家兔玻璃体液AKPγ—GT活性变化与PMI的相关性

目的研究死后家兔玻璃体碱性磷酸酶（AKP）和γ一谷氨酰转肽酶（γ一GT）活性与死后经过时间（PMI）的相关性,寻找一种推断PMI的新方法。方法应用酶动力学比色法检测在25~30℃和10~15℃下死后即刻至54h之间玻璃体液AKP和γ一GT活性变化情况。结果从死后即刻至54h之间发现,死后一定时间内,两种酶活性降解均存在平台期,平台期后AKP、γ一GT活性迅速下降,并逐步降解趋于零。经统计学分析,家兔死后两种酶活性与PMI之间有显著的负相关性（P〈0．01）。结论在0h~54h内两种酶活性的降解规律可作为推断PMI的参考指标。     

大鼠死后脑组织GAPDH mRNA多位点降解与晚期死亡时间的关系研究

目的 探讨看家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) mRNA上不同位点降解速率的规律性及其用于晚期死亡时间推断的可行性.方法 选取在死后较长时间内仍能检测出扩增产物的大鼠脑顶叶皮质,对GAPDH mRNA的6个不同位点进行不同时间点(死后即刻、1 d、5 d、9 d、12 d)的实时荧光定量RT-PCR监测,这些位点依次分布于GAPDH mRNA的5′～ 3′端.结果 用Ct值表示,并将所得数据及其比值(GAPDH mRNA 1～GAPDH mRNA 5与GAPDH mRNA 6的比值)与死亡时间(PMI)进行线性回归分析. 结果各位点GAPDH mRNA均与死后经过时间有相关性,但不同位点的mRNA降解速率不同.GAPDH mRNA 1～GAPDH mRNA 3的斜率为1.577、1.596、1.553,这3个位点的降解速率基本相同.GAPDH mRNA 4～GAPDH mRNA 6的斜率为0.936、0.892、0.829,这3个位点的降解速率基本相同.但后3个位点mRNA的降解速率要慢于前3个位点(P<0 05).以GAPDH mRNA 6作为外标,GAPDH mRNA 1～GAPDH mRNA 3与其的比值同PMI之间有相关性(R2=0 898,0 871,0 879),而GAPDH mRNA 4和GAPDH mRNA 5与其的比值同PMI之间无相关性.结论 同一组织中看家基因GAPDH的不同位点存在降解速率的差异性.选取降解速率慢的靠近3′端的位点作为引物,可能更适于研究晚期死亡时间的推断.     

大鼠肾HGPRT mRNA降解与死亡时间关系的研究

〗目的:探讨大鼠死后肾次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)mRNA降解情况与死亡时间(PMI)的关系。方法:40只Wistar大鼠断颈处死,置于20℃温控系统内,利用一步法荧光标记RT-PCR技术检测大鼠肾管家基因HGPRTmRNA在死后即刻至36 h降解情况。结果:在死后即刻至32 h大鼠肾组织均可检测到HGPRTmR-NA,且其扩增产物呈规律性下降趋势。结论:大鼠死亡后肾HGPRTmRNA降解与PMI负相关,可为PMI推断提供一种新的观测指标。     

胃癌双对比造影表现与血5‘—核苷酸酶相关性的研究

目的　初步探讨胃癌影像学表现与 5′-核苷酸酶 (5′- NT)活性的变化关系。方法　经病理证实的 4 1例胃癌 ,均行 X线双对比造影摄片 ,并采用分光光度法测其治疗前血清 5′- NT活性。以 4 0例健康人作对照组。结果　胃癌组 5′- NT活性 (1.14± 0 .16 u/ ml)较正常健康人明显减低 (2 .6 0± 0 .10 u/ m l) (P<0 .0 5 )。解剖部位上 ,从贲门、胃体到胃窦部胃癌 ,其 5′- NT活性分别为 0 .98、1.2 0、1.2 8u/ m l,呈逐渐升高的趋势。溃疡型胃癌 5′- NT活性(0 .96 u/ ml)低于肿块型 (1.12 u/ m l)和浸润型 (1.4 0 u/ ml)。 期胃癌 5′- NT(1.5 3u/ ml)高于 期 (0 .83u/ m l)、 期 (0 .98u/ ml)和 期 (1.0 3u/ m l) (P<0 .0 5 )。结论　胃癌患者血清 5′- NT活性明显较正常人降低 ,其酶活性的变化与胃癌的形态、生长部位及进展程度有一定的相关     

