缓激肽对β-淀粉样蛋白所致阿尔茨海默病动物模型脑中Tau蛋白磷酸化的影响

目的 观察缓激肽(BK)对β-淀粉样蛋白(Aβ)所致阿尔茨海默病(AD)动物模型脑中Tau蛋白磷酸化的影响.方法 随机选取20只健康Wister大鼠,进行水迷宫训练后分为4组,在大鼠双侧海马背侧细胞带分别注入蒸馏水5 μl(DW组),BK2.5 μl、DW2.5 μl(BK组),Aβ2.5 μl、DW2.5 μl(Aβ组),Aβ2.5 μl、BK2.5 μl(Aβ+BK组).2周后观察各组大鼠海马、皮层区的磷酸化Tau阳性细胞数.结果 Aβ+BK组海马CA1、CA4区及皮层区磷酸化Tau蛋白免疫阳性细胞积分光密度值明显高于其他各组.结论 Aβ与BK同时注入大鼠海马可产生协同作用,引起Tau蛋白更明显的磷酸化,提示可以用此方法 建立AD动物模型.     

远志对阿尔茨海默病大鼠海马神经元Tau蛋白磷酸化的影响

目的:研究远志对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)大鼠模型海马神经元Tau蛋白磷酸化的影响。方法:将32只雄性健康Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,远志1组,远志2组。用脑立体定位技术给大鼠海马注射Aβ1-40与apoE4的混悬液构建AD模型。将大鼠断头取脑,分离海马,采用免疫组化染色法检测大鼠海马神经元Tau蛋白磷酸化的情况。结果:①与对照组比较,模型组、远志1组、2组磷酸化Tau蛋白的平均灰度值明显降低(P<0.01)。②与模型组比较,远志1组、2组磷酸化Tau蛋白的平均灰度值明显升高(P<0.01)。远志2组与远志1组比较,磷酸化Tau蛋白的平均灰度值明显升高(P<0.01)。结论:远志对可溶性Aβ1-40与apoE4联合注射所致AD大鼠模型海马CA1区神经细胞内Tau蛋白过度磷酸化有明显的改善作用。     

Tau 蛋白过度磷酸化和β淀粉样蛋白对阿尔茨海默病发生的影响

近年来有关阿尔茨海默病发病机制研究主要有两大学说,tau 蛋白学说和β淀粉样蛋白学说,本文总结了有关 tau 蛋白和β淀粉样蛋白的作用机理,并讨论二者相互作用对阿尔茨海默病发病的影响。     

雌激素对阿尔茨海默病大鼠学习记忆及海马神经元损伤保护作用的研究

目的:观察雌激素对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆及海马神经元损伤的影响,探讨雌激素神经保护的机制. 方法:选取雌性成年SD大鼠24只,随机分为对照组、AD 雌二醇(E2)组、AD组,每组8只.Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能,苏木精-伊红(H-E)染色及Bielschowski染色法观察海马神经元形态,免疫组化法观察Tau蛋白异常磷酸化变化及GSK-3β活性.结果:与AD组相比,AD E2组大鼠迷宫测试明显改善(P<0.01);海马CA1区神经元纤维形态规则,Tau蛋白磷酸化阳性细胞数明显减少(P<0.01),Tau蛋白表达减少,且GSK-3β总量及磷酸化GSK-3β含量均有所增加.结论:雌激素治疗可改善Aβ诱导的大鼠学习记忆障碍及海马神经元损伤,可能通过作用GSK-3β导致Tau蛋白去磷酸化,从而达到保护神经的目的.     

β淀粉样蛋白和Tau蛋白在血管性痴呆发病机制中的作用

目的:观察β淀粉样蛋白和Tau蛋白在血管性痴呆(VD)大鼠发生、发展中的作用.方法:采用永久性结扎双侧颈总动脉方法建立VD模型.40只SD大鼠随机分为假手术组(10只)、模型组(30只).模型组按手术时间又分为4,6,8周组,每组n=10只.应用Morris水迷宫检测大鼠的学习、记忆能力;免疫组化染色方法检测大鼠海马C...     

