PI3K/Akt抑制剂对内质网应激下肝癌细胞MEK/ERK途径的影响

目的:研究内质网应激介导的PI3K/Akt抑制剂对肝癌细胞MEK/ERK途径的影响。方法:采用PI3K抑制剂LY294002/激活型突变载体myr-Akt分别阻断/激活内质网应激介导的Akt和ERK活化,并利用Western blot ting技术分析内质网应激条件下PI3K/Akt和MEK/ERK途径间的关系。结果:阻断PI3K/Akt促进内质网应激介导的MEK/ERK活化,过度激活PI3K/Akt则抑制内质网应激介导的MEK/ERK活化。结论:PI3K/Akt和MEK/ERK信号途径间在内质网应激肝癌细胞中可能存在信号交流。     

姜黄素通过内质网应激信号通路诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用及对细胞活性影响分析

目的 分析姜黄素通过内质网应激信号通路诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用及对细胞活性影响。方法 选取2017年4月～2018年3月期间为研究时间段,以此期间购置的肝癌SMMC-7721细胞为试验样本,利用不同浓度姜黄素处理试验样本,先经流式细胞仪检测细胞凋亡情况,后经CCK8法分别在试验开始后24 h检测其细胞活力,再经流式细胞仪检测肝癌细胞ROS含量。结果 姜黄素浓度越高,肝癌细胞存活率呈逐步下降趋势,同空白对照样本比较,有显著性差异(P0.05);姜黄素浓度越高,MFI值呈逐步升高趋势,同空白对照样本比较,有显著性差异(P0.05);不同浓度姜黄素处理的试验样本细胞凋亡率,呈逐渐上升趋势,与空白对照样本比较,有显著性差异(P0.05)。结论 利用姜黄素可有效地抑制肝癌细胞活性,诱导肝癌细胞凋亡。     

子痫前期内质网应激相关蛋白CHOP/GADDl53的表达及其意义

目的:研究内质网应激相关蛋白CHOP/GADD153在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其意义.方法:选择2009年6月～2010年6月在南京医科大学第一附属医院产科住院分娩的子痫前期患者30例(子痫前期组),以同期正常孕妇35例为对照组.采用RT-PCR技术、蛋向印迹(western-blot)法和免疫组化检测两组孕妇胎...     

内质网应激下肝癌细胞Akt和ERK通路间的cross-talk研究

目的 研究内质网应激介导的肝癌细胞PI3K/AKt和MEK/ERK途径间的信号交流。方法 采用PI3K抑制剂LY294002/Akt激活型突变载体myr-Akt和MEK抑制剂U0126分别阻断/激活内质网应激介导的Akt和ERK活化,并利用Western blot分析内质网应激条件下PI3K/Akt和MEK/ERK途径间的信号交流。结果 阻断PI3K/Akt明显促进内质网应激介导的MEK/ERK活化,而过度激活PI3K/Akt则抑制内质网应激介导的MEK/ERK活化。阻断MEK/ERK对内质网应激介导的PI3K/Akt活化无影响。结论 PI3K/Akt和MEK/ERK信号途径问在内质网应激肝癌细胞中存在信号交流。     

ERK信号通路参与内质网应激时由A类清道夫受体介导的细胞凋亡

目的:探讨ERK信号通路在内质网应激时由A类清道夫受体(SR-A)介导的细胞凋亡中的作用?方法:ERK磷酸化和葡萄糖相关蛋白78(GRP78)的表达用Western blot方法检测,细胞活性用四甲基噻唑蓝(MTT)实验检测,同时应用Annexin V FITC/PI 双染流式细胞术检测细胞凋亡率?结果:Western blot结果显示,fucoidan可以持续激活ERK,并且在1~4 h达到最强,这种作用在SR-A基因敲除小鼠的腹腔巨噬细胞中明显减弱?用PD98059阻断ERK信号途径后,内质网应激时fucoidan诱导RAW264.7细胞凋亡率明显降低?结论:在发生内质网应激时,fucoidan与SR-A结合后激活ERK信号通路,可能是促进巨噬细胞凋亡的机制之一?     

