沧源县1995～1997年疟疾监测情况分析

目的了解沧源县1995～1997年疟疾流行情况。方法采用发热病人血检、居民原虫调查、媒介监测等方法。结果原发病例和疫点高度分散,发热病人血检阳性率呈逐年上升趋势,1995～1997年分别为0.48％,1.41％和1.80％,恶性疟原虫比例分别为31.82％,81.58％和50.55％。结论沧源县的疟疾流行虽已控制在一个较低的水平,但近年来却呈逐年上升趋势,故应加强监测和疫点处理     

贵州省凯里等12个基本消灭疟疾县（市）的监测结果

目的：评价本地区基本消灭疟疾９年来的监测结果。方法：采用传统的疟疾度量调查各项指标。结果：（１）年带虫发病率波动在０．００５６‰至０．０００３３‰间；（２）居民发热病人血检阳性率平均为０．７３，居民普查原虫率平均为０．８２；（３）流动人口发热病人血检阳性率及原虫率分别为４１３．１和７．０６；（４）在９９４个疫点中，活动性疫点占１０．７％。结论：输入病例是疟疾病例的主要来源（９３．４％），仍需继续加强流动人口的管理。     

灭疟后期以流动人口管理为监测重点的探讨

德州地区位于鲁北平原中部,北纬36°～38°之间,属非稳定性低疟区。经过大力防治,1987年起消灭了本地区原发病例。1987～1990年对灭疟后期以流动人口管理为重点进行了疟疾监测。一、方法 (一)发热病人血检疟原虫采取被动和主动侦查方法,于疟疾流行季节,以县防疫站中心镜检站为主和有镜检条件的各级医疗卫生单位,对无外出史的当地居民和流动人口中的四热病人(初诊疟疾、疑似疟疾、感冒和不明热),取血涂片镜检疟原虫.确诊病例,给予正规治疗,同时进行疫点处理。 (二)疟疾血清抗体检测于疟疾流行季节,对德     

贵州省残存嗜人按蚊地区疟疾发病流行病学特点分析

目的：分析贵州省残存嗜人按蚊地区疟疾发病特点及流行规律，为制定疟疾防治及监测方案提供科学依据。方法：收集分布区1999-2001年疟疾发病及病例侦察情况，用流行病学方法分析疟疾病人及疫点类型，疫点平均病例数等流行病学特点。结果：嗜人按蚊疟区发病率仍超过1‰，发热病人血检阳性率为0.25%，流动人群血检阳性率为1.31%，当地感染疟疾病例占病例总数的84.59%，输入性病例占15.41％，内源性疫点占87.23%，外源性疫点占12.77%，平均疫点病例数为1.30例。结论：嗜人按蚊疟区是现阶段主要疟疾高发流行区，发现病人的主要手段仍是对当地发热病人的血检，以本地病例和内源性疫点为主，发病比较散发，呈点状分布。     

套式PCR扩增特定SSUrDNA基因片段检测四川疟原虫感染的研究

目的：用套式PCR系统诊断、鉴别人体疟原虫感染。方法：以疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸（SSUrDNA）基因为靶基因,选用1对疟原属特异性引物,建立套式PCR扩增系统并用于四川省疟疾病人血样的检测。结果：从间日疟原虫、恶性疟原虫和三日疟原虫感染血样中分别扩增出104bp,102bp和115bp预测大小的特定扩增带。61份血样检测结果与镜检的间日疟阳性符合率为100％,并查出镜检漏诊的2例P.v.和P.m.的混合感染及1例P.v.、P.F.和P.m.的混合感染病例,结论本系统特异、灵敏,稳定、简便,可在诊断疟疾的同时判定混合感染,故对疟疾的诊断,大规模流行病学研究及疫情监控有实际应用价值。     

