加味四逆散对慢性轻度不可预计性心理应激模型大鼠海马损伤的影响

目的观察加味四逆散(JWSND)对慢性轻度不可预计性心理应激大鼠海马损伤的影响。方法成年大鼠随机分为6组:雌性正常对照组,雌性模型组,雌性JWSND组,雄性正常对照组,雄性模型组,雄性JWSND组。建立慢性轻度不可预计性心理应激大鼠模型,比较造模前后糖水偏爱度;采用放射免疫方法检测大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、血清促肾上腺皮质激素(ACTH)含量,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色比色法测定大鼠海马脑片光密度(OD)值,流式细胞仪法检测海马神经元凋亡率。结果慢性心理应激大鼠糖水偏爱度明显下降(P<0.01或P<0.05),下丘脑-垂体轴功能亢进,海马脑片OD值明显低于正常对照组(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01);JWSND能明显提高心理应激大鼠糖水偏爱度(P<0.01),明显提高心理应激大鼠海马脑片OD值(P<0.05或P<0.01),降低海马神经元凋亡率(P<0.01)。结论 JWSND可有效减轻海马神经元损伤,此作用可能是其抗应激损伤中枢作用的主要机制之一。     

逍遥散抗抑郁有效部位配伍对应激抑郁模型小鼠行为学及睡眠时间的影响

目的研究逍遥散抗抑郁有效部位(A,B4,B3)配伍对应激抑郁模型小鼠行为学及睡眠时间的影响。方法逍遥散抗抑郁有效部位采用L9(34)正交设计进行配伍研究,以配伍后的组份及文拉法辛为干预药物,灌胃给予15 d的实验药物。实验过程中,定期测定小鼠体重与自主活动。于第14天给药后1 h,采用急性应激抑郁模型(小鼠悬尾)观测配伍组份对小鼠悬尾不动时间的影响,初步筛选最佳配伍比;第15天给药后1 h,各组小鼠按45 mg/kg腹腔注射阈剂量的戊巴比妥钠生理盐水注射液,准确记录注射结束时间、翻正反射消失时间、翻正反射恢复时间。观测配伍组份对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间的影响。结果与空白对照组比较,当配伍部位按生药量计,A为138.9 g/kg,B4为46.3 g/kg,B3为23.1 g/kg时,可显著减少小鼠悬尾不动时间(P<0.001),且不影响小鼠自主活动量,并能够明显延长小鼠睡眠潜伏期(P<0.01)和显著地缩短小鼠睡眠持续时间(P<0.001)。结论逍遥散抗抑郁有效部位按生药量计,A为138.9 g/kg,B4为46.3 g/kg,B3为23.1 g/kg时,抗抑郁作用最佳,且在最佳配伍比时,能明显缩短阈剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间。     

温胆汤含药血清对CREB mRNA沉默海马神经元细胞凋亡及BDNF/TrkB/CREB信号通路的影响

目的:探讨温胆汤对环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)mRNA沉默海马细胞活性、凋亡及海马脑源性神经营养因子/原肌球蛋白相关受体激酶/CREB(BDNF/TrkB/CREB)信号通路作用的影响。方法:制备温胆汤含药血清,将SD雄性大鼠随机分为温胆汤高、中、低剂量组、氯氮平组、正常生理盐水组,每组10只,其中每组15只。正常组予20 mL·kg~(-1)生理盐水灌胃,氯氮平组给予0.02 g·kg~(-1)氯氮平原药灌胃,温胆汤高、中、低剂量组分别予质量浓度为2,1,0.5 g·mL~(-1)的等量温胆汤浓缩生药灌胃,1次/d,连续灌胃8 d后,股动脉取血,5 000 r·min~(-1)离心15 min,倾取上清液,灭活,-80℃保存,备用。通过脂质体转染至海马细胞中,构建CREB mRNA沉默海马神经元细胞系,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)验证小分子干扰核糖核酸(siRNA)转录后效果。检测海马细胞周期和凋亡,正常海马细胞和CREB基因沉默海马细胞内BDNF,TrkB,CREB,钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA表达水平。结果:对于细胞凋亡,与正常大鼠血清组比较,各组别在24,48 h时,细胞凋亡显著降低(P0.01);与正常大鼠血清-siRNA组比较,各给药组细胞凋亡显著降低(P0.01)。对于BDNF,TrkB,CREB,CaMKⅡmRNA表达,与正常大鼠血清组比较,基因沉默正常组CREB,BDNF mRNA表达均显著下降(P0.01);与正常大鼠血清-siRNA组比较,各给药组可显著提高BDNF mRNA表达(P0.01),其中TrkB,CaMKⅡ各组间差异无明显统计学意义。结论:温胆汤含药血清可提高BDNF mRNA表达,通过调控BDNF/TrkB/CREB信号通路,以保护海马神经元,达到防治精神分裂症认知障碍的目的。     

