慢性乙型肝炎患者肝组织乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的定量检测

目的 探讨肝组织乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(HBV CccDNA)水平与病毒复制、肝组织损伤的关系.方法 应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测46例慢性乙型肝炎患者肝组织HBV CccDNA水平,同时检测肝组织和血清中HBV DNA、肝细胞乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎核心抗原(HBcAg)表达及肝功能.结果 将肝组织中HBVCccDNA定量水平分为低(＜104copies/mg)、中(104～106copies/mg)、高(＞106 copies/mg)3组,3组中HBsAg阳性表达差异无统计学意义,但105～106copies/mg和＞107copies/mg组HBcAg阳性表达高于＜104 copies/mg组,分别为105～106copies/mg组HBcAg表达14例(63.6%)和＞107copies/mg组7例(77.8%)vs＜104copies/mg组2例(13.3%)(P＜0.01);HBeAg阳性组肝组织中HBV CccDNA和肝组织总HBV DNA均显著高于HBeAg阴性组,分别为肝组织中HBV CccDNAHBeAg阳性组(8.72±1.94)log10 copies/mg vs HBeAg阴性组(6.54±1.56)log10 copies/mg;肝组织中HBV DNAHBeAg阳性组(7.45±1.82)1og10 copies/mg vs HBeAg阴性组(5.27±1.48)log10 copies/mg(均P＜0.01);肝组织中HBV CccDNA与肝组织总HBV DNA、血清HBV DNA呈正相关(均P＜0.05);而与肝组织炎症程度、肝纤维化程度、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)无相关性.结论 肝组织中HBV CccDNA定量能准确反映病毒复制水平,但不能将其视为肝组织损伤的标志.     

HBeAg阴性和HBeAg阳性的慢性乙肝临床特点分析

目的：比较HBeAg阴性与HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者临床特点的异同。方法：对900例慢性乙型肝炎患者进行调查,分析HBeAg阴性与HBeAg阳性两组患者临床特点的差异。结果：两组年龄、病程、肝功能、HBV DNA定量、肝组织病理炎症程度（G）均有差异;但家族史、甲胎蛋白（AFP）、肝组织病理纤维化程度（S）、纤维化指标无统计学差异。结论：HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者年龄较大、病程较长,但是HBeAg阳性组HBV DNA含量更高,肝脏炎症活动重。     

171例HBeAg阳性和阴性慢性乙型肝炎患者肝脏组织学的对比分析

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)HBeAg阳性和HBeAg阴性2种病原学状态下慢性乙型肝炎患者肝组织学的变化.方法 对76例HBeAg阳性和95例阴性慢性乙型肝炎患者行肝穿刺活体组织病理检查.采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测HBsAg和HBeAg;采用荧光定量PCR仪检测HBV DNA,按肝组织炎症、纤维化程度,比较HBeAg阳性和阴性的慢性乙型肝炎不同血清HBV DNA水平的分布.结果 76例HBeAg阳性和95例HBeAg阴性慢性乙型肝炎肝脏炎症活动度≥G2者分别为71例(93.42%)和86例(90.52%),2组比较差异无统计学意义(P>0.05),而肝脏炎症程度为G4者,分别为20例(26.32%)和4例(4.21%),2组比较差异有统计学意义(P<0.05).在肝组织纤维化病变程度上,HBeAg阳性和阴性慢性乙型肝炎患者比较差异无统计学意义(P>0.05); HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者重度炎症发生率高于HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者(P<0.05).HBeAg阴性(HBV DNA水平≥10(5)copies·mL(-1)慢性乙型肝炎患者,肝组织纤维化严重度高于HBeAg阳性慢性乙型肝炎与HBeAg阴性(HBV DNA水平<10(5)copies·mL(-1)慢性乙型肝炎患者,差异有统计学意义(P<0.05).结论 HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者重度炎症发生率较HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者高,HBeAg阴性(HBV DNA水平)10(5)copies·mL(-1))的慢性乙型肝炎患者重度纤维化或肝硬变发生率较HBeAg阳性慢性乙型肝炎和HBeAg阴性(HBV DNA水平<10(5)copies·mL(-1))慢性乙型肝炎患者高.     