间日疟原虫PCR检测试剂盒用于疟疾监测的现场评价

为评价间日疟原虫PCR检测试剂盒在疟疾现场监测中的效果,采用该试剂盒和常规镜检法对安徽省疟疾流行区的940份血样进行了检测,结果显示,该PCR检测试剂盒对234例在校中学生的人群带虫调查的阳性检出例数（5例）高于常规镜检（2例）,所需检测时间和费用均低于常规镜检。同时,采用两法对519例门诊发热病人血片（镜检初检阳性16例,阴性503例）进行复核,镜检复核发现漏诊2例,PCR复核发现漏诊6例,所需复核时间和费用也均低于常规镜检。采用两法对187例门诊“三热”病人进行被动病例检测,PCR检出阳性例数略高于镜检,但单位检测时间和费用也高于镜检。现场评价结果提示,该PCR检测试剂盒可替代镜检用于疟疾监测中大样本检测,且具有敏感、特异、高效和价廉的特点。     

2010-2016年溧阳市消除疟疾监测效果评价

目的 评价溧阳市消除疟疾监测效果,为制定消除疟疾防控策略和措施提供依据。方法 收集2010-2016年溧阳市疟疾疫情、发热病人血检和疟疾病例个案流行病学调查表等监测资料,采用描述性流行病学方法进行分析。结果 2010-2016年共报告疟疾病例67例,血检发热病人39 196 人次,镜检检出阳性65例,阳性率为0.17%。另有2例镜检阴性病例为出现发热症状后自行服用抗疟药,镜检未查见疟原虫,但疟疾快速诊断试剂盒（RDTs）检测显示阳性。67例疟疾病例中,恶性疟49例、卵形疟13例、间日疟5例。67例病例均为境外输入性疟疾病例,来自非洲的病例占94.03%（63/67）。67例病例中,男性占97.01%（65/67）,30 ~ 49岁占73.13%（49/67）,农民占病例数的80.60%（54/67）。全市10个镇均有病例分布,发病时间无明显季节特征。病例报告及时率、血片复核及时率、规范治疗率、流行病学个案调查率、疫点调查与处置率均达100%。主动病例侦查18 076人,未查见疟原虫阳性携带者。采用诱蚊灯法和人饵半通宵诱捕法进行蚊媒监测,分别捕获按蚊187只和78只,均为中华按蚊。2012-2016年溧阳市疾病预防控制中心门诊采用镜检与RDTs检测,共检测88人次,镜检查出疟原虫阳性35人次,其中恶性疟28人次、卵形疟7人次,恶性疟和卵形疟镜检阳性率差异无统计学意义（校正[χ2] = 0.05,P > 0.05）;RDTs检测阳性为34例,其中恶性疟14例,恶性疟或混合感染其他3种疟疾17例,恶性疟以外3种疟疾单一或混合感染3例,RDTs检测阳性率差异有统计学意义（校正[χ2] = 13.75,P < 0.05）。结论 溧阳市境外输入性疟疾病例仍有再传播风险,今后还需加强疟疾监测工作,强化传染源管理,巩固消除疟疾成果。     

宜宾市翠屏区17年疟疾血检监测

目的 总结疟疾防治血检监测经验。方法 连续17年对全城区四热病人进行血检。结果 累计检查343224人，发热病人疟原虫血检阳性3568人，阳性率1.04%；疫点周围人群疟原虫血检阳性9人，阳性率0.17%；抽查基层血检站血片，漏检率0.03%，误检率5.77%。结论“门诊四热病人血检”对及早诊断，控制疟疾流行有很大作用。     

