究多西环素对内毒素性急性肺损伤小鼠模型中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)mR-NA表达的影响。方法建立内毒素急性肺损伤小鼠病理模型,造模4 h后,用多西环素治疗,24 h后处死动物,检测支气管肺泡灌洗液白细胞计数及总蛋白含量,同时取肺组织进行逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测MMP-9及TIMP-1 mRNA表达水平。结果多西环素可以使支气管肺泡灌洗液中白细胞、总蛋白含量降低;同时使肺组织MMP-9 mRNA表达明显减少,而TIMP-1 mRNA表达增加。结论多西环素通过调节MMP-9及T1MP-1mRNA的表达,缓解由于内毒素或类似物质造成的肺部炎症,具有一定的肺保护作用。     

多西环素对缺氧大鼠心肌细胞缝隙连接蛋白43表达的影响

目的探讨多西环素对缺氧大鼠H9c2心肌细胞缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx 43)表达的影响及其可能的机制。方法培养大鼠H9c2心肌细胞,用Western Blotting法检测缺氧6 h、12 h、24 h后Cx43总蛋白的表达量及基质金属酶抑制剂(多西环素)、PI3K抑制剂(LY294002)、ERK1/2抑制剂(U0126)干预缺氧H9c2心肌细胞后Cx43总蛋白的表达量改变。结果缺氧组较空白对照组Cx43总蛋白表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。缺氧6 h时,多西环素和U0126干预组较缺氧组Cx43总蛋白表达量明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);缺氧12 h时,U0126干预组Cx43总蛋白表达量仍较缺氧组增高,差异有统计学意义(P<0.05);缺氧24 h时,多西环素和U0126干预后Cx43总蛋白表达量与缺氧组比较,差异无统计学意义(P>0.0.05)。LY294002干预组Cx43总蛋白表达量在观察时间范围内均较缺氧组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在培养的大鼠H9c2心肌细胞中,多西环素通过抑制基质金属酶增加缺氧心肌细胞Cx43总蛋白表达量,该作用至少部分抑制由ERK1/2信号介导的传导通路。     

两肾一夹型高血压大鼠重塑血管对血管紧张素II反应变化及其机制

为了探讨两肾一夹型高血压大鼠重塑血管对血管紧张素Ⅱ的反应变化及其机制，在制作两肾一夹型高血压大鼠模型血管基础上，观察了两肾一夹型高血压大鼠大、小动脉的形态学改变；用肠系膜微血管口径显微电视测量法和离体血管环灌流实验分别观察了两肾一夹型高血压大鼠肠系膜动脉和胸主动脉对血管紧张素Ⅱ的反应以及洛沙坦对该反应的作用；并用逆转录-聚合酶链反应检测两组动物胸主动脉血管紧张素Ⅱ1型受体nRNA和2型受体mRNA的表达。结果发现两肾一夹型高血压大鼠胸主动脉和肠系膜动脉中膜厚度增加，细胞层数增加，胶原纤维及弹力纤维含量增加；随着血管紧张素Ⅱ的浓度升高，肠系膜动脉、离体胸主动脉环收缩反应增加，而且在每一个血管紧张素Ⅱ浓度，两肾一夹型高血压大鼠肠系膜动脉和离体胸主动脉环对血管紧张素Ⅱ的收缩反应都比对照组增强；洛沙坦完全阻断离体胸主动脉环对血管紧张素Ⅱ的反应；两肾一夹型高血压大鼠胸主动脉血管紧张素Ⅱ1型受体nRNA表达增多，血管紧张素Ⅱ2型受体mRNA也有表达，而正常大鼠未见血管紧张素Ⅱ2型受体mRNA表达。此结果提示：(1)两肾一夹型高血压大鼠重塑血管对血管紧张素Ⅱ的反应增强，洛沙坦完全阻断血管对血管紧张素Ⅱ的反应；(2)血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达增多可能是两肾一夹型高血压大鼠重塑血管对血管紧张素Ⅱ的反应增强的机制之一。     

