灯盏乙素对过氧化氢致血管内皮细胞损伤的作用及其机制研究

目的:探讨灯盏乙素对过氧化氢(H2O2)损伤的血管内皮细胞的保护作用。方法:体外培养血管内皮细胞,将细胞分为6组,即正常对照组(control),氧化损伤组(H2O2组),氧化损伤加入维生素E对照组(VitE+H2O2),氧化损伤加入灯盏乙素组(scutellarin1+H2O2,scutellarin2+H2O2,scutellarin3+H2O2)。用VitE及不同浓度灯盏乙素预先培养血管内皮细胞24 h,然后加入1 mmol.L-1 H2O2继续培养24 h,MTT法检测细胞存活率;检测SOD,GSH-PX,CAT活力。结果:不同浓度灯盏乙素呈能够降低H2O2对抗氧化酶SOD,GSH-PX,CAT活力的影响,各指标差异有显著性(P<0.01)。结论:灯盏乙素可保护过氧化氢诱导的血管内皮细胞的损伤,其作用可能与抗氧化、增强抗氧化酶SOD、GSH-PX、CAT的活力有关。     

阿魏酸川芎醇酯对氧化损伤内皮细胞ICAM-1表达的影响

观察川芎嗪衍生物阿魏酸川芎醇酯(TMPF)对H2O2引起的脐静脉内皮细胞(ECV304)氧化性损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法以H2O2损伤ECV304细胞建立氧化损伤模型,以川芎嗪(TMP)作为阳性对照药物,观察TMPF对氧化损伤的ECV304细胞的保护作用[按试剂盒说明测量微量丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力;采用Real-Time PCR测定ICAM-1mRNA含量;采用Elisa检测ICAM-1蛋白表达]。结果与正常对照组比较,H2O2损伤组细胞内的MDA含量明显升高(P<0.01),TMP与TMPF各浓度保护组MDA含量明显低于H2O2损伤组(P<0.05或P<0.01),且TMPF保护组MDA含量均低于同剂量TMP保护组(P<0.05);与正常对照组比较,H2O2损伤组细胞内的SOD水平明显降低(P<0.05或P<0.01),在12.5μmol.L-1 TMP保护组和TMPF保护组与H2O2损伤组相比差异无统计学意义(P>0.05),在TMP和TMPF的其他浓度上与H2O2损伤组相比差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。H2O2可上调ICAM-1mRNA的含量,正常对照组ICAM-1mRNA的含量为H2O2损伤组的0.245倍,25.0μmol.L-1 TMP保护组ICAM-1mRNA的含量为H2O2损伤组的0.454倍,25.0μmol.L-1 TMPF保护组ICAM-1mRNA的含量为H2O2损伤组的0.376倍。H2O2损伤组细胞ICAM-1蛋白的表达量显著高于正常对照组(P<0.01),25.0μmol.L-1 TMP保护组ICAM-1蛋白的表达量低于H2O2损伤组(P<0.05),而25.0μmol.L-1 TMPF保护组ICAM-1蛋白的表达量显著低于H2O2损伤组(P<0.01)。结论 TMPF对H2O2引起内皮细胞氧化性损伤有明显的保护作用,能减少内皮细胞脂质过氧化物MDA的生成,提高SOD活性,TMPF能降低损伤细胞ICAM-1mRNA的含量及其蛋白表达。TMPF对氧化损伤内皮细胞中ICAM-1表达上调有较强的抑制作用,这可能是TMPF对内皮细胞氧化损伤保护作用的重要机制。     

原花青素对过氧化氢损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:探讨原花青素对氧化损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用。方法:体外培养内皮细胞,将细胞分为6组,即空白对照组(Control组)、氧化损伤组(H2O2组)、氧化损伤加入VitC对照组(VC+H2O2组)、氧化损伤加入原花青素5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L浓度组(procyanidin-L+H2O2组、procyanidin-M+H2O2组、procyanidin-H+H2O2组)。将750μmol/LH2O2作用于加入VitC及不同浓度原花青素预培养24h的内皮细胞,继续培养18h,以细胞毒四唑盐(MTT)比色试验、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)作为检测指标。结果:原花青素呈剂量依赖性降低H2O2对内皮细胞的生长抑制率,降低MDA、LDH量,增加培养液中NO2-/NO3-含量,各指标比较差异有统计学意义(P0.01)。结论:原花青素可保护和修复过氧化氢诱导的血管内皮细胞的损伤,其作用可能与抗氧化、促进NO释放有关。     

