无醛固定液与甲醛固定液对组织形态学保存效果比较

组织固定是组织处理过程中最重要的环节,在病理诊断学中,10%中性缓冲福尔马林以其低成本、易配制和固定后组织保持优异的组织形态学特点而成为具有悠久传统的国际通用组织固定液。近年来,随着人们环保意识的提高,甲醛的危害性逐渐动摇了其作为病理学界固定“金标准”的地位,病理工作人员长期暴露于甲醛严重超标的环境中,对身体健康造成严重危害[1]。国外发达国家已经推广应用环保型固定液取代甲醛固定液。本实验通过配制3种无醛固定液来进行组织固定,通过 HE染色、组织化学染色(特殊染色),并以NBF作为对照来比较不同固定液对组织形态学方面的影响,试图建立新的高质量的组织固定液。     

改良Masson染色法在肾穿刺活检组织染色中的应用

肾穿刺活检组织常规特殊染色有3种染色：过碘酸雪夫反应(PAS)、高碘酸-乌托品银(PASM)、Masson染色。其中Masson三色染色主要用来观察肾小球嗜复红蛋白沉积物(免疫复合物)及肾脏内胶原纤维增生等。但常规的Masson三色染色法对肾小球内免疫复合物显色颜色对比不鲜艳。我们采用改良的Masson三色染色法,通过组织切片的补充固定法、试剂浓度的改良组合、     

六胺银加马松三色双重染色在肾穿刺活检组织中的应用

肾小球病是发病率较高的疾病,肾穿刺检查是确诊肾脏疾病的重要手段,光镜观察肾组织病变在进行肾小疾球疾病诊断和分类工作中起重要作用[1]。常规HE染色不能清晰地显示肾小球基膜,在实际工作中除免疫荧光抗体检测外, PAS、PASM、Masson 特殊染色才能将基膜清晰地显示出来[2]。尤其是六胺银加马松三色双重染色在光镜下观察基膜增厚和钉突、双轨,对诊断膜性肾小球肾炎及其它各种肾小球疾病有重要价值,是观察肾小球基膜改变的重要方法之一[3]。     

比较三种不同固定液对淋巴结冷冻切片染色质量的影响

<正>淋巴结活检的主要作用是对恶性肿瘤淋巴转移进行分级,明确肿瘤转移的具体范围,减少不必要的手术及术后并发症^[1]。术中冷冻切片能在较短时间内获得淋巴结的病理诊断结果,对手术治疗方式和手术范围具有较高的指导作用,因此越来越受到临床医师的青睐。淋巴结组织由于其细胞丰富,质地较脆,外围常有脂肪包绕,在日常冷冻切片工作中较难获取高质量切片。     

小鼠卵巢组织切片HE和Masson染色法的比较

正卵巢是雌性动物生殖系统的重要器官,卵泡是卵巢组织中的主要结构成分。卵巢长期处于动态变化中,其中卵泡受到一系列复杂精细的调控而发生形态和结构的变化,处于不同的发育阶段~([1])。卵泡根据形态和功能可分为原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡四个阶段,不具备生长优势的卵泡在发育进程中形成闭锁卵泡~([2])。对卵巢的组织学和病理学研究中,常常需要借助染色来观察组织切片中卵泡的形态结构,识别各种发育阶段的卵泡。HE、PAS、Masson染色是小鼠卵巢组     

不同固定液和固定时间对大肠癌淋巴结免疫组化染色的影响

目的:探讨不同固定液和固定时间对大肠癌淋巴结组织的免疫组化染色效果.方法:42枚原发大肠癌淋巴结组织,分别用不同pH:5.0、6.0、7.0、8.0、9.0的混合甲醛固定液固定不同的时间(6h以下、6～12 h,1～7d,8d以上),进行组织免疫组化染色.以细胞角蛋白20为目标抗原,用Olympusdp70图像采集分析仪依据染色强度和阳性细胞率来计算评分.结果:采用pH7.0的固定液处理后,样品的阳性表达率为92.86%,显著高于pH为5.0、 6.0、 8.0、 9.0的固定液处理(P<0.05);固定时间为6～12 h,样品的阳性表达率为97.62%,显著高于固定时间为6h以下、1～7d、8d以上的各处理(P<0.05).结论:以细胞角蛋白20为目标抗原,选择pH值7.0的混合缓冲甲醛固定液固定大肠癌淋巴结标本6～12 h,可以得到最佳免疫染色效果.     