肾性高血压脑动脉瘤大鼠脑血管NO、NPY神经支配的变化

目的：研究高血压致脑动脉瘤形成对脑血管神经支配的影响，并进一步阐明脑动脉瘤形成机制。方法：利用改良Hashimoto方法建立实验怀大鼠高血压脑动脉瘤模型，应用NADPH－d组化和NPY免疫组化染色，观察肾性高血压脑动脉瘤大鼠脑血管壁NO，NPY神经支配变化，结果：在肾性高血压状态下，脑血管NADPH－d阳性神经纤维染色密度明显降低，NPY免疫反应阳性神经纤维密度明显增高，结论：脑血管舒缩神经递质的NO、NPY产生分布紊乱是持续高血压状态的结果，由此带来的脑血流动力学的改变可能参与了脑微动脉瘤的形成。     

肝纤维化形成过程中激活素A的表达变化

目的观察四氯化碳(CCl4)诱导实验性肝纤维化模型大鼠肝纤维化形成过程中激活素(activin,ACT)A的表达.方法40%CCl4皮下注射制备大鼠实验性肝纤维化模型,注射CCl41、2、3、4、5、6及7周后分批处死动物,每次6～10只,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化法检测ACTβA亚基mRNA和蛋白质的表达.结果RT-PCR和免疫组化研究表明,正常肝脏表达ACTβA亚基,但在肝纤维化形成过程中其表达一过性下降到检测不出的水平(注射CCl4后2、3周),然后又逐渐升高,注射6、7周后显著高于正常动物(P＜0.01),其mRNA表达水平分别为正常大鼠的1.6和2.2倍.免疫组化研究还表明,正常时ACTA表达主要位于肝小叶内的肝细胞,在肝纤维化形成后表达显著增加,分布发生改变,纤维化区域周围有大量表达ACT的肝细胞存在.结论ACTA可能在后期参与了肝纤维化的形成.     

多西环素对乳腺癌移植瘤小鼠MMP-2及TIMP-2 mRNA表达的影响

目的 研究多西环素在小鼠乳腺癌肺转移模型中对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)mRNA表达的影响.方法 30只TAⅡ近交系小鼠建立肺转移性乳腺癌BCML-TAⅡ99模型,随机分为对照组及给药组,每组15只,于可触及肿物后次日,给药组腹腔注射盐酸多西环素0.1 ml(10 mg/ml),对照组给予等量生理盐水.7 w后处死动物,剥离肿瘤称重,部分新鲜组织采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法 检测肿瘤组织MMP-2及TIMP-2 mRNA表达水平.结果 多西环素给药组小鼠肿瘤生长大小及转移率分别为(2.718±0.337)g和13.3%均低于对照组[(4.313±0.468)g,53.3%,P＜0.01,P＜0.05].与对照组比较,多西环素治疗组MMP-2 mRNA为0.637±0.088,明显低于对照组 (1.035±0.097,P＜0.05);TIMP-2 mRNA为0.778±0.148,明显高于对照组 (0.484±0.125,P＜0.05).结论 多西环素通过调节MMP-2及TIMP-2 mRNA的表达水平,对小鼠乳腺癌肺转移模型中肿瘤生长及转移发挥抑制作用.     

基质金属蛋白酶类在颅内动脉瘤中的表达

目的检测基质金属蛋白酶类(MMPs)中MMP-2、MMP-9在颅内动脉瘤中的表达情况。方法取经DSA证实为颅内动脉瘤,并经显微神经外科手术夹闭动脉瘤的17例患者的17个动脉瘤的瘤壁组织为研究标本(动脉瘤组)。17个动脉瘤中,小动脉瘤10个,大动脉瘤7个;Hunt-HessⅠ～Ⅱ级的患者为11例,≥Ⅲ级的患者为6例。对照组为同期经CT及MRI证实为非血管性疾病的外伤患者,共15例,取其颞浅动脉组织为对照标本。经HE染色及免疫组化染色,检测动脉瘤的瘤壁组织和正常血管壁的组织结构变化及其中MMP-2、MMP-9的表达情况,计算阳性指数(PI)。结果①对照组的动脉壁各层MMP-2、MMP-9的阳性表达较低。动脉瘤组瘤壁组织的内膜、中膜、外膜有MMP-2、MMP-9的阳性表达。②动脉瘤组患者MMP-2、MMP-9的阳性表达率分别为88.2%和82.4%,高于对照组的6.7%和13.3%,差异有统计学意义,P<0.01。③小动脉瘤患者MMP-2和MMP-9的PI值分别为5.1±2.2、5.1±4.2,大动脉瘤患者MMP-2和MMP-9的PI值分别为4.6±2.4、4.1±2.3,差异均无统计学意义,P>0.05。④Hunt-HessⅠ～Ⅱ级患者MMP-2和MMP-9的PI值分别为4.5±1.6、4.2±3.7,高于Ⅲ级患者的MMP-2和MMP-9的PI值(分别为5.7±3.1、5.7±3.1),差异均无统计学意义,P>0.05。⑤经Spearman相关分析,动脉瘤组MMP-2的PI值与MMP-9的PI值呈正相关,r=0.425,P<0.05。结论 MMP-2、MMP-9在动脉瘤的瘤壁组织中表达较高,其高表达可能促进了颅内动脉瘤的形成和破裂。     

