抑颤颗粒的含量测定

目的建立"抑颤颗粒"中芍药苷的HPLC含量测定方法。方法采用Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸水(14:86)为流动相;柱温:25℃,流速1 ml/min,检测波长为230 nm。结果芍药苷进样量在0.119 6~1.495 0μg范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均加样回收率为97.22%(n=6),RSD为1.97%。结论所建立的方法专属性良好,结果准确可靠,重复性好,可用于抑颤颗粒的质量控制。     

乙酰白藜芦醇的制备及其含量的高效液相色谱法测定

目的：以白藜芦醇为原料制备乙酰白藜芦醇,并建立高效液相色谱法测定其含量。方法应用白藜芦醇与醋酸酐120℃加热反应制取乙酰白藜芦醇。色谱柱采用inertsil ODS-SP柱（150 mm ×4.5 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（45∶55,V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为300 nm,进样量为20μl,柱温为25℃。结果反应获得高纯度的乙酰白藜芦醇,产率达90％;乙酰白藜芦醇质量浓度在20.0～400.0μg/ml范围内与峰面积线性关系良好（r＝0.9999）,平均回收率为99.82％,RSD为0.89％（n＝6）。结论该合成方法简单易行,可用于乙酰白藜芦醇的制备;建立的检测条件准确、简便,精密度高,可用于其含量测定。     

高效液相色谱法测定脑心通胶囊中丹参素的含量

目的 探讨应用高效液相色谱法测定脑心通胶囊中丹参素(C9H10O5)的含量.方法 采用高效液相色谱法,Shim-pack VP-ODS C18色谱柱(150×4.6mm,5μm),0.5%冰醋酸-甲醇(93:7)为流动相,流速为0.8ml/min,检测波长280nm.结果 丹参素对照品在3.54μg/ml～31.86μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为98.76%,RSD为1.18%.结论 高效液相色谱法简便、可靠、准确,可用于脑心通胶囊中丹参素的含量测定.     

环孢素A纳米脂质体的制备

采用旋转薄膜蒸发法结合机械法制备环孢素A(C sA)纳米脂质体,考察其形态、含量、粒径、包封率。并采用反相高效液相色谱法(HPLC)测定脂质体中C sA的含量,结果C sA纳米脂质体均匀圆整,含量为(1.98±0.02)g/L,包封率为98.44%±0.68%,粒径为(104.85±4.05)nm。含量测定的线性范围良好(2~12μg/m l,r=0.99989);样品溶液的日内和日间相对标准偏差均<5.0%;平均回收率为98.82%。提示C sA纳米脂质体的制备方法得到的粒子均匀圆整;反向HPLC测定方法样品分离效果好,分析快速准确,便于今后C sA的体内外研究。     

HPLC法同时测定痔瘘洗液中大黄素和大黄酚的含量

［摘要］　目的　建立高效液相色谱（HPLC）同时测定痔瘘洗液中大黄素和大黄酚含量的方法,为该制剂的质量评价提供依据。方法　采用HPLC法同时测定痔瘘洗液中大黄素和大黄酚的含量,色谱柱：Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（体积比为80∶20）;流速为0.8 ml/min,检测波长为254 nm,柱温为25 ℃;进样量10 μl。结果　大黄素、大黄酚的进样量分别在1.90～6.00 μg/ml(n=5,R=0.999)和4.00～18.51 μg/ml(n=5,R=0.999)范围内与各自的峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.80%、102.50%,相对标准偏差（RSD）分别为0.19%(n=6)、0.02%(n=6)。结论　该法具有操作简单、准确、回收率好、精密度和重复性高、分析快速等优点,可作为痔瘘洗液的质量控制方法。     

高效液相色谱法测定肺组织中三磷酸腺苷含量

目的 :建立用高效液相色谱技术测定肺组织中三磷酸腺苷 (ATP)含量的分析方法 ,为临床肺保护和肺保存研究提供可靠的检测手段。方法 :肺组织经高氯酸溶液沉淀蛋白后制成匀浆液 ,上清液用氢氧化钾溶液调pH值为中性后 ,用反相离子对高效液相色谱法 (RP HPLC)测定ATP含量。色谱条件 :色谱柱用AgilentXDB C1 8柱 ,流动相为甲醇 KH2 PO4 缓冲液 (内含 4mmol LIPR A离子对试剂 ) ,在2 5 9nm紫外波长处检测。采用外标定量法计算ATP含量。结果 :此种方法使ATP在 8 5 18μmol L～170 3μmol L浓度范围内有良好的线性关系 (r =0 9994 ) ,方法的回收率为 97 8%～ 10 4 % ,日内精密度RSD <5 %。结论 :其方法快速、灵敏 ,具有较高的准确度和精密度 ,适用于人和动物肺组织中ATP含量的测定。     