一步法RT-PCR检测大鼠死后脑HGPRT mRNA的降解

目的:探讨大鼠死后不同时间次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)mRNA的降解情况与死亡时间(PMI)的关系。方法:将36只大鼠断颈处死后置于20℃温度控制系统内,利用一步法荧光标记RT-PCR技术检测大鼠脑管家基因HGPRT mRNA在死后即刻至8d的相对表达量的变化。结果:在死后即刻至7d大鼠脑组织均可检测到HGPRT mRNA,其扩增产物呈下降趋势。结论:一步法RT-PCR技术检测大鼠脑组织HGPRT mRNA,在死后的降解呈现出一定的规律性,可为PMI推断提供一种新的指标。     

大鼠死后心肌肌红蛋白mRNA的含量变化与死亡时间的相关性研究

目的:研究大鼠心肌肌红蛋白(Myoglobin,Mb)mRNA 的降解规律,探讨其与死亡时间(Postmonem interval,PMI)的关系.方法:在25℃±1 ℃,65%～70%温度控制系统下,通过采用RT-PCR技术检测大鼠死后心肌Mb mRNA在体保存和离体保存条件下各相应时间段的含量变化,用SPSS 17.0软件对数据进行分析.结果:大鼠死后心肌Mb mRNA随死亡(离体)时间延长而逐渐降低,且与死亡(离体)时间呈线性关系,但在体保存要比离体保存降解慢.结论:Mb mRNA的降解呈时间相关性,在体与离体条件下的降解规律并不完全一致;Mb mRNA有望用于推断较早期死后经过时间.     

不同环境中应用猪眼玻璃体液成分浓度变化推断死亡时间的研究

目的 研究在不同环境中大出血死亡猪眼玻璃体液成分变化及其与死亡时间(postmorteminterval,PMI)的关系。方法 放血处死家猪后取192只猪眼随机分为A、B两组,分别在避光、温度(15±2)℃、湿度(50±5)%的空气中以及浸没于环境温度为(15±2)℃双蒸水的条件下放置2～96 h,采集玻璃体液,运用全自动生化检测仪、超高效液相色谱分析仪(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)检测K+、Na+、Cl–及次黄嘌呤(hypoxanthine,Hx)浓度;采用SPSS13.0统计软件对检测数据进行回归分析。结果 眼球置于空气中时,玻璃体液中K+、Hx与PMI相关性较高,回归方程为:PMI=-11.467+1.954[K+]-0.017[K+]2+0.511[Hx](R2=0.858);眼球置于双蒸水时,玻璃体液中Na+、Cl–与PMI相关性较高,回归方程为:PMI=144.439-1.636[Na+]+0.007[Na+]2-0.961[Cl-]+0.005[Cl-]2(R2=0.622)。结论 玻璃体液K+、Hx浓度变化可作为推断死后位于空气中的尸体较为稳定的指标;玻璃体液Na+、Cl–浓度变化可能对死后抛入淡水尸体的PMI推断具有参考价值。     

家兔玻璃体液铁、磷含量变化与PMI的相关性研究

目的研究死后家兔玻璃体液铁、磷浓度变化与死亡时间的关系,寻找一种精确推断PMI的方法。方法应用全自动生化分析仪检测样本中铁、磷含量,对所得数据进行统计学处理。结果家兔死后54h内眼玻璃体铁、磷元素与PMI显著相关,其单元回归方程分别为y=14.48-0.244x(x=PMI,y=Fe,r=-0.993)、y=-4.573+0.366x(x=PMI,y=Fe,r=0.965)、y=0.137+0.041x(x=PMI,y=P,r=0.975)。结论在54h内玻璃体液铁、磷含量变化可作为推断PMI的参考指标。     

荧光标记RT-PCR技术在实验动物死亡时间推断中的应用

目的 探讨荧光标记逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)在死亡时间(PMI)推断中的应用.方法 44只大鼠断颈处死后置于20℃温度控制系统内,利用荧光标记RT-PCR技术检测大鼠脑及肝组织GAPDH mRNA在死后即刻至8 d的相对表达量的变化.结果 在大鼠死后即刻至7 d脑组织、2 d肝组织内均可检测到GAPDH mRNA,其扩增产物的降解呈现出一定的规律性.结论 荧光RT-PCR技术检测大鼠死后脑及肝GAPDH mRNA,可为PMI推断提供一种新的方法.     