复式PCR检测间日疟原虫和恶性疟原虫的现场应用

目的探讨复式PCR方法在疟疾诊断中的现场应用价值。方法根据疟原虫18 S rRNA基因序列,合成疟原虫属特异性上游引物和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物,优化PCR反应体系,建立在同一PCR反应体系中同时检测间日疟原虫、恶性疟原虫基因组特异性DNA片段的疟疾诊断方法,并评价其现场应用价值。结果间日疟原虫和恶性疟原虫基因组DNA经过复式PCR后,分别扩增出1 451 bp和833 bp的特异性条带,而伯氏疟原虫、食蟹猴疟原虫及健康人血样均无扩增带出现,用该反应体系可检出原虫血症为1.1×10-6和5.6×10-7的间日疟原虫和恶性疟原虫感染。与镜检法相比,复式PCR检测119份现场样本,112份与镜检结果相同,阳性率为54%,漏诊率为0.8%,误诊率为0,而镜检法依次分别为53%、1.7%和3.4%。结论复式PCR方法检测疟原虫具有简便、快速、特异、敏感等优点,在疑似病例的鉴别诊断和分子流行病学调查中具有良好的应用价值。     

套式PCR扩增特定SSU rRNA基因片段检测四川疟原虫感染的研究

目的用套式PCR系统诊断、鉴别人体疟原虫感染。方法以疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸（SSUrRNA）基因为靶基因,选用1对疟原虫属特异性引物和4对种特异性引物,建立套式PCR扩增系统并用于四川省疟疾病人血样的检测。结果从间日疟原虫、恶性疟原虫和三日疟原虫感染血样中分别扩增出104bp、102bp和115bp预期大小的特定扩增带。61份血样检测结果与镜检的间日疟阳性符合率为100％。并查出镜检漏诊的2例P.v.和P.m.的混合感染及1例P.v.、P.f.和P.m.的混合感染病例。结论本系统特异、灵敏、稳定、简便,可在诊断疟疾的同时判定混合感染,故对疟疾的诊断、大规模流行病学研究及疫情监控有实际应用价值。     

多重PCR种特异性检测恶性疟原虫和间日疟原虫方法的建立

目的建立恶性疟原虫和间日疟原虫种特异性检测的多蕈PCR方法,用于疟疾的检测和诊断.方法根据疟原虫18S核糖体小亚基ssRNA的基因序列设计合成8对11条引物,通过对恶性疟、间日疟患者及健康对照者血样的DNA进行扩增,选择出敏感性和特异性最佳的引物用于建立多重PCR方法,并用梯度变化的方法分别对引物浓度、复性温度、延伸温度和循环次数等反应参数进行比较分析,优化PCR反应条件.利用优化后的多重PCR埘采自云南和上海的139份疟疾患者血样和32份非疟疾患者血样进行检测,以镜检方法为金标准,分析多重PCR方法检测患者血样的敏感性和特异性.结果从8对11条引物中优选出2对共3条引物用于建立多重PCR.利用这3条引物进行多重PCR,一次反应即可完成对恶性疟原虫和间日疟原虫的种特异性鉴定.对疟疾和非疟疾患者血样检测结果显示,该方法检测患者血样的敏感性为97.8%,特异性为100%.结论多重PCR方法敏感、特异、可进行批量检测,适用于对人群的疟疾监测和疑似疟疾病例的诊断,并能鉴定恶性疟原虫和间日疟原虫虫种.     

套式/多重PCR方法应用于疟疾诊断与监测的初步评价

目的 与镜检法比较评价标签引物-套式/多重PCR（UT-PCR）在疟疾监测中的应用价值。 方法 在海南、云南省恶性疟和间日疟混合流行区和广西疟疾控制区的疟疾监测中,采集初诊为疟疾或疑似疟疾的发热患者的血片与滤纸血样400份,在双盲条件下比较镜检法与UT-PCR的初检结果,对结果不一致的血片再次镜检复查,同时对其滤纸血样重复PCR 2～3次;评估UT-PCR与镜检法的敏感性和特异性。 结果 400例发热患者血样中,镜检法初检检出疟原虫阳性234例,其中恶性疟125例,间日疟109例;UT-PCR检出疟原虫阳性235例,其中恶性疟124例,间日疟109例;恶性疟和间日疟混合感染2例。两法初检结果一致的血样占92.5%（370/400）,其中阴性154例,阳性216例（间日疟117例,恶性疟99例）。复查25份初检结果不一致的血样,包括镜检阴性PCR阳性11例,镜检阳性PCR阴性10例,镜检为恶性疟PCR为间日疟3例,镜检为间日疟而PCR为混合感染1例,其中15份与UT-PCR的初检结果一致,7份“假阳性”原因不明,仅3份为PCR的假阴性。根据复查结果评估PCR的敏感性为99.6%,特异性为98.8%。 结论 采用更敏感的UT?鄄PCR疟疾诊断方法有助于解决疟疾诊断与鉴别诊断中的疑难问题,提高疟疾监测的质量和效率。     

