微RNA-196a和微RNA-210在胰腺癌中的表达及其与生存时间的关系

目的分析微RNA-196a(miR-196a)和miR-210在胰腺癌中的表达,及其与生存时间的关系。方法选择26例胰腺癌患者(A组)、20例良性胰腺病患者(B组)和24例健康受试者(C组)为研究对象。用实时定量荧光聚合酶链式反应法检测3组患者血清中miR-196a和miR-210表达水平。分析3组血清miR-196a和miR-210表达差异,miR-196a和miR-210水平与胰腺癌患者生存时间的关系。结果A,B,C组的miR-196a表达水平分别为(1.79±0.95),(1.24±0.92)和(0.71±0.68),miR-210表达水平(2.32±0.54),(1.25±0.36)和(0.98±0.22),A组的上述指标与B,C组比较,差异均统计学意义(均P<0.05)。在胰腺癌患者中,半年生存率为61.54%,1年生存率为46.15%,2年生存率为3.85%。在胰腺癌患者中,miR-196a高表达组和低表达组的生存时间分别为(7.58±3.43)和(12.38±5.17)个月,miR-210高表达组和低表达组的生存时间分别为(6.92±3.01)和(10.88±4.28)个月,差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-196a的敏感度、特异性及准确率分别为76.92%,93.18%和70.10%,miR-210的敏感度、特异性及准确率分别为68.00%,93.18%和61.18%,联合检测的敏感度、特异性及准确率分别为88.46%,95.45%和83.92%,联合检测的上述指标与miR-196a、miR-210单独检测比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论胰腺癌患者血清中特异性的表达miR-196a和miR-210,二者联合检测诊断胰腺癌可提高其诊断准确率,且miR-196a、miR-210表达水平与胰腺癌患者生存时间有一定关系。     

微小RNA-4491在胃癌血清中的表达及其临床意义

目的 检测微小RNA-4491(miR-4491)在胃癌患者血清中的表达水平,分析其与胃癌临床病理特征的相关性,探讨其单独检测及其与CA72-4联合检测在胃癌诊断中的临床价值。方法 实时荧光定量聚合酶链反应检测胃癌患者和健康受试者血清中miR-4491的表达水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线、曲线下面积(AUC)、危险分数分析法评估miR-4491对胃癌的诊断效能,计算灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV),探讨miR-4491独立及与CA72-4联合检测在胃癌诊断中的应用价值。结果 胃癌组和健康对照组血清miR-4491的相对表达水平分别为3.65±4.04和1.29±1.21,二者比较,差异有统计学意义(P<0.01),miR-4491的表达量与胃癌临床分期、淋巴结及远处转移均不相关(P>0.05),但与其病理分化程度呈负相关(P<0.05)。miR-4491独立检测诊断胃癌的AUC为0.78,敏感度、特异度、PPV、NPV分别为84.5%,59.4%,74.0%和72.9%,而CA72-4诊断胃癌的AUC为0.71,敏感度、特异度、PPV...     

微RNA-125b靶向调控M2型丙酮酸激酶影响宫颈癌SiHa细胞机制验证

目的探讨宫颈癌细胞中微RNA(miR)-125b和M2型丙酮酸激酶(PKM2)的表达以及miR-125b对PKM2基因的调控作用,从而确定miR-125b下游调控的靶基因,阐明其在宫颈癌发生发展中可能的分子机制。方法培养宫颈癌SiHa细胞及正常上皮细胞(293T细胞),利用细胞转染技术过表达或沉默miR-125b。实验分为实验组:miR-125b mimics(M组)、miR-125b inhibitor(I组);阴性对照组:miR-125b mimics negative con-trol(MNC组)、miR-125b inhibitor negative control(INC组);空白对照组(B组):未进行转染。采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-125b的含量。采用免疫荧光及蛋白质印迹法检测各组细胞中PKM2蛋白的表达。结果与293T细胞相比,宫颈癌SiHa细胞中miR-125b的表达下调(0.82±0.05)(P<0.05),PKM2表达上调(3.4±0.5)倍(P<0.05)。SiHa细胞转染成功后,免疫荧光检测miR-125b模拟物组表达PKM2蛋白的细胞数目(1.0±0.7)低于模拟物阴性对照组表达PKM2蛋白的细胞数目(3.6±0.5)(P<0.05);miR-125b抑制物组中表达PKM2蛋白的细胞数目(6.0±0.7)高于抑制物阴性对照组表达PKM2蛋白的细胞数目(3.6±1.3)(P<0.05)。蛋白质印迹法检测miR-125b模拟物组的PKM2蛋白相对表达量(0.239±0.042)低于模拟物阴性对照组的PKM2蛋白相对表达量(0.314±0.018)(P<0.05);miR-125b抑制物组的PKM2蛋白表达水平(0.40±0.03)高于抑制物阴性对照组的PKM2蛋白表达水平(0.34±0.04)(P<0.05)。结论与正常上皮细胞相比,宫颈癌SiHa细胞中miR-125b表达下调,而PKM2蛋白表达上调;宫颈癌细胞中miR-125b表达下调可能会通过增加PKM2的表达,从而增强其糖酵解作用,促进肿瘤的生长。     