家兔玻璃体及角膜生物酶改变与死后时间的关系研究

目的探讨家兔死后玻璃体内肌酸磷酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）、胆碱酯酶（CHE）、谷丙转氨酶（sGPT）四种酶的活性（酶活性单位）含量与死后经过时间（postmortem interval PMI）之间的相关关系，以及死后不同酶类的失活有无差异。同时观察环境温度对酶的活性变化的影响。探讨为更加准确地推断死亡时间提供一种新方法的可能。方法根据酶免反应和比色（比浊）法的有关原理，应用日本岛津全自动生化检测仪（用比色法）检测家兔死后0—54小时玻璃体液在不同的环境温度下（高温组25—30℃，低温组10-15℃）四种酶的失活情况。结果四种酶的活性在死后一定时间内无明显改变，即出现一个平台期，不同的酶具有不尽相同的平台期，同一种酶在不同的环境温度下平台期也不相同，低温下平台期相对较高温下平台期长，平台期后玻璃体内酶的活性与死后即刻相比出现显著性差异，酶的活性迅速下降，低温组在死亡54小时后四种酶活性几乎为零，高温组在死亡48小时后四种酶活性几乎为零。结论（1）死后玻璃体内四种酶活性与PMI有较高的负相关性，在一定的范围内依据其各自的回归方程将可以大致地推断PMI。依据四种酶活性的多元回归方程可以较准确地推断PMI。（2）个体死后玻璃体内酶的失活过程中存在一个平台期，相同温度下不同种类的酶以及不同环境温度下同一种酶的平台期各不相同。（3）环境温度的升高可以加速酶的失活，缩短酶的失活平台期。（4）不同种类的酶在死后失活快慢是有差异的。     

死后角膜褶皱变化与死后经过时间关系的实验性研究

目的：探讨应用数字图像分析技术研究死后角膜褶皱时序性变化规律并筛选合适量化指标。方法：兔缢死后随机分为睁眼组和闭眼组,每组20只,置于20 ℃暗室内。于死后72 h内每隔1 h,使用数码相机采集兔角膜图像,应用MATLAB软件分割出角膜瞳孔区域图像,并提取反映死后角膜皱褶变化的4项图像纹理特征参数值（CON、COR、ASM、HOM）。比较死后睁、闭眼对各参数值随死后经过时间（postmortem interval,PMI）的变化趋势影响,分析各特征参数（y）与PMI（x）的相关性。结果：不论死后睁眼或闭眼,CON随PMI呈上升趋势,COR呈下降趋势,但睁眼组CON、COR值较闭眼组变化迅速且幅度大;CON、COR值与PMI相关性较好（P<0.05）,回归方程分别为y=0.002 4x2-0.026 8x+0.467 3（R2=0.978,睁眼组）、y=0.000 4x2-0.010 6x+0.304 4（R2=0.904,闭眼组）,y=-0.000 4x2+0.014 2x+3.893 8（R2=0.938,睁眼组）、y=-3E-05x2+0.001 2x+3.980 8（R2=0.852,闭眼组）;ASM、HOM值与PMI关系无统计学意义（P>0.05）。结论：个体死后角膜褶皱发生时序性变化,纹理特征CON、COR与死后经过时间相关性较好。     

应用单细胞凝胶电泳检测大鼠死后脾细胞核DNA降解与死亡时间的关系

目的:探讨应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测大鼠死后脾细胞核DNA降解与死亡时间的一般规律,为早期死亡时间的推断提供新的方法。方法:建立大鼠死亡模型,在死后27h内,每隔3h取脾组织样本进行单细胞凝胶电泳,用共聚焦显微镜摄取彗星图像,应用彗星图像分析软件(IMI1.0)进行图像分析,并作统计学分析。结果:大鼠死后,脾细胞在电泳图像上出现了明显的彗星形拖尾,其尾长(TL)、尾矩(TM)在一定的时间范围内(0～15h)随死亡时间的延长而逐渐增大,二者均与死亡时间(PMI)呈现一定的相关回归关系。结果:单细胞凝胶电泳技术可应用于早期死亡时间的推断;彗星图像分析软件为SCGE的结果分析提供了便利。     

不同温度下人脾细胞DNA降解推断早期死亡时间

目的 对不同温度下人体脾细胞DNA降解状态进行多参数联合定量分析,得出温度相关的多元回归方程.方法 选取13例已知PMI的人体离体脾脏,在死后13h～34h内,分别在10℃、20℃及30℃条件下,每隔1h取材,进行细胞学涂片,Feulgen-Vans染色,选用图像分析系统检测几何参数(ID)及灰度参数(AOD、IOD、AG、LDC)指标,对不同温度的检测指标进行多元回归等统计分析,得出相应的回归方程.结果 温度相关的脾细胞DNA降解推断死亡时间回归方程是:Y=-0.668619XT+2.31609XID-33.45671XAOD-1.13296XIOD+0.44433XAG(XT=10,20,30).结论 不同温度的牌细胞AOD、IOD、ID、AG均有显著性差异,温度及反映DNA含量的各个参数与PMI存在很强的相关性,可以将温度作为参数引入方程用于推断PMI.     

