镉金属硫蛋白

因镉的生物学半减期很长(20年以上)和慢性接触对机体的损害,已被认为是一种有毒的重金属。长期接触低浓度镉,可诱导人或动物体内合成一种结合镉的低分子量的蛋白质——金属硫蛋白(Metallothionein,MT),该蛋白质在镉的代谢、蓄积以及镉的毒作用机理等方面起重要作用。本文就金属硫蛋白的发现、分离测定、特性、生物学作用以及研究的意义等问题介绍如下: 一、金属硫蛋白的发现 1957年Margoshes等首次报告在马肾皮质中发现了一种镉含量很高的低分子量蛋白质     

用转基因动物研究金属硫蛋白对镉毒性的作用

用转基因动物研究金属硫蛋白对镉毒性的作用刘杰镉（Ｃｄ）是一种污染环境的重金属，它广泛地用于电池、合金、塑料生产及电镀工业等，并作为一种污染源存在于某些磷肥之中。镉在自然界难于降解，广泛存在于食物链中。镉的毒性取决于接触剂量的大小和接触时间的长短。大剂...     

氯化镉和镉金属硫蛋白对大鼠肝细胞毒性的比较

无机镉(Cd)主要分布于肝脏,导致肝毒性损害。而镉金属硫蛋白(CdMT)则主要分布于肾脏,导致肾毒性损害。CdMT对培养的肾细胞毒性要比Cd大。但是CdMT对所有的培养细胞毒性是否都比Cd大,以及体内和体外毒性是否存在高度的相关尚不清楚。本研究旨     

金属硫蛋白在锌拮抗镉毒性中的作用

重金属镉中毒可导致机体多器官系统的损伤 ,补锌能有效拮抗镉的毒性 ,其机制与金属硫蛋白有着密切的关系。本文拟就金属硫蛋白在锌拮抗镉毒性中的作用做一综述     

镉金属硫蛋白灌胃小鼠后镉的细胞分布及毒性

目的 探讨镉金属硫蛋白(CdMT)灌胃小鼠染毒后镉的细胞分布及淋巴细胞毒性.方法 应用分离纯化的CdMT灌胃染毒小鼠4周,检测血红细胞镉(RBC-Cd)和脾淋巴细胞镉(sLC-Cd)的含量,及脾T淋巴细胞增殖功能、T细胞亚群和DNA单链断裂(DNA-SSBs).结果 RBCCd和sLC-Cd在CdMT染毒后明显增高;脾淋巴细胞毒性表现为增殖减低,T细胞亚群改变和DNA-SSBs尾长增加,且与细胞内镉含量有明显相关.结论 经消化道途径接触CdMT可致镉的吸收和在淋巴细胞内分布,导致DNA损伤和细胞免疫功能抑制.     

金属硫蛋白对金属毒性的防护机理

选用对金属硫蛋白(MT)具有高亲和力的Ag、Co、Hg、Ni、Pb和Zn等金属,研究MT与这些金属细胞毒性之间的关系。实验选用体重250～350g的Sprague-Dawley雄性大鼠,在72±2°F温度条件下饲养。取动物肝脏作细胞培养,加ZnCl_2(100μM)于肝细胞培养基中,培养24小时,诱导MT合成。随后做去     

镉毒性肾损害与镉、锌结合蛋白——Ⅰ.尿金属硫蛋白对镉毒性肾损害的检测价值

采用Sephadex G-75凝胶柱色谱技术对亚急性镉毒性肾损害大鼠肝、肾、血、尿中金属硫蛋白(MT)进行了分离测定。结果表明,镉暴露后,肝、肾、血、尿中MT增多。MT是体内镉的主要存在形式,其在体内镉的运转、蓄积及排泄过程起最重要的作用。尿中MT增高是镉毒性肾损害最早出现的变化之一,它作为低分子蛋白质是肾小管功能障碍的灵敏指标。同时,作为一种镉金属结合蛋白,在反映镉性肾损害有其特异性。     