Akt激活在雌激素对β淀粉样蛋白毒性保护机制中的作用

目的 探讨雌二醇(17β-estradi01)对Aβ25-35毒性作用的影响及其可能机制.方法 17β-estradiol和Aβ25-35作用于大鼠皮质神经元,检测对细胞活力和乳酸脱氢酶(LDH)释放的影响;检测Akt抑制剂和雌激素受体抑制剂存在时对细胞活力的影响;Westem印迹检测对磷酸化和非磷酸化Akt表达的影响.结果 20 μmol/的Aβ25-35使大鼠皮质神经元细胞活力降低至40.4%(P＜0.01),17β-estradiol.能使细胞活力恢复至84.2%(P＜0.01);Aβ25-35使细胞LDH增加至对照组的172.5%(P＜0.01),而17β-estradiol使LDH回降至118.5%(P＜0.01).Akt抑制剂和雌激素受体抑制剂均部分阻断了雌激素对Aβ25-35神经毒性的拮抗作用.与对照组相比,Aβ25-35降低了磷酸化Akt的表达(65.9%,P＜0.01),而雌激素部分拮抗此作用(94.7%,P＜0.01),Akt抑制剂则阻断了雌激素的作用(75.4%,P＜0.05);雌激素单独作用则增加了磷酸化Akt的表达;雌激素受体抑制剂部分阻断了雌激素作用,雌激素受体抑制剂单独作用对Akt的磷酸化无显著影响;各种情况下非磷酸化Akt的表达无显著影响.结论 雌激素17β-estradiol可以拮抗Aβ25-35的神经毒性作用,激活Akt可能是其发挥保护作用的机制之一;雌激素受体可能在Akt的激活中发挥一定作用.     

雷公藤红素对β淀粉样蛋白诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白异常磷酸化影响的研究

观察雷公藤红素对β淀粉样蛋白142导致SHSY5Y细胞Tau蛋白异常磷酸化的影响及其可能机制。〖HT5”H〗方法〖HT5”K〗用 Aβ142刺激SHSY5Y细胞,建立Tau蛋白异常磷酸化的细胞模型。加入雷公藤红素干预,Western印迹法检测Aβ142导致Tau蛋白异常磷酸化的变化,同时检测pNFSymbolkA@B表达情况;siRNA法下调TLR4表达,Western印迹法检测Aβ142导致的Tau蛋白异常磷酸化的变化情况;同时观察下调TLR4后,Aβ142刺激对pNFSymbolkA@B表达的影响。〖HT5”H〗结果〖HT5”K〗Aβ142刺激SHSY5Y细胞,导致Tau蛋白Ser199/202、Ser396位点的磷酸化水平增加,而雷公藤红素能降低这两个位点磷酸化水平;Aβ142导致细胞pNFSymbolkA@B表达增加,雷公藤红素干预后pNF SymbolkA@B表达下调,且NFSymbolkA@B抑制剂BAY117082同样能降低Aβ142导致的Tau蛋白异常磷酸化;下调TLR4表达,Aβ142导致的Tau蛋白异常磷酸化及pNFSymbolkA@B表达下降。〖HT5”H〗结论〖HT5”K〗雷公藤红素降低Aβ142导致的SH SY5Y细胞Tau蛋白异常磷酸化可能与其抑制TLR4/NF SymbolkA@ B通路活性有关。     

β淀粉样蛋白1-40对大鼠皮层神经元凋亡的诱导作用

目的　观察 Aβ1 - 40 对大鼠皮层神经元的毒性作用。　方法　原代培养大鼠皮层神经元 ,分别采用AO- EB染色、TU NEL染色和 DNA凝胶电泳 ,观察不同终浓度的 Aβ1 - 40 对培养的神经元凋亡的诱导作用。　结果　在荧光显微镜下可见 ,经 AO- EB染色后凋亡的神经元胞核染色质着绿色荧光呈固缩状、圆珠状或新月状 ,Aβ1 - 40 三个浓度 (2 0 ,4 0和 80μg/ml)作用不同时间的凋亡率依次为 :2 4 h 2 0 .17%± 0 .76 % ,2 5 .17%± 3.82 % ,2 8.33±2 .84 % ;4 8h 2 2 .33%± 1.4 4 % ,38.83%± 1.2 6 % ,36 .6 7%± 1.0 4 % ;72 h 17.5 0 %± 1.80 % ,2 6 .5 0 %± 1.32 % ,30 .6 7%± 1.2 6 %。 TUNEL染色结果显示胞核内散在分布断裂的 DNA片段 ;琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“梯状”带等细胞凋亡的特征性改变。　结论　 Aβ1 - 40 可诱导大鼠皮层神经元凋亡 ,以 4 0μg/ml作用 4 8h的诱导效果最为明显     

β淀粉样蛋白与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病是老年人常见的神经系统变性疾病,是痴呆中最常见的一种类型。目前认为β淀粉样蛋白的异常沉积是阿尔茨海默病主要发病机制之一,这里就目前β淀粉样蛋白与阿尔茨海默病的研究进展作一综述。     

中枢胰岛素信号与β-淀粉样蛋白稳态研究进展

阿尔茨海默病（Alzheimer's　disease,AD）的主要神经病理特征表现为β-淀粉样蛋白（Aβ）堆积形成的老年斑和Tau蛋白过度磷酸化形成的神经纤维缠结。临床研究发现糖尿病患者并发AD的风险显著增高,提示胰岛素信号异常可能是诱发AD的重要机制之一。本文从胰岛素信号与Aβ稳态的角度探讨了胰岛素信号异常在AD发生发展中的作用。     