桑叶降糖有效部位对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响

目的:初步探讨桑叶有效部位对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞模型的保护作用及机制。方法:测定HepG2细胞的生长曲线,成功复制HepG2细胞IR模型后,采用各降糖有效部位的提取液进行干预,并与常用的罗格列酮和参芪降糖胶囊进行对照,测定各组药液对HepG2细胞及IRHepG2细胞增殖的影响,观察比较各给药组细胞的葡萄糖消耗量。结果:筛选出2.5-10μg/L的罗格列酮、5-100mg/L的参芪降糖胶囊、2-12mg/L的桑叶生物碱、5-100mg/L的桑叶黄酮、5-100mg/L的桑叶多糖、5-100mg/L的桑叶水提物对HepG2细胞及IRHepG2细胞增殖无影响,每组给予不同浓度的药物干预后,高、中、低剂量的生物碱、水提物组和高剂量的黄酮、多糖组可显著增加其葡萄糖消耗量(P<0.01)。结论:桑叶生物碱具有显著的改善模型细胞IR的作用,可能与其增加HepG2细胞的葡萄糖消耗量和促进葡萄糖的吸收及摄取有关。     

四逆散对抑郁模型大鼠HPA轴、海马BDNF及其受体TrKB的影响

目的：探讨四逆散的高、低剂量组对抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）、海马脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体型酪氨酸激酶B（TrKB）表达的影响。方法：SD雄性大鼠50只,随机分为正常对照组、模型组、盐酸文拉法辛组（12.5 mg·kg^-1）、四逆散高、低剂量组（10,5 g·kg^-1）。采用慢性轻度不可预见性刺激造模,同时ig给药21 d后分别取血、下丘脑和海马。采用放射免疫分析法检测大鼠血浆皮质醇（CORT）、促肾上腺皮质激素（ACTH）及下丘脑中促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）的含量变化,采用免疫组化分析法检测海马BDNF及其TrKB阳性神经元面密度值的变化。结果：与正常组相比,模型组大鼠血浆中CORT,ACTH及下丘脑CRH的含量明显升高,海马中BDNF和TrKB的神经面密度值明显降低。与模型组相比,四逆散高、低剂量组可以显著降低抑郁症模型大鼠血浆CORT,ACTH、下丘脑CRH的含量;增加大鼠海马BDNF及其TrKB阳性神经元面密度值。结论：四逆散可明显改善抑郁模型大鼠的抑郁状态,其机制可能是通过HPA轴增加海马BDNF,TrKB的表达。     

鸡血藤黄酮类有效部位对人肺腺癌A549细胞氧化应激的影响

目的:探讨鸡血藤黄酮类有效部位( SSCE)对人肺腺癌A549细胞的杀伤活性与氧化应激反应的相关性.方法:实验分为SSCE高、中、低剂量组和正常对照组,各组分别加入不同浓度的SSCE(正常组用培养基代替)作用人肺腺癌A549细胞24 h后,采用脂质过氧化物(MDA)、谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测A549细胞MDA,GSH的含量;以2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针,用荧光酶标法和共聚焦荧光显微镜法检测活性氧(ROS);选择加入SSCE高浓度组同时加入抗氧化剂维生素C(Vit C),维生素E( Vit E),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx),过氧化氢酶(CAT)作用细胞24 h后,采用CCK-8法检测A549细胞增殖情况及荧光酶标仪法检测ROS.结果:加入SSCE后,SSCE各组细胞MDA均含量上升(P＜0.01)、高浓度组GSH含量下降(P＜0.01);高、中浓度组细胞ROS含量上升(P＜0.01);共聚焦显示SSCE各组均有绿色荧光,其中高、中浓度组荧光较强;加入抗氧化剂后,各组细胞抑制率均降低(P＜0.05),ROS含量均下降(P＜0.01).结论:SSCE可以改变A549细胞MDA,GSH,ROS水平,其抗肿瘤作用可能是通过诱导肿瘤细胞氧化应激反应而实现的.     

