中药肾康灵干预阿霉素肾病大鼠血蛋白质质谱表达的实验研究

目的：应用血蛋白质组学筛选阿霉素肾病（AN）大鼠血清中差异表达的蛋白质,旨在蛋白质分子水平探索频复发性肾病综合征（FRNS）的诊断标志物及中药肾康灵治疗的作用靶点。方法：利用表面增强激光解析-电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）联合CM10蛋白质芯片技术检测各组大鼠血蛋白质组质谱的表达,采用PBSⅡ-C型蛋白质芯片阅读机自动收集数据,使用Ciphergen Proteinchip Software3.2.1和Biomarker Wizard分析软件筛选出各组大鼠血清差异表达的蛋白质。结果：在质荷比值（M/Z）2000~50000范围内,P〈0.05,芯片共捕获到30种差异蛋白质,质谱仪筛选出B组与A组比较的25种差异蛋白,C组与B组比较筛选出5种差异蛋白,其中3种差异蛋白在B、C、D、E组间差异有统计学意义,且从B组→C组→D、E组→A组呈递减趋势,这3种蛋白峰分别为8837.7、15013.0、15053.2。结论：SELDI-TOF-MS能有效分析阿霉素肾病大鼠血清蛋白质质谱,中药肾康灵干预治疗后蛋白质质谱表达差异有统计学意义。     

益肾活血中药肾康灵干预阿霉素肾病大鼠的药理研究

目的:通过观察益肾活血中药肾康灵对阿霉素肾病(AN)大鼠的干预作用及与核因子(NF-κB)等的关系,阐明NS的发病机制及益肾活血中药干预治疗的可能机制.方法:用阿霉素(ADR)5.5 mg/kg诱导大鼠类似于人类微小病变(MCD)型肾病模型,用泼尼松(C组)、泼尼松 肾康灵(D组)治疗,并设对照组.检测各组治疗前后 NF-κΒ及肾脏病理形态学等指标的改变.结果:AN大鼠在治疗前尿蛋白显著增多,Alb显著下降,Ch和TG、NF-κB活性显著增强,肾脏病理损害明显加重;在治疗后,治疗组AN大鼠上述指标都明显改善(P＜0.05 或P＜0.01),肾脏病理损害明显减轻.结论:尾静脉注射ADR造成的人类肾病病理模型,其临床表现和实验指标改变类似于中医的"肾虚血瘀"病变;益肾活血中药肾康灵能显著改善AN鼠的肾虚血瘀证表现;NF-κB可作为中医肾虚血瘀证诊断和益肾活血法应用的客观指标.     

肾康灵胶囊对IgA肾病大鼠的实验研究

肾康灵胶囊为临床治疗ＩｇＡ肾病的中药中试产品 ,由黄芪、当归、生地、丹参、三七参、丹皮、黄柏、五倍子等组成 ,具有补气活血、清热养阴之功效。近年来对ＩｇＡ肾病治疗的观察表明 ,本品疗效显著 ,本文以具有改善微循环作用的保肾康片为对照药 ,观察了不同剂量的肾康灵胶囊对ＩｇＡ肾病大鼠的影响。资料与方法1　实验材料1 1　实验动物　ＳＤ系雄性大鼠 ,体重 (180± 10 ) ｇ ,由中国辐射防护研究院提供。1 2　药物与试剂　牛血清白蛋白 (ＢＳＡ) (上海生物制品厂 ,批号为 990 80 1) ,葡萄球菌肠毒素Ｂ(ＳＥＢ) (解放军军事医学科学院提…     