6-姜辣素对人乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探究6-姜辣素对人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法不同浓度6-姜辣素处理人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞,使用CCK-8法检测6-姜辣素对乳腺癌细胞增殖能力的影响;应用流式细胞仪检测6-姜辣素对乳腺癌凋亡的影响;6-姜辣素处理人乳腺癌细胞,应用Western印迹法检测促凋亡蛋白(Bad)、免抗人单克隆抗体(Bax)、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白水平。结果 6-姜辣素抑制乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖能力,并呈浓度依赖性和时间依赖性;流式细胞仪检测细胞凋亡率,提示6-姜辣素促进乳腺癌细胞凋亡发生;6-姜辣素处理乳腺癌细胞,促进Bad和Bax表达,而抑制Bcl-2表达;同时,6-姜辣素促进p-AMPK的表达,抑制p-mTOR的表达。结论 6-姜辣素通过激活AMPK/mTOR信号通路,抑制乳腺癌细胞增殖并促进其凋亡,发挥抗肿瘤功能。     

HPLC测定固本咳喘片中白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ的含量

目的：建立同时测定固本咳喘片中白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ含量的方法.方法：采用HPLC 法,Agilent HC-C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇：乙腈：0.2%磷酸溶液（52∶5∶43）,流速为0.8ml·min-1,柱温：30℃,检测波长为222nm.结果：白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ分别在0.8～15.0μg·ml-1（γ=0.9995）和1.7～33.0μg·ml-1（γ=0.9997）浓度范围内均有良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.22%,97.90% ;RSD 均小于2.0%.结论：本方法简便,快速,准确,重复性好,可用于该制剂的质量控制.     

不同给药途径伊立替康在家兔体内的药代动力学和生物利用度

目的探讨伊立替康中空栓在兔体内的药代动力学、绝对生物利用度及注射给药的替代途径。方法取含药血浆200μl,用600μl冷甲醇沉淀蛋白后上清液进样分析。流动相:0.05 mol/L Na2HPO4(pH3.0,内含0.05 mol/L辛烷基磺酸钠)-乙腈=68∶32;Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm;5μm);流速1.0 ml/min;检测波长:Ex 370 nm,Em 430 nm;进样量10～50μl;柱温为室温。取健康家兔10只,随机分为两组。第1组为静脉注射组;第2组为伊立替康中空栓直肠给药组。静脉组于耳缘静脉注射伊立替康注射液60 mg,直肠给药组由直肠给予伊立替康中空栓2枚(160 mg)。给药后用HPLC法测定血药浓度。按统计矩的非隔室动力学理论计算药代动力学参数。以直肠给药组AUC比静脉注射组AUC,计算伊立替康中空栓的绝对生物利用度。结果伊立替康体内HPLC法测得的回归方程为A=215.08C-312.90(r=0.999 7,n=6),伊立替康血药浓度在25～1 000 ng/ml范围内呈良好的线性关系,最低检测限为10 ng/ml。低、中、高三种浓度的日内精密度分别为4.54%、4.66%、2.96%;日间精密度分别为8.35%、5.44%、5.40%;提取回收率分别为89.08%、90.23%、88.91%;方法回收率分别为107.14%、96.76%、101.46%。伊立替康中空栓的Cmax为(3.065 3±0.178 6)μg/ml;AUC(0-inf)为(19.175 9±1.969 3)μg.h-1.ml-1;绝对生物利用度为11.34%。结论伊立替康中空栓剂直肠给药后,有一定的生物利用度,提示直肠给药有可能成为伊立替康的另一给药途径。     

