富含亮氨酸重复序列的 G蛋白偶联受体 6通过 Wnt/β-连环蛋白通路对结肠癌 SW480细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

目的 探讨富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体6(LGR6)对人结肠癌SW480细胞增殖和侵袭的作用及机制.方法 在结肠癌细胞株SW480细胞中构建低表达LGR6的实验组、阴性对照组和空白对照组,用实时荧光定量核酸扩增检测(qPCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)验证LGR6 mRNA和蛋白的表达水平.用MTT法检测细胞增殖活性,用Transwell小室法检测细胞的侵袭能力,用Western Blot检测Wnt/β-连环蛋白(βcatenin)信号通路相关蛋白表达水平.结果 实验组、阴性对照组和空白对照组LGR6 mRNA表达水平分别为(0.42±0.08)、(1.12±0.08)、(1.13±0.31),转染LGR6 siRNA的SW480细胞LGR6 mRNA和蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);转染后24、48、72 h时实验组细胞增殖活性[(0.24±0.04)、(0.27±0.06)、(0.45±0.08)、(0.63±0.09)]显著低于阴性对照组[(0.22±0.03)、(0.40±0.05)、(0.92±0.07)、(1.32±0.11)]和空白对照组[(0.26±0.04)、(0.42±0.07)、(0.94±0.09)、(1.21±0.12),均P<0.05].下调LGR6表达可促进结肠癌细胞Bax和Cleaved caspase 3蛋白的表达,并抑制结肠癌细胞βcatenin和c-Myc蛋白的表达(均P<0.05).结论 下调LGR6可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌SW480细胞的增殖和侵袭,并促进结肠癌SW480细胞的凋亡.     

微小RNA-152-3p 对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制研究

目的探讨微小RNA(miR)-152-3p对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法2019年2月至2020年4月,将结肠癌SW480细胞分为miR-152-3p模拟物阴性对照(miR-NC)组、miR-152-3p模拟物(miR-152-3p)组、抑制物(anti-miRNC)组、miR-152-3p抑制物(anti-miR-152-3p)组、阴性对照(si-NC)组、沉默转移相关蛋白2(si-MTA2)组、miR-152-3p模拟物+空载体(miR-152-3p+pcDNA3.1)组、miR-152-3p模拟物+过表达MTA2(miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2)组,均用脂质体法转染至结直肠癌SW480细胞中,另取未转染结直肠癌SW480细胞记为Control组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-152-3p和MTA2 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法测定蛋白的表达;MTT法检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果结肠癌HCT116、SW480及LoVo细胞中miR-152-3p表达分别为0.72±0.04、0.29±0.02、0.49±0.01,人正常结肠上皮细胞NCM460中miR-152-3p表达为1.06±0.12,与正常结肠上皮细胞NCM460相比,结肠癌细胞HCT116、LoVo、SW480中MTA2 mRNA和蛋白较高,miR-152-3p较低(P<0.05);Control组、miR-NC组、miR-152-3p组、si-NC组及si-MTA2组结肠癌SW480细胞吸光度分别为0.92±0.22、0.96±0.17、0.31±0.07、0.99±0.17及0.32±0.09,细胞迁移数分别为(172.00±23.52)个、(169.00±20.66)个、(53.67±12.22)个、(155.67±16.8)个及(54.33±8.74)个,细胞侵袭数分别为(124.67±10.02)个、(122.33±9.45)个、(26.00±5.00)个、(108.33±10.02)个及(42.00±4.00)个,与miR-NC 组相比,miR-152-3p 组SW480细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)及上皮钙黏素(E-cadherin)较高(P<0.05);与si-NC组相比,si-MTA2组SW480细胞中cyclin D1、MMP-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,P21及E-cadherin较高(P<0.05)。转染miR-152-3p和MTA2野生型表达载体的结肠癌SW480细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。相比miR-152-3p+pcDNA3.1组,miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2组SW480细胞中P21、E-cadherin的表达较低,MTA2、cyclin D1、MMP-2蛋白的表达较高,SW480细胞活性、迁移、侵袭数量较高(P<0.05)。结论miR-152-3p可能通过下调MTA2抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

