皮肤鳞状细胞癌中p16、pRb蛋白表达的临床病理研究

目的 探讨在皮肤鳞状细胞癌中p16、pRb蛋白表达与其临床病理特征的关系.方法 应用免疫组织化学S-P法检测42例皮肤鳞状细胞癌和10例正常皮肤组织中p16、pRb蛋白的表达,并结合其临床病理特征进行分析.结果 p16、pRb蛋白在正常皮肤和皮肤鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为90%、59.5%和0、45.2%,两者在皮肤鳞状细胞癌中的表达与正常皮肤比较差异均有统计学意义(P<0.05);高分化鳞癌中p16的表达显著高于低分化者(P<0.05),pRb的表达与之相反;皮肤鳞状细胞癌伴淋巴结转移者p16蛋白的阳性表达明显下调(P<0.05),pRb蛋白阳性表达明显升高(P<0.05).结论 p16、pRb蛋白的异常表达与皮肤鳞状细胞癌的发生、发展相关,两者的检测可作为判断皮肤鳞状细胞癌的恶性程度及预后的重要指标.     

p16基因甲基化及P16、Cyclin D1、pRb与皮肤鳞状细胞癌相关性研究

目的 探讨P16、CyclinD1和pRb蛋白在皮肤鳞状细胞癌（简称皮肤鳞癌）中的表达及他们的相互关系和意义；研究p16基因甲基化是否与原发性皮肤鳞癌的发生有关。方法 采用PCR为基础的限制性内切酶甲基化法及免疫组化S-P法检测40例原发性皮肤鳞癌组织中p16基因甲基化状态及P16、Cyclin D1和pRb蛋白的表达，并以10例正常皮肤组织作对照。结果 皮肤鳞癌组织P16蛋白iCyclin D1阳性表达率分别为37．5％和57．5％；P16蛋白表达与CyclinD1的表达呈显著负相关（r=-0．3162，P=0．008）。皮肤鳞癌中P16蛋白和pRb表达呈显著负相关（r=-0．4007，P〈0．05）。p16基因的甲基化阳性率为42．5％。2级皮肤鳞癌组织中P16蛋白及p16基因甲基化阳性表达率比1级鳞癌组织显著增高（P〈0．05），而Cyclin D1和pRb阳性率表达则显著降低（P〈0．05）。在有淋巴结转移组中P16蛋白及p16基因甲基化阳性率与元淋巴结转移组相比显著降低（P〈0．05），而Cyclin D1和pRb阳性率则显著增加（P〈0．05）。结论 在原发性皮肤鳞状细胞癌中存在P16蛋白低表达、Cyclin D1高表达的异常表达现象，两者的表达相互抑制，呈显著负相关；P16蛋白和pRb蛋白的表达呈负相关；p16基因甲基化与皮肤鳞癌病理分级、淋巴结转移之间有显著关系。提示p16基因甲基化在皮肤鳞癌的发生发展过程中起重要作用。     