老年重症肺炎病人血清微小 RNA-146a、微小 RNA-223、微小 RNA-21、微小 RNA-124水平及其与预后的关系

目的探究老年重症肺炎病人血清微小 RNA(miR)-146a、miR-223、miR-21、miR-124表达水平及其与预后的关系。方法选取 2018年 2月至 2020年 3月郑州大学第二附属医院诊治的 128例老年重症肺炎病人、 130例普通肺炎病人分别为重症肺炎组、普通肺炎组,并纳入同期 128例体检健康者为健康组。比较三组血清 miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124表达水平及肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)水平;分析老年重症肺炎病人血清 miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124表达水平与 TNF-α的相关性;比较不同预后老年重症肺炎病人临床资料和血清 miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124水平;分析老年重症肺炎病人死亡的影响因素;分析血清 miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124、TNF-α对老年重症肺炎病人预后的预测价值。结果普通肺炎组病人血清 miR-146a、miR-223、miR-21表达水平及 TNF-α水平分别为 1.67±0.56、1.64±0.55、1.71±0.57、(12.78±4.30)ng/L,重症肺炎组病人血清 miR-146a、miR-223、miR-21表达水平及 TNF-α水平分别为 2.32±0.78、2.27±0.76、2.39±0.80、(23.64±7.92)ng/L,高于健康组的 1.03±0.35、1.01±0.34、0.99±0.33、(5.43±1.84)ng/L、(P<0.05)普通肺炎组、重症肺炎组血清 miR-124表达水平分别为 0.71±0.24、0.37±0.13,低于健康组的 1.07±0.37(P<0.05);重症肺炎人血清 miR-146a、miR-223、miR-21表达水平及 TNF-α水组病,平高于普通肺炎组( P<0.05)血清 miR-124表达水平低于普通肺炎组( P<0.05);老年重症肺炎病人血清 miR-146a、miR-223、 miR-21表达水平与 TNF-α呈正,相关( P<0.05)血清 miR-124表达水平与 TNF-α呈负相关( P<0.05);死亡组老年重症肺炎病人血清 miR-146a、miR-223、miR-21、TNF-α水平及有,呼吸系统疾病史、吸烟史、机械通气占比高于生存组( P<0.05),血清 miR-124表达水平、氧分压水平低于生存组( P<0.05); miR-146a、miR-223、miR-21、TNF-α、机械通气是老年重症肺炎病人死亡的危险因素( P<0.05);血清 miR-146a、miR-223、miR-21、miR-124、TNF-α预测老年重症肺炎病人预后的曲线下面积( AUC)分别为 0.84、0.88、0.82、0.66、0.68,其灵敏度分别为 72.5%、80.4%、82.4%、60.8%、60.8%,特异度分别为 85.7%、81.8%、79.2%、67.5%、72.4%。结论老年重症肺炎病人血清 miR-146a、miR-223、miR-21表达水平较高,与 TNF-α水平呈正相关; miR-124表达水平较低,与 TNF-α水平呈负相关。且测定血清 miR-146a、miR-223、miR-21表达水平有助于临床预测老年重症肺炎病人的预后情况。     