加味四逆散对慢性心理应激抑郁症大鼠海马损伤的保护作用

目的观察加味四逆散对慢性心理应激抑郁症大鼠海马损伤的保护作用。方法采用多种应激源制作慢性心理应激抑郁症大鼠模型。30只Wistar大鼠分为正常组、模型组、中药组。观察各组大鼠海马神经元凋亡率，测定海马脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体TrkB蛋白含量及神经元内Ca^2＋浓度。结果模型组大鼠海马神经元凋亡率较正常组增加，海马BDNF及其受体TrkB蛋白表达降低，神经元内Ca^2＋浓度升高（P〈0．05或P〈0．01）。中药组可降低海马神经元凋亡率，增加BDNF与TrkB蛋白表达，降低神经元内Ca^2＋浓度。结论加味四逆散可能通过上调海马BDNF的表达，降低胞内Ca^2＋，实现抗抑郁的作用。     

加味四逆散对CMUS模型大鼠海马BDNF的影响研究

目的:研究加味四逆散对慢性不可预计性刺激致抑郁大鼠海马BDNF的影响,揭示其抗抑郁作用的神经元保护机制。方法:采用慢性不可预计性刺激复制大鼠抑郁模型,用免疫组化和原位杂交方法检测大鼠海马BDNF的表达情况。结果:加味四逆散对模型大鼠海马内BDNF、BDNFmRNA的阳性细胞数及平均灰度值有显著增加(P0.01),与阳性药组相比,无显着性差异(P0.05)。结论:加味四逆散治疗抑郁症的机制可能是通过增加海马BDNF水平以及对海马神经元的保护而实现的。     

金银花木樨草苷对大鼠抑郁及中枢海马神经递质调控的影响

目的研究金银花木樨草苷对大鼠抑郁及中枢海马神经递质调控的影响。方法将48只成年健康的SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组和金银花木樨草苷高、中、低(100 mg/kg、50 mg/kg、25 mg/kg)组。采用慢性不可预知性应激(chronicunpredictable mild stress,CUMS)结合孤养方法构建抑郁模型,旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验等考察药物对抑郁大鼠行为学的影响,HPLC-F检测海马中5-HT等单胺递质水平,Western blot和RT-PCR测定海马组织BDNF蛋白和mRNA的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠矿场实验自主活动量下降,悬尾不动时间和游泳不动时间延长(P<0.05);海马区神经递质5-HT、NE及DA水平降低(P<0.05),BDNF表达下调(P<0.05)。结论金银花木樨草苷可逆转并改善慢性应激引起的抑郁样行为,其可能的机制是上调海马BDNF表达,增加中枢单胺类神经递质水平。     

刺五加有效部位对MPP~+损伤PC12细胞的保护作用

目的:对刺五加有效部位进行体外药效学评价。方法:采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪测细胞凋亡率,紫外可见分光光度计测LDH的漏出量以及SOD、MDA、NO、NOS的活性和含量。结果:刺五加有效部位可以发挥良好的神经元保护作用,能提高MPP+损伤PC12细胞的存活率(P0.01),降低细胞凋亡率(P0.01),降低LDH的漏出量以及NO、NOS、MDA的含量和降低SOD活性,有统计学意义(P0.05)。结论:刺五加有效部位对MPP+损伤PC12细胞具有一定的保护作用,其作用机制可能是通过降低PC12细胞NO、NOS、MDA的含量和LDH的漏出量,引起胞内SOD的活性增强,从而降低细胞凋亡率,提高细胞存活率而实现的。     

