外源激素配比对药用植物锁阳愈伤组织诱导的影响

目的 筛选最佳激素组合,提高锁阳组织培养效率.方法 以锁阳肉质茎维管组织作为外植体,以MS为基本培养基,基于正交实验设计研究三种外源激素配比(NAA、2,4-D和6-BA)以及蔗糖和琼脂浓度对锁阳愈伤组织诱导的影响.结果 NAA、2,4-D和6-BA三种激素对锁阳愈伤组织诱导均有显著影响,不同激素之间对出愈率的作用效应大小为2,4-D ＞NAA＞6-BA,诱导锁阳愈伤组织最佳激素配比为MS+NAA (1.0mg/L)+2,4-D (1.5mg/L)+6-BA(2.0mg/L).培养基中琼脂浓度和蔗糖浓度对锁阳愈伤组织诱导率有一定影响,蔗糖浓度以30g/L,琼脂浓度以4.5g/L时愈伤组织诱导率最高.结论 锁阳愈伤组织诱导最适培养基为MS+NAA (1.0mg/L)+2,4-D (1.5mg/L)+6-BA (2.0mg/L)+蔗糖(30g/L)+琼脂(4.5 g/L).     

叶下珠愈伤组织快速培养体系研究

目的:诱导叶下珠得到愈伤组织并对其培养条件进行优化。方法:以茎、叶、种子为外植体,以MS为基本培养基,考察不同外植体在不同外源激素及不同配比下愈伤组织的诱导率;以诱导条件下优化得到的激素配比为基础,通过改变激素NAA、2,4-D和6-BA的相对比例,考察叶下珠愈伤组织继代生长的最佳条件。结果:茎为最佳外植体;最佳诱导培养基为MS+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L 2,4-D+2 mg/L 6-BA,此条件下诱导率可达90%以上;最佳继代培养基为MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L 2,4-D+2 mg/L 6-BA;外源激素NAA、2,4-D和6-BA不同比例组合后对叶下珠愈伤组织诱导及继代培养影响较大。结论:首次成功建立叶下珠愈伤组织快速培养体系,为利用现代生物技术方法保护和利用叶下珠物种资源提供了一种新途径。     

甘西鼠尾草愈伤组织诱导、增殖及分化研究

目的考察不同质量浓度激素组合对甘西鼠尾草愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。方法以甘西鼠尾草叶片为外植体,采用正交试验研究2,4-D、NAA、6-BA、KT对愈伤组织诱导及增殖的影响,并探讨适宜愈伤组织分化的培养条件。结果以诱导率和相对生长速率为指标,6-BA和2,4-D均对甘西鼠尾草细胞脱分化和细胞增殖具有显著影响,愈伤组织诱导的最佳激素组合为2,4-D 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,增殖的最佳激素组合为2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.1 mg/L,MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的培养基有利于不定芽的分化,而1/2 MS+IBA 1.0 mg/L的培养基则有利于不定根的分化。结论本实验所建立的组织培养体系,适宜甘西鼠尾草的植株再生。     

不同激素组合对唐古特大黄愈伤组织的影响

目的通过研究不同激素对唐古特大黄愈伤组织的影响,探讨培养唐古特大黄愈伤组织最佳培养基。方法选用唐古特大黄种子萌发的无菌苗为材料,诱导愈伤组织,研究2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),6-苄基氨基乙酸(6-BA),萘乙酸(NAA)3种激素组合对唐古特大黄愈伤组织诱导及愈伤组织蒽醌产量的影响。结果 2,4-D对愈伤诱导起主导性作用,2 mg/L的2,4-D最有利于愈伤组织的形成,但更高质量浓度的2,4-D会影响诱导效果。2 mg/L的6-BA有利于愈伤组织的快速诱导。对于愈伤组织中的蒽醌产量,2,4-D在2 mg/L时效果最好,6-BA无明显作用,1.0 mg/L以上质量浓度的NAA对2,4-D有增效作用。结论唐古特大黄愈伤组织的最佳培养基是MS培养基(MS)+2,4-D(2 mg/L)+6-BA(2 mg/L)+NAA(1 mg/L),在此培养基上,愈伤组织的生长速率和蒽醌的产量都有较佳的表现。     

金铁锁愈伤组织培养中植物激素优化

目的 通过优化激素组合,提高金铁锁愈伤组织诱导率和愈伤组织增殖速度.方法 采用正交设计法,以金铁锁幼嫩茎和愈伤组织为材料,分别考察激素组合对愈伤组织诱导和生长的影响.结果 以诱导率为指标,2,4-D对金铁锁愈伤组织的诱导效果最显著;以相对生长速率为指标,6-BA和2,4-D对金铁锁愈伤组织的增殖效果最显著.结论 金铁锁愈伤组织诱导最佳激素组合为2,4-D 0.5 mg/L+NAA 0.5mg/L+KT0.1 mg/L;继代的最佳激素组合为6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+KT 0.3 mg/L.     