M细胞对过敏性结膜炎小鼠MEK/ERK信号通路的影响

目的 探索M细胞在过敏性结膜炎小鼠中与丝裂原活化蛋白/细胞外调节蛋白激酶(MEK/ERK)信号通路的联系.方法 Barb/c小鼠随机分为空白对照组、模型组和治疗组,每组12只.空白对照组正常饲养,模型组和治疗组使用卵清蛋白(OVA)建立小鼠过敏性结膜炎模型.治疗组采用盐酸奥洛他定滴眼液治疗,每天滴加2次,每次1滴;模型...     

内质网应激与细胞凋亡

内质网(ER)是细胞内重要的细胞器,参与多种细胞进程,这些进程对于维持细胞存活和发挥细胞的正常生理功能具有重要的作用。然而在多种生理病理条件下,内质网稳态会发生变化而失衡,从而诱发内质网应激(ERS),此时机体通过激活未折叠蛋白反应(UPR)来恢复内质网的正常功能。当持续的ERS状态无法恢复时,ERS就会触发细胞凋亡程序,通过不同的凋亡途径引起细胞凋亡。     

MEK/ERK信号通路在上皮性卵巢癌顺铂耐药中的参与作用

目的 分析MEK/ERK信号通路在上皮性卵巢癌顺铂耐药中的参与作用,为临床治疗提供参考。 方法 分析郑州大学第一附属医院2015年2月-2017年8月期间诊治的92例卵巢癌顺铂耐药患者(观察组)的临床资料,检测患者MEK/ERK(extracellular regulated protein kinases)信号转导通路相关蛋白的表达。以同期未发生顺铂耐药的卵巢癌患者(对照组)90例为对照。 结果 卵巢癌顺铂耐药患者血清中MEK/ERK信号通路蛋白Ras、Raf、MEK、ERK1、ERK2及PI3K和AKT蛋白的表达水平明显高于对照组,且差异存在统计学意义(均P<0.05);观察组患者血清中Bcl2 (B-cell lymphoma-2)蛋白的表达水平明显高于对照组,细胞凋亡蛋白Bax(Bcl-2 associated X protein,BAX)和caspase-9(cysteinyl aspartate specific proteinase 9)水平明显低于对照组,且差异存在统计学意义(均P<0.05)。 结论 卵巢癌顺铂耐药过程可能与体内MEK/ERK信号通路及PI3K和AKT蛋白的异常表达有关。      

内质网应激与2型糖尿病

未折叠或错误折叠蛋白质在内质网腔蓄积及细胞内稳态的破坏将导致内质网应激。适宜的应激有利于细胞内环境的恢复,然而严重而持久的内质网应激反应将导致内质网功能受损,诱导细胞凋亡。β细胞具有高度发达的内质网,是对内质网应激最敏感的细胞之一,内质网应激介导的β细胞凋亡参与了糖尿病的发生。     

p53基因在内质网应激诱导的晶状体上皮细胞凋亡中的作用

目的探讨在内质网应激诱导的晶状体上皮细胞凋亡中,p53基因的作用.方法衣霉素用于诱导晶状体上皮细胞株LEC内质网应激.细胞凋亡用Hoechst染色法.基因表达测定采用RT-PCR.结果衣霉素处理导致CHOP基因表达升高,LEC细胞凋亡率和caspase-3活性增加.同时,衣霉素诱导细胞p53表达升高.通过转染的方式过表达CHOP基因可加强衣霉素诱导的LEC细胞凋亡以及p53表达升高.但是仅仅过表达CHOP基因并不能诱导LEC细胞凋亡以及p53表达升高.结论p53基因很可能在内质网应激所介导的细胞凋亡起重要作用,但p53基因不是CHOP的直接靶基因.     

青蒿油多相脂质体对SMMC-7721和NB4细胞株的抑制作用

目的：研究青蒿油多相脂质体对不同肿瘤细胞株的抑制作用。方法：以不同药物浓度的青蒿油多相脂质体作用于SMMC-7721及NB4细胞48h,阿霉素为阳性对照药,采用MTT法检测该制剂对两种细胞株的生长抑制作用。结果：青蒿油多相脂质体对SMMC-7721细胞的半抑制浓度IC50为69.125μg.mL-1,浓度在157.500μg.mL-1时,抑制率高达94.73﹪;对NB4细胞的半抑制浓度IC50为0.098μg.mL-1,浓度在0.315μg.mL-1时,抑制率达到84.96﹪。结论：青蒿油多相脂质体制剂对SMMC-7721和NB4细胞株均具有明显的抑制作用,多相脂质体新剂型对青蒿油抗SMMC-7721细胞有一定的增敏效果。     