四逆散加味抗大鼠肝纤维化作用机制

目的:探讨四逆散加味对肝纤维化的防治作用机制.方法:80只Wister大鼠随机分为8组:正常对照组、病理模型组、四逆散组、四逆散加味高、中、低剂量组、四逆散预防组.除正常对照组外,其余各组均采用猪血清ip诱发肝纤维化,0.5 mL/只,2次/周,连续10周,5周后即可形成肝纤维化.预防组于造模同时给药(以四逆散加味7 g·kg-1),各治疗组于造模第6周给药,连续4周.四逆散组4 g·kg-1,四逆散加味高、中、低剂量组(14,7,3.5 g·kg-1).采用酸性水解法检测肝组织羟脯氨酸(HYP)含量;放射免疫法(RIA)检测肝组织白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;原位杂交、免疫组化法分别检测肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA与蛋白表达.结果:与模型组比较,四逆散加味中剂量组大鼠肝组织羟脯氨酸( 478.32±42.35)vs(327.09±39.41)μg·L-1,P＜0.01;IL-1(0.58±0.89) vs(0.35±0.47) μg· L-1(P＜0.05);TNF-α (4.82±0.49) vs (4.21±0.45)μg·L-1(P＜ 0.05),含量均显著降低,TGF-β1mRNA(9.92±2.57)vs(5.27±1.39),(P＜0.01)和α-SMA mRNA(12.87±0.39)vs(6.33±0.72),(P＜0.01)及其蛋白表达显著减弱(均P＜0.01).结论:四逆散加味有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与抑制TGF-β11和α-SMA基因表达有关.     

四逆汤对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化Smad2和Smad7的影响

目的 观察四逆汤对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化Smad2和Smad7的影响。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和四逆汤组。模型组及四逆汤组给予注射异丙肾上腺素,对照组注射生理盐水。四逆汤组给予四逆汤灌胃,对照组和模型组均给予生理盐水灌胃。4周后,各组行Masson染色和电镜分析;通过免疫组化方法检测心肌Smad 2和Smad 7蛋白在心肌的表达;RT-PCR法检测Smad 2和Smad 7 mRNA表达。结果 Masson染色示模型组心肌胶原纤维IOD值为9303,而四逆汤组为2459,对照组为4224,提示模型组心肌纤维化较四逆汤和对照组明显;模型组心肌Smad 2蛋白IOD值为20275,mRNAI OD值为0.919;而四逆汤组Smad 2蛋白IOD值为9949,mRNAI OD值为0.561,提示模型组Smad 2表达明显高于四逆汤组（P<0.05);模型组心肌Smad 7蛋白IOD值为25667,mRNAI OD值为0.222,而四逆汤组Smad 2蛋白IOD值为93 147,mRNAI OD值为0.412,提示模型组Smad 7表达明显低于四逆汤组（P<0.05)。结论 四逆汤可以有效抑制异丙肾上腺素所致的大鼠心肌纤维化,其机制可能与下调Smad 2表达和上调Smad 7表达有关。     

补阳还五汤及不同配伍组方对缺血性脑中风后大鼠神经增殖作用的对比研究

目的观察补阳还五汤及不同配伍组方对缺血性脑中风后大鼠神经增殖作用的影响。方法采用机械开颅电凝法阻断大鼠大脑中动脉24h后,用随机电脉冲刺激仪每天刺激2h,连续15天,造成大鼠缺血性中风模型,分为模型组（给予等体积生理盐水灌胃）、补阳还五汤组、补阳还五汤去地龙组、当归补血汤组（同时给予相应药物灌胃进行干预治疗）。以免疫组织化学方法检测大鼠脑组织中5-溴脱氧核苷尿嘧啶（Br-dU）的表达。结果补阳还五汤组和补阳还五汤去地龙组大鼠海马区域中有大量BrdU阳性细胞存在,排列密集,部分呈簇状聚集,与模型组相比较,差异有显著性（P〈0.01）,并且脑缺血侧海马区域BrdU阳性细胞数与对侧比较显著增多（P〈0.05）;当归补血汤组与模型组和大鼠海马区域BrdU阳性细胞数比较,差异无显著性（P〉0.05）。结论补阳还五汤促神经增殖作用优于当归补血汤。     