长春花愈伤组织诱导及培养条件优化

目的：通过愈伤组织的诱导、增殖与培养条件的优化建立长春花愈伤组织培养体系。方法：以长春花的幼嫩叶片为外植体,在不同激素组合的脱分化、分化培养基上培养。考察抗氧化剂Vc对愈伤组织褐化的影响。结果：最佳诱导培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L 2,4-D;最佳继代培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/LNAA＋0.5 mg/L 2,4-D,并在该条件下进一步悬浮继代培养。10 mg/L Vc可有效抑制长春花愈伤组织的褐化。结论：激素KT对该愈伤组织的诱导效应不明显,NAA、2,4-D和6-BA均有一定的诱导效应;Vc具有抑制长春花愈伤组织褐化的作用。     

甘草愈伤组织培养中激素优化组合的研究

目的选择甘草愈伤组织诱导和继代培养的最佳激素组合。方法以甘草无菌苗的胚根为外植体设计正交试验考察不同浓度的激素组合对愈伤组织诱导和继代的影响。结果以诱导率为指标,NAA对甘草细胞脱分化影响最显著;以相对生长速率为指标,6-BA、2,4-D、NAA对甘草细胞生长分裂影响最显著。结论甘草愈伤组织诱导及继代的最佳激素组合为2,4-D1.0mg/L NAA1.0mg/L 6-BA1.0mg/L KT0.3mg/L。     

正交法优化植物生长调节剂在黄芪愈伤组织生长中的应用

目的 研究膜荚黄芪叶愈伤组织诱导、生长及黄芪多糖合成的最佳生长调节剂组合.方法 以膜荚黄芪叶为外植体,运用正交设计研究 6-BA、2,4-D 和 NAA 等3种植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导、培养及黄芪多糖合成的影响.结果 分别以诱导率、相对生长速率和黄芪多糖含量为指标,结果表明 NAA 和 6-BA 对愈伤组织诱导率影响显著,6-BA、2,4-D 和 NAA 都对愈伤组织的生长影响显著,2,4-D 和 NAA 对黄芪多糖合成影响显著.结论 诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS 2,4-D(0.5 mg·L-1) 6-BA(1.0 mg·L-1) NAA(2.0 mg·L-1);愈伤组织生长的最佳培养基为:MS 2,4-D(0.5 mg·L-1) 6-BA(2.0 mg·L-1) NAA(2.0 mg·L-1);促进黄芪多糖合成的最佳培养基为:MS 2,4-D(1.0 mg·L-1) 6-BA(1.0 mg·L-1) NAA(1.0 mg·L-1).     

裕丹参愈伤组织诱导、继代及植株再生的研究

目的 建立裕丹参愈伤组织的诱导、继代及植株再生体系.方法 比较不同的外植体基本培养基及植物生长调节剂对裕丹参愈伤组织的诱导、继代及植株再生的影响.结果 MS 6-BA 2 mg/L NAA 0.2～2 mg/L有利于叶柄和叶片愈伤组织的诱导,其出愈率均为100%,但叶柄出愈量更大;MS 6-BA 2 mg/L有利于叶片芽的分化,其分化率达55.6%,并有直接成芽现象;B5 6-BA 1 mg/L 2,4-D 1 mg/L是愈伤组织继代培养的最佳培养基.结论 愈伤组织诱导的最佳外植体为叶柄,最佳培养基为MS 6-BA 2 mg/L NAA 0.2～2 mg/L;诱导芽分化的最佳外植体为叶片,最佳培养基为MS 6-BA 2 mg/L;愈伤组织继代培养的最佳培养基为B5 6-BA 1 mg/L 2,4-D 1 mg/L.     