肾安冲剂对阿霉素肾病大鼠的治疗作用

目的：观察肾安冲剂对阿霉素肾病大鼠的治疗作用。方法：SD大鼠尾静脉注射阿霉素建立肾病综合征模型。雄性SD大鼠72只,随机分为6组：正常对照组、模型组、肾安冲剂小剂量组、肾安冲剂中剂量组、肾安冲剂大剂量组和泼尼松组,每组12只。连续给药8周,观察肾安冲剂对阿霉素肾病大鼠的24h尿蛋白、血清白蛋白、血清胆固醇、三酰甘油及肾组织病理形态学等方面的影响。结果：（1）与正常组比较,模型组24h尿蛋白定量、血脂水平明显升高,血清白蛋白水平明显降低（均P〈0.01）;（2）与模型组比较,各治疗组大鼠24h尿蛋白定量、血脂水平明显降低,血清白蛋白水平明显升高（均P〈0.01）;（3）肾安冲剂治疗组各指标与泼尼松组比较均有统计学差异（均P〈0.01）,说明肾安冲剂疗效优于泼尼松。结论：肾安冲剂具有降低尿蛋白、升高血清白蛋白水平,降低血脂以及减轻肾脏损害的作用。     

肾康片对阿霉素肾病大鼠的肾脏保护作用

目的:探讨肾康片对阿霉素肾病大鼠的肾脏保护作用及其作用机制.方法:经静脉注射阿霉素造成阿霉素大鼠肾病模型.设立阿霉素肾病大鼠模型组,肾康片高剂量治疗组,肾康片低剂量治疗组,苯那普利治疗组及正常对照组.6周后观察肾康片对大鼠24 h尿蛋白定量、肾功能、血脂及肾脏病理影响,取肾皮质匀浆测超氧化物歧化酶、丙二醛,应用免疫组化的方法测定肾组织标本纤维连接蛋白、层黏连蛋白、Ⅳ型胶原、转化生长因子-β1、白介素-1的表达.结果:肾康片可减少阿霉素肾病大鼠的尿蛋白排出量,明显降低甘油三酯,减少纤维连接蛋白、层黏连蛋白、Ⅳ型胶原、转化生长因子-β1、白介素-1的表达,显著增加超氧化物歧化酶、减少丙二醛,作用与苯那普利相似.结论:肾康片能减轻阿霉素肾病大鼠的肾脏损害,对肾脏具有保护作用.     

尿脱氧吡啶啉对评价肾病综合征患儿泼尼松治疗后骨吸收异常的价值及肾康灵的干预作用

目的：（1）通过观察肾病综合征（NS）患儿尿脱氧吡啶啉（DPD）排泄率的变化,探讨用尿脱氧吡啶啉来评价泼尼松治疗肾病综合征患儿骨吸收异常的价值。（2）观察肾病综合征患儿肾康灵治疗前后DPD排泄率的变化,探讨肾康灵治疗激素性骨质疏松的疗效。方法：（1）以30例NS患儿为研究对象,在足量泼尼松治疗前及治疗后6周分别留取尿标本检测尿DPD排泄率。（2）30例患儿在泼尼松足量治疗后6周随机分为治疗组、对照组。对照组继续足量泼尼松治疗,治疗组在对照组的基础上加用中药复方肾康灵冲剂口服治疗,2周后留取尿标本检测尿DPD排泄率。结果：泼尼松足量治疗6周后尿DPD排泄率明显高于激素治疗前（P〈0.01）。（2）泼尼松足量治疗8周后治疗组与对照组相比较,尿DPD排泄率明显降低,两者比较有统计学差异（P〈0.05）。结论：（1）泼尼松治疗肾病综合征的患儿尿DPD排泄增加,支持了激素可导致骨吸收增加的观点。（2）肾康灵能显著降低肾病综合征的患儿尿DPD的排泄,提示其治疗激素性骨质疏松有一定益处,其抗骨质疏松作用可能通过多个途径而实现。     