DNA芯片检测肝组织及血清中乙型肝炎病毒DNA的临床研究

目的：研究DNA芯片检测乙型肝炎和肝硬化患者肝组织及血清中乙型肝炎病毒（HBV）DNA的应用价值。方法：用点样仪将聚合酶链反应（PCR）扩增的HBV DNA探针制成基因芯片。对15例慢性乙型肝炎病人的血清和肝活检组织，99例乙型肝炎后肝硬化肝组织，分别用基因芯片、原位分子杂交、免疫组织化学和雅培试剂检测HBV DNA、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)、乙型肝炎表面抗原（HBsAg)和乙型肝炎e抗原（HBeAg)。结果：用基因芯片对15份HBsAg,HBeAg阳性的乙型肝炎患者血清进行检测，HBV DNA均阳性，阳性率符合率为100％；15份肝活检组织标本，免疫组化法检测HBcAg阳性15例，原位分子杂交法和基因芯片检测HBV DNA均阳性14例，阳性率93％。99份肝炎后肝硬化患者肝组织标本，HBcAg阳性67份，HBV DNA阳性53份，基因芯片检测HBV DNA阳性46份，阳性率分别为69％、88％。32例HBcAg、HBV DNA阳性的肝组织中，基因芯片检测HBV DNA均为阴性。结论：肝炎基因诊断芯片可检测肝组织及血清中HBV DNA，诊断准确率高，假阳性率低。     

慢性乙型肝炎患者肝细胞内HBsAg、HBcAg的表达与肝组织病理、血清HBV DNA定量关系

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者肝细胞内HBsAg、HBcAg的表达与肝组织病理及血清HBV DNA定量、肝组织HBV DNA定量之间的关系。方法对188例CHB患者进行肝组织穿刺活检,采用免疫组化技术观察肝细胞内HBsAg、HBcAg的表达,采用HE染色及免疫组化染色。光镜观察肝炎活动度及纤维化程度,同时测定其肝组织及血清中HBV DNA含量。结果在CHB患者肝组织内HBsAg和HBcAg阳性表达率分别为95.7%和77.1%。HBsAg表达方式主要为胞浆型(98.3%);HBcAg表达方式为浆膜型和胞核型,分别为62.1%和37.9%,浆膜型组炎症活动度分级和纤维化分型均高于胞核型组(P<0.05);浆膜型组血清和肝组织的HBV DNA含量均显著高于胞核型组,二者比较差异有统计学意义(χ2=8.214,P=0.042;χ2=11.250,P=0.010)。结论在CHB患者肝组织免疫损伤发生的免疫应答中,HBcAg的表达方式与病毒的复制有关,与肝组织炎症、纤维化损伤有直接关系。肝组织中HBcAg的表达结合HBV DNA载量作为抗病毒治疗指标更为可靠。     