宫颈鳞癌P53蛋白和ER的表达及其临床意义

目的：探讨宫颈鳞癌组织中P^53蛋白和ER的表达及其临床意义。方法：采用免疫组织化学S-P法对56例宫颈鳞癌进行产蛋白和ER检测。结果：56例宫颈鳞癌中P^53蛋白和ER阳性表达率分别是57．1％和37．5％，P^53蛋白表达与肿瘤病理分级、临床分期有关；ER的表达与宫颈鳞癌的病理分级、临床分期无关，但与P^53蛋白表达呈负相关。结论：P^53阳性表达随宫颈鳞癌组织病理分级和临床分期增高而逐渐增高，部分宫颈鳞癌可能属于激素依赖性，雌激素在宫颈鳞癌发生发展中可能是具有协同作用。     

Cerb-B2、P53、ER、PR在乳腺癌中的表达和预后

目的 探讨Cerb-B2、p^53、ER、PR在乳腺癌中表达与预后的关系。方法 采用免疫组化S-P方法测定100例乳腺癌中Cerb-B2、p53、ER、PR表达情况。结果 Cerb-B2、P^53的表达与乳腺癌的转移和预后有明显关系；ER、PR的表达与乳腺癌的转移和预后呈负相关。结论 乳腺癌中Cerb-B2、P5^3的表达提示乳腺癌患者预后不良；ER、PR表达提示乳腺癌患者预后较好。     

山豆根水提物对体外培养人肝癌细胞增殖及代谢的影响

目的:研究中药山豆根(SSCC)提取物对体外培养的人肝癌细胞的抑癌活性。方法:SSCC经粉碎、浸提、超速离心、减压浓缩、冷冻干燥得SSCC提取物。人肝癌SMMC-7721细胞经SSCC提取物处理不同时间后,以MTT法测SSCC提取物对人肝癌细胞线粒体代谢活性的影响,以细胞记数法观察了其对细胞增殖的影响。结果:1经SSCC提取物处理48h,其A570光吸收降为对照组的62.1%,72h为9.64%;2SSCC提取物处理7d后,人肝癌细胞数明显低于对照组;3经SSCC提取物处理24h后,在更换为正常培养基恢复培养过程中,细胞数呈现缓慢增长;4经SSCC提取物处理24h后其有丝分裂指数为对照组的50.6%。结论:中药SSCC提取物能抑制体外培养的人肝癌细胞的增殖,降低线粒体代谢活性。     

原发性膀胱移行细胞癌Pgp与突变p53蛋白、EGFR的相互关系

目的;探讨mder1基因表达产物Pgp与突变p53蛋白、EGRP是否存在相关性及其临床意义。方法：采用免疫组化SP法,检测107例原发性膀胱移行细胞癌中Pgp、突变p53蛋白、EGFR表达情况。结果：Pgp、突变p53蛋、EGFR的阳性表达率分别为63．6％、72．9％和66．4％,三者的过表达均与膀胱癌的病理分级、分期和术后的复发有关;相关性研究显示Pgp表达与突变p53蛋白和EGFP的表达密切相关（P＜0．01）。结论：Pgp,突变p53蛋白和EGFR过表达不仅是判定原发性膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的重要指标,而且提示原发性膀胱移行细胞癌中Pgp的表达可能与其他肿瘤一样,受到p53和EGFR等的调控。     

胃癌组织中P53及P21蛋白的表达

①目的探讨P53和P21蛋白异常表达在胃癌发生发展中的作用。②方法应用免疫组化技术检测58例胃癌及相应癌旁组织中P53和P21蛋白的表达。③结果胃癌组织P53蛋白阳性表达率为86.21%(50/58),癌旁组织P53蛋白均为阴性表达,胃癌组织P53蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织,差异具有极显著性(P=0.000)。胃癌组织P21蛋白阳性表达率为62.07%(36/58),癌旁组织P21蛋白阳性表达率为89.66%(52/58),胃癌组织P21蛋白阳性表达率明显低于癌旁组织,差异有极显著性(2χ=12.5,P<0.01)。胃癌组织中P21与P53蛋白共同阳性表达率为56.9%,但两者无相关性(χ2=1.323,r=0.203,P>0.05)。④结论P53和P21蛋白表达异常与胃癌发生有关。     

