红细胞保存研究进展

随着输血医学的发展，安全、合理、有效地用血越来越受到重视，血液的保存是关键的一环。血液的保存包括红细胞保存、血小板保存、白细胞保存。红细胞的保存方法主要有4℃低温保存、-80℃或-196℃深低温保存，新近兴起的冰冻干燥保存较前两种方法有明显的优势，制品可以室温保存，易于水化，重量大大减轻，便于运输。目前，冰冻保存红细胞已用于临床，冰冻干燥保存正在研究中。本文综述红细胞的保存研究进展。     

深低温长期保存血管组织

临床实践中自体静脉移植是修复血管缺损的常用方法 ,但存在来源有限 ,增加患者额外损伤 ,延长手术时间等弊端。随着血管外科的发展 ,已远远不能满足临床的需要。因此血管移植的发展 ,必须有赖于血管保存技术的革新 ,迄今已经采用的血管保存方法 ,有的保存期短 ,不能随时满足临床需要。有的虽然使血管抗原性降低 ,但其生物学活性丧失 ,移植后通畅率不高 ,如冻干和采用各种化学方法保存 ,而深低温保存血管 ,不仅保存期可长达数月甚至数年 ,而且保存材料质量优良 ,细胞活性接近新鲜血管 ,用于同种异体血管移植术后通畅率与自体血管相仿 ,采用这…     

角膜接触镜引起角膜上皮病临床特点及护理

随着近视人数的增多,隐性眼镜的普及,角膜上皮病有逐年上升的趋势,本院处于文化区,近年来角膜接触镜引起角膜上皮病的就诊率约占眼科门诊的1/6,了解角膜上皮病的病因、临床特征及护理措施,对治疗角膜上皮病具有重要的意义.1病因     

受体血清保存后的兔角膜行角膜移植术的实验研究

目的评价受体血清保存7 d的兔角膜行角膜移植术后植片的内皮细胞功能。方法30只新西兰大白兔随机分为2组：A组（对照组）15只和B组（实验组）15只。以传统湿房保存1 d的兔角膜作为A组供体;以受体血清保存7 d的兔角膜作为B组供体,对2组新西兰大白兔行角膜移植术。裂隙灯观察2组术后第3天,第1、8周角膜植片（大体形态）情况。2组术后第8周取角膜植片行扫描电镜观察超微结构及锥虫蓝-茜素红检测角膜内皮细胞活性;角膜厚度仪测量角膜厚度及图像分析系统计算内皮细胞密度和细胞面积。结果A、B 2组术后第8周眼部充血消退,植片透明、清亮,未见排斥反应。A组细胞密度、细胞面积与B组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）,A组角膜厚度与B组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论受体血清有维护角膜内皮细胞结构和功能的作用。     

胬肉切除联合自体结膜瓣移植术后使用角膜绷带镜对角膜上皮愈合的影响

【目的】探讨胬肉切除联合自体结膜瓣移植术后使用角膜绷带镜对角膜上皮愈合的影响。【方法】选取2017年1月至2018年10月本院眼科收治的原发性翼状胬肉患者60例(80眼),随机分为观察组和对照组各30例。对照组患者给予胬肉切除+自体结膜瓣移植+羊膜移植治疗,观察组患者给予胬肉切除+自体结膜瓣移植+角膜绷带镜治疗。比较两组患者术后临床疗效,并对患者术后舒适度评分进行比较,记录两组患者术后2 h、术后1 d和术后1周视觉模拟评分(VAS),并比较两组患者手术前后角膜表面规则指数、不对称指数、角膜散光值变化情况。【结果】观察组患者术后治疗有效率明显高于对照组(P<0.05);舒适度评分显著优于对照组(P<0.05);术后2 h、术后1 d和术后1周VAS评分均显著低于对照组(P<0.05);术后角膜表面规则指数、不对称指数、角膜散光值显著低于对照组(P<0.05)。【结论】胬肉切除联合自体结膜瓣移植术后使用角膜绷带镜治疗可促进患者术后恢复,提高患者舒适度,减轻患者疼痛,促进角膜创面愈合,值得临床进一步推广。     

血小板保存技术及其研究进展

血小板极其脆弱，在外周血循环中寿命仅为8～10d，离体后易发生变形和破坏，影响输后体内存活率，如何尽量地保护血小板的活力、提高存活率及延长贮存期限，对于血小板输注意义很大。多年来人们一直致力于延长血小板保存期的研究，取得了一定的成果，笔者现就血小板保存技术及其研究进展作一综述。     