慢性乙型肝炎血清HBcAg与肝细胞内HBsAg、HBcAg表达的关系及临床意义

【目的】探讨慢性乙型肝炎患者血清HBcAg与肝细胞内HBsAg、HBcAg表达的关系及临床意义。【方法】血清中HBcAg检测方法系RIA法。同时行肝组织活检，对肝组织进行炎症活动度分级（G）和纤维化程度分期（S），并采用免疫组织化学技术观察肝细胞内HBsAg、HBcAg表达。【结果】437例患者血清HBcAg阳性率为86．72％（379／437），肝细胞内HBsAg和HBcAg阳性表达率分别为93．82％（410／437）和65．45％（286／437）。血清HBcAg／抗-HBc（-／＋）分别与HBcAg／抗-HBc（＋／＋）和HBcAg／抗-HBc（-／-）组比较，肝细胞内HBcAg阳性表达率分别为52％（26／50）、66．5％（252／379）、100％（8／8），经比较差异有显著性。HBcAg／抗-HBc（＋／＋）、HBcAg／抗-HBc（-／＋）、HBcAg／抗-HBc（-／-）组肝细胞内HBsAg阳性表达率分别为94．2％（357／379）、90％（45／50）和100％（8／8）。在G1、G2，G3和G4组中血清HBcAg阳性率分别为75．4％（52／69），83．2％（119／143）、91．3％（136／149）和94．7％（357／379），G1、G2分别与G3、G4组比较差异有显著性（P〈0．05-0．005）。在S1、S2，S3和S4组中血清HBcAg阳性率分别为76．2％、87．3％、93．6％和90．0％，S1与S2、S3、S4组比较差异有显著性（P〈0．025-0．005）。【结论】结果提示，HBcAg／抗-HBc（-／＋）组肝细胞内HBsAg、HBcAg表达阳性率低。随着HBcAg阳性率的增加，肝脏的炎症和纤维化程度均加重。血清中HBcAg与肝细胞内HBsAg、HBcAg的表达，与肝脏的炎症和纤维化程度相关，可作为抗病毒治疗期间观察血清转换的一个指标。     

乙型肝炎血清学标志物与HBV DNA的相关性分析

目的探讨乙型肝炎HBV DNA与乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)之间的相关性。方法将400例血清标本采用荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)检测HBV DNA,并同时采用ELISA法检测HBV-M,按照不同的HBV-M模式分组进行分析。结果 131例HBeAg阳性标本中HBV DNA阳性率为100.0%,与HBeAg阴性标本的阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01);HBsAg阳性标本和HBsAg阴性标本比较,HBV DNA检测结果差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HBV DNA检测在各种模式的HBV-M阳性血清中检出率相差较大,HBeAg和HBsAg阳性者HBV DNA阳性率较高。说明仅仅依靠HBV-M进行早期诊断以及判断患者是否具有传染性是不够的,同时检测HBV DNA和HBV-M有助于乙型肝炎的早期诊断、疗效观察和预后判断。     

血清HBsAg和HBV DNA对慢性乙型肝炎肝组织病理状态的判别评价

目的构建基于血清HBsAg水平、HBV DNA载量、HBsAg/HBV DNA比值判别慢性乙型肝炎肝组织不同病理学分级和分期的Fisher判别函数,评价Fisher判别函数判别肝组织不同病理学分级和分期的效能。方法 472例经肝组织活检的慢性乙型肝炎患者入选本研究,其中HBeAg阳性279例,HBeAg阴性193例。血清HBsAg采用Abbott Architect I2000及其配套试剂检测,血清HBV DNA采用实时荧光定量PCR检测。统计分析采用SPSS 13.0软件。结果 HBeAg阳性患者血清HBsAg、HBV DNA与病理学分级和分期呈显著负相关（P〈0.05）;血清HBsAg/HBV DNA与病理学分级呈显著负相关（P〈0.01）,与病理学分期无显著相关性（P〉0.05）。HBeAg阴性患者血清HBsAg与病理学分级和分期均无显著相关性（P〉0.05）,血清HBV DNA、HBsAg/HBV DNA分别与病理学分级和分期呈显著正相关和负相关（P〈0.01）。根据Bayes逐步判别分析,HBeAg阳性和阴性患者符合判别不同病理学分级的模型纳入自变量标准的指标分别只有血清HBsAg和HBsAg/HBV DNA,符合判别不同病理学分期的模型纳入自变量标准的指标分别有血清HBsAg、HBV DNA和HBV DNA。判别HBeAg阳性患者不同病理学分级的Fisher判别函数判别G1、G2、G3的一致率分别为5.8%、51.1%、59.1%,判别HBeAg阴性患者不同病理学分级的Fisher判别函数判别G1、G2、G3的一致率分别为95.5%、0.0%、5.7%;判别HBeAg阳性患者不同病理学分期的Fisher判别函数判别S1、S2、S3、S4的一致率分别为36.4%、34.9%、21.6%、57.9%,判别HBeAg阴性患者不同病理学分期的Fisher判别函数判别S1、S2、S3、S4的一致率分别为86.7%、29.4%、0.0%、0.0%。结论基于血清HBsAg和基于血清HBsAg、HBV DNA的Fisher判别函数分别对HBeAg阳性患者肝组织病理学分级G3和分期S4有重要的判别价值;基于HBsAg/HBV DNA比值和基于血清HBV DNA的Fisher判别函数对HBeAg阴性患者肝组织病理学分级G1和分期S1有重要的判别价值。     

