血清肌型烯醇化酶放免实验与临床意义

烯醇化酶是由三个免疫学上性质不同的亚基（α，β和γ）组成的糖酵解酶。β－烯醇化酶（αβ和ββ）存在于骨骼肌和心肌组织，是肌肉特异烯醇化酶（Ｍｕｓｃｌｅ－ｓｐｅｃｉｆｉｃｅｎｏｌａｓｅ，ＭＳＥ），它催化２－磷酸甘油酸成为磷酸烯醇式丙酮酸。我们建立了ＭＳＥ放免实验测定法（ＲＩＡ）并用于检测肌病和急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者血清ＭＳＥ水平，并观察了血清ＭＳＥ与肌酸激酶（ＣＫ）和肌红蛋白（Ｍｂ的相关性。实验结果显示：ＡＭＩ和肌病患者血清ＭＳＥ水平明显升高，正常值为２３．９±１０．９μｇ／Ｌ，肌病为２４９．４±２０３．１μｇ／Ｌ和ＡＭＩ为２７３．９±２０６．７μｇ／Ｌ。在这些患者中ＣＫ和Ｍｂ也明显升高并与ＭＳＥ有很好的相关性（ＣＫ，ｒ＝０，８７８；Ｍｂ，ｒ＝０．６１９）。实验结果表明血清ＭＳＥ可作为肌病及ＡＭＩ特异诊断指标。     

应用RNA探针检测流感病毒特异性RNA

插入流感病毒Ａ／Ａｉｃｈｉ（Ｈ３Ｎ２）ＮＰ ｃＤＮＡ的ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ＾＋质粒，分别经Ｘｃｍ Ｉ和ＢｓｐＭＩ线性化之后，以此为模板用Ｔ７和Ｔ３ＲＮＡ多聚酶合成了同位素标记的正链和负链ＲＮＡ探针。流感病毒在狗肾传代细胞（ＭＤＣＫ）生长良好，而在其变异株ＭＤＣＫ－Ｌ细胞生长受阻。为了分析比较两种细胞中流感病毒基因复制情况，作者应用上述ＲＮＡ探针，检测了接种流感病毒的两种细胞中病毒ＲＮＡ（ｖ     

神经元特异性烯醇化酶与中枢神经系统疾病

烯醇化酶（ｅｎｏｌａｓｅ,ＥＣ４２１１１１）是参与糖酵解的一种重要酶,由α、β、γ三种亚基以二聚体的形式组成αα、β、γγ、αγ、αβ五种同功酶。其中γγ型特异地存在于神经元和神经内分泌细胞中,称为神经元特异性烯醇化酶（ｎｅｕｒｏｎｓｐｅｃｉ...     

聚合酶链反应在MLCK表达载体构建中的应用

用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）方法扩增 出含有Ｓａｌ Ⅰ位点和转录起始点ＡＴＧ的肌球蛋白轻链激酶（ｍｙｏｓｉｎ Ｌｉｇｈｔ ｃｈａｉｎ ｋｉｎａｓｅ，ＭＬＣＫ）ｃＤＮＡ片段，并入质粒ｐＢＫｒｓｖ中，构建成能在宿主细胞中表达的表达本，并通过酶切图谱、ＳａｌⅠ位点ＤＮＡ序列是到证实。为进一步研究ＭＬＣＫ的表达奠定基础。     

ZIPI和ZIP2不同程度激活PKC对钾离子通道的磷酸化

蛋白修饰酶的定向修饰反应是蛋白合成后进行特异、有效修饰的一个关键步骤。ＺＩＰＩ和ＺＩＰ２是两个互为剪切异构体的蛋白，它们既与钾离子通道的Ｋｖβ２亚基结合，又与蛋白激酶ｃ（ｐｋｃξ）结合。由于它们的联结作用，使三者形成一个复合物。而ＺＩＰＩ和ＺＩＰ２厅不同程度激活ｐｋｃξ对钾离子通道的磷酸化，且二者可以相互结合，形成异型多聚体，这就使它们对ｐｋｃξ的刺激复杂多变。另外，ＺＩＰＩ和ＺＩＰ２共存于同一种     