防风愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

目的建立防风Saposhnikovia divaricate再生体系。方法研究不同外植体、温度、培养基、光照条件对诱导防风愈伤组织的影响,采用响应面试验设计,优化愈伤组织诱导及增殖的激素配比。结果以防风的叶片为外植体,诱导愈伤组织最适培养基为MS+6-BA 0.90 mg/L+2,4-D 1.05 mg/L+KT 0.96 mg/L,25℃恒温12 h/d光照培养;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.56 mg/L+2,4-D 0.48 mg/L+KT 0.40 mg/L,继代周期为35 d;诱导丛生芽最适培养基为MS+NAA 0.6 mg/L+6-BA 1.0 mg/L;最适生根培养基为MS+NAA 0.4 mg/L+6-BA 0.1 mg/L。结论成功诱导防风愈伤组织并建立稳定高效的植株再生体系。     

太子参快速繁殖研究

采用组织培养对太子参快速繁殖研究结果表明：选定茎尖为最佳外植体，适宜丛生芽诱导培养基为MS＋6－BA2.0mg/L NAA0.2mg/L和MS＋6－－BA4.0mg/L NAA0.4mg/L，适宜愈伤化培养基为MS＋2，4－D4.0mg/L Kt0.5mg/L和MS＋2，4－D3.0mg/L Kt 0.5mg/L,适宜生根培养基为1／2MS＋NAA 0.3mg/L.     

秦艽愈伤组织的培养及其龙胆苦苷含量的研究

目的:为扩大和提高甘肃道地药材秦艽资源的利用效率。方法:以秦艽种子的萌发所获得的幼芽作为外植体,诱导形成愈伤组织;筛选诱导愈伤组织产生的不同培养基和培养条件,并继代培养;应用HPLC法测定龙胆苦苷的含量。结果:秦艽愈伤组织生长的最佳培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L),最佳继代培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.5 mg/L),最佳继代时间为30 d。龙胆苦苷积累量在指数生长后期(28～30 d)达最高,为0.78 mg/g DW。结论:筛选出了适宜的秦艽愈伤组织培养方法。秦艽愈伤组织在固体培养基上的生长曲线呈"S"型,且愈伤组织中龙胆苦苷的积累量随愈伤组织增殖而不断增加。     

半夏愈伤组织的诱导及增殖效应

以半夏Pinellia ternata (Thunb ) Breit 的幼嫩叶柄为外植体,接种于附加 NAA、2,4- D、KT、6-BA及其组合的MS培养基上,均能产生愈伤组织。研究结果表明,MS+ 1. 5 mg/L KT + 2. 0 mg/L 2,4- D 对半夏愈伤组织的诱导效果最好。MS+ 0 2 mg/L 6- BA+0 .5 mg/L NAA增殖培养的愈伤组织较适合于器官的分化,MS+0 5 mg/L 6 -BA +1 0 mg/L 2,4 D增殖培养的愈伤组织较适合于做细胞悬浮培养的材料。     

喜树愈伤组织的诱导与培养

目的：研究喜树叶片、茎段和带芽茎段的愈伤组织诱导效果以及愈伤组织继代培养条件。方法：以MS为基本培养基,附加不同质量浓度6-BA,NAA和2,4-D,通过正交试验研究愈伤组织继代培养的适宜条件。结果与结论：MS+6-BA 2 mg·L^-1+NAA 2 mg·L^{-1+2,4-D 2 mg·L-1的诱导效果较好,容易诱导出愈伤组织,其中叶片的诱导率可达80%以上。愈伤组织在MS+６-BA 1 mg·L-1+2,4-D 1 mg·L-1培养基上继代培养生长快速,疏松易分散,适合用于细胞培养。}     

青蒿花药培养研究

目的 以青蒿花药为材料,进行诱导培养,获得了胚性愈伤组织,为青蒿单倍体植株的诱导奠定了基础.方法 青蒿花药在进行不同时间的低温前处理后,置于含不同激素和蔗糖浓度的MS培养基上,再进行不同时间的高温后处理,然后转入25℃黑暗培养,统计愈伤诱导率.结果 青蒿花药培养最适培养基是6-BA 1 mg/L+2,4-D 0.3 mg/L+蔗糖3%或6-BA 1 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%,无需低温前处理和高温后处理.结论 可通过青蒿花药培养得到单倍体胚性愈伤组织.     

