以X区为靶位的siRNAs抑制HBsAg、HBeAg及HBVDNA分泌的体外实验

目的研究以X区为靶位的si RNA对HBV感染细胞模型HBs Ag、HBe Ag及HBV DNA分泌的抑制作用。方法针对HBV X区设计并化学合成4条si RNAs,观察在不同浓度及不同时间点对Hep G2.2.15细胞分泌HBs Ag、HBe Ag及HBV DNA的抑制作用。结果si RNA-1 si RNA-2和si RNA-4在20、40、80 nmo L/L浓度时,对Hep G2.2.15细胞HBs Ag、HBe Ag的分泌有明显的抑制作用(P<0.01),并随着浓度的增大,抑制作用有增强趋势;40 nmo L/L浓度的三种si RNA在24、48、72 h时间点,发现随着培养时间的延长,对HBs Ag和HBe Ag分泌的抑制作用逐渐增强(P<0.01),72 h抑制作用达到高峰;72 h时三种浓度的si RNA1、si RNA2、si RNA4对HBV DNA分泌有明显的抑制作用(P<0.05)。结论在体外实验中,化学合成以X区为靶位的si RNAs能有效地抑制HBs Ag、HBe Ag及HBV DNA的分泌。     

基于Egr-1调控IL-8表达研究强肝胶囊对大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用

目的从抑制早期生长反应因子-1(Egr-1)介导的白细胞介素8(IL-8)表达的角度探讨强肝胶囊对大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和强肝胶囊组,每组各10只。模型组和强肝胶囊组喂食高脂饲料,建立高脂血症非酒精性脂肪肝模型,造模同时强肝胶囊组大鼠ig强肝胶囊内容物0.53 mg/g,给药体积为1 m L/100g体质量,模型组ig等量生理盐水。每周给药6 d,持续8周。治疗结束取动物肝脏,氧化酶法测定肝组织中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法检测Egr-1和IL-8 m RNA表达;Western blotting法测定Egr-1蛋白表达;ELISA法测定肝组织中IL-8水平。将大鼠肝脏Hep G2细胞分别进行0.25 mmol/L油酸处理、转染Egr-1 si RNAs并油酸处理、转染pc DNA3.1-Egr-1阳性表达质粒并油酸处理后,RT-q PCR法检测细胞中Egr-1和IL-8 m RNA表达,WB法检测Egr-1蛋白表达,ELISA法检测培养液上清中IL-8水平。结果经过8周治疗,强肝胶囊组TG和、TC水平明显下降(P0.01);Egr-1 m RNA、Egr-1蛋白表达和IL-8 m RNA、IL-8水平均明显下降(P0.01)。Egr-1 si RNA#1、si RNA#2能明显降低Egr-1表达水平,采用si RNA干扰Egr-1基因,并用油酸处理Hep G2细胞后,细胞内和培养液上清中IL-8水平较对照细胞显著降低(P0.01)。转染Egr-1阳性表达质粒导致Egr-1表达量上升(P0.01),IL-8表达也同步升高(P0.01)。结论 Egr-1可正向调节IL-8表达。强肝胶囊通过抑制Egr-1介导的IL-8表达,达到改善非酒精性脂肪肝的作用。     

RNA干扰PPAR-α基因表达对HepG2细胞部分脂代谢信号及炎症因子IL-6的影响

目的研究RNA干扰抑制PPAR-α基因表达对Hep G2部分脂代谢信号及炎症因子IL-6影响。方法在脂质体lipofectamineTM2000介导下将PPAR-αsi RNA瞬时转入人肝细胞癌Hep G2细胞,用RT-PCR方法检测转染效率及转染后LPL m RNA、IL-6m RNA、CPT-1 m RNA的表达变化。结果成功转染PPAR-αsi RNA后,与空白对照组比,转染试剂组Hep G2细胞LPL m RNA表达增高（0.002605±0.000213 vs 0.003920±0.000324,P〈0.05）、CPT-1m RNA表达稍降低（2.25831±0.06151 vs 2.06625±0.05091）,差异无统计学意义,IL-6m RNA表达显著增高（0.01604±0.00118 vs 0.02458±0.001718,P〈0.01）。结论在人肝细胞癌Hep G2细胞中抑制PPAR-α基因表达可促进LPL m RNA、IL-6 m RNA表达,促进脂蛋白酯酶合成而诱发炎症,但对线粒体氧化途径的关键酶CPT-1表达无明显影响。     