HBV血清标志物少见模式标本HBV DNA荧光定量检测结果分析

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物少见模式与HBV DNA含量的关系.方法 检测77例乙型肝炎患者(HBV)血清标志物及HBV DNA含量.结果 对77例乙型肝炎患者HBV血清标志物分析得出8种少见血清标志物模式,其中HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性的D模式最为常见,HBeAg阳性模式HBV DNA阳性率及含量与HBeAg阴性模式比较,差异有统计学意义(P＜0.01),血清HBV DNA与HBeAg具有明显相关性(r=0.722),HBV DNA总阳性率为59.74%.结论 只有将二者有机结合才能准确掌握HBV复制和人体对其免疫状态,才能科学地指导临床诊治乙型肝炎.     

慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA定量检测的临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA（HBV cccDNA）的临床意义。方法选取经肝组织病理学诊断的慢性乙型肝炎患者57例,其中乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性37例,HBeAg阴性20例;肝组织炎症轻度33例,肝组织炎症中度24例。采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）同时定量检测其血清HBVDNA和cccDNA。结果HBeAg阳性组血清HBV cccDNA对数值和阳性率分别高于阴性组,8.1±1.3vs6.5±1.9,73.0%vs30.0%（均P〈0.01）。肝组织炎症轻度组（G1～G2）血清HBVcccDNA对数值低于中度组（G3）,7.1±0.4vs8.5±0.4（P〈0.01）。血清cccDNA与丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶呈正相关（r=0.612、0.632,均P〈0.05）。结论血清HBVcccDNA为病毒复制的标志物,与肝组织细胞损伤相关。     

慢性乙型肝炎肝组织ICAM-1、HBsAg、HBcAg的表达及分析

目的探讨ICAM-1、HBsAg、HBcAg在慢性乙型肝炎肝组织中的表达及其在发病机制中的意义.方法免疫组化SABC法检测慢性乙型肝炎肝组织中ICAM-1、HBsAg、HBcAg的表达.结果在慢性乙肝中,随着炎症活动度的增高,ICAM-1表达增强,HBcAg表达减弱,HBsAg表达由胞浆显色为主逐渐转为胞膜显色为主.结论肝细胞ICAM-1、HBcAg的表达在慢性乙肝的炎症反应中起重要作用.肝细胞中HBsAg的表达在一定程度上反映了病毒的复制活动.     

单纯 HBV 感染和 HBV HDV 重叠感染者血清标志物的比较

目的：通过比较单纯乙型肝炎病毒（HBV）和乙丁型肝炎病毒（HBV HDV）重叠感染的患者血清中 ALT、HBV DNA及 HBV 血清学标志（HBVM）等的异同,了解 HBV HDV 重叠感染特点,初步探讨 HDV 的致病机理。方法对95例 HBV HDV 重叠感染的患者生物化学指标、肝炎病毒标志物等作统计分析,以100例单纯 HBV 感染患者作为对照。结果在95例重叠感染者中,慢性乙型肝炎发生率最高,占66．32％,肝硬化次之。按 HBV DNA 载量分类,两者差异无统计学意义（P ＞0．05）,重叠感染组 ALT 异常率与 HBV DNA 呈正相关（r ＝0．90,P ＜0．05）。重叠感染组以 HBeAg 阴性模式为主（P ＜0．05）,按HBsAg＞250 IU/mL 统计,差异无统计学意义（P ＞0．05）;按 HBsAg＞250 IU/mL 且 HBeAg ＞1 S/CO 统计时,单纯 HBV 组高于重叠感染组（P ＜0．05）。HBcAb-IgM 阳性率在重叠感染组中明显高于单纯 HBV 感染（P ＜0．05）。结论乙、丁型肝炎病毒重叠感染在慢性 HBV 中的发生率高。随着 HBV 病毒 DNA 数量的增加,肝功能的异常率也增高,HDV 感染能抑制 HBeAg 表达,重叠感染组中 HBcAb-IgM 阳性率高,可能与慢性乙型肝炎病情加重反复有关。     