中药肾康灵干预频复发性肾病患儿与NF-κB关系的临床研究

目的：通过观察中药肾康灵干预治疗小儿频复发性肾病（FRNs）与核因子-κB（NF-κB）的关系，旨在阐明FRNS的发病机制及中药干预治疗的可能机制。方法：选取2003年6月-2006年3月的40例FRNS，采用简单随机法分成治疗组（A组）、西药对照组（B组）。对照组采用泼尼松长程疗法，雷公藤采用24周疗法，环磷酰胺采用口服8周或冲击疗法；治疗组加用肾康灵中药，日1剂，2次／d，疗程1年以上。另设20例为健康对照组（C组）。检测各组外周血中激活的NF-κB。结果用SPSS12．0软件系统进行统计学分析。结果：FRNS患儿外周血中激活的NF-κB均分剐显著高于健康对照组（P〉0．05）；治疗后A组和B组NF-κB活性与C组比较均无统计学差异（P〉0．05）；疗效比较A组和B组之间差异非常显著（P〈0．05）；A组在降低NF-κB活性方面明显优于B组（P〉0．05）。结论：（1）FRNS患儿外周血中激活的NF-κB明显升高，表明患儿免疫功能处于紊乱状态。（2）肾康灵＋西药组能显著降低外周血中激活的NF-κB，提示肾康灵＋西药组能有效改善FRNS患儿免疫功能紊乱状态。     

褪黑素对大鼠阿霉素肾病的干预作用

褪黑素（ＭＴ）是一种主要由松果腺分泌的神经内分泌激素，近年来，它的抗氧化清除自由基能力和神经内分泌免疫调节功能倍受关注［１］。但有关ＭＴ对阿霉素肾病（ＡＩＮ）干预作用的报道较少。我们在ＡＩＮ 和松果腺摘除（ＰＸ ）模型基础上，观察ＭＴ对ＡＩＮ大鼠血尿生化指标的影响，试图为临床肾小球疾病治疗提供新的可能性。一、材料与方法１ 动物和试剂：雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，体重１７０－２１０ ｇ，安徽医科大学动物实验中心提供．自由进食、饮水。ＭＴ为美国Ｓｉｇｍａ公司产品。阿霉素（ＡＤＲ），日本明治制药株式会社产品工实…     

中药肾康灵干预频复发性肾病患儿与NEI网络关系的临床研究

小儿频复发性肾病（frequent relapse nephropathy of children，FRNS）是小儿难治性肾病之一，临床治疗颇为棘手。我们采用中药肾康灵干预治疗，选用参与神经-内分泌-免疫网络系统（neuro-endocrine-immunenetwork，NED作用的NF-kB、TxB2、6-keto—PGF1α、皮质醇等重要指标为主要观察内容，寻找小儿FRNS中医辨证的客观指标，探讨FRNS的发病机制及中药肾康灵干预治疗的作用机制。     

中药肾康灵治疗小儿频复发性肾病与尿RBP、α1-MG和NAG酶关系的临床研究

目的：观察中药肾康灵干预治疗小儿频复发性肾病综合征对尿RBP、α1-MG和NAG酶的影响,探讨中医肾康灵干预治疗的作用机制。方法：选择符合FRNS诊断标准的患儿60例,随机分为两组,西药对照组（A组）30例、肾康灵＋西药治疗组（B组）30例。观察A、B两组在治疗前后尿RBP、α1-MG和NAG酶的变化及疗效。并选择30例健康儿童作为正常组。结果：治疗前A、B两组尿RBP、α1-MG和NAG酶比较无统计学差异（P均〉0．05）,而与正常组比较明显升高,有统计学差异（P均〈0．01）;治疗后A、B两组尿RBP、α1-MG和NAG酶水平与治疗前比较均有所降低,有统计学差异（P〈0．05或P〈0．01）,而B组比A组降低更为明显,A、B两组比较有统计学差异（P〈0．05）。结论：（1）FRNS患儿治疗前尿RBP、α1-MG和NAG酶均明显高于正常组,说明FRNS患儿存在肾小管间质损害的临床表现。（2）中药肾康灵干预治疗能明显降低FRNS患儿异常升高的尿RBP、α1-MG和NAG酶,从而改善患儿肾小管间质功能,提高临床疗效。     