纳米雄黄的抗小鼠原位乳腺癌作用及其机制

目的：研究纳米雄黄体内体外对小鼠乳腺癌细胞（4T1）的增殖抑制作用及其机制。方法：以萤火虫荧光素酶（Luciferase,Luc）基因标记小鼠4T1乳腺癌（4T1-Luc）细胞,应用噻唑蓝（MTT）比色法和生物发光法（Bioluminescentmethod,BLM）检测细胞增殖活性;细胞形态学及AnnexinV／PI双标记法观察细胞凋亡。4T1-Luc细胞接种雌性BALB／c小鼠乳腺脂肪垫制作原位乳腺癌模型,纳米雄黄（4和8mg·kg-1·d-1）灌胃治疗20d,小动物活体成像系统连续动态观察小鼠乳腺肿瘤生长变化,治疗末期处死动物、剥离肿瘤块称重,并制片HE染色和CD34标记观测肿瘤组织内细胞核分裂像、新生血管形成及坏死改变。结果：MTT法和BLM法检测显示1．56～50gg／mL纳米雄黄体外显著抑制4T1-Luc细胞的增殖（P〈0．05）;形态学观察和AnnexinV／PI染色显示细胞呈现典型的凋亡改变。体内纳米雄黄呈时间和剂量依赖性地抑制小鼠4T1-Luc原位乳腺癌的生长（P〈0．05）;肿瘤组织制片观察,经纳米雄黄治疗后肿瘤组织内细胞核分裂像和微小血管显著减少（P〈0．01）,肿瘤组织内部呈显著的坏死改变。结论：纳米雄黄体外抑制小鼠乳腺癌4TI细胞增殖和诱导细胞凋亡,并主要通过减低原位肿瘤组织内新生血管的形成而导致肿瘤组织坏死而发挥抗乳腺癌作用。     

喉罩通气全身麻醉应用于乳腺癌根治术的临床效果观察

<正>乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤,原位乳腺癌并不致命。但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性,细胞之间连接松散,容易脱落。癌细胞一旦脱落,游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身,形成转移,危及生命。临床上治疗乳腺癌的最佳方法就是手术切除,但手术过程中的麻醉方法直接影响着手术的效果及患者的恢复程度。文献~([1])报道,喉罩(laryngeal mask airway,LMA)是临床麻醉气道管理上的突破,具有放置简便、无须喉镜暴露声门、刺激小等优点。     

苯丁酸钠单用与氟尿嘧啶或顺铂联用对喉癌Hep-2细胞株的影响

目的:研究苯丁酸钠(sodiumphenylbu-tyrate,PB)对体外喉癌Hep-2细胞株生长和分化的影响,及其能否增强氟尿嘧啶、顺铂对喉癌细胞的细胞毒性。方法:采用流式细胞仪检测PB作用后喉癌细胞的细胞周期,应用四氮唑蓝法检测PB单独及联用氟尿嘧啶或顺铂时,喉癌细胞的存活能力。结果:经PB作用4d后,细胞周期出现G1-S期阻滞和剂量依赖性生长抑制作用;PB的半数抑制浓度(IC50)是4.21mmol·L-1。1mmol·L-1PB与氟尿嘧啶或顺铂联用3d后,2药的IC50分别由(11.4±s1.7)mg·L-1和(1.60±0.05)mg·L-1下降至(8.2±0.8)mg·L-1和(1.36±0.11)mg·L-1P<0.05。结论:PB能诱导体外喉癌细胞发生分化和生长抑制作用,增强氟尿嘧啶、顺铂对喉癌细胞株的细胞毒性作用。     

MDRI的siRNA干扰口腔Tca8ll3/DDP细胞表达的研究

目的探讨小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)对口腔鳞癌多药耐药基因mdr1(MDRI)及其表达产物P-糖蛋白(permeability-glyco-protein,P-gp)的干扰作用。方法体外构建针对MDR1的小干扰RNA,将其转染至人舌癌耐药细胞系Tca8113/DDP,采用RT-PCR法检测转染前后MDR1 m RNA的表达;采用免疫细胞化学技术比较转染前后P-gp的表达;采用MTT法检测转染前后肿瘤耐药细胞对顺铂的敏感性。结果 Tca8113/DDP细胞经MDR1-si RNA转染后48 h的转染率达最高,为71.3%;转染后mdr1 m RNA表达较对照组显著降低,降低率为68.32%,转染48 h后P-gp的表达较对照组明显降低;si RNA可显著提高Tca8113/DDP细胞对DDP的敏感性,逆转其耐药性,耐药倍数为2.05。结论 si RNA可以明显干扰口腔鳞癌MDR1及相应蛋白P-gp的表达。     

