诱导型一氧化氮合酶在实验性病毒性心肌炎心肌内的表达及其与心肌损害的关系

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）在急性病毒性心肌炎心肌内的表达及其与心肌损害的关系。方法 ６～８周龄ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠２４只,随机分两组：感染组１６只以柯萨奇病毒Ｂ３ｍ（ＣＶＢ３ｍ）腹腔内注射,另８只为正常对照组。采用免疫组化法检测两组小鼠心肌组织内ｉＮＯＳ表达,并将其半定量与心肌病理变化程度进行相关分析,用比色法测定了血清中ＮＯ间接含量。结果 ①感染组小鼠心肌标本病理组织学检查均有不同     

L—精氨酸对小鼠病毒性心肌炎心肌细胞的影响及其机理的探讨

目的：探讨Ｌ－精氨酸对病毒性心肌炎病理变化的影响。方法：将接种柯萨基病毒Ｂ３的Ｂａｌｂ／ｃ雄性小鼠随机分为饲服Ｌ－精氨酸组和对照组,于接种病毒后第５ｄ测小鼠血清ＮＯ（ＮＯ２／ＮＯ３）和ＣＫ－ＭＢ,心肌组织病理学改变和超微结构变化。结果：血清ＮＯ（ＮＯ２／ＮＯ３）和血清ＣＫ－ＭＢ,Ｌ－精氨酸组高于对照组;心肌组织病理学检查可见Ｌ－精氨酸组小鼠心肌细胞有程度不等的空泡变性和坏死,病理损伤较对照组严重;     

病毒性心肌炎血和心肌CVB_3RNA含量与心肌病变的关系

目的研究小鼠柯萨奇Ｂ３病毒性心肌炎模型血、心肌柯萨奇病毒ＲＮＡ含量的关系;外周血中ＣＶＢ３ＲＮＡ含量与心肌病理积分的关系。方法利用定量ＰＣＲ方法检测病毒性心肌炎小鼠模型急性期外周血、心肌ＣＶＢ３ＲＮＡ含量。结果ＣＶＢ３感染所致心肌炎小鼠外周血、心肌中ＣＶＢ３ＲＮＡ含量显著正相关（ｒ＝０．９４,Ｐ＜０．０５）。外周血及心肌中ＣＶＢ３ＲＮＡ含量与心肌病理积分显著正相关（ｒ＝０．８０,Ｐ＜０．０１,ｒ＝０．８５,Ｐ＜０．０１）。结论病毒性心肌炎急性期外周血中ＣＶＢ３ＲＮＡ含量可以反映心肌中病毒ＲＮＡ含量水平,且两者与心肌病理损害均有一致性改变。     

原位杂交法检测颗粒酶B在柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌浸？…

目的 初步探讨了颗粒酶Ｂ在病毒性民炎发病中的作用。方法 将４０只４周龄ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠随机等分为为实验组和对照组，分别用柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）及病毒稀释液腹腔接种，第７天处死，取其心脏，石蜡切片，常规ＨＥ染色。用原位发校的方法检测小鼠心肌浸润细胞中颗粒酶Ｂ的表达。四星图像分析系统 地杂交阳性信号面积与病变面积行半定量分析，并对两者行相关性分析。结果 实验组大鼠２０只中１６只检测到颗粒酶ＢＭ     

原位杂交法检测颗粒酶B在柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌浸润细胞中的表达

目的　初步探讨颗粒酶Ｂ在病毒性心肌炎发病中的作用。方法　将４０只４周龄ＢＡＬＢ／ｃ雄性小鼠随机等分为实验组和对照组，分别用柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）及病毒稀释液腹腔接种，第７天处死，取其心脏，石蜡切片，常规ＨＥ染色。用原位杂交的方法检测小鼠心肌浸润细胞中颗粒酶Ｂ的表达。四星图像分析系统对杂交阳性信号面积与病变面积行半定量分析，并对两者行相关性分析。结果　实验组小鼠２０只中１６只检测到颗粒酶ＢｍＲＮＡ的阳性信号，阳性率８０％，对照组阴性。杂交阳性信号面积与病变面积呈显著正相关（ｒ＝０．８８，Ｐ＜０．０５）。结论　病毒性心肌炎小鼠心肌浸润细胞中检测到颗粒酶Ｂ的表达。提示颗粒酶Ｂ可能在病毒性心肌炎的发病机制中起一定作用。     