应用SELDI-TOF-MS技术分析胆管恶性肿瘤患者外周血清蛋白的差异表达

目的 应用蛋白质组学技术分析胆管恶性肿瘤患者外周血清中差异表达的蛋白质,初步探讨其对胆管恶性肿瘤早期诊断的意义.方法 应用表面加强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,对58例胆管恶性肿瘤患者及58例对照者(38例健康体检者及20例胆囊结石患者)外周血清蛋白质进行检测,应用Ciphergen蛋白质芯片软件对蛋白质谱进行分析.结果 与对照组外周血清蛋白质谱相比,胆管恶性肿瘤患者外周血清中相对分子质量为5.900×103、9.080×103及11.863×103 的3个蛋白质点呈明显高表达(P<10-5); 相对分子质量为6.959×103、14.000×103、14.129×103、14.302×103、17.557×103、17.690×103及28.552×103的7个蛋白质点呈明显低表达(P<10-5),其中相对分子质量为11.863×103的蛋白质点在胆管恶性肿瘤组外周血的平均峰值约为对照组的8倍.有黄疸与无黄疸的胆管癌患者的外周血清中上述10个蛋白质点未见差异表达,但检测出另外3个差异表达的蛋白质点,其相对分子质量分别为7.255×103、12.364×103和15.873×103,并均在伴黄疸患者外周血清中呈高表达(P<10-5).相对分子质量为5.900×103的蛋白质点在Ⅱ期胆管癌患者的表达明显高于Ⅲ、Ⅳ期患者(P<10-5), 另9个蛋白质点在胆管癌不同临床分期中的表达差异均无统计学意义.结论 胆管恶性肿瘤患者外周血清蛋白质表达与对照组相比有明显变化,相对分子质量为11.863×103的蛋白质点具有作为胆管恶性肿瘤早期诊断的生物学标志物潜力.     

食管癌血清差异表达蛋白的研究

目的 探讨食管癌患者和健康人群蛋白表达的差异,筛选用于早期诊断的肿瘤标志物并建立诊断模型.方法 回顾性分析2008年1月至8月新疆医科大学第一附属医院收治的127例原发性食管癌患者(食管癌组)和63例健康体检者(健康对照组)的临床资料.采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,应用弱阳离子交换蛋白芯片检测和分析两组受试者的血清蛋白表达谱,筛选可以用于临床食管癌早期诊断新的肿瘤标志物,建立蛋白质指纹图诊断模型.采用秩和检验分析数据.结果 食管癌组与健康对照组血清蛋白质荷比(M/Z)峰值图谱明显不同.得到差异性较大的10个蛋白中,有6个在食管癌组呈高表达,M/Z为4488、5495、15964、3948、8154、8166;4个呈低表达,M/Z为8789、6682、8714、6650.建立由6个蛋白组成的蛋白质指纹图诊断模型,食管癌组患者中124例判定正确,3例误判;健康对照组患者中60例判定正确,3例误判,其准确度为96.8%(184/190),敏感度为97.6%(124/127),特异度为95.2%(60/63).结论 应用SELDI-TOF-MS技术筛选食管癌肿瘤标志物建立的蛋白质指纹图诊断模型灵敏度高、特异性强.     

运用表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱技术建立结直肠癌预测诊断模型

目的 寻找与结直肠癌相关的蛋白质并建立结直肠癌血清蛋白指纹图谱诊断预测模型.方法 随机选取结直肠癌病例36例(结直肠癌组)和疝或行胆囊择期手术的患者36例(对照组),术前静脉采血,采用弱阳离子交换蛋白质芯片(CM10),经表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)技术测定,建立结直肠癌的血清蛋白指纹图谱诊断预测模型;选取88例结直肠癌患者和44例正常对照进行盲法验证.结果 通过两组比较,得到5个差异蛋白峰,并以此建立诊断预测模型,其敏感性为100%,特异性为97.2%.盲法验证显示敏感性为71.6%,特异性为72.7%.其中质荷比为8908与13707的蛋白均存在于结直肠癌组和正常组的比较中,提示上述蛋白质与结直肠癌相关.结论 运用SELDI-TOF-MS技术建立的血清蛋白指纹图谱模型对诊断结直肠癌具有较高的敏感性与特异性.质荷比为8908与13707的蛋白可能成为结直肠癌的肿瘤标记物.