XIAP和XAF1在中耳胆脂瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:研究凋亡抑制蛋白XIAP及其拮抗蛋白XAF1在中耳胆脂瘤中的表达及胆脂瘤上皮的凋亡情况,探讨三者之间的关系及意义。方法:采用组织芯片技术结合免疫组化法检测50例胆脂瘤标本及20例正常外耳道上皮中XIAP及XAF1的表达;采用末端转移酶介导的原位缺口末端标记染色(TUNEL)技术检测两组标本的凋亡状态。结果:①胆脂瘤上皮中的XI-AP、XAF1蛋白表达显著高于正常上皮(P<0.01)。②胆脂瘤细胞凋亡显著高于正常上皮(P<0.01)。③胆脂瘤上皮中,XI-AP、XAF1二者表达呈正相关(P<0.01);XAF1表达与凋亡呈正相关(P<0.01)。结论:XIAP、XAF1在胆脂瘤中的表达同步升高,提示在胆脂瘤发病中,促凋亡与抑凋亡二者达到了新的平衡,使胆脂瘤上皮细胞过度增生但不能无限增殖。     

Caspase-3在肝癌组织中的表达及意义

目的:探讨Caspase-3在肝癌组织中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测肝细胞肝癌组织中Caspase-3的表达水平,利用计算机图像分析技术测量肝细胞肝癌Caspase-3表达的平均光密度和平均阳性面积。结果:Caspase-3在肝细胞肝癌组织中呈低表达。结论:Caspase-3在肝细胞肝癌的发生发展过程中起着重要作用。     

比色法检测Caspase-3相对活性

目的建立比色法检测Caspase-3相对活性的方法。方法以H9c2(2-1)细胞缺氧/复氧损伤为凋亡诱导模型,采用比色法检测Caspase-3相对活性,并使用吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色法进行平行的方法学比较。结果H9c2(2-1)细胞缺氧/复氧组与对照组相比Caspase-3相对活性升高了0.48倍,差异具有统计学意义(1.48±0.16 vs 1.00±0.06,P<0.01);缺氧/复氧组细胞经AO/EB染色出现凋亡的形态学特征。结论本研究成功建立了Caspase-3相对活性的比色检测方法,与试剂盒方法相比大大降低了检测成本,同时也为检测Caspases家族其他蛋白酶的活性提供了方法学依据。     

Caspase-3／Caspase-9活化与皮鳞癌1号方抑制A431细胞生长的关系研究

目的：研究 Caspase-3和 Caspase-9活化与皮鳞癌1号方抑制 A431细胞生长的关系。方法培养 A431细胞,用不同浓度的皮鳞癌1号方分别作用于 A431细胞;Hochest 染色检测细胞凋亡形态;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞色素 C 含量;比色法测定 Caspase-3和 Caspase-9活性。结果Hochest33258染色可见皮鳞癌1号方组 A431细胞发生核固缩、凋亡小体等典型的凋亡形态学特征;与对照组比较,Cytc 、Caspase-3、Caspase-9表达增加。结论Caspase-3和 Caspase-9的活化与皮鳞癌1号方可诱导 A431发生凋亡有关。     

Caspase-3在妇科恶性肿瘤中的研究进展

Caspase-3是凋亡过程中主要的酶切效应因子,对凋亡的完成起着至关重要的作用。本文就Caspase-3在卵巢上皮性肿瘤、子宫内膜癌、子宫颈癌及绒癌中的研究进展作一综述。     

TGF与中耳胆脂瘤相关性的Meta分析

目的 对转化生长因子 (transforming growth factor,TGF)与中耳胆脂瘤相关性研究的国内文献进行Meta分析,探讨TGF与中耳胆脂瘤发病的相关性.方法 检索中国学术期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、万方及维普数据库,收集 1989～2009年国内公开发表论文,且为TGF在中耳胆脂瘤中表达...     