槲蕨愈伤组织的诱导研究

目的对槲蕨愈伤组织诱导条件和增殖培养条件进行了探讨。方法以槲蕨幼嫩根茎、孢子叶片和叶柄为外植体,进行了愈伤组织的诱导和增殖培养,并对愈伤组织生长量和培养过程中的褐化问题进行了初步统计分析。结果 1/2MS+2,4-D 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.3 mg/L+Vc 10 mg/L为诱导槲蕨愈伤组织的较优培养基,1/2MS+2,4-D1.0 mg/L+6-BA0.5 mg/L+Vc 10 mg/L为槲蕨愈伤组织增殖培养的较优培养基。结论槲蕨幼嫩根茎能成功诱导出愈伤组织,但诱导率和增值率较低;添加Vc能较好地控制培养过程中的褐化问题,诱导培养20 d转移继代亦能较好地控制褐化的加重。     

明党参快速繁殖研究

目的为明党参种质资源保护.方法用组培快速繁殖.结果选出最佳外植体为叶片,适宜形成愈伤组织的培养为MS 2,4-D 1.0 mg/L Kt 1.0 mg/L;适宜芽分化培养基为MS 6-BA 3.0mg/L NAA 0.2 mg/L;适宜生根培养基为MS IBA 0.4 mg/L或MS NAA 0.4mg/L.结论通过组织培养,初步建立了明党参的快速繁殖系,为这一珍稀濒危药用植物资源可持续利用提供了有效途径.     

沙生药用植物锁阳愈伤组织诱导研究

目的为扩大和提高锁阳资源的利用效率。方法以锁阳肉质茎的不同组织部位作为外植体,以MS为基本培养基,筛选诱导愈伤组织产生的最佳外植体。结果以MS为基本培养基附加2,4-D 2.0 mg/L、6-BA 1.0 mg/L和NAA1.0 mg/L,在暗培养、20℃条件下锁阳肉质茎的维管组织部分是诱导愈伤组织的最佳外植体,髓部较差,鳞片叶未诱导出愈伤组织。结论初步筛选出了适宜锁阳愈伤组织诱导的外植体和培养条件。     

华重楼植株的快速繁殖研究

目的以华重楼Paris polyphylla var.chinensis根茎为外植体,建立华重楼植物的快速繁殖技术。方法以MS为基本培养基,通过研究激素6-BA、2,4-D、NAA、IBA、KT、IAA和头孢曲松钠、活性炭等对愈伤组织诱导、不定芽分化和不定根产生的影响,找出组培苗诱导培养的最佳培养基配方。结果华重楼最佳愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.5mg/L+2,4-D 3.0 mg/L;最佳不定芽分化培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L+KT 1.0 mg/L+头孢曲松钠300 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭0.5%。当组培苗长出第1片叶且不定根长出4条以上时将组培苗取出,先放在无菌水中栽培5 d,再移栽至松软土壤中,组培苗生长健壮,成活率为100%。结论在获得愈伤组织的基础上,进一步完成对不定芽的诱导与无根苗生根培养,筛选出了培育华重楼组培苗的最佳条件。     

老瓜头愈伤组织诱导培养技术的研究

目的为老瓜头Cynanchum komarovii资源利用提供前期的生物技术实验参考。方法以老瓜头的根段、茎段和叶片为外植体,采用正交试验方法,筛选诱导愈伤组织产生的最适培养基;进行愈伤组织增殖培养过程中,测定了不同时间愈伤组织的鲜、干质量,绘制愈伤生长曲线;同时进行了愈伤组织分化培养基的实验筛选。结果不同外植体诱导愈伤产生,其根诱导效果最好,各处理诱导率达90%~100%,茎段和叶片愈伤组织诱导最佳配方分别为MS 2,4-D1.0mg/L 6-BA2.0mg/L NAA0.5mg/L和MS 2,4-D0.5mg/L 6-BA0.5mg/L NAA0.5mg/L,茎段比叶片较容易诱导,各处理诱导出的愈伤组织质地松散,颜色鲜黄,几乎无褐化现象。愈伤组织继代生长在第10天进入对数生长期,愈伤鲜生长量最大达4.961g,干质量0.496g。愈伤组织的分化率很低,很难生芽,易分化出钉状根。结论对于诱导愈伤形成,根段是最佳的外植体,筛选出了茎段和叶片诱导愈伤的最适配方,愈伤组织生长量较大,但分化困难。