计算机断层扫描联合血清三叶因子1、微RNA-130a-5p检测对肺癌的诊断价值分析

目的 探究计算机断层扫描(CT)联合血清三叶因子1(TFF1)、微RNA-130a-5p(miR-130a-5p)检测对肺癌的诊断价值。方法 选取2015年2月至2016年9月石家庄市人民医院收治的94例肺癌病人为肺癌组，85例同期确诊的肺良性病变病人为良性病变组。对所有受试者进行CT检查，并分析CT对肺癌病人的诊断效能；采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TFF1水平；采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清miR-130a-5p相对表达量；ROC曲线分析血清TFF1、miR-130a-5p对肺癌的诊断价值；分析CT、TFF1、miR-130a-5p单独检测及联合检测对肺癌的诊断价值。结果 CT诊断肺癌误诊16例，19例漏诊。CT诊断肺癌的灵敏度为79.79%，特异度为81.18%，准确度为80.45%，误诊率、漏诊率分别为18.82%与20.21%。与良性病变组相比，肺癌组病人血清TFF1显著上升，miR-130a-5p水平显著下降(P<0.05)。血清TFF1、miR-130a-5p对肺癌诊断价值的曲线下面积(AUC)分别为0.85、0.83，截断值分别为1.1...     

OVCAR细胞转染miR-130b下调多梳基因-1蛋白表达增加对卡铂敏感性

目的观察miR-130b对卡铂抗卵巢癌的增敏作用,探讨其相关的作用机制。方法 OVCAR细胞Lipofectiamine 2000转染miR-130b模拟物和无miR-130b基因功能的miR-130b阴性对照,荧光定量PCR检测转染效果。转染细胞给予对倍稀释卡铂100,50,25,12.5,6.25,3.12,1.56和0.78μmo.lL-1处理68 h。MTT法检测OVCAR细胞存活;Western印迹法检测多梳基因-1(Bmi-1)蛋白表达。结果 荧光定量PCR结果显示,正常对照组、miR-130b模拟物转染组和阴性对照组miR-130b表达的相对值分别为0.22±0.08,0.46±0.12和0.23±0.10,miR-130b模拟物转染组显著高于正常对照组和阴性对照组(P<0.01),正常对照组和阴性对照组之间无统计学差异。卡铂对正常对照组、miR-130b模拟物转染组和阴性对照组卵巢癌OVCAR细胞的IC50值分别为32.4±4.6,14.7±2.1和(31.4±4.2)μmo.lL-1,miR-130b模拟物转染组IC50值显著低于正常对照组和阴性对照组(P<0.01)。正常对照组、miR-130b模拟物转染组和阴性对照组细胞多梳基因-1蛋白的相对表达量分别为0.75±0.16,0.21±0.12和0.77±0.18,miR-130b模拟物转染组显著降低(P<0.01)。结论 OVCAR细胞转染miR-130b可以显著增加卡铂对其敏感性,下调多梳基因-1蛋白表达可能是miR-130b增敏的作用机制之一。     

微 RNA-130a靶向人类 RUNT相关转录因子 3对肺癌 A549细胞增殖和转移的影响

目的 探讨微RNA(miR)-130a与人类RUNT相关转录因子3(RUNX3)的靶向关系及其对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化的影响.方法 将体外培养的A549细胞分为对照组(未处理)、anti-miR-NC组(转染miR-130a inhibi?tor阴性对照)、anti-miR-130a组(转染miR-130a inhibitor)、anti-miR-130a+siNC组(转染miR-130a inhibitor和NC-siRNA)和anti-miR-130a+siRUNX3组(转染miR-130a inhibitor和RUNX3-siRNA),采用实时定量PCR检测各组细胞中miR-130a和RUNX3mRNA的表达水平,蛋白质印迹法(Western Blot)检测各组细胞中RUNX3蛋白和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测各组细胞增殖能力,克隆形成实验检测各组细胞的克隆形成能力,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭与迁移能力,荧光素酶实验检测miR-130a和RUNX3的靶向关系.结果 荧光素酶实验证实,RUNX3是miR-130a的潜在靶基因.与anti-miR-NC组相比,下调miR-130a可抑制A549细胞增殖[(94.72±6.05)％比(51.28±3.24)％]、克隆[(36.15±2.06)％比(15.46±1.25)％]、侵袭[(90.25±5.48)个比(42.18±3.26)个]、迁移[(118.55±9.86)个比(73.48±6.75)个](P<0.05),促进E-cadherin蛋白表达[(0.26±0.03)比(0.48±0.04)](P<0.05),而抑制N-cadherin、Vimentin蛋白表达[(0.52±0.03)比(0.25±0.02);(0.68±0.05)比(0.35±0.03)](P<0.05);与anti-miR-130a+siNC组相比,共转染anti-miR-130a与siRUNX3可成功增强A549细胞增殖[(52.16±3.12)％比(72.23±6.13)％]、克隆[(16.08±1.05)％比(22.12±1.34)％]、侵袭[(41.59±3.02)个比(68.32±4.26)个]、迁移能力[(72.26±5.18)个比(98.25±6.02)个](P<0.05),抑制E-cad?herin蛋白表达[(0.52±0.04)比(0.33±0.03)](P<0.05),而促进N-cadherin、Vimentin蛋白表达[(0.27±0.03)比(0.46±0.03);(0.33±0.02)比(0.53±0.04)](P<0.05).结论 miR-130a可通过靶向RUNX3抑制A549细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转移.     