毛绞股蓝化学成分研究（I）

从毛绞股蓝［Ｇｙｎｏｓｔｅｍｍａｐｕｂｅｓｃｅｎｓ（Ｇａｇｎｅｐ．）Ｃ．Ｙ．Ｗｕ］全草的水提取物中分离到４个化合物，鉴定其中３个为：（ｌ）α－菠甾醇（α－ｓｐｉｎａｓｔｅｒｏ１），（２）商陆黄素（ｏｍｂｕｉｎ），（３）邻苯二酚（ｐｙｒｏｃａｔｅｃｈｏｌ）．化合物（４）为一新结构达玛烷型皂甙，结构正在鉴定。     

心脏术后心肌损伤生化标志物的动态变化及意义

目的：探讨心肌缺血损伤与各生化标志物动态变化的关系。方法：采用动力学方法和酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）对３２ 例心脏手术病人（心脏手术组）、８０例健康者（对照组Ⅰ）和８０ 例骨骼肌损伤者（对照组Ⅱ）进行血清ＣＫ,ＣＫ－ＭＢ,ＬＤＨ,α－ＨＢＤＨ,ＡＳＴ和ｃＴｎＴ的测定。结果：对照组Ⅱ中ＡＳＴ、ＣＫ、ＬＤＨ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ－ＭＢ与对照组Ｉ比较均有显著差别,而ｃＴｎＴ仅１ 例有所升高。心脏手术后各生化标志物均有较显著升高,其中ｃＴｎＴ、ＣＫ－ＭＢ升高尤为显著,ｃＴｎＴ高峰平均值较参考值高出２８倍,ＣＫ－ＭＢ高峰平均值较参考值高１６ 倍。心脏手术后ｃＴｎＴ升高最快,６ ｈ 其活力达高峰,持续１～３ ｄ;ＣＫ－ＭＢ１２ ｈ 活力达高峰,持续１～２ ｄ,其余生化标志物升高较迟,持续时间亦较长。结论：ｃＴｎＴ是心肌缺血损伤最具有意义的标志物。     

细胞外信号调节激酶与血管平滑肌细胞的增生、肥厚

哺乳动物细胞丝裂原活化的蛋白激酶家族（ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ／ＭＡＰＫ）至少包括细胞外信号调节激酶（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄｋｉｎａｓｅ／ＥＲＫ）、ｃ－ｊｕｎＮ末端蛋白激酶（ｃ－ｊｕｎＮ－ｔｅｒｍｉｎａｌｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ／ＪＮＫ）和ｐ３８三个亚族［１］。ＥＲＫ是最主要的ＭＡＰＫ,也是研究得最透彻的一部分。活化的ＥＲＫ有两种形式：ＥＲＫ１（ｐ４２ＭＡＰＫ）和ＥＲＫ２（ｐ４４ＭＡＰＫ）,能催化激活蛋白－１（ＡＰ－１）等…     

TNF—α的生物活性检测法与酶联免疫吸附法比较

比较了生物活性检测法与酶联免疫吸附法对大鼠腹腔巨噬细胞分泌的肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α，ＴＮＦ－α）的检测。在静息Ｍ＋φ培养上清液中，用两种方法的未测到ＴＮＦ－α；而脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ，１００μｇ／Ｌ）刺激组，用两种方法均测到大量ＴＮＦ－α；如ＬＰＳ与秋水仙碱（ｃｏｌｃｈｉｃｉｎ，Ｃｏｌ）联用，ＴＮＦ－α的产生受到抑制，ＢＡ法检测     

2型糖尿病线粒体基因变异的研究

目的：探索中国人２型糖尿病与线粒体变异的关系。方法针对已经报道的线粒体基因的高发突变区（ｍｔ３１５３－３５５１）近４００ｂｐ的片段在中国人正常人群、２型糖尿病群体及１２个母系遗传的２型糖尿病系中进行聚合酶链反应－单链构象多态性（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）研究,发现异常构象再进     