Caspase-3与Clusterin在血管瘤组织中的表达及其相关性研究

目的探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）与Clusterin的表达及其与血管瘤消退的关系。方法采用免疫组化SP法检测Caspase-3与Clusterin在34例血管瘤和6例正常皮肤组织中的表达。结果Caspase-3与Clusterin在34例血管瘤组织中阳性表达率,增生期分别为31.3%、81.3%,消退期分别为72.2%、38.9%,而在正常皮肤均不表达,其中,Caspase-3在增生期中的表达低于消退期,差异有统计有统计学意义（P〈0.05）,Clusterin在增生期中表达高于消退期,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论Clusterin蛋白可能通过抑制细胞凋亡在血管瘤的发生发展中发挥重要作用,且其表达与Caspase-3的异常表达密切相关。     

hTERT及Caspase-3在重度子痫前期胎盘表达的研究

目的通过研究重度子痫前期孕妇与正常妊娠孕妇胎盘组织中hTERT及Caspase-3的表达规律,探讨二者在重度子痫前期发病过程中的可能的发病机制。方法采用免疫组织化学染色方法 (HRP法)45例晚期妊娠(对照组,其中22例为早产,23例为足月)及45例重度子痫前期(研究组,其中22例为早产,23例为足月)孕妇胎盘组织中人端粒酶逆转录酶蛋白的表达水平。结果①hTERT在重度子痫前期胎盘组织的表达显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);②Caspase-3在重度子痫前期胎盘的表达显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);③在重度子痫前期胎盘组织中,hTERT与Caspase-3的表达呈负相关关系,差异有统计学意义,(P<0.05)。结论我们发现hTERT在重度子痫前期表达降低,Caspase-3表达增强,hTERT与Caspase-3的表达呈负相关关系,推测hTERT及Caspase-3与重度子痫前期发病过程有密切关系,hTERT在早期妊娠可能起到保护的作用。     

Caspase-3及Cleaved-Caspase-3在氟中毒大鼠肝脏中表达

目的 探讨氟中毒大鼠肝脏组织中Caspase-3及Cleaved-Caspase-3的表达情况.方法 选用36只健康SD大鼠分为对照组、低氟组、高氟组(饮用含氟量分别为＜1 mg/L、5mg/L及50 mg/L的自来水),每组12只(雌雄各半).饲养6个月后,股动脉放血处死,氟离子电极法检测大鼠尿氟含量;自动血生化分析仪检测大鼠肝功能;免疫组织化学法和蛋白印记(Western blot)法检测Caspase3及Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平.结果 低氟组、高氟组大鼠尿氟[(1.85±0.13)、(2.23±o.10) mg/L均高于对照组[(1.63±o.11) mg/L] (P＜0.05);低、高氟组大鼠血清谷丙转氨酶及谷草转氨酶活性[(48.66±5.55)、(68.17±8.39)U/L及(142.57±16.21)、(165.89±28.26) U/L]均高于对照组[(38.49±2.98)、(117.98±9.88) U/L](P＜0.05);高过剂量氟组Caspase-3及Cleaved-Caspase-3蛋白表达[(98.08±13.08)、(106.33±9.14)]明显高于对照组[(53.92±6.36)、(59.78±7.54)l(P＜0.05).结论 氟可促进Caspase-3及Cleaved-Caspase3蛋白的表达,其可能参与慢性氟中毒所致肝脏损伤发病过程.     