慢性乙肝病毒携带者血清HBeAg及HBV-DNA与肝组织病理改变的关系

目的了解慢性乙型肝炎病毒携带者肝组织病理改变特征,并分析血清HBeAg及HBV-DNA定量与肝组织病理改变的关系。方法选取临床诊断为慢性乙型肝炎病毒携带者228例,行肝穿刺病理检查、肝功能、血清HBV-DNA及乙肝血清学标志物检测。结果 228例患者中病理符合病毒携带者49例(21.5%),肝硬化7例(3.1%),慢性乙型肝炎轻度136例(59.6%),中度28例(12.3%),重度7例(3.1%),重型1例(0.4%)。炎症分级G≥2者43例(18.8%);纤维化分期S≥2者49例(21.5%)。HBeAg阴性组病理炎症分级及纤维化分期均明显重于阳性组(P值均小于0.05)。HBV-DNA低载量组纤维化分期重于高载量组,而两组间肝组织炎症分级无统计学意义。结论多数慢性乙型肝炎病毒携带者有不同程度病理变化,血清HBeAg、HBV-DNA均不能准确反映肝脏损伤情况,对此类患者制定治疗方案时应考虑肝组织病理检查结果。     

血清HBVDNA定量与肝组织病理的相关性研究

目的明确慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者血清HBV DNA定量与肝组织炎症活动度及肝纤维化分期之间的关系。方法 CHB患者223例分成HBeAg阴性和阳性两组,应用PCR检测血清HBV DNA,同时行肝组织病理检查明确肝组织炎症活动度和肝纤维化分期。结果 (1)HBeAg阳性组不同肝组织炎症活动度分级之间的HBVDNA无明显的差别(P0.05),而且二者无明显相关性(rs=-0.073,P0.05);不同肝纤维化分期之间的HBVDNA也无明显的差别(P0.05),而且二者也无相关性(rs=-0.113,P0.05)。(2)HBeAg阴性组不同肝组织炎症活动度分级之间的HBVDNA有明显的差别(P0.05),而且二者呈正相关(rs=0.327,P0.01);不同肝纤维化分期之间的HBVDNA也有明显的差别(P0.05),而且二者也呈正相关(rs=0.314,P0.01);随着肝组织炎症分级和肝纤维化分期的增加,HB-VDNA进行性增高。结论 HBeAg阴性CHB患者的血清HBV DNA定量与肝组织炎症活动度及肝纤维化分期具有良好的一致性;HBeAg阳性CHB患者的HBV DNA定量不能反映肝组织病理情况。     

乙型肝炎病毒 PreS1抗原及抗体检测应用价值分析

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）前S1（PreS1）抗原及抗体检测的临床应用价值。方法于2013年3～11月,随机选择具有不同乙型病毒性肝炎（简称乙肝）两对半检测结果的患者120例进行PreS1抗原及抗体检测,分析PreS1抗原及抗体检测结果与两对半检测结果的关系。结果大三阳及小三阳患者 PreS1抗原阳性检出率为89％和7％,乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝核心抗体（HBcAb）阳性患者阳性检出率为14％,单纯 HBsAg阳性患者阳性检出率为5％。PreS1抗原与 HBsAg、乙肝 e抗原和 HBcAb具有一定的相关性。结论两对半联合PreS1抗原、抗体检测能够更灵敏、准确地反映乙肝患者的病情和预后,在HBV感染早期诊断方面也具有一定的临床应用价值。     