注射用利福平含量测定方法的研究

目的　探讨注射用利福平含量测定方法 ;方法　采用 HPL C法 ,用 ODS柱 ,以甲醇 -乙腈 - 0 .0 75 mol/ L 磷酸二氢钾溶液- 1.0 mol/ L 枸缘酸钠溶液 (30 :30 :2 6 :4 )为流动相 ,在 2 5 4 nm波长测定利福平的含量 ;结论　该方法简单 ,结果准确 ,专属性强。结果线性范畴为 4 8～ 112 mg·L- 1 ,r=0 .9998,平均回收率为 (99.4± 0 .8) %。     

探讨高效液相非接触电导法测定盐酸二甲双胍的含量

目的是为了建立一种新的可以测定盐酸二甲双胍片中盐酸二甲双胍含量的高效液相非接触电导检测法。方法用非接触电导检测器进行实验操作,采用C18色谱柱(4.6×250 mm),流动相为乙腈(0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调至p H=3.5)(35∶75),流速为1.0 m L/min、进样量是10μL、柱温为35℃。结果盐酸二甲双胍进样量在0.10~1.04μg范围内呈现良好线性关系,平均回收率为101.00%;RSD为0.26%。结论该法方便快捷、灵敏度高,为二甲双胍的含量测定提供依据。     

12导联同步Holter缺血性ST段改变与冠脉造影结果对照

目的 评价12导联同步Holter(简称DCG)诊断缺血型ST段改变的敏感性.方法 选择22例接受过冠状动脉造影(CAG)、12导联Holter检查的住院者,统计其CAG结果和DCG检查结果中各导联缺血型ST段改变.结果 ①22例中,3例CAG未见异常DCG存在缺血型ST-T改变(占13.64%);1例CAG异常DCG未发生心肌缺血(占4.55%);②DCG示各导联缺血型ST段改变的发生率,以V6导联最高,占86.36%(19/22);其次为V5导联,aVL导联未发生;③DCG示ST段下降程度最重的是V6导联(-37mm),其次为V5导联(-32.3mm).结论 DCG无创、费用低,对心肌缺血的诊断具有较高的敏感性,可作为诊断心肌缺血的重要无创性检查技术.     

头花蓼花不同部位中槲皮素的含量研究

目的对贵州3个产地家种、野生的头花蓼花、茎、叶及全草中槲皮素的含量进行测定比较,得出含量最高的部位。方法样品采用水浴回流提取1 h方法提取,采用高效液相色谱法测定槲皮素含量,色谱条件：Diamonsil C18色谱柱（4.6×150 mm,5μm）,流动相甲醇-0.4%磷酸溶液（50∶50）,检测波长360 nm。结果在四种检测样品中,槲皮素含量分别为：花0.104%～0.385%,平均0.250%;茎0.064%～0.151%,平均0.103%;叶0.280%～0.668%,平均0.615%。结论头花蓼槲皮素的含量最高均为叶,其次是花,茎中最少。     

高效液相色谱法测定精制冠心颗粒中芍药苷的含量

目的 建立测定精制冠心颗粒中芍药苷含量的高效液相色谱法.方法 采用Hypersil C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm),带前置保护柱,流动相为乙腈-水(15:85)；检测波长为230 nm.结果 在0.710 4μg～3.5220μg范围内线性关系良好(r=0.999),精密度RSD=0.72％,重现性RSD=0.39％,稳定性RSD=0.80％,平均回收率为99.07％,最低检测限为6 ng,最低定量限为15 ng.结论 所用方法简便、准确、重复性好.     

甘肃省市售蔬菜中镉污染状况调查

目的了解甘肃省市售蔬菜中镉污染状况,为食品安全风险评估提供科学依据。方法 2011—2014年共采集样品1 152份,按采样地区、年度和样品种类分别统计分析;按照《食品中镉的测定(石墨炉原子吸收光谱法)》GB/T5009.15-2003测定镉含量。结果各地区蔬菜样品中均检出了镉,且有不同程度的超标,2011年镉含量平均值最高(0.070 mg/kg),2014年较低(0.010 mg/kg);P95值2011年偏高值较高(0.380 mg/kg),2014年较低(0.056 mg/kg);检出率2013年较高(99.7%),2011年较低(50.2%);超标率2011年较高(9.3%),2014年较低(1.0%);所检样品镉含量均不服从正态分布,差异有统计学意义(χ~2=79.135,df=3,P<0.05);各类蔬菜样品中也都检出了镉,但只有菌类和果实类蔬菜中的镉含量超过了国家标准,与镉在植物中富集规律一致;不同品种蔬菜中镉的含量都不服从正态分布,对其含量的比较差异有统计学意义(χ~2=278.807,df=5,P<0.05)。结论甘肃省市售蔬菜中镉污染较轻,但甘肃省作为高原夏菜的主要产地之一,应加强监管力度。     