多种癌细胞Nesprin 1蛋白的表达

目的通过比较Nesprin 1在不同癌细胞中的表达程度,为Nesprin 1与多种癌细胞之间的关系做初步探讨。方法采用Western blotting方法检测Nesprin 1在人宫颈癌细胞(Hela)、人肺癌细胞(H-125)、人乳腺癌细胞(HCC-1937)、人膀胱癌细胞(5637)、人肝癌细胞(Hep G2)、人胃癌细胞(BGC-823)、人结肠癌细胞(HCT 116)、人食管癌细胞(Eca-109)、小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(Raw 2647)等癌细胞当中的表达。结果各癌细胞组GAPDH均有表达,Nesprin 1各组表达量不同,从强到弱顺序为HCC-1937H-125HCT116=Eca-109RAW2647BGC-823Hep G2Hela5637,其中人膀胱癌细胞5637的表达不明显。结论 Nesprin 1蛋白可在多种癌细胞中表达,膀胱癌细胞中表达不明显。     

Tob与细胞周期蛋白D1在喉癌细胞增殖过程中调控关系的研究

目的探讨Tob与细胞周期蛋白(cyclin)D1的调控关系及其对喉癌细胞增殖的影响。方法荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测74例喉癌及相应癌旁正常组织中Tob与cyclinD1的表达;应用U0126处理Hep2细胞,检测处理后细胞中磷酸化的Tob蛋白和Tob蛋白总量的改变,以及cyclinD1的表达量,并用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞毒性指数;RNA干扰(RNAi)抑制Hep2细胞中Tob蛋白的表达后,检测cyclinD1的表达改变,MTT法测定细胞毒性指数。结果Tob和cyclinD1分别在喉癌组织中表达下降和增加,且二者呈负相关;U0126处理后,磷酸化的Tob减少,Tob蛋白总量无明显改变,cyclinD1表达降低,且细胞增殖下降;siR-NA-Tob转染后可使磷酸化的Tob和Tob总量减少,而cyclinD1表达增加,细胞增殖亦增强。结论Tob和cy-clinD1都与喉癌的发生相关。Tob接受细胞外信号调节激酶(ERK1)的调控,并调节下游cyclinD1基因的表达,影响喉癌细胞的增殖能力,发挥其肿瘤抑制基因的作用。     

表面修饰的LPC纳米粒介导的siRNA肿瘤靶向递送(英文)

本研究构建了能够靶向肿瘤的新型纳米粒(脂质体-鱼精蛋白-硫酸软骨素纳米粒,LPC-NP)。该纳米粒粒径约90 nm,zata电位约+35 mV。采用后插法对LPC纳米粒进行DSPE-PEG_(2000)或DSPE-PEG_(2000)-T7修饰。T7是与转铁蛋白功能类似的七肽,能够靶向转铁蛋白受体过度表达的乳腺癌细胞MCF-7。PEG修饰可显著降低血清对LPC纳米粒的聚集作用,T7修饰的纳米粒显著提高siRNA的细胞摄取和基因沉默效率。体外细胞毒实验表明抗EGFR siRNA显著抑制MCF-7细胞生长。实验结果表明经T7肽修饰的LPC纳米粒有望成为RNA干扰肿瘤治疗的递送载体。     

子宫中隔切除术后预防粘连方法探讨

目的 探讨子宫中隔并不孕患者宫腔镜术后不同处理方法预防宫腔粘连的效果.方法 55例子宫中隔并不孕患者行腹腔镜监护下宫腔镜子宫中隔切除术(TCRS),术后针对不同患者采用不同术后处理措施,包括宫腔放置与不放IUD,是否进行人工周期治疗,部分患者术后使用GnRH-a类药物治疗术后第1、3个月行宫腔镜检查随访,宫内放置IUD的患者;于术后第3个月取环.结果 54例患者术后进行宫腔镜检查随访,其中40例分别于术后第1、3个月完成了术后2次宫腔镜检查,另14例只完成一次检查.宫腔术后放环与否对术后宫腔形态影响无差异(P>0.05),术后使用人工周期治疗患者较未使用者子宫内膜厚,此两者术后第3个月宫腔镜检查发现宫底创面均已有内膜覆盖.使用GnRH-a类药物患者术后官腔形态满意.结论 TCRS术后宫腔放置IUD无助于预防术后粘连的发生;术后人工周期治疗应更个体化并有针对性的使用GnRH-a类药物治疗.术后及时进行宫腔镜检查随访可防止术后宫底新粘连的形成.     