自体角膜缘移植治疗单眼化学伤后角膜上皮愈合不良的护理

治疗化学伤后角膜上皮愈合不良是我们科从１９９６年５月至１９９６年１１月采用的自体角膜缘移植手术共１１例（１１只眼）。自体角膜缘移植术的成功与否及术后效果的巩固与术后护理的好坏有密切的关系，术后护理的重点在于尽可能减少对新生角膜上皮的摩擦和碰撞。本组１１例病例，术后随访２个月应用荧光素染色裂隙灯检查证实角膜上皮完全修复，且无并发症发生，愈合率达１００％。     

新鲜羊膜及几种保存羊膜移植治疗角膜碱烧伤

目的:近年来羊膜移植成为治疗角膜碱烧伤较为有效的手段之一,但其生物学基础尚不完全清楚.观察不同活性羊膜移植对兔眼角膜碱烧伤的治疗效果,并分析其生物活性成分作用.方法:实验于2004-01/07于重庆医科大学动物实验中心实验室完成,动物实验方法符合动物伦理学要求.①实验材料及分组:健康产妇剖宫产胎盘由重庆医科大学附属第一医院产科提供.选用新西兰大白兔45只,按随机数字表法分为5组(n =9):新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组、乙醇保存羊膜组、真空干燥羊膜组及对照组.②实验方法:于新鲜羊膜制备后24 h内,保存羊膜保存1个月后行羊膜移植.③实验评估:术后2～21 d每日、21 d后每3日观察眼表角膜透明度及新生血管生长情况;术后14,30,60 d行荧光素染色,观察角膜上皮的修复情况;术后2周、1个月、2个月行组织病理和透射电镜观察.结果:白兔43只进入结果分析.①在角膜透明性及角膜上皮修复速度上新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组和真空干燥羊膜组无明显差异,均明显优于乙醇保存羊膜组和对照组,乙醇保存羊膜组与对照组无明显差异.②在抑制新生血管方面,新鲜羊膜组明显优于甘油保存羊膜组及真空干燥羊膜组.结论:真空干燥羊膜、甘油保存羊膜和新鲜羊膜移植后均能减轻眼表碱烧伤的炎症反应,促进角膜上皮修复.其中新鲜羊膜效果最好,可能与其较其他羊膜含有更多的生物活性物质有关.     

-80℃长期保存血小板的可行性研究

目的探索-80℃条件长期保存血小板的关键技术。方法将12人份加终浓度为5%二甲基亚砜(DMSO)的富含血小板血浆,分为若干等份后置于实验专用-80℃低温冰箱中保存1—16个月,1—6个月每月每人份各取1份样本、8—16个月每2个月每人份各取1份样本37℃水浴复温后检测:血小板计数(P lt)、血小板平均体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、pH、血小板CD62p表达、凝血酶激活CD62p表达、凝血酶激活CD62p再表达、磷脂酰丝氨酸(PS)表达和激活血小板诱导血浆凝固时间。结果在16个月的保存过程中P l、tMPV、PDW、pH、血小板CD62p表达、凝血酶激活CD62p表达、凝血酶激活CD62p再表达、PS表达和激活血小板诱导血浆凝固时间等,变化均无统计学意义(P>0.05)。结论血小板加终浓度为5%DMSO,在-80℃条件下长期保存质量较好且较稳定,此技术条件可用于长期储备血小板资源。     

自体角膜缘上皮和球结膜移植术治疗中重度结角膜碱烧伤

中重度结角膜碱烧伤是一种致盲性很高的眼表面疾病,过去多采用保守疗法,即使保全眼球,往往以眼表面的纤维血管化而告终。二期行角膜移植术,由于大量的新生血管存在植片难以成活,即使植片成活新生血管的再次长入也难以恢复有用视力。     

自制心脏保存液保存离体兔心的研究

目的：初步探讨自制心脏保存液对离体兔心的保存效果。方法：取18只新西兰白兔，随机成分3组，建立非循环式Langendorff灌注模型，分别用晶体停搏液、uⅣ液和我院自制的心脏保存液在低温下保存4h；复灌后检测左心室压力、心肌酶学指标及心肌含水量。结果：自制心脏保存液组左心室压力、心肌酶学指标及心肌含水量与晶体停搏液组有显著差异，与UW液组无显著差异。结论：实验证实我院自制的心脏保存液与uⅣ液心肌保护效果相近，其配方设计基本可行。     