金属硫蛋白与镉中毒

金属硫蛋白（Metallothion，in，简称MT）是一种低分子量（6000～10000）蛋白质，具有高金属含量（每分子含7～12个金属分子），金属通过硫酯键与蛋白结合。氨基酸组合中约含23％～33％半胱氨酸，通过形成金属硫键选择性的结合半脱氨酸无二硫键及芳香族氨基酸和组氨酸。MT被发现以来，围绕着与镉毒性的关系做了许多研究工作，发现MT的亲金属性使生物体接触铜后引起一系列特殊的生物学效应，如有特定的靶器官，生物半减期长，药物促排困难，干扰体内必需微量元素的平衡等。本文就MT与Cd的吸收、转运、中毒与解毒以及铜与其它微量元素的关…     

镉、锌与金属硫蛋白抗体对金属硫蛋白的竞争结合

[目的]通过镉、锌与金属硫蛋白抗体（MT-Ab）对金属硫蛋白（MT）的竞争结合,探讨MT-Ab在镉致肾损伤过程中的作用机制。[方法]根据不同的实验处理分组,每组包含0、5、10、20、40mg／mL 5个不同实验浓度亚组。采用竞争ELISA法,按波长490nm处的光密度值判断竞争结合的程度。[结果]实验所用包被MT质量浓度为1μg／mL,MT-Ab浓度为32U。随着实验镉、锌离子浓度增加,光密度值下降。[结论]镉、锌与MT-Ab对MT的结合存在着竞争作用,MT-Ab可使CdMT解离产生游离镉离子,从而导致肾损伤效应。     

Ⅱ型糖尿病小鼠对镉金属硫蛋白致肾脏毒性的易感性

[目的]探讨Ⅱ型糖尿病小鼠对重复性镉金属硫蛋白（CdMT)染毒致肾脏损伤的易感性。[方法]18只6月龄雄性Ⅱ型糖尿病小鼠（Umea ob/ob小鼠）和18只同种系非Ⅱ型糖尿病的雌性瘦型小鼠（正常小鼠）,各自随机分为3个组,采用背部皮下注射方式染毒。为了使两种类型小鼠肾皮质中达到相似的染镉浓度,根据两种小鼠肾脏体系数之比值来确定不同的CdMT染毒剂量。[结果]ob/ob小鼠尿NAG、尿钙及肾皮质钙含量在低肾皮质镉剂量时升高,而瘦型小鼠在试剂量时的相应指标无明显改变。[结论]本研究提示Ⅱ型糖尿病小鼠对镉的肾脏毒性易感。     

金属硫蛋白抗镉性肾毒作用的试验研究

采用亚急性镉中毒性肾损害动物模型，观察了金属硫蛋白（ＭＴ）对镉性肾损害的保护作用。结果显示：在镉致肾损害的过程中，可见ＭＤＡ含量增加、ＳＯＤ活性降低，表明镉具有诱导肾脏的脂质过氧化作用。用硫酸锌事先诱导ＭＴ的合成，可延缓镉性肾损害出现的时间和减轻肾损害的程度，表明ＭＴ具有抗镉性肾损害的作用。     

金属硫蛋白和职业性镉接触

为了解金属硫蛋白(MT)是否可作为预防镉中毒性肾病的生物学监测指标,本文研究了(1)镉的累计时间加权接触量(cumulative time weighted exposure)(μg/m~3年)与血清或尿MT的关系,(2)肾功能与血清及尿MT的关系,(3)血、尿镉与血清及尿MT的关系。     

镉对Ⅱ型糖尿病小鼠金属硫蛋白基因表达的诱导与镉肾脏毒性之关系

目的 探讨金属硫蛋白基因诱导表达能力与Ⅱ型糖尿病小鼠（ob/ob小鼠）对镉金属硫蛋白肾脏毒性易感性之间的关系。方法 以β-actin为内参照,采用半定量RT－PCR方法检测在相同肾皮质镉水平条件下,镉对ob/ob小鼠和瘦型小鼠（正常小鼠）肾皮质MT1和MT2基因的诱导表达。结果 镉对ob/ob小鼠肾皮质MT1和MT2基因诱导表达的能力过低,而镉对瘦型小鼠MT1及MT2基因具有明显的诱导能力。结论 本研究提示Ⅱ型糖尿病小鼠对镉肾脏毒性易感的可能原因与糖尿病小鼠肾中镉对MT基因的诱导能力过低有关。     