五味子酮对β-淀粉样蛋白诱导大鼠海马神经元内游离钙离子浓度变化的影响

目的观察中药五味子酮对β-淀粉样蛋白(Aβ25~35)诱导的大鼠海马神经元内游离钙离子浓度([Ca2+]i)变化的影响。方法采用大鼠海马神经元原代培养技术,运用双激发波荧光指示剂Fura-2/AM标记胞内相对[Ca2+]i的变化并进行比较。结果1μmol/L Aβ25~35作用于海马神经元48 h后,[Ca2+]i为0.5951±0.0311,明显高于空白对照组的0.3617±0.0197(P<0.05);1μmol/L Aβ25~35和100μmol/L五味子酮共同作用于海马神经元48 h后,[Ca2+]i为0.4168±0.0468,仍明显高于空白对照组(P<0.05),但较单纯Aβ25~35作用后明显下降(P<0.05)。结论中药五味子酮可以通过抑制Aβ诱导的神经元[Ca2+]i增加,维持细胞内钙稳态,对神经元有一定的保护作用。     

雌激素缺失及17β-estradiol替代治疗对大鼠海马β淀粉样蛋白含量的影响

目的 观察雌激素缺失及雌二醇(17β-estradiol)替代治疗对大鼠海马β淀粉样蛋白(Aβ)含量的影响及其可能机制.方法 切除大鼠双侧卵巢制作雌激素缺失模型(Ovx),然后给予17β-estradiol补充治疗.ELISA检测海马AB含量,荧光法测定α和β分泌酶活性,Western印迹检测β分泌酶(BACEl)和中性内肽酶(NEP)的表达.结果 Ovx大鼠雌激素水平[(11±4)pg/ml,P＜0.01]明显低于对照组[(21±8)pg/ml],而给予17β-estradiol替代治疗后雌激素水平上升[(63±13)pg/ml,P＜0.01];Ovx大鼠海马组织Aβ40[(28.5±4.5)ng/ml,P＜0.01]和Aβ42含量[(4.6±1.2)ng/ml,P＜0.01]均显著高于对照组的Aβ40[(14.4±2.4)ng/ml]和Aβ42[(2.8±0.4)ng/ml];而17β-estradiol替代治疗可以使Aβ40[(20.3±3.2)ng/ml,P＜0.01]和Aβ42[(3.8±0.5)ng/ml,P＜0.01]降低;Ovx大鼠α仅分泌酶活性降低(67.5%,P＜0.01)而β分泌酶活性增加(145.8%,P＜0.01),17β-estradiol替代治疗后部分逆转了上述现象;Ovx大鼠BACE1的表达增加(135.4%,P＜0.01)而NEP表达降低(40.8%,P＜0.01),而补充17β-estradiol后可以部分拮抗上述作用.结论 雌激素缺失可以增加去势大鼠海马AB含量,这可能与α分泌酶活性下降、BACE1活性增加和(或)NEP活性下降有关,而补充17β-estradiol可以降低Aβ含量;这可能是绝经后妇女雌激素替代治疗降低阿尔茨海默病发病危险性的原因之一.     

β淀粉样蛋白级联假说相关的阿尔茨海默病发病机制及防治策略研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种以进行性认知功能障碍和记忆衰退为特点的中枢神经系统疾病。研究表明,β淀粉样蛋白(Aβ)是AD发生的关键环节,被认为是遗传因素和环境因素共同作用引发AD病程的上游分子。Aβ聚集及由此引发的细胞炎症反应等被认为是AD患者脑内提前于神经元变性的早期事件,但目前针对Aβ聚集这一环节的药物尚无一种通过临床3期试验,提示了AD发病过程的复杂性,也使Aβ级联假说面临挑战。本文总结了AD发病机制中的重要学说—Aβ级联假说及与其相关的AD病理、病理生理过程和治疗的研究进展。     

手术创伤对大鼠海马中β淀粉样前体蛋白和β淀粉样蛋白表达的影响

目的 探讨手术创伤对大鼠海马中β淀粉样前体蛋白(App)、β淀粉样蛋白(Aβ)表达的影响.方法 49只SD大鼠随机分成对照组(A组,n=7)、假手术组(B组,n=21)、肝部分切除术组(C组,n=21),B、C组大鼠分别在术后24 h、3 d、7 d三个时间点取左侧海马(n=7),放射免疫法测Aβ,取右侧海马热启动荧光定量PCR测AppmRNA.结果 (1)肝部分切除术后24h大鼠海马中App770(Ct)/GAPDH(Ct)为(1.39±0.05),低于对照组和假手术组(P＜0.05),说明此时App770mRNA的表达增加.但是手术对于App695mRNA、App751mRNA以及App770mRNA在其他时间的表达没有影响.假手术组App695mRNA、App751mRNA、App770mRNA的表达与对照组差异无显著性(P＞0.05).(2)肝部分切除术组大鼠海马中Aβ的表达在术后24h、3d、7d分别为(58.3±2.6)pg/ml、(48.0±3.7)pg/ml、(27.2±3.6)pg/ml,明显高于对照组和假手术组,(P＜0.05).在相应的时间点中,假手术组与对照组没有差异(P＞0.05).结论 肝部分切除术后大鼠海马中App770mRNA的表达增加,Aβ表达水平上调.     