大蒜有效部位组合物对模型大鼠胃癌前病变的疗效和作用机制

目的：研究大蒜油-大蒜皂苷-大蒜多糖组合物治疗胃癌前病变的疗效,阐明该组合物治疗胃癌前病变的作用机制。方法：将大鼠随机分为空白对照组（n=14）和造模组（n=144）。于造模22周时,将造模组大鼠再随机分为6组：模型组（n=24）、大蒜油对照组（n=24）、胃复春对照组（n=24）、组合物高、中、低剂量组（3×24）。连续给药13周后处死。取材后,在光镜下观察胃黏膜的病理学变化。同时,采用电化学发光法检测各组大鼠离心血浆中的3种肿瘤标志物CEA、CA199、CA724的水平。运用Western Blotting和Real-time PCR技术检测胃癌前病变大鼠胃组织中TGF-β1和Smad4的蛋白和mRNA表达情况。结果：1）组合物高剂量（2.38 g/kg）组能够显著地改善胃癌前病变大鼠胃黏膜的病理变化。2）组合物高剂量（2.38 g/kg）组能够明显降低胃癌前病变大鼠血清中的CEA、CA199、CA724 3种肿瘤标志物的水平。3）组合物高剂量（2.38 g/kg）组能够下调TGF-β1 mRNA及其蛋白表达水平,而能够上调Smad4 mRNA及其蛋白表达水平。结论：组合物高剂量（2.38 g/kg）组能够显著改善胃癌前病变大鼠胃黏膜的病理变化,降低血清肿瘤标志物水平,调节TGF-β1和Smad4的蛋白表达,从而纠正TGF-β/Smads信号转导通路的异常变化,有效地治疗胃癌前病变。     

加味四逆散对肠易激综合征大鼠不同脑区核团c-fos蛋白表达的影响

目的:观察加味四逆散对肠易激综合征大鼠不同脑区核团c-fos蛋白表达的影响。方法:采用束缚制动加灌服番泻叶改良的方法制备肠易激综合征大鼠模型,将24只W istar大鼠随机分成正常组、模型对照组、加味四逆散组和得舒特组,用免疫组织化学法检测大鼠大脑皮质和纹状体c-fos阳性神经元的变化。结果:加味四逆散可明显降低大鼠脑皮质和纹状体c-fos阳性神经元的数目。结论:加味四逆散能够降低c-fos在IBS大鼠不同脑区核团的蛋白表达,干预脑肠轴紊乱的调控机制。     

香青兰有效部位滴丸对犬急性实验性缺血心肌的保护作用

 目的 研究香青兰有效部位滴丸对犬急性心肌缺血损伤的保护作用。方法 犬冠状动脉结扎致心肌缺血模型,香青兰有效部位滴丸低 (25 mg·kg-1) 、中(50 mg·kg-1)、高（100 mg·kg-1）剂量组十二指肠给药后采用心外膜电图标测心肌损伤程度（ΣST）及损伤范围（NST）,采用红四氮唑(TTC)染色法测定心肌梗死区域。测定血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）活性。检测香青兰有效部位滴丸对实验动物心肌耗氧量、血压、心率（HR）及冠脉流量（CF）及冠脉阻力（CR）的影响。结果 犬急性心肌缺血形成后,十二指肠给予香青兰有效部位滴丸50、100 mg·kg-1可改善心肌缺血程度,并缩小心肌缺血范围,减少梗死心肌的范围;高剂量还降低心肌耗氧量,抑制CK-MB活性的升高。100 mg·kg-1可降低血压,但对HR、CF、CR无明显影响。结论 香青兰有效部位滴丸对犬冠脉结扎所致心肌缺血性损伤具有一定保护作用。     

β-细辛醚对抑郁模型大鼠行为及海马MKP-1,MSK-1,CREB和Bcl-2的影响

目的:探讨β-细辛醚对抑郁模型大鼠行为学及丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1),增强有丝分裂原和应激活化蛋白酶-1(MSK-1),cAMP反应元件结合蛋白(CREB)和B细胞淋巴瘤/白血病因子-2(Bcl-2)表达的影响.方法:60只2～3月龄SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组和β-细辛醚组,每组15只.采用慢性轻度不可预见性应激加孤养复制抑郁模型,造模第2天开始,氟西汀组和β-细辛醚组灌胃给药,1次/d(氟西汀1.2 mg· kg-1·d-1,β-细辛醚25 mg· kg-1·d-1).于实验第1,7,14,21天,分别进行体重、糖水消耗量检测和敞箱实验,对大鼠行为学改变进行评定.采用免疫组织化学染色检测MKP-1和Bcl-2蛋白表达,实时定量PCR对MKP-1,MSK-1,CREB和Bcl-2进行定量分析.结果:与模型组比较,氟西汀组和β-细辛醚组大鼠行为学指标显著改善,海马区MKP-1表达减弱、MSK-1,CREB和Bcl-2表达增强,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:β-细辛醚可有效改善抑郁模型大鼠的抑郁症状,其机制可能与减少海马区MKP-1,增强MSK-1,CREB和Bcl-2蛋白表达有关.