羟基氯喹对人结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响

目的 探究羟基氯喹对人结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响,并分析可能的机制。方法 体外培养人结肠癌细胞系SW480细胞,随机分为空白组和低、中、高剂量实验组。空白组正常培养,低、中、高剂量实验组分别用加入含羟基氯喹终浓度为20,40,80μg·mL^-1的细胞培养液。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;用平板克隆实验检测细胞克隆形成率;用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;用蛋白质印迹法检测Toll样受体4(TLR4)、核转录因子kappa B p65(NF-κB p65)、半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平。结果 空白组和低、中、高剂量实验组SW480细胞存活率分别为100%,(83.15±12.45)%,(62.01±9.32)%和(43.25±6.45)%;这4组的克隆形成率分别为(85.16±12.77)%,(65.28±9.78)%,(51.06±7.07)%和(37.11±5.57)%;这4组的凋亡率分别为(9.12±1.37)%,(16.72±2.51)%,(25.89±3.89)%和(39.75±5...     

双硫仑对结肠癌细胞SW480生长和侵袭的作用及机制研究

目的：探讨双硫仑（disulfiram）对SW480结肠癌细胞体外增殖、迁移和体内生长的作用及机制。方法：MTS法检测不同浓度双硫仑对结肠癌细胞SW480增殖的作用;划痕实验双硫仑对SW480细胞迁移的影响;Transwell实验双硫仑对SW480细胞侵袭的影响;裸鼠移植瘤模型研究双硫仑对SW480细胞体内增殖的抑制作用;免疫组化检测双硫仑对裸鼠移植瘤组织中低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1,HIF-1α）和葡萄糖转运蛋白1（Glucose transporter 1,GLUT1）蛋白表达的影响。结果：双硫仑对SW480细胞增殖有抑制作用,且呈现剂量依赖性;双硫仑4 μmol·L-1和8 μmol·L-1浓度组均能够抑制SW480细胞迁移和侵袭能力,与对照组相比具有显著性差异（P<0.05）;双硫仑20 mg·kg-1和40 mg·kg-1剂量组均能够抑制SW480细胞裸鼠移植瘤的生长（P<0.01）,且抑制移植瘤中HIF-1α和GLUT1蛋白的表达。结论：双硫仑可抑制SW480结肠癌细胞的增殖和转移,其机制可能与抑制HIF-1α和GLUT1蛋白的表达有关。     

二甲双胍在结肠癌中通过抑制lncRNA-MALAT1的表达发挥抗肿瘤效应

目的 探讨二甲双胍（MET）对结肠癌细胞的抑制作用及其机制。方法 采用CCK-8、流式细胞术及Transwell检测MET对结肠癌细胞SW480和SW620增殖、凋亡及侵袭的影响,qRT-PCR检测5种lncRNA在结肠癌细胞中的表达,Western blotting检测MET和/或MALAT1基因敲减在体外对PI3K/AKT和ERK通路活性的影响。结果 MET在体外对SW480和SW620细胞具有抑制作用,且呈剂量和时间依赖性（P<0.05）。MET可促进SW480和SW620细胞凋亡（P<0.05）。在5种lncRNA中,lncRNA-MALAT1在SW480和SW620细胞中的表达水平最高（P<0.01）。siRNA可抑制lncRNA-MALAT1表达,并进一步增强MET介导的抗结肠癌作用（P<0.05）。MET可下调结肠癌细胞中lncRNA-MALAT1的表达（P<0.05）,并通过PI3K/AKT和ERK信号通路与lncRNA-MALAT1敲减协同抑制结肠癌细胞的增殖和侵袭,并促进其凋亡（P<0.01）。结论 MET在结肠癌细胞中通过抑制lncRNA-MALAT1的表达发挥抗肿瘤效应。     

延龄草皂苷通过降低成纤维细胞活化蛋白表达水平抑制人类结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭

目的 研究延龄草皂苷是否能通过影响纤维细胞活化蛋白(FAP)表达来抑制结肠癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭.方法 将对数生长期结肠癌细胞HCT116分为5组:对照组、siRNA组、低剂量实验组、中剂量实验组和高剂量实验组.低、中、高剂量实验组分别用含浓度为30,60,90 mg·L-1延龄草皂苷的DMEM培养基100μL...     

姜黄素对人结肠癌细胞MMP-2、MMP-9表达的影响

目的 探讨姜黄素对人结肠癌细胞的抗侵袭作用的可能机制.方法 将处于对数生长期的细胞分为5组:RPMI1640对照组(阴性对照组),姜黄素10、20、30、40μmol/L培养组,置培养箱中分别培养12、24h,在倒置相差显微镜下观察细胞生长状况.采用MTT法检测姜黄素对结肠癌细胞SW480的抑制率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测姜黄素各浓度组及阴性对照组MMP-2、MMP-9的表达量.结果 姜黄素各浓度组(10、20、30、40μmol/L)与阴性对照组比较,均能够明显抑制癌细胞的增殖,减少MMP-2、MMP-9的表达(P<0.01),并呈剂量依赖性.结论 姜黄素能够有效地抑制结肠癌细胞的增殖,抑制癌细胞MMP-2、MMP-9的表达,从而减少细胞外基质的降解.     