β淀粉样蛋白神经毒性与线粒体功能异常研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是老年痴呆症中最常见的类型,其发病机制十分复杂。β淀粉样蛋白(βamyloid protein,Aβ)被认为是诱发AD发病的关键因素,Aβ神经元毒性介导的神经细胞线粒体功能障碍是AD发病过程中的重要事件。本文就近年关于Aβ的神经毒性与线粒体功能异常的研究作一综述。     

Aβ和Tau蛋白分子影像探针诊断阿尔茨海默病的应用与思考

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）是一种神经退行性疾病,老年斑（senile plaque, SP）和神经元纤维缠结（neurofibrillary tangles, NFTs）是AD早期特征性病理改变。以SP的核心成分Aβ和NFTs的核心成分Tau蛋白为靶点的特异性分子探针,在早期诊断及评估AD等方面具有重要的研究和应用价值。     

β-淀粉样蛋白与阿尔茨海默病

随着人均寿命的延长,阿尔茨海默病（俗称老年痴呆）的发病率逐年上升,已成为现代社会老年人的主要致死疾病之一。本文就β-淀粉样蛋白与阿尔茨海默病的关系进行文献综述,提示：人们的焦虑、紧张和抑郁等不良情绪会引起人体的应激反应,从而激活细胞膜上的β-2-肾上腺素受体,进而引起β-淀粉样蛋白的生成增加,使细胞外产生老年斑和脑血管淀粉样变性,细胞内发生神经元纤维缠结,导致神经元变性乃至形成痴呆。     

五味子酮对β淀粉样蛋白所致神经元应激损伤的保护作用

目的: 研究人工合成的β淀粉样蛋白β-AP25-35对原代培养的大鼠海马神经元内活性氧的影响以及五味子酮的保护作用.方法:原代培养7～9 d的大鼠海马神经元随机分为β-AP25-35处理组、五味子酮干预组和空白对照组3组,分别给予β-AP25-35(1 μmol/L)、β-AP25-35(1 μmol/L) 五味子酮(100 μmol/L)或仅予Neuro-basal B27培养基.继续培养48 h后,测定并计算各组细胞内活性氧.结果:各组神经元内活性氧的含量为:β-AP25-35处理组(44.58±3.86) U/ml, 五味子酮干预组(15.70±2.13) U/ml, 空白对照组(5.46±1.58) U/ml.β-AP25-35处理组、五味子酮干预组两组神经元内活性氧的含量与空白对照组比较,均有明显升高(P＜0.01),β-AP25-35处理组活性氧含量又明显高于五味子酮干预组(P＜0.01).结论:β-AP25-35可以引起原代培养的大鼠海马神经元内的活性氧增加,五味子酮对此有部分阻断作用,对神经元有一定程度的保护作用.     

β淀粉样蛋白1-40对大鼠皮层神经元凋亡的诱导作用

目的观察Aβ1-40对大鼠皮层神经元的毒性作用. 方法原代培养大鼠皮层神经元,分别采用AO-EB染色、TUNEL染色和DNA凝胶电泳,观察不同终浓度的Aβ1-40对培养的神经元凋亡的诱导作用. 结果在荧光显微镜下可见,经AO-EB染色后凋亡的神经元胞核染色质着绿色荧光呈固缩状、圆珠状或新月状,Aβ1-40三个浓度(20,40和80 μg/ml)作用不同时间的凋亡率依次为24 h 20.17%±0.76%, 25.17%±3.82%, 28.33±2.84%;48 h 22.33%±1.44%, 38.83%±1.26%, 36.67%±1.04%;72 h 17.50%±1.80%, 26.50%±1.32%, 30.67%±1.26%.TUNEL染色结果显示胞核内散在分布断裂的DNA片段;琼脂糖凝胶电泳呈现典型的"梯状"带等细胞凋亡的特征性改变. 结论 Aβ1-40可诱导大鼠皮层神经元凋亡,以40 μg/ml作用48 h的诱导效果最为明显.     

阿尔茨海默病β淀粉样蛋白药物治疗的研究进展

阿尔茨海默氏病（AD）是一种病因未明的疾病,β淀粉样蛋是其核心的病理机制。文章综述了近年来针对AD的β淀粉样蛋药物治疗的研究新进展。