反义寡核苷酸抑制柯萨奇病毒B3致病作用的实验研究

目的：观察在细胞培养系统和小鼠体内反义寡核苷酸（ＡＯＤＮ）抑制柯萨奇病毒Ｂ３（ＣＶＢ３）致病作用。方法：观察细胞病变效应（ＣＰＥ）,常规微量法滴定病毒的５０％组织细胞感染量（ＴＣＩＤ５０）以及观察感染小鼠心肌组织的病理改变。结果：１．ＡＯＤＮ可推迟和减轻ＣＶＢ３感染细胞ＣＰＥ,且随ＡＯＤＮ浓度增高,对ＣＰＥ的抑制作用增强;培养上清中病毒滴度随ＡＯＤＮ浓度升高而降低。２．随ＡＯＤＮ剂量增加,感染小鼠     

新生儿柯萨奇B3病毒性心肌炎及其病原学检测

１９９２年北京市某医院发生一次新生儿柯萨奇Ｂ３病毒感染流行，发病３５例，合并病毒性心肌炎８例，２例死亡，尸解病理诊断为急性弥漫性非化脓性心肌炎。为明确病原学诊断，用ＥＬＩＳＡ测患儿血中柯萨奇Ｂ病毒抗体ＩｇＭ；用ＰＣＲ测患儿血及心肌组织中的肠道病毒（包括柯萨奇病毒）ＲＮＡ；用大便及咽拭子分泌物进行病毒分离，证实此次流行的病原为柯萨奇病毒Ｂ３。认为ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ方法快速、敏感、特异强，可推广应用。     

新生儿柯萨奇B＿3病毒性心肌炎及其病原学检测

１９９２年北京市某医院发生一次新生儿柯萨奇Ｂ３病毒感染流行，发病３５例，合并病毒性心肌炎８例，２例死亡，尸解病理诊断为急性弥漫性非化脓性心肌炎。为明确病原学诊断，用ＥＬＩＳＡ测患儿血中柯萨奇Ｂ病毒抗体ＩｇＭ；用ＰＣＲ测患儿血及心肌组织中的肠道病毒（包括柯萨奇病毒）ＲＮＡ；用大便及咽拭子分泌物进行病毒分离，证实此次流行的病原为柯萨奇病毒Ｂ３。认为ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ方法快速、敏感、特异强，可推广应用。     

定量PCR比较病毒性心肌炎血和心肌肠道病毒RNA含量及其与心肌病变的关系

目的 研究小鼠柯萨奇病毒性心肌炎模型血,心肌柯萨奇病毒ＲＮＡ含量的关系;外周血中肠道病毒ＲＮＡ含量与心肌病理积分的关系。方法 利用定量ＰＣＲ方法检测病毒性心肌炎小鼠模型急性期外周血,心肌肠道病毒ＲＮＡ含量。结果 ＣＶＢ３感染所致心肌炎小鼠外周血,心肌中肠道病毒ＲＮＡ含量显著正相关。     

C—myc蛋白的表达与小鼠病毒性心肌炎心肌细胞凋亡的关系

给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种嗜鼠心肌柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＢＶ３ｍ）诱发急性病毒性心肌炎（ＶＭＣ），感染病毒９天后，ＶＭＣ检出率为９３．３３％。应用电镜、原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）及免疫组化技术检测发现，感染鼠心肌中有细胞凋亡和Ｃ－ｍｙｃ蛋白表达，二者阳性率分别为７６．６７％和８０．００％。提示细胞凋亡和Ｃ－ｍｙｃ蛋在与ＶＭＣ的发生与发展。     

Effect of Prevention and Treatment of Murine Acute Viral Myocarditisand Protection of Lymphoid Organ Atrophy withXinkang Oral Liquid (心康口服液)

Ｉｔｈａｓｂｅｅｎｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｔｈａｔｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓｉｓｔｈｅｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔｃａｕｓｅｏｆｖｉｒａｌｍｙｏｃａｒｄｉｔｉｓｉｎｈｕｍａｎ(1) ,ｗｈｉｃｈｉｓａｃｏｍｍｏｎｄｉｓｅａｓｅｓｅｒｉｏｕｓｌｙｅｎｄａｎｇｅｒｈｅａ     

玉丹荣心丸抗急性病毒性心肌炎的实验研究

目的观察中成药玉丹荣心丸对B组柯萨奇病毒(CVB)感染Balb/c小鼠所致急性病毒性心肌炎的治疗效果的研究。方法Balb/c鼠腹腔接种1000 TCID50/0.1ml CVB,经过两周的持续注射成功获得急性病毒性心肌炎的动物模型。将动物随机分为病毒对照组、药物组,药物组使用中成药玉丹荣心丸进行灌胃给药,而病毒对照组不使用任何药物,28天后观察小鼠心肌组织的病理改变。结果药物组小鼠心肌组织的病理改变轻微,并有好转迹象,而病毒对照组病理改变严重,有死亡。结论玉丹荣心丸对B组柯萨奇病毒感染所致的急性病毒性心肌炎有很强的治疗效果。     