X连锁凋亡抑制蛋白在胆脂瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的研究X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在胆脂瘤中的表达及胆脂瘤中的凋亡情况,探讨两者之间的关系。方法①运用免疫组织化学两步法检测25例胆脂瘤标本及10例外耳道正常皮肤组织中XIAP的表达。②采用末端转移酶介导的原位缺口末端标记染色(TUNEL)技术检测两者组织的凋亡状态。结果①与正常上皮比较,胆脂瘤上皮中的XIAP蛋白表达明显下调(Z=-2.411,P<0.05)。②在胆脂瘤上皮中,细胞凋亡显著高于正常上皮组织(Z=-2.712,P<0.01)。③在胆脂瘤上皮中,XIAP的表达与凋亡呈负相关(rp=-0.527,P<0.01)。结论XIAP在胆脂瘤中的表达明显下调,与胆脂瘤上皮的凋亡密切相关,提示XIAP可能参与胆脂瘤上皮的凋亡调控过程,在胆脂瘤的发生、发展过程中起重要作用。     

丙泊酚对大鼠肠缺血再灌注损伤时肝细胞凋亡及Caspase-3的影响

目的探讨丙泊酚对大鼠肠缺血再灌注损伤时肝细胞凋亡及Caspase-3的影响。方法成年健康Wistar大鼠42只,随机分为3组:实验对照组(C组,6只)、肠缺血再灌注组(IR组,18只)、丙泊酚干预组(P组,18只)。各组根据再灌注时间分为1,3,6h三个时相。通过夹闭肠系膜上动脉制作肠缺血再灌注损伤模型,实验结束后即刻取肝左叶做标本。用免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白表达量,末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测肝细胞凋亡指数(AI)。结果与C组比较,IR组和P组肝组织Caspase-3蛋白含量、AI均增加(P<0.05);与IR组比较,P组Caspase-3蛋白表达减少、AI减少(P<0.05)。结论丙泊酚可以下调大鼠肠缺血再灌注时Cas-pase-3蛋白表达,使肝细胞凋亡减轻,从而对肝损伤有一定的保护作用。     

Survivin和Caspase-3在胃间质瘤中的表达及意义

目的研究Survivin和Caspase-3在胃间质瘤中表达情况及临床意义。方法用免疫组化法检测57例胃间质瘤和相应的56例光镜下阴性切缘组织及10例正常胃组织的Survivin和Caspase-3的表达情况，并进行相关的研究。结果胃间质瘤中Survivin表达呈核型和核浆型，阳性率为75．4％，胃间质瘤的光镜下阴性切缘组织为3．6％，正常胃组织无表达；胃间质瘤中Caspase-3表达呈浆型，阳性率为33．3％，胃间质瘤的光镜下阴性切缘组织为82．1％，正常胃组织为80．0％。结论Survivin在胃间质瘤中表达明显高于正常组织，与核分裂象和危险度正相关，可望作为一预后因素；Caspase-3在胃间质瘤中的表达明显低于正常组织；Survivin可能通过抑制Caspase-3的表达，从而抑制胃间质瘤的凋亡，这可能在胃间质瘤的发生发展过程中起了作用。     

Survivin、XIAP在甲状腺乳头状癌组织中表达的研究

目的 探讨凋亡抑制蛋白survivin与XIAP在甲状腺乳头状癌组织中的表达和相互关系.方法 应用免疫组织化学法(S-P法)检测35例甲状腺乳头状癌,28例甲状腺腺瘤组织中survivin和XIAP的表达情况,并分析两者间的关系.结果 Survivin和XIAP在甲状腺乳头状癌组织中的阳性率分别为74.2%和94.3%...     

siRNA介导hPOT1基因表达抑制对HeLa细胞Caspase-3的影响

目的应用siRNA表达载体介导的RNA i技术,特异地抑制端粒保护蛋白POT1基因在HeLa细胞中的表达,并观察其对细胞Caspase-3活化的影响。方法利用作者课题组先前构建的含hPOT1基因特异性序列(hsDNA)的3种重组siRNA表达质粒(pmU6-shRNA1、pmU6-shRNA2和pmU6-shRNA3),由脂质体介导转染HeLa细胞,以RT-PCR和EM-SA法检测转染细胞中的hPOT1基因的表达抑制效果,并通过RT-PCR、W estern b lot和Caspase-3检测试剂盒分析Caspase-3表达和活化。结果3种pmU6-shRNA重组质粒转染HeLa细胞48 h后,细胞中hPOT1基因mRNA和蛋白质表达水平均降低,Caspase-3 mRNA表达水平基本无变化,Caspase-3酶原水平降低,而Caspase-3酶活性增高。结论siRNA表达载体介导的RNA i能有效地抑制HeLa细胞中hPOT1基因表达,hPOT1基因表达的抑制导致细胞Caspase-3活化。     