复式PCR检测恶性疟原虫与间日疟原虫的研究

目的： 建立在同一次扩增中即可鉴别患者感染的疟原虫虫种的复式ＰＣＲ检测方法。方法： 根据恶性疟原虫（Ｐ．ｆ．）中度重复基因序列ｐＢＲＫ１－１４ 和间日疟原虫（Ｐ．ｖ．）线粒体细胞色素Ｃ氧化酶基因ＣＯＩＩＩ合成引物,采用经优化的ＰＣＲ反应体系, 对疟原虫ＤＮＡ模板进行扩增。结果： Ｐ．ｆ．与Ｐ．ｖ．分别被扩增出２０６ 和３７０ ｂｐ 大小的ＤＮＡ片段,与人白细胞ＤＮＡ 无交叉;用该反应体系至少可检测出原虫血症为５×１０－ ７的Ｐ．ｆ．感染和１．０２×１０－ ６ Ｐ．ｖ．感染; 自云南疟疾流行区采集的７８３份滤纸干血滴样本中, 复式ＰＣＲ法阳性检出率为８５．８％ , 误诊率为０, 漏诊率为０．１％ , 而镜检法依次分别为８４．９％ 、３．１％ 和１．０％ , 两者符合率为９５．８％ 。结论： 本复式ＰＣＲ检测疟原虫较镜检敏感、特异, 适用于我国恶性疟与间日疟混合流行区的疟疾诊断、流行病学调查、药物的疗效考核和献血员的筛选等。     

疟疾复合PCR检测系统的建立

目的：建立简易、快速的复合ＰＣＲ系统,用于检测间日疟、恶性疟及混合感染。方法：以疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因为靶片段,设计疟原虫属特异性上游引物Ｓ１和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物Ｓ２和Ｓ３,建立双温度点复合ＰＣＲ扩增系统并用于临床血样的检测。结果：从间日疟原虫和恶性疟原虫感染血样中分别扩增出７０５ｂｐ和５７５ｂｐ特定扩增带,而食蟹猴疟原虫、诺氏疟原虫及健康人血样均未见扩增带。检测原虫水平达２－１０虫／μｌ全血。限制性内切酶酶切分析证实扩增产物为目的片段。检测１０４份镜检确诊疟疾患者血样,其中８１份与镜检结果相符,并查出镜检未发现的１７份混合感染和２份虫种鉴别失误的恶性疟。结论：本系统敏感性高,特异性强,操作简便,可在一次扩增中同时检出间日疟和恶性疟两种原虫。     

单克隆抗体－ELISA技术检测间日疟感染的现场研究

对１１２例发热病人血样同时进行镜检和用ＭｃＡｂ－ＭｃＡｂＥＬＩＳＡ夹心法检测间日疟抗原，发热病人血片分别由基层镜检员和省级专业人员镜检，检出间日疟阳性率分别为３０．３６％和４３．７５％，ＥＬＩＳＡ法检测阳性率为４２．８６％，其敏感性、特异性均在９５％以上。具有采样方便、样本可成批操作、结果客观等特点，适用于基层开展灭疟后期疟疾传染源监测。     