黄龙口服液对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠白介素12水平及自然杀伤细胞活性的影响

目的 :探讨黄龙口服液干预柯萨奇B3 (CVB3 )病毒性心肌炎小鼠动物模型血清IL 12水平和NK细胞活性的影响。方法 :CVB3 诱导Balb/c小鼠心肌炎为研究对象 ,给予黄龙口服液进行干预 ,分别于用药后第 3,7和 14d测定小鼠血清IL 12水平和NK细胞活性。同时测定心脏组织中病毒滴度 ,进行心肌病理学检查。结果 :黄龙组小鼠血清IL 12水平明显升高 ,NK细胞活性增强 ,早期小鼠心脏组织中病毒滴度下降 ,心肌损害较轻。结论 :黄龙口服液干预病毒性心肌炎小鼠在免疫损伤中起到一定的保护作用 ,早期提高宿主对病毒免疫应答能力 ,能有效提高CVB3 感染小鼠血清IL 12水平和提高NK细胞活性 ,从而在早期降低心脏组织中病毒滴度 ,减轻心脏损伤程度 ,有效改善预后。     

静脉丙种球蛋白地小鼠病毒性心肌炎T细胞亚群,NK细胞及部 …

为探讨病毒性心肌炎（ＶＭＣ）免疫发病机理及静脉丙种球蛋白（ＩＶＩＧ）治疗ＶＭＣ的作用机理,将ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为正常对照组、病毒模型组、ＩＶＩＧ保护组及ＩＶＩＧ治疗组,观察ＩＶＩＧ对小鼠脾脏Ｔ细胞亚群、ＮＫ细胞、ＩＬ－１、ＩＬ－２及外周血ＴＮＦ活性的影响。结果：与正常对照组比较,病毒模型组ＮＫＣ活性及ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８均明显降低,ＩＬ－１、ＩＬ－２及ＴＮＦ活性明显升高,而ＩＶＩＩＧ保护组一     

克隆测序技术在小鼠心肌炎实验中的应用

目的 :应用克隆测序技术结合观察急性病毒性心肌炎模型的发病过程及病理改变 ,从病原学及病理学角度鉴定柯萨奇病毒B3 亲心肌株 (CVB3m)诱导BALB/c小鼠急性病毒性心肌炎 (VMC)模型 ,为VMC模型提供科学的鉴定方法。方法 :以CVB3m腹腔注射诱导BALB/c小鼠心肌炎 ,分别于 3、5、7、10、14天取心肌 ,以RT -PCR法检测CVB3m,并通过质粒克隆测定cDNA序列 ;同时观察小鼠心肌病理组织学变化。结果 :感染小鼠心肌组织中RT -PCR扩增产物与已知CVB3mcDNA序列相应片段吻合度 >99 3% ;小鼠心肌病变从心肌细胞肿胀、少数淋巴细胞浸润到坏死和炎性病变随病程发展逐渐增多 ,第 10天达高峰 ,至第 14天炎症逐渐恢复 ,出现不同程度的纤维化。结论 :提示用克隆测序法鉴定为VMC发病机理及药物防治研究提供了稳定可靠的动物模型 ,并为研究CVB3m病毒感染小鼠后基因变异提供了参考依据。     

大蒜多糖对小鼠病毒性心肌炎的治疗作用

目的 :探讨大蒜多糖对实验性小鼠病毒性心肌炎的治疗作用。方法 :采用BALB C小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)建立实验性小鼠病毒性心肌炎模型。小鼠随机分为正常对照组、模型组、大蒜多糖组、黄芪组。注射病毒 1h后给药 ,连续 7d ,于第 8d处死存活鼠取材。观察小鼠存活率及心肌病理变化 ,测定血清心肌酶、丙二醛(MDA)、一氧化氮 (NO)含量和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)活力、心肌组织中病毒滴度及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果 :大蒜多糖治疗组与模型组相比小鼠存活率明显增高 ,心肌组织病理损伤减轻 ,血清心肌酶、MDA、NO含量显著降低 ,GSH Px活力升高 ,心肌组织中病毒滴度及iNOS表达降低。结论 :大蒜多糖对实验性小鼠病毒性心肌炎具有治疗作用     