HPV16E7、Cyclin D1和pRb的异常表达对喉癌的影响及其机制

目的:探讨人乳头状瘤病毒16E7蛋白(HPV16E7)、细胞周期调节蛋白D1(Cyclin D1)和视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)的异常表达对喉癌的影响及其机制。方法:取喉癌组织标本(喉癌组)、喉声带息肉组织标本(息肉组)和喉癌前病变组织标本(癌前组)各69例。采用过氧化物酶标记的链酶卵蛋白素染色免疫组织化学技术和Western Blot技术检测各组喉组织标本中HPV16E7、Cyclin D1和pRb的表达水平。结果:喉癌组HPV16E7和Cyclin D1阳性表达出现于细胞核,为大量黄褐色粗大颗粒,其阳性表达率分别为44.93%和52.17%,明显强于息肉组(分别为2.90%和8.70%)和癌前组(分别为10.14%和18.84%)(P均<0.01)。pRb的阳性表达发生于细胞核,为少而小的黄色颗粒,其阳性表达率为10.14%,显著小于息肉组的92.75%和癌前组的59.42%(P均<0.01)。癌前组HPV16E7和Cyclin D1阳性表达率较息肉组提高,pRb阳性表达率较息肉组明显下降(P均<0.005)。在喉癌肿瘤临床分期中,HPV16E7阳性表达率在Ⅰ-Ⅳ期中随着分期增加呈上升趋势,与临床Ⅲ期比较,HPV16E7在Ⅳ期的阳性表达率显著加重(P<0.025);Cyclin D1阳性表达率逐渐增多,pRb阳性表达率逐渐减少(P均<0.005)。在喉癌组织病理分级中,HPV16E7、Cyclin D1和pRb的阳性表达率随着分化程度减弱,HPV16E7和Cyclin D1阳性表达率分别为Ⅲ级>Ⅱ级>Ⅰ级,pRb阳性表达率为Ⅲ级<Ⅱ级<Ⅰ级(P均<0.005)。喉癌组中HPV16E7和Cyclin D1蛋白量均强烈增加,pRb蛋白定量显著减小;HPV16E7阳性表达率的增加与Cyclin D1阳性表达率增加呈显著的正相关(r=0.48,P<0.001),与pRb阳性表达率下降呈严重的负相关(r=-0.41,P<0.005);而Cyclin D1的阳性表达率增加与pRb阳性表达率下降也呈明显的负相关(r=-0.44,P<0.002)。结论:喉癌肿瘤的发生和发展与HPV严重感染宿主细胞造成HPV16E7过度表达,并刺激Cyclin D1恶性增加和pRb严重降低密切相关。通过对HPV16E7、Cyclin D1和pRb的检测有利于提高临床早期诊断和防治喉癌的发生和发展,对患者喉癌恶性程度和生存预后评判均具有重要的临床意义。     

肽基脯氨酰顺反异构酶1 和细胞周期蛋白D1 在食管鳞状细胞癌中的 表达

目的研究肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在食管鳞状细胞癌中的表达及意义。方法通过免疫组织化学SP法检测37例食管鳞状细胞癌标本癌组织及癌旁组织中Pin1与Cyclin D1蛋白的表达,分析各临床病理参数对食管鳞状细胞癌组织中Pin1及Cyclin D1表达的影响。结果 Pin1在癌旁正常组织中不表达或呈微弱的核表达,在癌组织中呈阳性表达;Cyclin D1在癌旁正常组织中不表达,在癌细胞的细胞质或细胞核内呈阳性或强阳性表达。有淋巴结转移者Pin1表达较未转移者高,差异有统计学意义(P<0.05),分化程度、年龄、性别及TNM分期等临床病理参数对Pin1的表达无影响(P>0.05)。分化程度高者Cyclin D1表达较低,分化程度低者Cyclin D1表达较高,差异有统计学意义(P<0.05),年龄、性别及肿瘤分期等临床病理参数对Cyclin D1的表达无明显影响(P>0.05)。结论 Pin1和Cyclin D1在食管鳞状细胞癌中的表达明显增高,二者相互作用调节细胞周期,促进食管鳞状细胞癌的发生。     

42例皮肤鳞状细胞癌的临床与病理分析

目的 探讨皮肤鳞状细胞癌(SCC)的临床、病理学特征、恶性程度及预后.方法 收集42例皮肤鳞状细胞癌,分析其临床和组织病理学特征,并通过免疫组化方法分析其p16、pRb蛋白的表达.结果 本病的典型皮损为不规则斑块或结节,中央可有溃疡或菜花状增生;组织病理以鳞状细胞向下增生,突破基底膜并侵入真皮或皮下组织为特征.p16蛋白阳性表达低于对照组(P＜0.05),pRb蛋白则高于对照组(P＜0.05).结论 皮肤鳞状细胞癌具有特殊的临床及组织病理特点,免疫组化有助于判断其发病、恶性程度及预后.     