糙苏化学成分的研究

从云南产糙苏Ｐｈｌｏｍｉｓｕｍｂｒｏｓａ地上全草分得９化合物,鉴定了它们的化学结构,分别是：β－谷甾醇（β－ｓｉｔｏｓｓｔｅｒｏｌ,Ｉ）,熊果酸（ｕｒｓｏｌｉｃａｃｉｄ,Ⅱ）,黄花香茶菜甲素（ｓｃｕｌｐｏｎｅａｔｉｎＡ,Ⅱ）,黄花香茶菜丙素（ｓｃｕｌｐｏｎｅａｔｉｎＣ,ＩＶ）２α－羟基熊果酸（２α－ｈｙｄｒｏｘｙｕｓｏｌｉｃａｃｉｄ,Ｖ）委陵菜酸（ｔｏｒｍｅｎｔｉｃａｃｉｄ,Ⅳ）,ｅｎｔ－７α,１     

鸡肌球蛋白轻链激酶在大肠杆菌中的表达

目的建立鸡肌球蛋白轻链激酶（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＬＣＫ）ｃＤＮＡ表达克隆。方法将ＭＬＣＫ功能区（自动抑制区、钙调蛋白识别区和活性催化区）的ｃＤＮＡ插入质粒ｐＢＫｒｓｖ中，重组质粒（ｐＢＫｒｓｖ－ＭＬＣＫ）转化入大肠杆菌中并获得表达。结果Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹试验表明表达产物的分子量与插入片段ｃＤＮＡ所含信息相一致。结论所获重组克隆在体外表达，表达蛋白具有使多肽底物磷酸化的活性     

一氧化氮及一氧化碳对碱性成纤维细胞生长因子促血管平滑肌细胞增殖作用的影响

目的：研究一氧化氮（ＮＯ） 及一氧化碳（ＣＯ） 对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ） 促平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ, ＶＳＭＣ）增殖作用的影响及其机制。方法：以３ＨＴｄＲ参入法测定平滑肌细胞增殖程度,放射活性法测定ＶＳＭＣ内蛋白磷酸化程度、蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｃ,ＰＫＣ） 及丝裂素活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ, ＭＡＰＫ）活性。结果：孵育２４ ｈ 后,ｂＦＧＦ刺激的ＶＳＭＣ增殖较对照组增加１．１ 倍（Ｐ＜ ０．０１）,细胞内蛋白磷酸化程度增加３８．２％ （Ｐ＜ ０．０１）,ＰＫＣ 及ＭＡＰＫ 活性分别增加１．５ 和２ ．５倍（ Ｐ＜ ０．０１）;ＣＯ 前体ｈｅｍｅＬｌｙｓｉｎａｔｅ（ＨＬＬｙｓ） 及ＮＯ 前体ＬＡｒｇｉｎｉｎｅ（ ＬＡｒｇ） 对静止期ＶＳＭＣ 生长无显著影响,亦未引起细胞内蛋白磷酸化、ＰＫＣ及ＭＡＰＫ 活性发生显著改变;５、１０ 、２０ μｍｏｌ·Ｌ－１ ＨＬＬｙｓ 使ｂＦＧＦ刺激的ＶＳＭＣ增殖分别减少４３．４ ％ 、４６．６％ 和４７ ．６％     

枳Ju叶化学成分研究（Ⅲ）

从枳Ｊｕ（ｈｏｖｅｎｉａ ａｃｅｒｌａ Ｌｉｎｄｌ．）叶中分得两个达玛烷型三萜皂甙并分别鉴定为：枳Ｊｕ皂甙Ｃ２（ｈｏｖｅｎｉａ ｓａｐｏｎｉｎＣ２,Ｖ）,酸枣仁皂甙元－３－「α－Ｌ－吡喃鼠李糖（１→２）」「β－Ｄ－吡喃半乳糖（１→２）－β－Ｄ－毗喃葡萄糖（１→３）」－α－Ｌ－毗喃阿拉伯糖甙（ｊｕｊｕｂｏｇｅｎｉｎ－３－Ｏ－「α－Ｌ－ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）」β－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏｐ     

Influence of octapeptide of cholecystokinin, vasoactive intestinal peptide and substance P on dynamics of biliary system and cardiovascular system

Ｃｈｏｌｅｃｙｓｔｏｋｉｎｉｎ（ＣＣＫ）,ｖａｓｏａｃｔｉｖｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｐｅｐｔｉｄｅ（ＶＩＰ）,ａｎｄｓｕｂｓｔａｎｃｅＰ（ＳＰ）ａｒｅｋｎｏｗｎｔｏｐｌａｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｓｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｓｐｈｉｎｃｔｅｒｏｆ...     