Balb/c小鼠CVB3病毒性扩张型心肌病并心力衰竭模型的建立

目的 建立慢性病毒性心肌炎、扩张型心肌病并心力衰竭的实验模型。方法 用CVB3反复感染Balb／c小鼠，分别于感染后第1、3、6、9个月不同时点，采用超声心动图观察小鼠左心室收缩期及舒张末期内径及射血分数。取心肌经HE染色观察其病理形态特征，VG染色观察心肌纤维化，及原位末端标记法观察细胞凋亡。结果B超发现，感染病毒后小鼠左心室收缩末期及舒张末期内径增大，左心室射血分数(EF)下降，与正常小鼠相比P＜O．050反复感染病毒3个月内组织病理学特征与慢性心肌炎类似，而3个月后则呈现出典型的扩张型心肌病理特征。在慢性期主要是病变部位的炎症细胞及心肌细胞凋亡，而扩张型心肌病期出现心肌细胞散在性凋亡。结论 Balb／c小鼠反复感染病毒可能是慢性心肌炎演变为扩张型心肌病并心力衰竭的良好的实验模型；心肌间质纤维与细胞凋亡在心肌炎演变为扩张型心肌病发病过程中起重要的作用。     

柯萨奇病毒B_3致病模型的建立

目的 :建立柯萨奇病毒 (CV)B3 的实验动物模型 ,以期为抗病毒药物筛选提供工具。方法 :雄性BALB/C鼠腹腔注射CVB3 后 ,观察小鼠发病症状 ,并在不同时间处死小鼠 ,取小鼠心、脾、肝、肾等组织进行病毒分离、病毒核酸检测、心肌组织病理检查。结果 :感染后第 3d小鼠即出现症状 ,第 5d在小鼠的心脏、脾脏、肾脏均可分离出感染性病毒 ,其滴度分别为 :10 4 .7,10 3.3 ,10 3.2 TCID50 / 0 .1ml,同时小鼠心、脾、肾、等组织及血清中CVB RNA检测为阳性 ,心肌组织出现典型炎性改变。结论 :雄性BALB/C鼠感染CVB3 后可引起病毒性心肌炎发生     

基于MCP-1的不同干预方式对病毒性心肌炎的影响作用

目的:比较N端2-8氨基酸缺失的突变型MCP-1(mMCP-1)干预和抗-MCP-1抗体干预对病毒性心肌炎小鼠发病的影响作用。方法:CVB3腹腔注射BALB/c小鼠,随机分组处理:病毒性心肌炎模型组、抗体干预组、羊IgG对照组、mMCP-1干预组和空质粒对照组,并设未感染生理盐水对照组。采用心肌注射的方式在心肌转移抗体或mMCP-1真核表达质粒pVMm。观察小鼠心脏重量和体重的比值(HW/BW)、血清CK-MB水平、心肌组织病理学积分(PS)、心肌组织病毒载量和心肌浸润的单个核细胞变化。结果:经20μg、40μg和60μg pVMm干预的小鼠,心肌组织病变和心肌损伤较模型组减轻;不同pVMm干预剂量对心肌组织浸润的单个核细胞数的影响作用不同,40μg或60μg pVMm干预的小鼠,心肌组织中浸润的单个核细胞数明显低于模型组,20μg pVMm干预的小鼠,心肌组织中浸润的单个核细胞数与模型组相比没有明显的差异。抗-MCP-1抗体干预和mMCP-1干预小鼠相比,HW/BW、血清CK-MB水平和PS未见明显差异。结论:mMCP-1和抗-MCP-1抗体均可缓解病毒性心肌炎心肌组织病变和心肌损伤,mMCP-1可替代抗-MCP-1抗体用于病毒性心肌炎的干预治疗。     

芪芍五味子复方制剂抗CVB3病毒抑制心肌细胞凋亡机制的研究

目的 研究中药芪芍五味子复方制剂抗柯萨奇B3病毒(CVB3)效果及抑制病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡的机制.方法 采用细胞培养法观察细胞病变效应(CPE)与广谱抗病毒药物病毒唑对照,进行复方制剂体外抗病毒实验;BALB/c小鼠接种CVB3建立病毒性心肌炎动物模型,随机分为正常对照组、病毒对照组、复方制剂治疗组和维生素C与病毒唑联用组,观察各组心肌病理变化,Real-time定量PCR检测小鼠心肌CVB3RNA水平,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡和坏死率.结果 复方制剂体外最大无毒浓度为19.53g/L,预防给药、同时给药和治疗给药3种方式细胞培养所需有效药物浓度均低于病毒唑;与同期病毒对照组小鼠比较,复方制剂治疗组小鼠心肌炎症性病理变化明显减轻,CVB3RNA拷贝数降低(P<0.05),心肌细胞凋亡和坏死率显著降低(P<0.05).结论 芪芍五味子复方制剂可有效抗病毒,抑制病毒诱导心肌细胞凋亡,对CVB3感染小鼠心肌有良好的保护作用.