大鼠急性胰腺炎 Caspase－3及 Survivin 在胰腺组织中表达的实验研究

目的：检测 Caspase－3及 Survivin 在急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达并探讨其与胰腺组织损伤的关系。方法60只 SPF 级雄性 Wistar 大鼠随机分为假手术组、胰腺炎6 h 组、胰腺炎12 h 组及胰腺炎24 h 组。采用胰腺被膜下注射牛磺胆酸钠（Na－Tc）建立急性胰腺炎模型。分别检测4组大鼠血清淀粉酶（AMY）、胰腺病理损伤、胰腺组织中 Caspase－3及 Survivin 的表达程度。结果假手术组、胰腺炎6 h、12 h、24 h 组组间两两比较血清淀粉酶及胰腺组织病理评分胰腺组织 Caspase－3及 Survivin 平均光密度表达差异均有统计学意义（ P ＜0．05）。 Caspase－3、Survivin、血清淀粉酶及胰腺病理评分均有相关性（ P ＜0．05）。结论急性胰腺炎过程中伴随着 Caspase－3及 Survivin 的表达紊乱,并且与胰腺损伤密切相关。     

Caspase-3、Bcl-2和Bak在胃癌中的表达及意义

目的 研究Caspase-3、Bcl-2、Bak等凋亡相关基因蛋白在胃癌中的表达,与胃癌临床病理特征和预后的相关性。方法 将100例无术前放化疗史的胃癌手术标本和30例对照组胃粘膜制成组织芯片,取样针直径2．0mm。用免疫组化方法分别检测Caspase-3、Bcl-2、Bak的表达;用原位末端标记法进行细胞凋亡指数检测。对随访14个月～13年的47例作生存分析。结果 获得2个组织芯片蜡块,分别含114和116个位点。Caspase-3在正常粘膜的表达（90％）显著高于胃癌组织（56％）（P〈0．01）,其表达与胃癌组织学分化、血管神经侵犯相关（P〈0．05）,与淋巴结转移和国际抗癌联盟（UICC）临床分期及预后无关。Bcl-2和Bak在胃癌中的表达分别为42％和47％,表达均与组织学分化相关（P〈0．05）,与淋巴结转移、血管神经侵犯、UICC分期及预后无关。结论 Caspase-3、Bcl-2和Bak均参与细胞凋亡调控和胃癌生物学进程,但其表达与胃癌预后无关。UICC分期仍然是胃癌的独立预后指标。     

神经节苷脂对大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3表达的影响

目的研究单唾液四己糖神经节苷脂（Monosialoganglioside,GM1）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经功能缺失评分及Caspase-3表达的影响,探讨其神经保护作用机制。方法42只Wistar雄性大鼠随机分为三组,即神经节苷脂GM1治疗组,脑缺血再灌注损伤模型组,正常对照组。采用改良线栓法建立右侧大脑中动脉缺血再灌注模型。治疗组缺血即刻腹腔注射30mg/kg神经节苷脂,模型组注射等剂量生理盐水,运用Zea-Longa法进行神经病学评分,用光镜观察脑组织形态学改变,用免疫组化法检测Caspase-3。结果与模型组相比,GM1治疗组脑组织变性坏死程度轻,神经功能缺损评分显著减少,Caspase-3阳性细胞减少（P〈0.01）;模型组Caspase-3表达明显多于对照组（P〈0.01）,而且缺血再灌注24h较再灌注1h明显增多（P〈0.01）。结论GM1可以通过抑制Caspase-3的表达来抑制细胞凋亡,从而发挥脑缺血再灌注损伤的保护作用。