湖北省丘陵区嗜人按蚊传疟阈值的研究

目的　调查嗜人按蚊传疟作用 ,为嗜人按蚊分布区媒介监测及制定合理的防治措施提供依据。　方法　在随州市曾都区严家畈村选择 9个自然村应用寄生虫学和昆虫学方法进行调查。估算嗜人按蚊的媒介能量和临界叮人率。　结果　 2 0 0 1年 7～ 8月居民带虫发病率 0 .6 5 %。小学生带虫率 0 .5 1% ,荧光抗体阳性率 5 .0 5 %。在观察区搜捕到嗜人、中华、微小 3种按蚊。嗜人按蚊密度及组成在人房内占优势 ,平均叮人率 0 .9892 /人·夜 ,吸人血指数为 0 .5 0 ,媒介能量为0 .94 4 8,是中华按蚊的 6 .5 2倍 ,嗜人按蚊临界叮人率为 0 .2 82 3,而实际叮人率是它的 3.5倍。　结论　嗜人按蚊是当地传播疟疾的主要媒介 ,提示临界叮人率在媒介监测中具有重要的指导意义。     

Natural Plasmodium infections in Brazilian wild monkeys: reservoirs for human infections?

Four hundred and forty-eight samples of total blood from wild monkeys living in areas where human autochthonous malaria cases have been reported were screened for the presence of Plasmodium using microscopy and PCR analysis. Samples came from the following distinct ecological areas of Brazil: Atlantic forest (N=140), semideciduous Atlantic forest (N=257) and Cerrado (a savannah-like habitat) (N=51). Thick and thin blood smears of each specimen were examined and Plasmodium infection was screened by multiplex polymerase chain reaction (multiplex PCR). The frequency of Plasmodium infections detected by PCR in Alouatta guariba clamitans in the S?o Paulo Atlantic forest was 11.3% or 8/71 (5.6% for Plasmodium malariae and 5.6% for Plasmodium vivax) and one specimen was positive for Plasmodium falciparum (1.4%); Callithrix sp. (N=30) and Cebus apella (N=39) specimens were negative by PCR tests. Microscopy analysis was negative for all specimens from the Atlantic forest. The positivity rate for Alouatta caraya from semideciduous Atlantic forest was 6.8% (16/235) in the PCR tests (5.5, 0.8 and 0.4% for P. malariae, P. falciparum and P. vivax, respectively), while C. apella specimens were negative. Parasitological examination of the samples using thick smears revealed Plasmodium sp. infections in only seven specimens, which had few parasites (3.0%). Monkeys from the Cerrado (a savannah-like habitat) (42 specimens of A. caraya, 5 of Callithrix jacchus and 4 of C. apella) were negative in both tests. The parasitological prevalence of P. vivax and P. malariae in wild monkeys from Atlantic forest and semideciduous Atlantic forest and the finding of a positive result for P. falciparum in Alouatta from both types of forest support the hypothesis that monkeys belonging to this genus could be a potential reservoir. Furthermore, these findings raise the question of the relationship between simian and autochthonous human malaria in extra-Amazonian regions.     

标签引物-套式/多重PCR检测恶性疟原虫和间日疟原虫的研究

目的 建立简便、灵敏、低本底、可同时检测恶性疟原虫和间日疟原虫的套式/多重聚合酶链反应（PCR）系统。 方法 应用标签引物扩增技术、Primer Premier 5.0软件、美国生物信息中心(NCBI-BLAST)网络资源和矩阵试验法优化套式/多重PCR，检测疟疾患者滤纸血样并与镜检结果进行比较。 结果 新建立的标签引物套式/多重PCR，检测模拟现场滤纸血样的敏感性为恶性疟原虫1～2个虫/μl血，间日疟原虫5～10个虫/μl血。检测71份现场采集的镜检疟原虫阳性滤纸血样（恶性疟24份和间日疟47份）的结果与镜检结果的符合率分别为87.5%和100%。 结论 通过标签引物扩增技术优化的套式/多重PCR系统，适用于检测现场采集的滤纸血样，其检出低原虫血症的敏感性和鉴定虫种的准确性均优于镜检法，是很有潜力的疟疾诊断技术。