四种固定液对肾上腺组织冰冻切片固定效果的比较

目的　以肾上腺组织为例观察比较丙酮、4%多聚甲醛、AAF和95%乙醇四种固定液的固定效果,为临床做出更好的快速冰冻切片,及时、准确的做出病理诊断提供实验基础。 方法　取人正常肾上腺组织,冰冻切片后分别用四种固定液进行固定,然后行HE染色,观察各组的组织结构、细胞核染色、细胞质染色和核质对比度情况。 结果　经冷丙酮固定的肾上腺组织切片,镜下组织结构清晰,高倍镜下观察：细胞核形态清晰完整,核染色和胞质染色清晰对比度好;经4%多聚甲醛固定的切片,镜下组织结构不清,细胞核形态较清晰,核染色和胞质染色对比度差;经AAF液固定的组织切片,镜下组织结构尚清晰,细胞核部分溶解,核染色均一,胞质染色较清晰;经95%乙醇固定的组织,组织结构尚清晰,核溶解普遍,胞质染色不清晰。 结论　四种固定液都可用于固定肾上腺组织及其它细胞成分较多的病理肿瘤组织,但冷丙酮效果最好。     

微波在Masson三色快速染色中的应用

常规的Masson三色染色方法需要较长时间,给病理技术人员和快速诊断带来诸多不便。为此,我们将微波辐射应用于Masson三色快速特殊染色技术全过程,通过反复实验不仅明显缩短了整个制片过程,而且进一步提高了病理技术质量和工作效率。     

肾穿刺活检组织切片制备技术的改进

肾穿刺活检组织切片的制备是病理技术工作中一项特殊的技术,其制备质量的优劣在一定程度上关系到临床肾病诊治工作的开展。为提高肾穿刺活检组织切片制备技术、准确把握肾脏疾病的诊断与治疗,作者收集141例肾穿刺活检组织标本,在组织标本的切割分配与固定、半薄切片的制备以及常规染色、特殊染色和免疫组化染色方面,对肾穿刺活检组织切片的制备进行改良,效果良好,现介绍如下。     

盐酸脱钙液后脱钙在骨髓组织活检中的应用及体会

<正>骨髓组织活检是明确骨髓病变最主要的方法之一,但由于骨髓组织中含有大量的磷酸钙和碳酸钙,在常规制片中易致切片破碎、刀痕严重等问题,因此对骨髓组织进行充分的脱钙也显得格外重要[1-2]。目前在临床工作中,我们常使用的脱钙液有酸类脱钙液、电解质脱钙液、螯合剂脱钙液、离子交换树脂脱钙液等[2-3]。这些脱钙液作用机制不同,效果各有千秋[4]。在实际临床工作中我们对脱钙液选择的标准应该是效果强、时间短、对组织细胞形态以及对抗原影响小等[5]。本实     

组织固定对免疫组织化学染色的影响

影响免疫组化染色结果的因素较多 ,从组织离体到取材前对组织进行预处理能大大改善免疫组化结果。作者在这方面进行了摸索 ,现将有关体会介绍如下。1　材料与方法1 1　 标本　所有组织均选用 1999年 4～ 7月本校附属湘雅医院外科手术切除的乳腺癌、肝癌及肺癌根治术标本各 2 0例。每例标本均见明显的肿块。1 2　组织处理方法　手术标本从外科送病理科后立即从肿块中央切开 ,把组织分为两部分 ,一部分置原固定液中 (组织离体后已置固定液中 )不作任何处理 (未处理组 ) ;另一部分按下列方法进行处理 (处理组 ) :(1)用脏器刀将组织切开 ,每刀之…     

骨髓活检组织石蜡切片制作的改进及特殊染色的应用

骨髓活检组织石蜡切片制作是病理诊断血液病常用制片方法,近年来在骨髓组织制片和染色上应用了一些新方法,但作为常规石蜡制片和染色目前仍在广泛地采用。本文就组织制片的改进和Giemsa染色方法的改良与特殊染色互补应用旨在对诊断起辅助     