重组结核杆菌融合蛋白(EC)产品质量标准的建立

目的 建立重组结核杆菌融合蛋白(EC)[该制品名称是国家药典委员会确定的药品中文通用名称,“EC”为重组融合蛋白“结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶6(ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)”;简称“EC”]原液及成品的质量标准。方法 选取6批次EC原液及11批次EC成品、体质量300~400g无特定病原体(SPF)级白色豚鼠21只、卡介苗(BCG)活菌菌液(1mg/ml)、结核分枝杆菌减毒株H37Ra活菌菌液(2mg/ml)作为实验材料,建立EC原液质量标准,包括残余抗生素活性检测、致敏效应实验、效价测定及动物法鉴别实验;建立EC成品质量标准,包括鉴别实验及效价测定;应用建立的质量检测标准对连续6批次EC原液和11批次EC成品进行检测,验证其适用性和可行性。结果 (1)EC原液残余抗生素活性检测。①专属性实验:磷酸盐缓冲液的吸光度值(A值)为1.736,卡那霉素标准品(0.0ng/ml)的A值为2.178;②线性与范围实验:卡那霉素标准品在0.5~40.5ng/ml范围内,连续3次实验回归方程拟合优度的判定系数R²均大于0.99;③准确性实验:连续3批次EC原液的卡那霉素残留量回收率分别为112.163%、117.285%、103.527%;④重复性实验:连续3批EC原液重复性实验A值相对标准偏差(RSD)分别为5.59%、9.18%、8.07%;⑤中间精密度实验:同一实验员不同时间及不同实验员检测连续3批次EC原液卡那霉素残留量检测均小于定量限0.5ng/ml,为限量测定;⑥耐用性实验:改变读板时间(0、5、10min)对EC原液卡那霉素残留量检测无影响,卡那霉素残留量均小于定量限0.5ng/ml。(2)EC原液效价测定:稀释度为1μg/ml(5U/ml)、2.5μg/ml(12.5U/ml)、5μg/ml(25U/ml)及10μg/ml(50U/ml)时,每个稀释度对应的2批次EC原液动物皮肤试验的硬结或红晕平均直径及硬结或红晕平均直径总和比值分别为(15.17±0.88)mm、(13.67±1.25)mm、1.11(91.00/82.00);(17.00±1.76)mm、(16.08±1.32)mm、1.06(102.00/96.50);(19.58±1.69)mm、(17.67±1.37)mm、1.11(117.50/106.00);(20.75±1.57)mm、(20.25±1.17)mm、1.02(124.50/121.50)。(3)EC原液动物法鉴别实验:连续3批次EC原液动物皮肤试验的硬结或红晕平均直径均为0,TB-PPD动物皮肤试验的硬结平均直径为(15.13±5.06)mm。(4)EC成品鉴别试验:连续3个批次EC成品动物皮肤试验的硬结或红晕平均直径均为0,TB-PPD动物皮肤试验的硬结平均直径为(16.50±2.65)mm。(5)质量标准验证:①EC原液:残余抗生素活性检测结果均低于定量限0.5ng/ml;致敏效应实验结果均为皮肤试验后豚鼠注射部位局部反应无明显区别,也无全身反应;每个稀释度[2.5μg/ml(12.5U/ml)、5μg/ml(25U/ml)及10μg/ml (50U/ml)]在皮内注射后24h所产生的局部硬结或红晕反应平均直径均≥8mm,与相应稀释度参考品的局部硬结或红晕平均直径总和的比值为0.9±0.1;动物法鉴别实验结果为EC原液对BCG活菌致敏组豚鼠的皮肤试验结果均呈阴性反应(硬结或红晕平均直径<5mm),而TB-PPD呈阳性反应(硬结平均直径≥5mm)。②EC成品检测:各批次成品对BCG活菌致敏组豚鼠的皮肤试验均呈阴性反应(硬结或红晕平均直径<5mm),而TB-PPD呈阳性反应(硬结平均直径≥5mm)。结论 所建立的质量标准可用于EC原液及成品的检定。     