VC、VE及其联合作用对体外缺氧损伤大脑神经细胞抗氧化能力的影响

目的 :观察维生素C(VC)、维生素E(VE)及其联合作用对体外培养缺氧损伤大脑神经细胞抗氧化能力的影响。方法 :采用鼠胚大脑神经细胞无血清体外细胞培养方法 ,分别将不同剂量的VC、VE加入到无血清培养液中 ,将神经细胞分为正常对照组 ,缺氧损伤对照组、缺氧损伤加入VC低、中、高浓度组 (VC -L、M、H组 ) ,缺氧损伤加入VE低、中、高浓度组 (VE -L、M、H组 ) ,缺氧损伤加入VC、VE联合作用组 (VC VE组 )。于缺氧损伤2天后收集细胞 ,测定各组细胞活力及抗氧化指标。结果 :与缺氧损伤对照组相比较 ,VC/VE各组、VC VE组均能显著增强其异常降低的MTT活力、SOD及GSH -PX活性 ,显著降低MDA含量 ,差异有显著性 (P<0.05)。与正常对照组相比较 ,VE与VC VE组MTT、及VE -M、H与VC VE组SOD及GSH -PX活性均显著升高 (P<0.05)。此外VC VE组细胞活力、SOD及GSH -PX活性均高于VC/VE -H组 ,与VC -H组有显著性差别(P<0.05)。结论 :VC、VE能够明显提高缺氧损伤神经细胞的抗氧化能力 ,对大脑神经细胞缺氧损伤恢复有促进作用。二者联合作用优于单独作用 ,其作用强度依次为 :VC VE>VE>VC。     

东北鹤虱提取物LEGPS-Ⅱ对小鼠巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究东北鹤虱提取物LEGPS-Ⅱ对小鼠巨噬细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用昆明种小鼠,培养腹腔巨噬细胞(MФ),实验分为5组:正常对照组;H2O2氧化损伤组;3个浓度的LEGPS-Ⅱ(30、60、120μmol/L)保护组。用MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养液中一氧化氮(NO)含量、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、丙二醛(MDA)含量。结果:与正常对照组相比,经H2O2处理过的氧化损伤组,细胞存活率明显降低(P<0.01),NO的含量、iNOS的活力明显升高(P<0.01),T-SOD活力明显下降(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01);与H2O2损伤组相比,给LEGPS-Ⅱ各组均显著提高细胞存活率(P<0.05,P<0.01);使细胞培养液中NO的含量、iNOS的活力显著降低(P<0.05,P<0.01),T-SOD活力显著提高(P<0.05,P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),且呈现剂量依赖性。结论:东北鹤虱提取物LEGPS-Ⅱ可通过其抗氧化作用而在不同阶段保护经H2O2损伤的巨噬细胞     

当归CO2超临界萃取物对氧化应激损伤血管内皮细胞的保护作用

目的 研究当归CO2超临界萃取物对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用.方法 采用过氧化氢(H2O2)建立体外培养的HUVEC细胞氧化应激损伤模型.将细胞分为正常对照组、损伤组、给药组,其中给药组给予当归CO2超临界萃取物预培养24 h后加入1.25mmol/L H2O2,继续培养2 h.MTT法检测细胞存活率;通过各种化学方法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的活性;用流式细胞仪检测细胞周期改变及凋亡.结果 当归CO2超临界萃取物能明显提高H2O2损伤的内皮细胞的存活率,提高细胞SOD和NO的活性,降低LDH和MDA水平,减少H2O2诱导的细胞凋亡率,恢复血管内皮细胞增殖.结论 当归CO2超临界萃取物具有较强的抗氧化能力及内皮细胞保护作用,可减轻血管内皮细胞的氧化损伤.     

哈巴苷及哈巴俄苷对过氧化氢损伤血管内皮细胞的保护作用

目的探讨哈巴苷及哈巴俄苷对过氧化氢（H2O2）损伤人血管内皮细胞的保护作用及其机制。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞（HUVECS）,将生长良好的3代～5代细胞用于实验。实验分四组：对照组、H2O2组、哈巴苷干预组及哈巴俄苷干预组,光镜观察细胞形态,用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）检测细胞活力;取细胞上清液,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶（LDH）和丙二醛（MDA）含量。结果哈巴苷及哈巴俄苷干预均使H2O2损伤的HUVECS形态趋于正常,活力增强,细胞膜损伤减轻,减少细胞LDH及MDA产生。结论哈巴苷及哈巴俄苷能对抗H2O2引起的损伤,保护血管内皮细胞。     