阿利吉仑对高血压肾病小鼠肾的保护作用及其作用机制

目的探究阿利吉仑对高血压肾病小鼠的保护作用及其对磷脂酰肌醇激/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响。方法用微渗泵灌注血管紧张素Ⅱ制备高血压小鼠肾病模型。按照体重将小鼠随机分为6组:假手术组、模型组和低、中、高3个剂量实验组(灌胃阿利吉仑12. 5,25. 0,50. 0 mg·kg^-1)与对照组(卡托普利30 mg·kg^-1),每组15只;造模后给药,每日1次,连续灌胃2周。以实时定量PCR法测定肾组织中胰岛素受体底物2(Irs2)、磷脂酰肌醇激酶-3(PI3K)、蛋白激酶B(Akt) mRNA表达;以免疫印迹法测定Irs2、PI3K、Akt与Caspase-3蛋白表达情况。结果给药4周,假手术组、模型组、对照组和高剂量实验组的PI3K mRNA表达分别为1. 14±0. 21,0. 34±0. 08,1. 07±0. 23和0. 96±0. 22;这4组的Akt mRNA表达分别为1. 23±0. 27,0. 45±0. 13,1. 05±0. 16和0. 91±0. 15,模型组与假手术组比较或高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。这4组的小鼠肾组织Caspase-3蛋白表达水平分别为0. 29±0. 06,1. 06±0. 13,0. 31±0. 06和0. 37±0. 08,模型组与假手术组比较或高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论阿利吉仑对高血压小鼠肾具有一定的保护作用,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路、抑制Caspase-3表达有关。     

MCL-1 siRNA通过线粒体凋亡途径部分逆转耐顺铂结肠癌细胞系SW480的耐药性

目的 探讨顺铂耐药结肠癌细胞的MCL-1表达水平与顺铂耐药性的关系。方法 用MTT法检测顺铂耐药结肠癌细胞系SW480(SW480-R)对顺铂的敏感性。通过检测siRNA下调SW480-R 细胞MCL-1的表达作用观察其对细胞耐药性的影响。Western blot试验检测SW480-R 细胞Bcl-2家族蛋白及线粒体来源促凋亡因子的表达水平。Annexin V/PI染色检测SW480-R 细胞的凋亡。结果 SW480-R细胞相比于常规SW480细胞对顺铂的敏感性显著下降,western blot结果表明SW480-R细胞的MCL-1水平显著上调而其他Bcl-2蛋白家族成员(Bcl-2,Bcl-xl,BIM,BAK,BAX)表达水平变化不明显。体外转染MCL-1 siRNA能逆转SW480-R细胞的耐药性,提高顺铂对SW480-R的杀伤活性。在SW480-R细胞中,MCL-1 siRNA能促进线粒体来源的促凋亡因子(细胞色素C、凋亡诱导因子、Smac/DIABLO)在顺铂治疗下从线粒体中释放到细胞质中,进而诱导耐药肿瘤细胞发生凋亡。结论 MCL-1的高表达可能是结肠癌细胞产生顺铂耐药性的重要机制,MCL-1基因沉默能通过线粒体凋亡途径逆转耐顺铂结肠癌细胞系SW480的耐药性。     