红细胞4℃保存研究进展

目前枸橼酸枸橼酸钠葡萄糖(ACD)或枸橼酸枸橼酸钠葡萄糖磷酸盐(CPD)溶液保存的血液有3周的保存期,盐腺嘌呤葡萄糖甘露醇(SAGM)和枸橼酸枸橼酸钠葡萄糖磷酸盐腺嘌呤(CPD A)溶液又分别将保存期延长至35d或35～42d。然而,现有的保存方法基本能保障平时的血液供应,但远不能满足临床特殊医疗、自然灾害、战时等特殊条件下输血治疗的需要。而且随着对输血传染病检测的加强,许多献血者丧失了献血资格,血液短缺问题日益严重。长久以来被认为可取代常规输血的红细胞和血小板代用品,也由于制造、功效、安全等方面的问题,不会很快广泛地应用于临…     

巧用3M透明敷料保护角膜及保存眶内异物

3M透明敷料为一种新型输液贴膜,其规格为6cm×7cm,适用于术中输液时固定静脉导管针。由于其粘性好、轻薄、透明度高,可用于手术中粘贴病人的上下眼睑,以保护全麻病人的角膜;并将术中从病人眶内取出的异物用其粘于病历中,效果良好。现介绍如下。     

气管保存的实验研究

目的通过研究低温保存气管的组织形态学特点和免疫组织化学的状况,探讨气管的保存方法,保存后的组织形态学特点、功能及检测方法。方法将人的气管（支气管）分成3组,其中1组在-85℃低温保存,3组都进行光镜观察,用Envision二步法免疫组织化学方法检测抗胰糜蛋白酶抗体、肌动蛋白抗体、上皮特异抗原抗体在组织中的表达情况。结果大体上及光镜下见保存后的气管形态、结构同保存前;保存前后的气管的平均长度分别是2.07cm、2.0cm,差异无显著性（P〉0．05）,免疫组化显示肌动蛋白抗体在3组中全是阳性,抗胰糜蛋白酶抗体和上皮特异抗原抗体染色结果分别是第1组19例（95％）、18例（90％）,第2组17例（85％）、16例（80％）,第3组7例（35％）、9例（45％）。第1组和第2组比较无显著差异（P〉0,05）。结论保存前后气管的长度、形态和功能无明显变化,说明可以低温保存气管并可以用免疫组织化学方法检测保存后的气管的状况。     

体外培养人角膜缘上皮细胞抑制激活态角膜基质细胞的生长

背景：角膜受到损伤后,角膜基质细胞激活转变为成纤维细胞,引起角膜基质瘢痕化,导致视力下降甚至丧失。目的：观察角膜不同部位上皮细胞与角膜基质细胞的相互作用,探索角膜缘上皮细胞群能否抑制激活态角膜基质细胞的生长。方法：采用酶消化及机械外力相结合的方法获取人角膜中央、角膜旁中央及角膜缘处角膜上皮细胞与浅层角膜基质细胞,进行体外培养。相差显微镜下观察细胞形态及生长变化。待培养角膜上皮细胞与基质细胞发生接触抑制时,记作＂0周＂,采用免疫荧光染色技术检测培养细胞中PCNA及p63蛋白的表达。结果与结论：培养的角膜上皮细胞与成纤维细胞发生接触抑制时,两种细胞间有明显分界线。角膜缘组上皮细胞中PCNA及p63蛋白均有较高的表达;角膜旁中央组PCNA有较高的表达,p63蛋白阴性表达;角膜中央组PCNA表达较低,p63蛋白阴性表达;从鉴定结果中可以得出只有角膜缘组中存在一定比例的角膜缘上皮干细胞。角膜缘组上皮细胞逐渐包围并化解成纤维细胞,在相互作用4周后,成纤维细胞聚集成死细胞团,缺乏角膜缘干细胞的中央组及旁中央组中成纤维细胞生长面积增加,上皮细胞生长受到抑制甚至死亡。说明体外培养的角膜缘上皮细胞群可以抑制激活态角膜基质细胞的生长。     