大鼠肝脏镉金属硫蛋白的制备

用氯化镉注射Ｗｉｓｔａｒ大鼠，每天１次连续５次后取肝脏制备金属硫蛋白（Ｃｄ－ＭＴ－Ｉ和Ｃｄ－ＭＴ－ＩＩ）。主要步骤经加热，葡聚糖凝胶Ｇ－７５和Ａ－２５层析分析，超微薄膜过滤，有火焰和无火焰原子吸收分光光度计及紫外分光光度计分析等。所得样品较纯且该法可在常规实验室应用。     

镉诱导人胚肾细胞金属硫蛋白基因亚型的表达

[目的]研究镉对人胚肾细胞（HEK293T）金属硫蛋白（MT）各基因亚型表达的影响。[方法]以10μmol/LCdCl2染毒HEK 293T0、2、4、8、12、16、20、24h,2.5、5、10、20、40μmol/LCdCl2染毒HEK293T24h后,采用MTT法测定HEK 293T增殖活性;采用RT-PCR检测镉对HEK 293T MT-1A、MT-1B、MT-1E、MT-1F、MT-1G、MT-1H、MT-1X及MT-2A mRNA表达的影响。[结果]CdCl2染毒HEK 293T 24h后,经10μmol/LCdCl2诱导后,随时间MT-1A、MT-1F、MT-1G、MT-1H及MT-2A mRNA表达水平均呈先升高后降低趋势。MT-1X mRNA水平在8h明显升高（P〈0.05）,16h达到峰值并持续到24h。5μmol/L以上CdCl2均可明显抑制HEK293T活力,与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。MT-1A、MT-1F、MT-1G、MT-1H及MT-2A mRNA在2.5μmol/LCdCl2诱导表达水平均达到峰值,随着剂量增加,MT-1F、MT-1G、MT-1H维持在较高水平,40μmol/L剂量水平仍明显高于对照组（P〈0.05）,MT-1A、MT-2A在40μmol/L降低到基础表达水平。MT-1X mRNA表达水平与染毒剂量呈线性正相关（r=0.75,P〈0.01）。MT-1X的表达与镉对HEK 293T毒性呈负相关关系（r=-0.88,P〈0.01）。[结论]镉可以诱导MT-1F、MT-1G、MT-1H、MT-1X及MT-2A mRNA表达水平明显升高,并表现出特定的剂量-效应和时间-效应关系。     

镉诱导人胚肾细胞金属硫蛋白基因亚型的表达

为了研究镉对人胚肾细胞（HEK293T）金属硫蛋白（MT）各基因亚型表达的影响。研究人员使用10μmol／L CdCl2染毒HEK293T0、2、4、8、12、16、20、24h,2．5、5、10、20、40μmol／L CdCl2染毒HEK293T24h后,MTT法测定HEK293T增殖活性;RT-PCR检测镉对HEK293TMT-1A,MT-1B,MT-1E,MT-1F,MT-1G,MT-1H,MT-1X及MT-2AmRNA表达的变化。     

重复性注射镉金属硫蛋白诱导小鼠肾脏金属硫蛋白基因的表达

目的　探讨重复性注射镉金属硫蛋白(CdMT)对小鼠肾脏金属硫蛋白(MT)基因表达的影响。方法　以β-actin为内参照,采用半定量RT-PCR方法检测重复性CdMT染毒后小鼠肾脏MT1和MT2基因的表达水平及与染镉剂量和肾皮质镉含量之间的相关性。结果　随着CdMT剂量的增加,MT1、MT2基因的表达水平都相应升高,当CdMT染毒总剂量达到0.60mg/kg时,肾皮质中MT1、MT2基因的表达水平分别为1.60±0.12及1.44±0.05,与相应的对照组(1.22±0.16及0.92±0.12)相比,均明显升高,差异有显著性(P<0.05,P<0.01);肾皮质中MT1及MT2基因表达水平分别与肾皮质中镉的含量呈正相关,其相关系数分别为r=0.72(P<0.01)及r=0.71(P<0.01)。结论　镉对MT1及MT2基因表达具有较强的诱导能力;肾皮质中MT1和MT2基因表达的变化趋势基本相同