血府逐瘀汤延缓大鼠骨髓源内皮祖细胞衰老的机制研究

目的观察血府逐瘀汤对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)衰老及肿瘤抑制基因(p53)、沉默信息调节因子1(SIRT1)表达的影响。方法体外培养EPCs,加入1×10^-7mol·L^-1AngⅡ诱导细胞衰老,建立内皮祖细胞衰老模型。将EPCs随机分为6组:正常组(不做处理)、模型组(空白血清),对照组(miR-34a抑制剂)和低、中、高3个剂量实验组(5%,10%,15%含药血清)。分别处理24,48,72h后,收集细胞。以β-半乳糖苷酶染色法检测内皮祖细胞衰老状态;以实时荧光定量法检测p53 mRNA、SIRT1 mRNA的表达。结果正常组、模型组、对照组和低、中、高3个剂量实验组的衰老细胞百分数分别为(10. 67±1. 52)%,(66. 33±2. 08)%,(23. 66±1. 52)%,(51. 33±1. 52)%,(43. 66±2. 08)%和(32. 00±2. 00)%;这6组p53 mRNA的表达量(相对值)分别为1. 00±0. 00,2. 99±0. 15,1. 47±0. 10,2. 96±0. 18,2. 02±0. 08和2. 00±0. 13;这6组SIRT1mRNA的表达量(相对值)分别为1. 00±0. 00,0. 49±0. 03,0. 90±0. 06,0. 50±0. 02,0. 60±0. 03和0. 69±0. 03。模型组的上述指标与正常组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 01);对照组和3个剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 01)。结论血府逐瘀汤能够延缓EPCs的衰老,可以减少衰老EPCs中p53 mRNA的表达而增加SIRT1 mRNA的表达,其中以高剂量组效果最佳。     

2017-2018年江苏省中医院脑梗死住院患者使用活血化瘀类中药注射剂合理性评价

目的 对2017-2018年江苏省中医院脑梗死住院患者使用活血化瘀类中药注射剂的合理性进行分析,促进合理使用。方法 采用回顾性分析的方法对江苏省中医院800例脑梗死的病历进行分析,调查活血化瘀类中药注射剂的使用种类、适应症、用药时机、用药疗程、用法用量、溶媒的选择及溶媒量、联合用药情况以及使用时是否发生不良反应,通过分析找出其使用不合理的地方,并提出相应的整改措施。结果 共有11种活血化瘀类中药注射剂用于脑梗死患者的辅助治疗。使用率最高的活血化瘀类中药注射剂为银杏二萜内酯葡胺注射液,使用率达34.68%。316例患者存在超适应症用药,占39.50%。超疗程使用占总使用频次的1.91%。未按说明书推荐使用的稀释溶媒有2.50%。联合使用的治疗脑梗死的相关药物有17种。结论 江苏省中医院脑梗死住院患者的在活血化瘀类中药注射剂的使用上存在一定的不合理用药现象,需加强对活血化瘀类中药注射剂在使用中的监测和管理。     

多层级基本药物目录中含儿科使用信息药物的对比分析

目的：从儿科药可获得性的角度比较分析WHO、国家和省三层级基本药物目录。方法：通过统计WHO 2013版《儿童基本药物示范目录》、2012版《国家基本药物目录》和2011版《江苏省基本药物目录》中含儿科使用信息的药物,对3个目录中儿科适宜药物进行比较分析。结果与结论：2012版《国家基本药物目录》能够满足一定的儿科需求,但缺乏一些儿科专用品种和适用剂型规格,我国应针对无明确儿童用法用量信息的药品进行儿科评价。江苏省可参考2011版增补目录并借鉴WHO《儿童基本药物示范目录》,针对本省的用药需求补充儿童适用的品种、剂型和规格。     

江苏省中医院临床药学工作开展情况的调查研究

对江苏省13所中医院临床药学工作展开情况进行问卷调查与统计,结合社会对临床药师的实际需求,分析临床药学工作中出现的问题,对临床药学未来工作进行展望,探索中医药特色的临床药学道路,为临床药学教育改革提供依据。     

某院中药饮片处方点评细则与方法

目的：分享中药饮片处方点评的方法,促进中药饮片合理使用。方法：根据处方管理办法（2007）、医院处方点评管理规范（2010）、中药处方格式及书写规范（2010）等相关内容,并参考2015年版《中国药典》一部、《中华本草》、2006年版《中药大辞典》、2002年版《江苏省中药饮片炮制规范》等相关典籍,修订中药饮片处方点评的具体方法。结果：分享某院中药饮片处方点评的细则和处方点评工作表,提出促进中药饮片合理使用的干预方法。结论：制定的中药饮片处方点评细则和设计的处方点评工作表可为规范中药饮片处方点评提供参考,提出的干预方法可促进中药饮片的合理使用。     

临床医学专业本科生介入放射学认知度调查

目的评价医学生对介入放射学知识的认知程度,探讨在本科临床医学专业中开设介入放射学课程的必要性。方法通过对江苏某高校临床医学专业本科准毕业生进行问卷调查的形式,了解其介入放射学知识来源及认知程度。结果发出调查问卷100份,收回有效问卷83份。对于介入放射学一般了解的占38.6%(32/83),缺乏56.6%(47/83)。78.3%认为介入医学职业前景比较乐观,但打算投身介入事业的人却仅有12.0%。结论开设介入医学课程教学,有利于学生对于介入放射学的全面了解,有利于满足现代临床医学的需求,并能提供更多是从事介入放射学事业的后备人才。     