食管鳞癌组织中细胞周期素B1和D1表达的意义

目的:探讨食管鳞癌组织中细胞周期素B1和D1(Cyclin B1, Cyclin D1) mRNA和蛋白的表达及其与食管鳞癌床生物学指标的关系. 方法:应用原位杂交法、免疫组化SP法对62例食管鳞癌组织(组织学Ⅰ级15例,Ⅱ级25例,Ⅲ级22例;有淋巴结转移20例,无淋巴结转移42例;肿瘤浸润深度:浸润至黏膜层、黏膜下层或浅肌层7例,深肌层14例,纤维膜41例)、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织进行Cyclin B1,D1 mRNA和蛋白的检测,分析其阳性表达与食管鳞癌患者临床病理因素的关系. 结果:Cyclin B1,D1的mRNA和蛋白在正常食管黏膜组织中不表达或低表达,在癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中高表达,三者阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05);食管鳞癌患者癌组织中CyclinB1,D1的mRNA和蛋白的表达与性别、年龄无关;与组织学分级、浸润深度及有无淋巴结转移有关(P<0.05). Cyclin B1,D1 mRNA与蛋白正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中的表达有高度的一致性. 结论:Cyclin B1,D1 mRNA和蛋白的高表达可促进食管鳞癌的发生与发展,在癌前病变期的鳞状上皮不典型增生组织中即出现高表达,是食管鳞癌发生过程中的早期事件.     

原发皮肤恶性黑色素瘤p16蛋白、pRb表达研究

目的:为探讨p16蛋白、pRb在恶黑中的作用.方法:以黑素细胞痔为对照,用免疫组化法检测了p16蛋白、pRb在恶黑中的表达.结果:发现恶黑中的p16蛋白阳性率(33.06%)显著低于黑素细胞痣(84.21%)(P＜0.05);伴淋巴结转移组阳性率(33.33%)显著低于无转移组(64.25%)(P＜0.05).pRb和p16蛋白在恶黑中的表达强度存在明显负相关关系.结论:p16蛋白表达缺失与恶黑及其转移有关,p16蛋白与pRb在恶黑中的负相关表明,恶黑发生机制涉及到周期表D1、CDK4、p16蛋白、pRb调节通路障碍.     

舌鳞癌组织中Cyclin D1的表达与临床病理相关性

目的: 探讨细胞周期素D1(Cyclin D1)在舌癌中的表达及临床病理相关性. 方法: 采用免疫组化ABC法检测42例舌鳞状细胞癌、19例良性肿瘤石蜡包埋标本的Cyclin D1表达. 结果: Cyclin D1在舌癌细胞核中呈阳性表达,阳性表达率55%,与组织学分级及淋巴结转移呈明显正相关(r=0.388, P<0.05). 生存分析资料显示Cyclin D1( )、(-)两组5 a相对复发危险度(RRR) u=1.959(P>0.05),Kaplan-Meier生存曲线示两组5 a累积无复发生存期(RFS)无显著差异(P>0.05). 结论: Cyclin D1在舌癌中异常表达,其表达可能与肿瘤分化及发展相关,Cyclin D1的表达与预后无关.     

食管鳞癌中NF-κB及相关因子的表达及其意义

目的:探讨核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB)及周期素D1(Cyclin D1)、C-Src基因、表皮生长因子受体(EGFR)在食管鳞癌中的变化特征及其生物学意义。方法:采用免疫组化S-P法检测食管鳞癌手术标本中NF-κB、Cyclin D1、C-Src、EGFR的蛋白表达情况并分析其特征。结果:NF-κB在正常上皮无表达,在癌组织中表达升高(P<0.01),但与食管癌的分化程度、浸润深度无明显关系(P>0.05),而与淋巴结转移有一定关系(P<0.01);Cyclin D1在正常鳞状上皮中有少量表达,在癌组织中高表达(P<0.05),表达强度与组织学分级及淋巴结转移均有一定关系(P<0.01);C-Src在正常上皮中有表达,在癌组织中表达增高(P<0.05),表达强度与分化程度、浸润深度、淋巴结转移均有明显关系(P<0.01);EGFR在正常上皮中有少量表达,在癌组织中高表达(P<0.01),且表达强度与分化程度及浸润深度、淋巴结转移亦均有一定关系(P<0.05~P<0.01)。在食管鳞癌中,NF-κB和Cyclin D1、C-Src、EGFR的蛋白表达均有相关关系(P<0.01)。结论:NF-κB可能参与食管鳞癌的发生及淋巴结转移,Cyclin D1、EGFR、C-Src可能参与食管鳞癌的发生及演进过程。NF-κB促进食管鳞癌发生、发展的分子机制与Cyclin D1、C-Src、EGFR的作用有关系。     