HBV DNA与其五项检测指标关系及意义

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）标志物定量检测在慢性乙型肝炎诊治中的临床意义。方法选择住院慢性乙型肝炎病人70例,应用电化学发光法测定入院时第一份血清HBV相关抗原、抗体的含量,应用聚合酶链反应法测定HBV DNA含量,同时测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平。结果慢性乙型肝炎病人HBV DNA与HBsAg和HBeAb呈负相关关系（r=-0．494、-0．536,P〈0．01）,与HBeAg呈正相关关系（r=0．586,P〈0．01）;HBeAg阳性组HBV DNA与HBsAg和HBeAb呈负相关关系（r=-0．555、-0．568,P〈0．01）,与HBeAg和HBcAb呈正相关关系（r=0．608、0．569,P〈0．01）;HBeAg阴性组HBV DNA与HBV抗原抗体指标不存在相关关系（P〉0．05）。慢性乙型肝炎病人ALT与HBV DNA及HBV抗原抗体指标均不存在相关关系（P〉0．05）。结论HBeAg、HBcAb、HBsAg定量检测是反映HBV复制的指标之一,HBsAg变化可能与HBV的生物学行为有关,无证据支持以乙型肝炎标志物来判断肝功能受损的程度。     

乙型肝炎病毒标志物及其DNA相关性及联合检测临床价值

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）血清免疫标志物（HBV M）和HBV DNA含量的相关性及两种指标联合检测的临床应用。方法酶联免疫吸附试验检测HBV M;荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测HBV DNA含量。结果乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性的标本HBV DNA阳性率高,分别为：Ⅰ组[HBsAg、HBeAg和乙型肝炎核心抗体（抗-HBc）阳性],HBV DNA阳性率98.9%（181/183）;Ⅳ组（HBsAg和HBeAg阳性）,HBV DNA阳性率96.3%（26/27）;Ⅶ组[HBsAg、HBeAg、乙型肝炎e抗体（抗-HBe）和抗-HBc阳性],HBV DNA阳性率100.0%（2/2）;HBsAg阳性、HBeAg阴性,HBV DNA阳性率也较高,为Ⅱ组（HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性）60.4%（58/96）;Ⅲ组（HBsAg、抗-HBc阳性）50%（10/20）;HBeAg、HBsAg阴性有一定的HBVDNA阳性率,但阳性率低,分别为：Ⅴ组（抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性）13.3%（2/15）;Ⅵ组（抗-HBs、抗-HBc阳性）8.3%（1/12）;Ⅷ组（抗-HBs阳性）0（0/26）;Ⅸ组（HBV M全阴性）6.7%（1/15）。结论血清HBV DNA水平与HBV M表现模式有关,与HBsAg,HBeAg有良好的相关性,而HBV M阴性的患者也可能有HBV DNA阳性,因此HBV M和HBV DNA联合检测,可有效提高乙型肝炎的检出率,为临床提供HBV感染、复制及传染性判断以及指导治疗的实验室依据。     

乙型肝炎病毒在孕妇早期妊娠绒毛细胞中感染状态的研究

目的:探讨乙型肝炎病毒在孕妇早期妊娠绒毛细胞中的感染状态。方法:50例自愿行人工流产术的早期妊娠妇女,根据血清HBV表面标志物检测结果分为两组:实验组(乙型肝炎病毒携带组)20例和对照组(乙型肝炎感染标志均阴性组)30例。采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素过氧化物酶复合物(SABC)法检测两组孕妇的绒毛细胞血清HBsAg、HBcAg;荧光定量PCR法检测HBV-DNA拷贝数。结果:实验组HBV-DNA阳性16例,阴性4例。HBsAg和HBcAg均阳性5例,HBsAg和HBeAg均阳性4例;对照组HBV-DNA均阴性,HBsAg和HBcAg均阴性。结论:乙型肝炎病毒可感染早期妊娠绒毛细胞。