胃癌组织CyclinE和p53蛋白表达的研究

研究CyclinE和 p5 3蛋白在胃癌中表达的意义。方法 :采用免疫组化SP法对正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生、萎缩性胃炎伴不典型增生组织各 2 0例和 78例胃癌组织标本进行CyclinE和p5 3蛋白检测。结果 :胃癌中CyclinE和 p5 3蛋白阳性表达率均高于正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生组 (P <0 .0 1) ,p5 3蛋白阳性表达高于萎缩性胃炎伴不典型增生组 (P <0 .0 5 ) ;CyclinE、p5 3蛋白表达与胃癌肿瘤细胞分化程度相关 (P <0 .0 5 ) ;CyclinE蛋白阳性表达率在有肝转移组高于无肝转移组 (P <0 .0 5 ) ;p5 3蛋白表达率在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组 (P <0 .0 5 )。p5 3蛋白表达与胃癌浸润深度有关。结论 :CyclinE和p5 3蛋白异常表达可能参与胃癌的发生发展过程 ,检测CyclinE和 p5 3蛋白表达作为反映胃癌病理学特点可能有一定参考意义。     

EB病毒相关胃癌组织中P53及P21蛋白的表达

目的探讨Epstein-Barr病毒(EBV)感染、P53和P21蛋白表达异常在胃癌发生发展中的作用以及三者相关性。方法应用免疫组化技术检测13例EBV相关胃癌(EBVaGCs)、45例临床指标与之匹配的EBV阴性胃癌(EBVnGCs)以及58例相应癌旁组织中P53和P21蛋白的表达。结果胃癌组织P53蛋白阳性率明显高于癌旁组织,差异有极显著性(χ2=50.000,P<0.01)。EBVnGCs组织中P53蛋白阳性率与EBVaGCs相比差异无显著性(χ2=0.072,P>0.05);但EBVaGCs组织P53蛋白过表达率明显低于EBVnGCs组织,差异有极显著性(χ2=7.259,P<0.01)。胃癌组织P21蛋白阳性率明显低于癌旁组织,差异有极显著性(2χ=12.500,P<0.01)。EBVnGCs与EBVaGCs组织P21蛋白阳性率无明显差异(P>0.05)。胃癌组织中P21与P53蛋白共同表达率较高,但无显著相关性(2χ=1.323,P>0.05,r=0.202 5)。结论P21蛋白表达存在p53依赖性和p53非依赖性两条途径;胃癌组织中EBV感染与P53蛋白的异常表达有关,而与P21蛋白异常表达无显著相关性。     

微血管密度与P53表达对胃癌预后的价值

应用微波辐射ＳＰ方法检测１００例胃癌中ＣＤ３４和Ｐ５３表达,结果：Ｐ５３蛋白阳性率达５２％,Ｐ５３异常表达与胃癌分化程度,浸润深度无关（Ｐ〉０．０５）,而与临床分期,淋巴结转移和预后有密切关系（Ｐ〈０．０５）;低分化胃癌组和进展期Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ期胃癌微血管密度（ＭＶＤ）明显高于高分化胃癌组和Ｉ期胃癌（Ｐ〈０．００１）,有淋巴结转移胃癌ＭＶＤ明显高于淋巴结未转移胃癌（Ｐ〈０．００１）,胃癌ＭＶＤ与Ｐ５３     

血管免疫母细胞性淋巴结病bcl-2与P53蛋白表达

（１）目的 研究ｂｃｌ－２与Ｐ５３蛋白在血管免疫母细胞性淋巴结病（ＡＩＬ）中的表达,探讨ＡＩＬ的发生发展规律,病变性质及恶性转化的可能机制。（２）方法 应用免疫组化染色、ＰＣＲ技术检测ｂｃｌ－２与Ｐ５３蛋白表达及ｂｃｌ－２／ＩｇＨ融合基因,同时选择非零奇金病（ＮＨＬ）２０例及淋巴结反应性增生１０例作为对比研究。（３） 结果 ＡＩＬ病人ｂｃｌ－２与Ｐ５３蛋白阳性表达率分别为６３．６％（１４／２２）,