HPLC-UV法测定血浆环丙沙星浓度

目的建立快速、简捷的HPLC-UV测定血浆中环丙沙星方法。方法色谱柱为ZirchromKromasilC18柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温45℃,流动相为乙腈25mmol·L-1磷酸水溶液(16∶84v/v),流速1.2ml·min-1,检测波长为273nm。结果环丙沙星浓度在0.05～5.8μg/ml,范围线性良好(r=0.9998),日内及日间精密度均小于5%,回收率>95%。结论本法为环丙沙星浓度测定的理想方法,值得推广。     

液相色谱-串联质谱法测定人血清中萘普生含量

采用液相色谱—串联质谱法（LC-MS/MS）测定人血清中萘普生的含量。血清样品经甲醇沉淀去除蛋白后,用Gemini C18（50×2.1mm,5μm）分析柱分离,以乙腈-5mM醋酸氨（30：70）为流动相进行等度洗脱。结果萘普生在10～4000ng/ml范围内线性关系良好（r=0.9994）,日内、日间精密度的相对标准偏差（RSD）均〈6%,准确度均在85%～115%。认为采用LC-MS/MS测定人血清中萘普生的含量具有样品简便快速、准确性好、精密度和灵敏度高、线性关系好等优点。     

高效液相色谱法测定人胃黏膜中γ-氨基丁酸和谷氨酸含量

目的:建立一种可同时测定胃黏膜组织微量γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)含量的高效液相色谱法.方法:用异硫氰酸苯酯(PITC)作衍生剂,色谱柱为Pico/Tag 氨基酸专用柱,梯度洗脱,紫外检测波长254 nm.结果:GABA在0.125-6.25nmoL/mL范围,Glu在0.025-2.5μmol/mL范围,线性关系良好;GABA和Glu加样回收率分别为90.4-104%,88.1-105.5%;批内误差分别为3.56%,和1.12%;批间误差分别7.47%和5.98%.结论:本法稳定、灵敏,可用于胃黏膜组织GABA和Glu含量的检测.     

中国不同地区寄生虫氨基酸组成的反相高效色谱(RP-HPLC)测定

目的为了搞清寄生虫生长、发育、代谢、繁殖的特征规律,对寄生虫病进行有效的防治,有必要搞清它们蛋白氨基酸组成.方法采用2,4二硝基氟苯柱前衍生化法,对经盐酸充分水解的中国不同地区,不同种类马来丝虫及其幼虫蛋白质氨基酸组成在反相高效液相色谱柱(RP-HPLC)上进行分离,在紫外吸收(360nm)检测器上进行定量测定.分离中所选用洗脱液为A0.060mol/LNaAc(pH6.40);B乙腈/冰(11,V/V),采用梯度洗脱模型.对定量测定结果进行统计学处理,表明该方法有高的定量精确度和重复性.结果寄生虫蛋白质经水解后,在RP-HPLC柱上分离出18种不同的氨基酸,雄性(154μg/mg～351μg/mg)和雌性(179μg/mg～440μg/mg)氨基酸含量,没有明显的差异.但不同省区的氨基酸含量存在着一定的差异.从南方福建省的18种氨基酸含量179μg/mg到北方辽宁省的440μg/mg,无论是雄性还是雌性马来丝虫中酸性氨基酸的相对量均高于碱性氨基酸,如雌性马来丝虫Glu含量占氨基酸总量平均为12.5%,Lys为6.03%,芳香族氨基酸的含量相对较低,Try占氨基酸总量的0.70%,感染期幼虫和微幼虫18种氨基酸总量为111μg/mg和1052g/mg,低于成虫平均270μg/mg的含量.结论该方法具有快速、简便、灵敏、经济、准确和再现性好等优点,所测得的定量结果,为研究寄生虫的种内分化、种下分类和生长、发育、代谢等生命活动具有重要意义,并为寄生虫的体外培养和免疫学诊断及治疗研究提供了有益的信息.