Cyclin D1及p16在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的:研究细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及p16基因在人非小细胞肺癌组织中的表达和临床意义。方法:以免疫组化SP法检测62例非小细胞肺癌组织中及20例肺良性病变组织中Cyclin D1及p16的表达。结果:Cyclin D1及p16在肺癌组织中均有较高的表达,其阳性率分别为62.9%和56.5%;在肺良性病变中未发现Cyclin D1的表达,p16阳性率为85.0%。Cyclin D1的表达与肿瘤的大小、淋巴结转移及临床分期无关(P>0.05);p16的表达与肿瘤的大小无关(P>0.05),与淋巴结转移及临床分期有关(P<0.005)。结论:Cyclin D1的过表达与肺癌的发生有关,可作为肺癌早期诊断指标之一,而与肺癌发展和预后无关;p16异常与肺癌发生、发展及预后有关。     

抗精子抗体和抗子宫内膜抗体与不孕及流产的关系

目的　探讨抗精子抗体（ＡｓＡｂ）与抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）在不孕、流产中的作用及二者关系,进一步 揭示不孕、流产的病因。方法　采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）同时检测３４５例不孕、流产妇女血清中的ＡｓＡｂ与 ＥＭＡｂ,按ＡｓＡｂ检测结果分阳性组和阴性组,比较两组ＥＭＡｂ阳性率的差异。结果　原发不孕及自然流产妇女中, ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率高达１６．６７％和１９．５１％,而ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率高达４３．６４％和４２．８６％,显著高于 ＡｓＡｂ（－）组（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。继发不孕妇女中ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率为１８．１８％,ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率 为３２．２％,二者无显著性差异（０．０１＞Ｐ＞０．０５）。结论原发不孕及自然流产妇女中因个体免疫反应差异使某些 人易对体内、外物质发生免疫反应而产生抗体,从而导致不孕或流产。     

亚硝基脲类和亚硝基硫脲类的理化性质及致突变能力

本题选择N,N′-二甲基亚硝基脲(DMNU),N,N′-二乙基亚硝基脲(DENU),及其类似物N,N′-二甲基亚硝基硫脲(DMNTU)、N,N′-二乙基亚硝基硫脲(DENTU)为代表,测定了这些化合物的水解反应速度、脂溶性(HPLC的logk′值)、水解产物和致突变能力。证明了硫脲的脂溶性大于脲的脂溶性。DMNTU对TA100菌株的致突变能力最强,其它较弱。     

气血与足月妊娠分娩关系的探讨

论述足月妊娠分娩的发动和维持依靠气的推动、温煦、气化、固摄功能和血的营养、濡润功能。顺利分娩既要气血充足，还要气顺血和。临床研究结果表明调补气血，是促进产程，预防难产的重要手段。实验研究结果阐明调补气血中药加强产力、促进产程主要是从改善产妇全身情况，提高机体抗应激、抗疲劳、耐缺氧能力，即所谓使产妇气血充足调和，充分发挥气血在分娩过程中的生理作用。     

水疗联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响

目的探讨新生儿游泳联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响。方法将经阴道顺产分娩的正常新生儿100例随机分为两组，观察组（水疗联合抚触组）50例，对照组（单纯沫浴组）50例。①测定两组10日、28日的体重、身长、上臂围；②观察记录胎便转黄时间，测定皿清胆红素；③记录24h睡眠时间。结果两组新生儿10日、28日体重、身长、上臂同增长有显著差异（P〈0．05），两组新生儿5日时，胎便转黄时间及黄疸指数比较均有显著性差异（P〈0．01），两组睡眠时间比较有统计学意义（P〈0．05），两组并发症比较无统计学意义（P〉0．05）。结论新生儿水疗联合抚触可促进新生儿的生长发育，能加速胎粪的早排出，减轻生理性黄疸程度，有效地降低新生儿高胆红素血症的发病率，提高睡眠质量。