微小RNA在中国汉族人血浆中的分布研究

目的观察中国汉族人血浆中miR-192、miR-206及miR-613的分布情况。方法用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定116例健康受试者的miR-192、miR-206及miR-613的表达,外加cel-miR-39进行校正,分析不同受试者血浆中miR-192、miR-206及miR-613的表达差异。结果 116例受试者血浆中miR-192、miR-206、miR-613的相对表达量(△Ct)分别为14.01±4.19,17.63±4.42,19.77±4.68,miR-192在血浆中的表达量明显高于miR-206、miR-613(P<0.05);将3组数据分别按四分位数分组后,发现miR-192、miR-206、miR-613各四分组组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论中国人汉族人血浆中miR-192、miR-206和miR-613呈正态分布且这3种miRNAs在血浆中的分布有显著差异。     

miR-130b与碘难治性分化型甲状腺癌的关系研究

目的探讨miR-130b与碘难治性分化型甲状腺癌(RR-DTC)的关系。方法选取2013年1月至2015年12月在我院就诊并行~(131)I照射治疗的远处转移DTC患者104例,随访36个月,根据治疗结果,将患者分为RR-DTC组(41例)和碘治疗有效组(R-DTC组)(63例),检测患者~(131)I照射治疗前肿瘤组织miR-130b的表达水平,观察患者血清甲状腺球蛋白(Tg)的变化趋势及其与miR-130b的相关性。结果①~(131)I照射治疗前,R-DTC组和RR-DTC组患者肿瘤组织中miR-130b水平分别为(0.79±0.10)和(0.43±0.07),RR-DTC组患者miR-130b水平明显低于R-DTC组,而血清Tg水平高于R-DTC组(P<0.05)。治疗后,RR-DTC组患者Tg同比下降率和T/B分别为10.13%±9.87%和4.29%±1.64%,明显低于R-DTC组(P<0.05)。②Spearman相关性分析显示,Tg同比下降率、T/B与miR-130b呈正相关性(r_s=0.928、0.896,P<0.05)。③ROC曲线分析显示,miR-130b诊断RR-DTC的截断值为0.485,曲线下面积为0.662。根据miR-130b的截断值,将RR-DTC组患者分为<0.485亚组(23例)和≥0.485亚组(18例)。④随访期间,<0.485亚组和≥0.485亚组RR-DTC患者3年生存率分别为34.78%、50.0%,经Log-rank检验,差异无统计学意义(P>0.05)。结论甲状腺癌组织miR-130b表达有望成为难治性分化型甲状腺癌潜在的辅助诊断指标之一。     

肝硬化 96例血清中微 RNA-454和 Wnt10a的表达及其临床意义

目的 探究肝硬化病人血清中微RNA(microRNA,miR)-454和无翅型小鼠乳腺肿瘤病毒整合位点家族成员10a(Wnt10a)的表达及其临床意义。方法 以2018年2月至2020年12月入住武汉科技大学附属汉阳医院的96例肝硬化病人为肝硬化组,并根据Child-Pugh分级分为A级36例、B级31例、C级29例。另选60例健康体检者为对照组。抽取空腹外周血检测天冬氨酸转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、丙氨酸转氨酶（ALT）等肝功能指标,qRT-PCR法检测血清中miR-454和Wnt10a表达水平,并分析miR-454、Wnt10a与Child-Pugh分级评分及AST、ALT、ALB等肝功能指标的关系;受试者操作特征（ROC）曲线分析miR-454、Wnt10a对严重肝硬化的诊断效能。结果 肝硬化组miR-454表达水平0.85±0.20）显著低于对照组1.46±0.29,Wnt10a表达水平1.67±0.31显著高于对照组0.94±0.23(P<0.05);肝硬化组GGT、CLO、AST、ALP、ALT、TBil水平明显高于对照组,而ALB水平低于对照组（P<0...     