大蒜素对人胃癌细胞系MGC-803增殖的影响及其作用机制

目的通过大蒜素作用于人胃癌细胞系MGC-803,探讨其对胃癌细胞增殖的影响及机制。方法通过细胞培养技术检测大蒜素作用胃癌细胞后细胞增殖抑制率;免疫组化及RT-PCR法检测胃癌细胞中p16INK4因子表达变化。结果大蒜素作用于MGC-803细胞后,对其增殖表现出了明显的抑制作用,且呈浓度依赖性：大蒜素处理的MCC-803细胞p16蛋白及p16INK4 mRNA表达明显强于未应用大蒜素处理组（P〈0．05）。结论大蒜素可以抑制MGC-803细胞的增殖,其机制之一可能为上调了细胞抑癌基因p16INK4的表达。     

睡眠剥夺对大鼠心脏的影响及其致心律失常机制研究

目的：以Sprague-Dawley大鼠为研究对象，观察经过1d、3d、5d及7d睡眠剥夺（SleepDeprivation，SD）大鼠心电图及其心室肌组织Kv2．1钾离子通道水平，探索SD致心律失常的发生机制。方法：以改良多平台睡眠剥夺法（MMPM）建立睡眠剥夺模型，设笼养对照组，大平台对照组，睡眠剥夺1d、3d、5d、7d组，实时PCR定量监测各组大鼠心肌组织Kv2．1钾离子通道基因mRNA水平随SD时间变化趋势。结果：SD后大鼠心电图改变以心律失常为主，心肌组织Kv2．1钾离子通道的水平随SD时间的延长持续下调（笼养对照组，大平台对照组，睡眠剥夺1d，3d，5d．7d组的2^-△△ct值依次为1，0．84，0．60，0．35，0．1，0．06，各睡眠剥夺组的较两对照组显著下降（P〈0．05）。结论：SD可致大鼠发生心律失常，心肌组织Kv2．1钾离子通道水平的下调可能是SD致心律失常的机制之一。     

洛沙坦降低糖尿病大鼠肾组织膜3型基质金属蛋白酶mRNA的表达

目的　研究洛沙坦对糖尿病大鼠肾组织膜 3型基质金属蛋白酶 (MT3 MMP)mRNA表达的影响。方法　雄性Wistar大鼠分为 3组 ,A组 (11只 )为正常对照组 ,B组 (11只 )为糖尿病未干预组 ,C组 (9只 )为糖尿病大鼠洛沙坦 (血管紧张素Ⅱ 1型受体阻断剂 )干预组。以链脲佐菌素 (STZ)制备糖尿病大鼠模型。大鼠饲养 18周后取出肾脏检测MT3 MMPmRNA表达、电镜检测大鼠肾小球基底膜厚度及系膜基质密度 (系膜基质面积 /系膜面积 ) ;收集 2 4h尿测定尿白蛋白排泄量 (UAE)。mRNA表达采用RT PCR ,以 β actin作为内对照。UAE测定采用大鼠白蛋白特异的酶免疫分析试剂盒。结果　肾组织MT3 MMPmRNA表达在B组大鼠 (1.37± 0 .96 )显著高于A组 (0 .75± 0 .34,P <0 .0 5 )和C组 (0 .75± 0 .30 ,P <0 .0 5 ) ,而后两组比较差异无显著性。UAE、肾小球基底膜厚度及系膜基质密度在B组大鼠均显著高于A组和C组 (P <0 .0 5 )。结论　STZ糖尿病大鼠肾组织MT3 MMPmRNA表达明显增加 ,洛沙坦处理能延缓糖尿病肾病的发生 ,与此同时降低MT3 MMPmRNA表达。提示MT3 MMP与糖尿病肾病发病可能有一定关系。     