甲醛对鼠的肝脏毒性研究

<正> 用小鼠肝脏离体灌流和大鼠肝脏组织切片培养方法,观察了甲醛对肝脏多种酶、谷胱甘肽(GSH)及细胞亚微结构的影响。结果表明:甲醛致乳酸脱氢酶(LDH)活性增加,5′-核苷酸(5′-N)和葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)活性下降,GSH 含量下降,细胞膜和内质网亚     

大鼠下丘脑内神经降压素对体温的影响

目的　探讨下丘脑内神经降压素 (Neurotensin ;NT)对体温的影响。方法　使用核团内微量注射的方法向大鼠双侧视前区 -下丘脑前部 (PO/AH)和下丘脑后部 (PH) )分别注射NT和抗NT血清 ,观察大鼠体温的变化。结果　双侧PO/AH注射NT后大鼠体温下降 (P <0 0 5 ) ,且呈明显的量效依赖关系 ,但注射抗NT血清不能引起体温变化 ;下丘脑后部 (PH )注射NT对体温无明显影响 (P >0 0 5 )。结论　下丘脑内外源性NT可能参与机体的体温调节过程 ,其作用部位在视前区 -下丘脑前部 ,内源性的NT对体温无明显影响。     

尸体眼玻璃体液钾、钡离子浓度与死亡时间的关系

目的寻找一种准确推断死亡时间（postmortem interval,PMI）的方法。方法将20例交通事故尸体按PMI分为13组:死后1h组（2例）、死后2h组（2例）、死后3h组（2例）、死后4h组（2例）、死后5h组（2例）、死后8h组（1例）、死后9h组（1例）、死后10h组（2例）、死后12h组（1例）、死后13h组（1例）、死后14h组（1例）、死后15h组（1例）和死后16h组（2例）。分别检测各组尸体眼玻璃体液中钾离子（K⁺）、钡离子(Ba²⁺)的浓度,并分析其与PMI的相关性。结果死后16h内尸体玻璃体液K⁺、Ba²⁺浓度与PMI相关,其中钾的回归方程为y=4.611+0.141x（R2=0.362,F=10.234）,钡的回归方程为y=-0.001+0.003x-0.000 44x2+0.000 019 2x3（R²=0.498,F=5.301）,其中y为K⁺、Ba²⁺浓度,x为PMI。结论尸体玻璃体液中K⁺、Ba²⁺浓度变化有望作为早期PMI推断的参考指标。     

不同湿度下高海拔死亡雄性大鼠玻璃体液内胆碱酯酶、乳酸脱氢酶和钠离子的浓度与死亡时间

目的 探讨高海拔不同湿度(H)环境下,死亡雄性大鼠玻璃体液中胆碱酯酶(CHE)、乳酸脱氢酶(LDH)和钠离子(Na+)的浓度与死亡时间(PMI)的相关性.方法 将105只雄性大鼠用空气栓塞法处死,分成A、B、C大组(45％H组;75％H组;100％H组),每个大组按照死亡时间分成7个小组[0(死后即刻)、3、6、9、1...     

偏头痛1号对偏头痛模型大鼠血浆NT、ANP和中枢5-HT的影响

目的:研究偏头痛1号对大鼠血浆神经降压素(Neurotensin,NT)、心钠素(atrialnatriuretic polypeptide,ANP)和脑组织中5-羟色胺(5-hydroxtryptamine,5-HT)含量的影响。方法:采用Csillik造模法造成实验性偏头痛大鼠模型,给予偏头痛1号灌胃6d后,采用放免法(radioimmanoassay,RIA)测定大鼠血浆中NT、ANP的含量,采用荧光光度法测定脑组织中5-HT的含量。结果:与空白组相比,模型组大鼠的NT和5-HT的含量显著下降(P<0．01), ANP的含量显著升高(P<0．01)。与模型组相比,偏头痛1号低剂量组大鼠血浆NT和5-HT的含量明显升高(P<0．05),ANP含量明显下降(P<0．05);高剂量组大鼠NT和5-HT含量非常明显升高(P<0．01),ANP含量非常明显下降(P<0．01)。结论:偏头痛1号可通过有效调节NT、ANP和5-HT的含量来达到治疗偏头痛的作用。     

肝脏产生的三种酶在血清中的生物变异

本文以同一组人群为研究对象、对r 谷氨酰转肽酶 (GGT)、 5′核苷酸酶 ( 5′ NT)及肝脏来源的碱性磷酸酶 (ALP)进行生化变异的分析 ,结果显示 ,男性GGT的活性显著高于女性 ,GGT的预期分析偏差小于或等于 3 7% ,5′ NT预期分析偏差小于或等于 2 1 9% ,肝脏ALP的预期分析偏差小于或等于 5%