miR-10b、miR145及miR155在乳腺癌患中的表达及临床意义

目的 探讨microRNA-10b(miR-10b)、microRNA-145(miR-145)及microRNA-155(miR-155)在乳腺癌患者病理组织及血清中的表达水平,进而评价其在乳腺癌诊断中的价值.方法 收集100例正常健康志愿者,150例乳腺癌患者血液和39例乳腺癌患者的癌组织和癌旁组织,提取血液和组织中的microRNA,采用实时荧光定量PCR检测miR-10b、miR-145及miR-155表达水平,分析其与乳腺癌患者临床病理参数之间的相关性,并绘制ROC曲线分析其在乳腺癌诊断中的价值.结果 治疗前乳腺癌患者血清中的miR-10b,miR-145和miR-155表达水平高于对照组(P＜0.05),三者表达水平均与肿瘤转移显著相关,与年龄、组织学特征、ER表达无相关性(P＞0.05)miR-10 b与临床分期显著相关(P＜0.05),miR-10b的ROC曲线下面积为0.936,miR-145的ROC曲线下面积为0.904,miR-155的ROC曲线下面积为0.91.miR-10b,miR-145,miR155在Ⅲ级乳腺癌患者肿瘤组织的表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ级乳腺癌患者癌组织的表达水平(P＜0.05).结论 血清中miR-10 b、miR-145及miR-155有可能作为乳腺癌早期诊断的肿瘤标志物.     

ABCC4 is regulated by microRNA-124a and microRNA-506

Multidrug resistance protein 4 (MRP4, ABCC4) is an efflux membrane transporter expressed in renal tubules, hepatocytes, brain capillaries, prostate and blood cells. MRP4 drives energy dependent efflux of important physiological and pharmacological compounds. MRP4 expression and function is highly variable but cannot be fully attributed to known mechanisms. The goal of this study was to characterize ABCC4 regulation by miRNAs and to assess the influence of ABCC4 3′-UTR polymorphisms on ABCC4 regulation by miRNAs. miR-124a and miR-506 decreased MRP4 protein levels in HEK293T/17 cells 20–30% and MRP4 function by 50%. These miRNAs did not affect ABCC4 mRNA expression. Moreover, miR-124a and miR-506 expression was negatively correlated with MRP4 protein expression in 26 human kidney samples (Spearman r = −0.62, P = 0.007 and r = −0.41, P = 0.03 for miR-124a and miR-506, respectively). To assess the effect of ABCC4 3′-UTR polymorphisms, six common 3′-UTR haplotypes were inferred in Caucasians, African Americans and Asians and tested in luciferase reporter assays. Multiple ABCC4 3′-UTR haplotypes caused significant reductions in luciferase activity; in the presence of miR-124a or miR-506 mimics the luciferase activity of all six ABCC4 3′-UTR haplotypes was further reduced. Mutation of the putative binding site for miR-124a and miR-506 in the ABCC4 3′-UTR eliminated the effect of these miRNAs. In conclusion, ABCC4 is directly regulated by miR-124a and miR-506 but polymorphisms in the ABCC4 3′-UTR have no significant effect on this miRNA regulation. Regulation of ABCC4 by miRNAs represents a novel mechanism for regulation of MRP4 function.     