生长阻滞和DNA损伤诱导基因153在慢性缺氧诱导心肌细胞凋亡中的表达

目的研究慢性缺氧诱导心肌细胞发生凋亡的情况,探讨生长阻滞和DNA损伤诱导基因(CHOP/GADD153)蛋白表达变化与心肌细胞凋亡的关系。方法将体外培养的心肌细胞置于95%N_2/5%CO_2混合气体培养箱内进行慢性缺氧处理,随机将心肌细胞分为对照组及缺氧6、12、24、48、72 h组。采用流式细胞术及DNA梯度技术检测心肌细胞凋亡情况.RT-PCR检测CHOP/GAD153 mRNA水平变化,western blot检测细胞凋亡过程中CHOP/GADD153蛋白表达变化。结果缺氧6 h组心肌细胞出现典型的凋亡特征;与对照组比较,缺氧12、24、48、72 h组心肌细胞凋亡数量明显增多(P<0.05):CHOP/GADD153 mRNA和蛋白表达水平也明显增加(P<0.05)。结论慢性缺氧可诱导心肌细胞发生凋亡,CHOP/GADD153可能参与了慢性缺氧诱导心肌细胞凋亡的信号传导通路。     

葡萄糖调控蛋白对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的研究大鼠局灶性脑缺血时糖调控蛋白(GRP78、GRP94)的表达。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型。将60只大鼠分手术组与假手术组,制成缺血6、12及24 h模型。应用组织学观察、免疫组织化学方法及半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测缺血61、2及24 h后GRP78、GRP94表达的变化。结果(1)大鼠局灶性脑缺血后,在6 h即可看到GRP78、GRP94表达低于假手术组水平,12 h升高但仍低于假手术组水平,24 h又明显下降。假手术组GRP78、GRP94表达与时间无关。(2)形态学观察:手术组缺血周围脑组织细胞中GRP78、GRP94阳性表达较多,缺血中心坏死组织内无阳性表达;假手术组相同脑区内阳性表达多,无组织损伤。结论短时间脑缺血GRP78、GRP94表达渐升高,对脑组织具有保护作用;长时间脑缺血后导致内质网功能下降,GRP78、GRP94表达下降。     

升高血压对大鼠脑缺血保护作用机制的研究

目的 初步探讨升高血压对急性期脑梗死大鼠脑缺血损伤保护作用的机制。方法 健康成年雄性SD大鼠42只，随机分为3组，正常对照组(6只大鼠)、升压治疗组(采用改良线栓法分别阻塞大鼠大脑中动脉3h、4h和6h制作梗死模型，分为H3、H5、H63个亚组，每个亚组6只大鼠)和单纯缺血组(I2、I4、I63个亚组，每个亚组6只大鼠)。升压治疗组在缺血最后1h用去氧肾上腺素(苯肾上腺素)升高系统血压30％，正常对照组和单纯缺血组以等渗盐水作对照。用分光光度法测定大鼠脑组织匀浆中丙二醛含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果脑缺血后各组大鼠脑组织丙二醛含量较正常对照组均有明显增加(P＜0．05)，而且随缺血时间延长丙二醛含量增加明显；升压治疗后，丙二醛含量较单纯缺血组有不同程度的减少，H，亚组丙二醛含量较I，亚组差异有显著意义(P＜0．05)。脑缺血后各组大鼠脑组织SOD活性均较正常对照组明显下降(P＜0．05)，随时间延长SOD活性下降更加明显；升高血压治疗后S01)活性较单纯缺血组有不同程度的增加，其中H3和H4组SOD活性的恢复差异有显著意义(P＜0．05)。结论恢复脑组织S0D活性、降低氧化损伤可能是急性期升压治疗有效的重要机制之一。     