10例狂犬病误诊原因分析

狂犬病近年来发病率有逐年增加的趋势,近十二年来,我们共遇见狂大病２３例,其中１０例被误诊为其它疾病,现就其误诊原因进行分析如下。１临床资料１．１ 一般资料：男８例,女２例;年龄最大７８岁,最小４岁。发病季节为３月～１１月。首诊科室,儿科３例、内科３例、转院３例、急诊科１例。１．２ 临床表现：发热７例,恐风５例,恐水６例,怕光３例,流涎１０例,胸闷、气促、呼吸困难４例,烦躁不安１０例,多汗７例,恐惧６例,肢体麻木４例,抽搐４例,恶心、呕吐２例,昏厥１例。所有病例发病至死亡时间为２天～６天,死亡原因为…     

欧洲药典适用性认证介绍

目的介绍欧洲药典适用性认证程序,为国内药品监管机构和原料药生产企业提供信息,促进我国原料药生产企业的国际化。方法通过查阅调研欧盟相关药品法规和与EDQM同行面对面的交流,详细了解欧洲药典适用性认证的组织机构和具体程序。结果与结论欧洲药典适用性认证程序在对原料药的质量控制有重要作用,加强了药典的监管力度,进一步保证了原料药的质量、安全性和有效性。     

新疆维吾尔自治区基层医院平均住院日调查分析

目的 通过对新疆维吾尔自治区14个县乡级医疗机构住院患者平均住院日及影响因素进行分析,为县乡级医疗机构进一步提高医疗管理质量提供依据.方法 将2009-2010年1504例县乡级医院住院患者平均住院天数,按性别、年龄、院别、付费方式、疾病分类进行描述性统计和秩和检验分析.结果 不同性别间及院别间平均住院日差异均有统计学意义(均P＜0.05),男性平均住院日为10.39 d,女性为8.69d,乡级医院为9.27d,县级医院为9.50 d.不同年龄间平均住院日差异有统计学意义(P＜0.05),小于15岁组、15 ～24岁组、25～44岁组、45 ～65岁组、大干65岁组平均住院日分别为8.10 d、7.66d、8.83 d、10.26 d和11.33 d.自费患者平均住院日为8.39 d,新农合组为9.10 d,商业保险组10.17 d,社会基本医疗保险患者则为11.08 d.不同疾病分类间平均住院日差异明显,妊娠类平均住院日最短,为6.73 d,而肿瘤患者则为14.26 d.结论 不同性别、不同年龄段、不同疾病分类及不同付费方式间平均住院日存在差异,县级医疗机构和乡级医疗机构住院患者平均住院日也存在差异.     

住院患者精神用药情况调查分析

目的：了解目前住院精神患者的药物使用情况。方法：采用一日法调查西安市精神卫生中心403例住院精神患者诊断和治疗情况，并与上海市精神卫生中心2004年调查结果相比较。结果：①传统精神药物使用显著减少，新型精神药物使用占据首位；②抗精神病药物使用趋向小剂量化；③本组联用丙戊酸盐类药物显著增多；④我院精神药物使用情况与上海精神卫生中心比较有显著差异。结论：近年来精神药物使用情况已发生了显著变化，与新型精神药物疗效好，副作用少，患者依从性高有关。     

不同方法治疗慢性宫颈炎的疗效分析

目的慢性宫颈炎是妇科最常见的疾病之一,可引起盆腔脏器炎症,并且与宫颈癌的发生关系密切。本文诣在探讨不同方法在慢性宫颈炎中的疗效。方法回顾性分析新乡市中心医院收治的210例宫颈炎患者,采用药物保妇康栓、聚焦超声治疗及宫腔镜下宫颈电切术的临床效果进行统计分析。结果宫颈电切术治疗有效率为97.9%,明显高于另外两组,差异有统计学意义。结论宫腔镜下宫颈电切术治愈慢性宫颈炎,并且切除宫颈移行带,减少宫颈癌发生。     

复发性耳廓假性囊肿的治疗

目的 探讨不同方法对复发性假性耳廓囊肿的治疗效果.方法 对2008年5月至2012年2月在我科就诊的58例复发性假性耳廓囊肿分成2组,穿刺抽液+冷冻+加压包扎组(19例),手术切除囊肿前壁软骨+对穿缝合组(39例),随访3个月到1年,观察2组治愈率、复发率,有效率、并发症等情况.结果 对照组1次治愈后痊愈5例,复发14例,治愈率为26.3％,复发率为73.7％,有效率为78.9％,其中耳廓增厚6例,1例并发化脓性软骨膜炎.观察组治愈38例,复发1例,经过1次穿刺后治愈,治愈率为97.4％,复发率为2.6％,有效率为100.0％.所有患者无耳廓变形、增厚,无化脓性耳廓软骨膜炎的并发症.结论 囊肿前壁软骨切除+对穿缝合是治疗复发性假性耳廓囊肿的高效、首选办法,值得推广.