微小RNA-181a-5p在甲基苯丙胺依赖大鼠血清外泌体中的表达及生物信息学分析

目的检测甲基苯丙胺依赖大鼠和健康大鼠血清外泌体中微小RNA(miR)-181a-5p的表达,并对miR-181a-5p进行靶基因预测及相关生物信息学分析。方法用甲基苯丙胺复制大鼠条件性位置偏爱(CPP)模型。按照体重将雄性SD大鼠随机分为2组(每组10只):正常组(0.9%NaCl),实验组(2mg·kg^-1甲基苯丙胺)。实验组上午8:00皮下注射甲基苯丙胺,下午16:00皮下注射0.9%NaCl溶液,连续4 d。正常组同时皮下注射等体积0.9%NaCl溶液。实验组与正常组上午处置后,立即置于白箱训练1 h;下午皮下注射0.9%NaCl溶液后,立即置于黑箱训练1 h,连续训练4 d。在末次处置1 d后,进行位置偏爱测定,记录大鼠15 min内在白箱中停留时间及运动路程。用RT-qPCR技术检测大鼠血清外泌体中miR-181a-5p的表达水平;以Target Scan、miRanda及miRBD预测miR-181a-5p靶基因;用DAVID数据库对其靶基因进行功能聚类分析(GO)和生物通路(KEGG pathways)分析;以STRING在线分析软件对其靶基因蛋白进行相互作用分析。结果 CPP训练后,2组在白箱中停留时间(s)及运动路程(cm):正常组分别为202.67±28.24,3349.26±412.28;实验组分别为460.47±66.71,4475.97±585.74。实验组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。正常组、实验组血清外泌体中miR-181a-5p表达分别为3.39±1.79,10.23±4.32,组间差异有统计学意义(P<0.01)。预测得到miR-181a-5p靶基因108个,其功能主要富集于神经元的生成和分化、基因表达调控及谷氨酸转运等生物学过程,涉及内质网蛋白加工信号通路。miR-181a-5p靶基因编码蛋白之间存在复杂的相互作用,其中RAD23B、PRKCD、MAP2K1、NCBP1、GABRA1等在蛋白互作网络中具有核心地位。结论miR-181a-5p可能通过调控基因表达及谷氨酸转运等生物过程,作用于内质网蛋白加工信号通路,进而调节下游靶蛋白参与甲基苯丙胺成瘾的发生过程。     

羟乙基淀粉130/0.4复苏减轻失血性休克大鼠早期肺损伤的作用

目的通过测定肺组织匀浆中SOD、MDA、MPO的含量、观察肺组织的形态学变化,研究羟乙基淀粉130/0.4复苏对失血性休克大鼠早期肺损伤的影响。方法健康雄性SD大鼠54只,体重230～280g,随机分为3组:对照组(C组)、乳酸林格液复苏组(RL组)、6%羟乙基淀粉130/0.4复苏组(HES组)。按照Wiggers改良法复制失血性休克模型。分别于复苏后1、2、4h测定肺组织中SOD、MDA、MPO的含量;光镜下观察肺组织形态学改变。结果①复苏后RL组与HES组肺组织中MDA的含量逐渐升高,同一时间RL组升高的程度较HES组明显(P<0.01);复苏后RL组与HES组肺组织中SOD的活性逐渐降低,同一时间RL组SOD降低的程度较HES组明显(P<0.01);②复苏后,HES组各时点肺组织MPO含量均明显低于RL组(P<0.01),但高于C组;③免疫组化染色光镜观察显示:RL组肺组织间质水肿、肺泡隔增宽、中性粒细胞侵润程度,HES组比RL组的组织损伤明显减轻。结论 6%羟乙基淀粉130/0.4可以减轻休克及复苏导致的早期肺损伤,是较为理想的休克复苏液体。     

微小RNA-21对肝癌患者的HepG2细胞增殖的调控作用

目的研究微小RNA-21(miR-21)在肝癌HepG2细胞中对增殖的作用并探讨相关的机制。方法收集2012年至2015年本院收治的98例肝癌患者,分离其肝癌组织和癌旁组织,用免疫组化法检测丝裂原激活蛋白激酶激酶3(MAP2K3)的表达情况;肝癌细胞系HepG分为mimic-miR-21组与miR-21抑制药组,分别转染mimic-miR-21与miR-21抑制药。转染48 h后,以3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑法检测在24,48,72 h的HepG2细胞的增殖情况,用实时定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测HepG2细胞中miR-21和MAP2K3 mRNA的表达水平,以免疫印迹法检测MAP2K3的表达水平。结果 MAP2K3在肝癌组织与癌旁组织中的表达强度分别为1382±105,5872±289;HepG2细胞转入mimicmiR-21与miR-21抑制药24 h后,mimic-miR-21组与miR-21抑制药组的miR-21 mRNA表达量分别为6.45±1.21,0.43±0.12。mimic-miR-21与miR-21抑制药组的增殖活性在24,48,72 h分别是(100±12)%,(60±18)%;(138±12)%,(45±8)%;(146±9)%,(38±6)%,以上指标组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。HepG2细胞转入mimic-miR-21与miR-21抑制药24h后,mimic-miR-21组与miR-21抑制药组的MAP2K3在RNA表达水平分别为0.17±0.03,0.97±0.09,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 miR-21可通过抑制MAP2K3的表达从而促进肝癌HepG2细胞增殖。     