大豆异黄酮对体外血管内皮细胞氧化损伤保护作用的形态学观察

目的：从形态学角度观察大豆异黄酮（SI）对氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL)诱导的血管内皮细胞（ECV）损伤的保护作用。方法：体外培养人脐静脉血管内皮细胞（ECV），将细胞分为5组，即氧化损伤对照组（ox-LDL），氧化损伤加入维生素E对照组（VE＋ox-LDL），氧化损伤加入大豆异黄酮低，中，高浓度组（SL－L＋ox-LDL，SI－M＋ox-LDL，SI－H＋ox-LDL。用ox-LDL作用于加入VE及不同浓度SI孵育24h的内皮细胞，继续培养24h，测定各组细胞活力（MTT），观察各组细胞一般形态和超微结构的变化。结果：加入VE及SI各浓度组细胞MTT（OD值）明显高于ox-LDL组，差异有显著性（P＜0．01）；而VE ox-LDL组与（SL－L，M，H）＋ox-LDL组间，MTT（OD值）无显著性差异（P＞0．05）。光镜观察结果显示ox-LDL组细胞收缩，变圆，细胞间隙增宽，而加入VE及SI可使细胞形态有不同程度的恢复，细胞间隙减小。扫描电镜观察显示ox-LDL组细胞膜有破损，细胞表面绒毛减少甚至消失，加入VE及SI可使细胞恢复近似正常状态，铺片良好，胞膜完整，细胞间有突起互相连接。结论：SI对血管内皮细胞氧化损伤具有一定的保护作用，而且SI与VE之间无显著性差别。     

大豆异黄酮对氧化损伤血管内皮细胞抗氧化作用的研究

目的：探讨大豆异黄酮（SI）对氧化损伤血管内皮细胞的抗氧作用。方法：体外培养血管内皮细胞，将细胞分为5组，即空白对照组（control)，氧化损伤对照组（ox-LDL)，氧化损伤加入维生素E对照组(VC ox-LDL)，氧化损伤加入大豆异黄酮低，中，高浓度组（SI－L＋ox-LDL,SI-M ox-LDL,SI-H ox-LDL)。将氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）作用于预先加入VE及不同浓度SI孵育24h的内皮细胞，继续培养24h，测定细胞外及细胞内丙二醛（MDA）含量，超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX）活性，乳酸脱氢酶（LDH）释放情况及一氧化氮（NO)生成量。结果：ox-LDL组MDA含量，LDH释放百分比高于control组及VE＋ox-LDL组，（SI－L，M，H）＋ox-LDL组，差异有显著性（P＜0．01）；而ox-LDL组SOD，GSH－PX活性及NO浓度均低于control组和VE ox-LDL组，（SI－L，M，H）＋ox-LDL组，差异有显著性（P＜0．01）；另外，SI－M＋ox-LDL组与VE＋ox-LDL组比较，各指标均无显著性差异（P＞0．05）。结论：SI可减轻ox-LDL对血管内皮细胞的氧化损伤，起到一定的抗氧化保护作用。     

阿魏酸镧配合物对H2 O2氧化损伤的血管内皮细胞的影响

目的：探讨阿魏酸镧配合物（ Lanthanum Ferulate,LF）对氧化损伤的血管内皮细胞的影响。方法体外培养内皮细胞,将细胞分为7组,即空白对照组、溶剂对照组（ DMSO）、氧化损伤组（ H2 O2）、氧化损伤加阿魏酸对照组、氧化损伤加阿魏酸镧配合物低、中、高浓度组（ LF- L＋ H2 O2、LF- M ＋ H2 O2、LF- H ＋ H2 O2）。阿魏酸及不同浓度阿魏酸镧配合物预培养内皮细胞24 h后,加入200μmol /L H2 O2继续培养12 h,用MTT法观察阿魏酸镧配合物对H2 O2损伤的内皮细胞活性的影响,检测各组细胞培养液内乳酸脱氢酶（ LDH）、一氧化氮（ NO）、丙二醛（ MDA）含量。结果阿魏酸镧配合物呈剂量依赖性降低H2 O2对内皮细胞生长抑制率,降低MDA、LDH量,增加培养液中NO-2/NO-3含量,各指标差异有统计学意义（P〈0.05）。结论阿魏酸镧配合物可拮抗和修复过氧化氢诱导的血管内皮细胞的损伤,其作用可能与其抗氧化和促进NO释放有关。