肾穿刺组织荧光加苏木精染色效果观察

在肾脏病理诊断中 ,确定免疫复合物在肾组织中的沉积是很重要的。肾穿组织切片荧光染色后 ,肉眼和普通光镜下是无色的 ,不易观察组织结构 ,加染苏木后 ,则易行光镜观察 ,对荧光无影响。1　材料和方法　　我们取 10例新鲜肾穿组织 ,切 0 5ｃｍ进行冷冻切片 ,切片厚 3μｍ ,采用武汉博士德生物工程有限公司试剂分两组同时行ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ及Ｃ3ｃ荧光染色 ,37℃染色 30ｍｉｎ后行ＰＢＳ洗 3ｍｉｎ× 3次 ,蒸馏水洗。第一组直接缓冲甘油封片 ,第二组浅染苏木精 1ｍｉｎ ,水洗 ,缓冲甘油封片。在荧光镜下分别观察两组切片 ,发现两组切…     

单纯微波固定在组织制片中的应用

在组织制片过程中,组织的正确固定具有重要意义,适当而完好的固定是优良组织切片的基础,特别在免疫组化染色时尤为重要。良好的固定能保存细胞内的物质接近其生活状态时的形态和位置,尽量减少抗原成分弥散或丢失,以保证染色的特异性及敏感性。在临床病理及科研工作中,又常需要我们在短时间内制作出高质量的切片,为此笔者尝试利用微波技术进行组织固定,探索单纯微波固定在组织制片中的应用,以期缩短制片时间,提高制片染色质量。     

几种常见免疫复合物性肾炎肾小球免疫荧光和Masson三色染色的对比观察

肾穿刺组织的免疫病理（免疫荧光或免疫组化）和Masson三色染色法,对于确定一些常见的抗体介导或免疫复合物性肾小球肾炎是重要的两种检查手段,尤其是对于尚未开展常规电镜检查的单位,加强对两者检查结果的对比观察,对于确定肾小球肾炎的病理类型有着十分重要的意义。本文集中比较观察不同类型肾小球肾炎病变肾小球免疫荧光和Masson三色染色所示免疫球蛋白或补体的形态特征,增强对其识别或鉴别能力,以图提高对一些常见免疫复合物性肾炎的诊断水平。     

实体组织单细胞悬液制备方法

在实际工作中由于机器操作和手工操作均不能保证每张玻片的条件一致,因此到目前为止还没有有效可靠的对照方法,故其标准化问题日益受到大家的重视。我们以新鲜组织和固定组织为标本,探讨实体组织单细胞悬液制作的具体过程,为实现一一对照式原位玻片检测技术寻求一套全面、可靠的技术方法。[第一段]     

HE染色质控组织的选取及优化

<正>良好的HE切片对病理诊断至关重要,高质量的HE染色红蓝对比鲜明;可见3种红色(大红、粉红和紫红),显示色彩亮丽、对比鲜明及细腻的细节;核染色质清晰^[1]。使用质控组织评估染色效果是HE染色质量控制的重要手段,以往质控组织多选用单一类型组织,存在较大的局限性,无法全面地反映不同类型标本的染色效果。本科室运用组织芯片进行HE染色质控,取得了良好的效果,同时也遇到了组织收集和芯片蜡块制备难度大、对质控人员能力要求高、质控时间偏长等问题,     

介绍一种标本的保色固定液

在病理学的工作和研究中 ,典型病理标本的保存具有重要价值。目前标本的保存、陈列所用的甲醛固定液 ,长期放置会发生聚合反应 ,产生多聚甲醛的白色沉淀物 ,使固定液变浑浊 ,并且标本会失去原色。标本的保存问题是多年来我们一直探讨的问题 ,为此 ,通过对比观察 ,配制了一种较理想的标本保色固定液 ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　病变典型、具有保留价值的教学标本。1.2　溶液配制　Ⅰ液 :10 %中性缓冲福尔马林液 (甲醛 10 0ｍｌ,Ｎａ2 ＨＰＯ46 5 ｇ ,Ｎａ2 ＨＰＯ44ｇ ,蒸馏水 890ｍｌ) ;Ⅱ液 :甲醇 10ｍｌ。将Ⅰ液和Ⅱ液混合 ,…     

不同固定液、染色法显示结缔组织肥大细胞效果的比较

本研究用6种固定液、4种染色法,观察对显示小鼠耳廓、舌和背皮肤结缔组织肥大细胞的影响。结果表明:一种固定液固定的组织,用不同的染色法染色或不同固定液固定的组织,用一种染色法染色,显示肥大细胞的效果不同。这可能是由于固定液能影响肥大细胞颗粒对染料的亲合力。本文对不同部位的结缔组织肥大细胞对固定液的反应有差异这一现象,进行了讨论。