自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉

翼状胬肉术后复发率在２４%到８９%不等［１,２］。虽术后配合放疗或抗代谢药物应用 ,但仍难免复发 ,且有一定并发症［３］。近年我们采用常规胬肉切除联合角膜缘干细胞移植 ,取得了满意的疗效 ,现报告如下。临床资料一、一般资料本组翼状胬肉４７例５９眼 ,其中男２２例 ,女２５例 ,年龄 :３０岁以下５眼 ,３１至５０岁２１眼 ,５１至７０岁１６眼 ,７０岁以上１７眼 ,双眼１２例２４眼 ,单眼３５例３５眼 ,其中初发５０眼 ,复发性９眼 ,所有患者局部均无活动性炎症 ,无睑球粘连 ,胬肉头部进入透明角膜内２ｍｍ至同侧瞳孔区边缘。二、手术…     

组织工程角膜上皮移植治疗免角膜碱烧伤:形态学观察

背景:采用健康角膜缘干细胞体外培养形成组织工程化角膜上皮,移植于碱烧伤后角膜创面可促进创面的修复愈合.目的:观察组织工程角膜上皮移植治疗角膜碱烧伤的疗效和时机.设计、时间及地点:对比观察动物实验,于2007-07/2008-06在解放军总医院第一附属医院实验动物科完成.材料:新西兰雌性大白兔21只,体质量2.0～2.5 kg,随机分为对照组和移植组,其中对照组8只16眼,移植组13只再分为:早期移植组,1 d移植组2只4眼、3 d移植组3只6眼、6 d移植组3只6眼、9 d移植组2只4眼;中期移植组,14 d移植组3只6眼.方法:取21只兔上方健康角膜缘组织体外培养制备组织工程角膜上皮.21只兔双眼采用1 mol/L氢氧化钠制作改良角膜碱烧伤模型,移植组在碱烧伤后早期1,3,6,9 d和中期14 d行自体或同种异体组织工程角膜上皮移植,对照组烧伤后持续观察4周.主要观察指标:移植组及对照组烧伤后4周内眼表和组织病理学变化.结果:角膜碱烧伤后1周开始出现角膜上皮的大片脱落,2周角膜上皮大片脱落或溃疡发生率达72%,持续至4周,移植组在4周时发生率仅为25%,大多获得完整的角膜上皮;烧伤后早期移植组角膜基质深层炎性细胞浸润和新生血管生长较对照组明显受到抑制,而中期移植组角膜基质层较对照组并无明显差异;4周内异体组织工程角膜上皮移植的免疫排斥反应并不大于自体移植.结论:自体或同种异体组织工程角膜上皮移植可尽快恢复眼表完整性,且烧伤后早期移植效果明显优于中期移植.     

准分子激光原位角膜磨镶术后角膜上皮内生的护理干预

目的探讨准分子激光原位角膜磨镶术（LASIK）术后角膜上皮内生的原因及护理干预。方法对LASIK术后眼角膜上皮内生患者临床资料进行回顾性分析,找出影响角膜上皮内生相关原因,采取针对性护理干预,比较干预前后LASIK术后眼角膜上皮内生率。结果干预前术后角膜上皮内生发生率为1．40％,干预后618例患者均未发生角膜上皮内生。结论术前佩戴角膜接触镜、角膜上皮水肿脱落、薄角膜瓣、术后层间弥漫性角膜基质炎、手术室湿度过高和术后患者频繁眨眼、揉眼、意外眼伤害是角膜上皮内生的主要原因,护理干预措施可有效防止和减少LASIK术后角膜上皮内生并发症。     

干燥脱水保存鸵鸟脱细胞角膜基质载体材料的细胞毒性

背景：陕西省眼科研究所通过前期研究发现鸵鸟角膜具有开发成为人角膜材料替代品的优势。目的：判断鸵鸟角膜基质支架材料对细胞的潜在毒性作用。方法：采用细胞培养方法,将干燥脱水法保存的鸵鸟脱细胞角膜基质载体支架制备成浸提液与 L-929 细胞共同培养,采用 MTT 比色法评价其作用 1,2,3 d,对细胞生长和增殖的影响。结果与结论：干燥脱水法保存的鸵鸟脱细胞角膜基质载体支架浸提液组培养 1,3,5 d,对实验细胞毒性反应级别均为 1 级。参照《中华人民共和国国家标准 GB/T16886.5-2003》进行细胞毒性试验,供试品组见少量细胞呈圆形,疏松贴壁,无胞浆内颗粒,偶见细胞溶解。结合 MTT 法分析结果表明,采用干燥脱水法保存鸵鸟脱细胞角膜基质载体材料,细胞毒性为 1 级,为合格材料。