p130cas和甲胎蛋白共表达在原发性肝细胞癌中的临床意义

目的研究p130cas及AFP在肝癌中表达,探讨其表达的临床意义。方法采用免疫组织化学SABC法,检测40例肝癌组织中p130cas和AFP表达情况。结果 p130cas表达与肝癌的组织学分级、原发肿瘤浸润、局部淋巴结转移、门静脉癌栓、TNM分期及术后生存期相关。AFP表达与肝细胞癌的组织学分级、局部淋巴结转移、门静脉癌栓、术前血清AFP及术后生存期有关。结论 p130cas和AFP与肝细胞癌的发生、侵袭转移和术后生存密切相关;联合检测此两种蛋白更有助于评价肝细胞癌的预后。     

卵巢癌组织中 microRNA-7表达水平及其临床意义

目的 探讨microRNA-7在卵巢癌组织中的表达水平及其临床意义。方法 收集该院确诊的卵巢癌患者42例,每例均行手术切除。同时收集38例良性卵巢上皮囊肿组织作为良性对照组。采用RT-PCR方法分别检测卵巢癌组织、癌旁组织和良性病变组织样本microRNA-7的表达,并分析其表达与卵巢癌临床特征的关系。结果 卵巢癌组织microRNA-7表达为0.176±0.063,癌旁组织表达为0.314±0.099,良性病变组织表达为0.465±0.123。与癌旁组织和良性病变组织比较,卵巢癌组织中microRNA-7 表达显著下降(P均＜0.05)。microRNA-7的表达与患者的年龄、病理分型无关,与临床分期和区域淋巴结转移相关(P均<0.05)。单因素分析结果显示,microRNA-7高表达的卵巢癌病人总生存期长于低表达组(P=0.02)。结论 microRNA-7在卵巢癌组织中表达下显著调,可能是卵巢癌患者重要的预后指标之一。     

羟乙基淀粉130/0.4置换度测定方法的改进

目的:改进羟乙基淀粉130/0.4置换度测定方法.方法:采用气相色谱法测定,以氢碘酸水解羟乙基淀粉130/0.4中羟乙基成碘乙烷.色谱柱:Agilent DBT-5(0.32 mm×30 m,膜厚0.25 μm);检测器:氢火焰离子化检测器;载气:N2;流速:2 mL·min-1;分流比:1:40;应用程序升温(50℃,保持2 min,以45℃·min-1,升至230℃,保持4 min),进样口温度250℃,检测器温度280℃.结果:碘乙烷在4.13～41.34 g·L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9998(n=5).平均回收率为98.34%,RSD为1.7%(n=6).结论:该法简便快捷专属性好,可用于羟乙基淀粉130/0.4置换度测定.     

MicroRNA-1对大鼠心肌细胞凋亡的影响

摘要 目的 探讨microRNA-1(miR-1) 对大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法 应用转染的方法使培养的H9C2大鼠心肌细胞高表达miR-1（miR-1组）,荧光定量PCR的方法确定miR-1上调后,采用MTT法和流式细胞术检测各组细胞活力和凋亡情况、用荧光定量PCR和Western Blot的方法检测凋亡抑制因子Bcl-2的mRNA和蛋白表达情况。正常细胞和转染随机合成的miRNA阴性对照片段分别为正常对照组和阴性对照组。结果 与正常对照组相比,阴性对照组各个指标的变化均没有统计学差异。miR-1组的miR-1 mRNA表达水平显著升高,细胞活力下降,凋亡率增加,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均明显降低。 结论 转染的miR-1 mimic能够上调细胞内的miR-1mRNA表达水平,抑制心肌细胞增殖,促进细胞凋亡。