国家基本药物制度发展回顾及探讨:基于2012版《国家基本药物目录》

目的:为完善我国国家基本药物制度提供参考。方法:通过文献研究和描述性分析法梳理我国国家基本药物制度的发展脉络以及基本药物目录的调整轨迹。结果:国家基本药物制度是基本药物供应和合理使用的保障,基本药物目录是国家基本药物制度发展的核心体现。国家基本药物制度在保障基本药物目录实施方面尚存在不足,如制度保障缺乏联动性、缺乏法律保障体系等。结论:应进一步完善国家基本药物制度,在机制、立法等方面更趋细化和规范,以更好地保障基本药物目录发挥指导用药的作用,提高公众药品可及性。     

江苏省创新型生物医药产业园发展模式研究

目的：为了解决现阶段江苏省传统型生物医药产业园面临的发展困境,进一步探索江苏省创新型生物医药产业园的发展模式。方法：通过对江苏省内各个医药产业园实地走访调研,结合相关文献资料,提出了江苏省创新型生物医药产业园的发展模式。结果：江苏省生物医药产业园应该以产业模式创新、体制机制创新以及产城模式创新为导向,完成传统型向创新型园区的转型升级。结论：江苏省生物医药产业园区可以以创新转型为路径,推动整个江苏省生物医药产业的进一步发展。     

江苏省医药制造业与区域经济耦合协调度研究

目的：了解江苏省医药制造业系统与区域经济系统之间的耦合协调关系,并为实现2个系统的协调发展提供建议。方法：以耦合协调模型为基础,选取2008-2018年江苏省医药制造业与区域经济发展水平数据和2017年江苏省11个地级市数据,分别从时间维度和空间维度对2个系统的耦合协调度进行实证研究。结果与结论：江苏省医药制造业与区域经济存在相互耦合关系。从时序上看,2008-2018年江苏省医药制造业与区域经济的发展呈总体上升趋势,并且2个系统的耦合发展类型也从轻度失调阶段逐步发展到优质协调阶段,表明江苏省医药制造业与区域经济耦合协调度不断优化,系统之间的关系也越来越协调;从空间维度上看,江苏各地区医药制造业与区域经济发展水平及耦合协调度存在较大差异性,耦合协调度较高的多集中在经济发达城市,其余地区协调度则较低,说明江苏省医药制造业产业布局仍需进一步整合优化。     

基于专利分析的硒医药技术发展研究

近年,中药中农药残留污染问题引起广泛关注。在“一带一路”战略背景下,甘肃省中药材的出口贸易快速增长,同时农药残留物超标问题也阻碍了中药材产品进入国际市场,严重影响了中药产业的发展。针对甘肃省大宗道地药材当归、党参、甘草和黄芪,笔者综述了2009~2019年来的农药残留检测方法和和国内的标准的差距,并提出对中药中农药多组分残留检测技术研究方案,以期保证中药质量安全,促进中药产业发展。     

氟哌噻吨美利曲辛片治疗脑梗死伴焦虑症的临床研究

目的观察氟哌噻吨美利曲辛片联合心理干预治疗脑梗死伴焦虑症的临床疗效及安全性。方法将80例脑梗死伴焦虑症患者随机分为对照组40例和试验组40例。对照组予以抗血小板聚集、活血化瘀、脑保护剂等常规治疗;试验组在对照组治疗的基础上,予以氟哌噻吨美利曲辛片每次10 mg,bid,口服,同时每隔3~5 d给予1次心理干预。2组患者均治疗6周。比较2组患者的焦虑自评量表(SAS)评分、抑郁自评量表(SDS)评分、美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分,以及药物不良反应的发生情况。结果治疗后,试验组和对照组的SAS评分分别为(40.07±3.02)和(52.07±6.94)分,SDS评分分别为(40.03±3.38)和(51.48±7.22)分,NIHSS评分分别为(6.04±1.51)和(8.92±4.12)分,差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验期间,2组患者均未发生药物不良反应。结论氟哌噻吨美利曲辛片联合心理干预治疗脑梗死伴焦虑症的临床疗效确切,其能显著降低神经功能缺损评分和改善患者预后,且安全性较好。