宝兴卫矛中三萜成分研究

从宝兴卫矛Ｅｕｏｎｙｍｕｓ ｍｕｐｉｎｅｎｓｉｓ Ｌｏｅｓ ｅｔ ＲｅｈｄＫ 中分离得到６个化合物,经理化和光谱分析分别鉴定为木栓酮（ｆｒｉｅｄｅｌｉｎ,Ⅰ）,美登木酸（ｐｏｌｐｕｎｏｎｉｃ ａｃｉｄ,Ⅱ,）,雷松藤酸Ｃ（ｗｉｌｆｏｒｉｃａｃｉｄ Ｃ,Ⅱ）,３－羟基－２－２氧代－无羁萜烯－２９－酸（３－ｈｙｄｒｏｘｙ－２－ｏｘｏ－３－ｆｒｉｅｄｅｉｅｎ－２０α－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ,Ⅳ     

suc2基因的克隆及在酵母基因组中的定位突变

目的 克隆酿酒酵母的蔗糖转换酶基因（ｓｕｃ２）,并定位突变酵母基因组中的ｓｕｃ２基因以获得无蔗糖转换酶表达的酵母品系。方法 用ＰＣＲ法从酵母Ｙ１９０基因组中扩增出ｓｕｃ２的成熟肽基因片段,克隆后测序。将色氨酸合成酶（ＴＲＰ）基因片段插入ｓｕｃ２基因中,构建成用于同源重组的ｓｕｃ２基因定位突变载体。导入酵母Ｙ１９０,用营养缺陷筛选出ｓｕｃ２基因突变的克隆。用ＰＣＲ扩增并克隆突变后的ｓｕｃ２基因,用序     

中枢神经系统感染患儿脑脊液白蛋白α3—巨球蛋白,免疫球蛋白测定…

应用速率散射比浊法测定４８例中枢神经系统感染患儿脑脊液白蛋白（ｃｓｆ－Ａｌｂ），α２－巨球蛋白（ｃｓｆ－α２ＭＧ）免疫球蛋白（ｃｓｆ－Ｉｇ）系列指标，并与非感染组对照，结果显示：非感染组各项指标均在正常范围，结核性脑膜炎（结脑），化脓性脑膜炎（化脑）病毒性脑炎（病毒脑）随病情加重而部分指标增高。结脑各项指标均增高。其中ｃｓｆ－α２ＭＧ，Ａｌｂ，ＩｇＭ有显著差异，提示中枢神经系统感染患儿血脑屏障受到     

study of activity of promoter from mouse α2(Ⅰ) procollagen gene

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｃｌａｒｉｆｙｔｈｅｓｅｇｍｅｎｔａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅｉｎｍｏｕｓｅα２（Ⅰ）ｐｒｏｃｏｌａｇｅｎｇｅｎｅｗｈｉｃｈａｒｅｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅｆｏｒｈｉｇｈｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌａｃｔｉｖｉｔｙｄｕｒｉｎｇｆｉｂｒｏ...     

一毛囊角化病家系中ATP2A2基因的突变

目的：检测国内一毛囊角化病家系中ＡＴＰ２Ａ２基因的突变。探讨该病的发病机制。方法：采用电镜、ＰＣＲ、单链构象多态性（ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄｅｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｓｍ,ＳＳＣＰ）分析和ＤＮＡ测序方法。结果：电镜显示表皮基底细胞桥粒减少,张力微丝在核周凝聚。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法提示ＡＴＰ２Ａ２基因（编码肌浆网／内质网钙离子－ＡＴＰ酶２）第５外显子可能存在异常,ＤＮＡ测序