实验性肝纤维化大鼠MMPs和TIMPs mRNA表达及中药小柴胡汤的作用

目的 探讨大鼠肝纤维化过程中MMP-2、TIMP-1 mRNA表达及小柴胡汤对其的影响.方法 用40%的四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型,并用不同剂量的小柴胡汤进行干预.应用HE常规染色法对肝组织切片行组织病理学检查;应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)半定量测定大鼠肝组织中MMP-2、TIMP-1 mRNA的表达.结果 (1)肝组织病理学检查结果显示:小柴胡汤治疗组与模型组相比,肝纤维化程度显著减轻.(2)病理模型组TIMP-1 mRNA与正常对照组比明显升高(P＜0.01);而MMP-2 mRNA却明显降低(P＜0.05).(3)小柴胡汤治疗组TIMP-l mRNA与模型组比显著降低(P＜0.01),而MMP-2 mRNA与模型组无差异(P＞0.05).结论 TIMP-1 mRNA在肝纤维化过程中升高;小柴胡汤能显著减轻大鼠肝纤维化程度,其可能通过下调TIMP-1 mRNA的表达发挥作用.     

Expression of FOXP3 in esophageal squamous cell carcinoma relating to the clinical data

Forkhead box protein 3 (FOXP3) has been studyed as a biomarker in many human malignancies recently. But in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) the studies are limited. In this study, expression of FOXP3 in ESCC tissue was evaluated in relation to the clinical data. Detection of FOXP3 mRNA was made by using quantitative real‐time PCR while protein expression was assessed by immunocytochemistry (n = 112). The results were correlated to the clinical data including age, gender, carcinoma size, carcinoma differentiation, lymphatic invasion and pathological stage. A significantly higher FOXP3 expression in tumors was confirmed than in normal‐appearing mucosa. The FOXP3 mRNA and protein expressions were higher in advanced stages (stage II B and III) than in early stages (stage I and stage II A). A significantly higher FOXP3 expression in tumors with lymph node metastasis was also confirmed than in those without lymph node metastasis. No significant correlation was found in age, gender, carcinoma size, or carcinoma differentiation. These results suggest that expression of FOXP3 was higher in ESCC tissue and was closely correlated to lymphatic invasion and pathological stage. It may imply that FOXP3 might play an important role in esophageal carcinoma progression.     

流体切应力对人内皮祖细胞组织纤溶酶原激活物基因表达的影响

目的研究不同流体切应力务件下,内皮祖细胞组织纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator,t-PA)基因表达的变化。方法分离健康志愿者外周血的单个核细胞并诱导分化成内皮祖细胞,并通过相差显微镜和免疫荧光标记等方法进行形态学观察和鉴定。种植内皮祖细胞到小径人工血管表面后,分为静态组、低切应力组(0．5 Pa)、中切应力组(1．5 Pa)和高切应力组(2．5 Pa)4个不同处理组,之后用ELISA各组不同时间点培养液中t-PA的水平,并用半定量RT-PCR测定切应力处理25 h后,不同切应力组内皮祖细胞t-PA的基因表达。结果外周血单个核细胞在体外诱导分化成为内皮祖细胞,ac-LDL吞噬及lectin抗体荧光标记双阳性,FLK-1和vWF免疫荧光抗体染色均为阳性。提高流体切应力可以增加t-PA的分泌,上调内皮祖细胞t-PA的基因表达。结论提高流体切应力能明显促进内皮祖细胞t-PA的分泌和基因表达,有助于改善内皮祖细胞的生理功能。     

Amlodipine inhibits matrix metalloproteinases expression and secretion in mouse macrophage

Objective To investigate whether the calcium channel blocker amlodipine could inhibit macrophage matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) expression and secretion. Methods Peritoneal macrophages were isolated from BALB/C mice and incubated with low (5μg/L ), middle (15μg/L) and high (305μg/L) concentrations of amlodipine, or in the medium alone (controls) for 24 hours, and the expression and secretion of MMP-2 and MM-9 of the cells were analyzed by RT-PCR and gelatin zymography. Results Compared with controls, amlodipine at low concentration had no significant effects on the expression and secretion of either MMP-2 and MMP-9 (P>0.05) at middle concentrationit it could inhibited MMP-2 and MMP-9 expressions completely and significantly reduced the secretion of MMP-9 (P<0.05); but it had no effect on the secretion of MMP-2. At high concentration it also inhibited MMP-2 and MMP-9 expression completely. Conclusion Amlodipine at 15 ig/L inhibited the expression of MMP-2 and MMP-9 and reduced the secretion of MMP-9, suggesting that amlodipine may stabilize atherosclerotic plaque.