小鼠骨髓中NK细胞及其前体细胞的特征

本文对小鼠骨髓中NK细胞及其前体细胞的特征作了进一步探讨。作者先用牛血清白蛋白(BSA)密度梯度离心对小鼠骨髓细胞作了分离,将其分出     

高压液相纯化小鼠单克隆抗体及其在免疫学中应用

本文采用Deschamps方法加以修改,40％饱和硫酸铵沉淀小鼠腹水中免疫球蛋白,然后用TSK-DEAE 5PW高压液相离子交换层析柱,应用线性梯度洗脱条件,纯化TLiSAl IgG1单克隆抗体,回收率为50～60％、纯度>90％。纯化后的单克隆抗体在荧光细胞激活分类仪分析、碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶染色、~(125)I标记单抗进行竞争结合试验、功能性实验以及制备Sephorose CL-4B亲和层析柱纯化相应抗原进行氨基酸列序分析中均显示良好的生物学活性。     

LAK细胞活性:血与脾脏中效应细胞及其前体细胞的特征

LAK细胞为IL-2激活的杀伤细胞,这些细胞不但能溶解NK敏感靶细胞,也能溶解NK抵抗靶细胞,对新分离的自体和同种肿瘤细胞亦有细胞毒作用。研究表明,NK细胞也可在IL-2的作用下,释放γ-干扰素。多数血或脾淋巴细胞介导的LAK活性,均系IL-2刺激NK细胞产生。靶细胞对NK细胞溶解敏感与否是相对的,有时,未经刺激的NK细胞,可溶解“NK抵抗”靶细胞。各种增强NK活性的因子(干扰素、IL-2),不仅能提高NK细胞对抗NK敏感靶细胞的反应性,也可诱     

B细胞超抗原及其免疫学特性

B细胞超抗原是一类主要由细菌和病毒产生的,能够非特异地刺激B细胞大量增殖,并促进其合成免疫球蛋白的抗原。其激活B细胞的机理与普通抗原和B细胞丝裂原显著不同,不同微生物超抗原的特征与这些微生物的致病机制有密切关系。本文就目前研究比较多的几种B细胞超抗原的基本特征、免疫学特性及其对B淋巴细胞的作用机制与分子基础进行了综述,讨论了B-sAg在免疫谱库选择中的作用及其与一些疾病的关系。     

永生化神经前体细胞及其应用

神经前体细胞是在一定环境下可向神经元或神经胶质细胞分化的多潜能细胞 ,永生化神经前体细胞 ( imm ortalizedneural progenitor cells)则具有无限增殖分裂能力。基因修饰的永生化神经前体细胞的回体移植 ( ex vivo)治疗中枢神经系统 ( CNS)疾病已成为近年来神经生物学的研究热点之一 [1 ] 。将这些神经前体细胞株移植到受损的脑或脊髓组织中之后不仅可存活 ,再增殖、整合 ,并分化为神经元和神经胶质细胞 ,而且能合成神经营养因子、相关的神经递质和代谢酶。因此 ,永生化神经前体细胞为神经再生和神经行为缺陷的逆转提供了新的潜在治疗途…     

hAR-N单克隆抗体免疫学特性的研究及其应用

前列腺癌组织中雄激素受体 (ＡＲ)含量与术后采用抗雄激素疗法的反应程度、术后复发、转移率的发生密切相关〔1〕。ＡＲ的检测方法多为免疫组化法〔2〕。其所需试剂———ＡＲＭｃＡｂ国内尚无 ,为此我们研制ＡＲＭｃＡｂ。以美国Ｚｙｍｅｄ公司ＡＲ多抗为标准对自制ＡＲＭｃＡｂ性能进行鉴定 ,以便为临床和科研工作提供性能稳定可靠、质优价廉的免疫试剂。材料与方法动物 :ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 ,雌性 ,6～ 8周龄 ,购自北京医科大学动物实验中心。抗原 :ｈＡＲ Ｎ段 2 0个氨基酸合成肽 (该区具有高亲水性 ,与其它类固醇激素具有很少同源性 )由北…     

615系小鼠脾LAK细胞系（LAK—88／DC）的建立及其生物学特性的研究

LAK—88/DC细胞系是将两只正常雄性615近交系小鼠的脾细胞混合,经ConA制激后,分离淋巴细胞。于含有3u/ml (?)—2的RPMI1640全培养基中培养并连续传代而建成。它是一株IL-2依赖、Thy—1.2~+的T淋巴细胞系,核型为40、xy。LAK—88/DC呈悬浮培养、生长迅速,迄今已传至160余代。支原体检测阴性,已用于IL-2制剂的活性检测。     

人脐带血中粘附前体细胞的研究

目的:验证脐带血中内皮细胞前体细胞的存在,并研究这一前体细胞的分化发育过程中的影响因素。方法:用淋巴细胞分离液分离出脐带血中的单个核细胞,在胶原包被的培养瓶中,用含20%小牛血清的MCDB131培养液培养,获得具有粘附性的细胞,并观察不同培养条件对这一细胞分化发育的影响。倒置相差显微镜下每日两次观察、记录。流式细胞分析所获细胞的CD34、CD14以及因子免疫组化检测Ⅶ因子表达。结果与结论:脐带血中存在可粘附CD34^-内皮细胞的前体细胞,小牛血清、小牛下丘脑提取物、胰岛素对这一细胞的生成及分化有促进作用,而地塞米松、次黄嘌呤则对这一细胞的生成及分化有抑制作用。免疫组化证实这一细胞Ⅶ因子表达阳性,培养两周的粘附梭形细胞可形成管状排列及血岛样结构。     

肿瘤碱性蛋白单克隆抗体免疫学特性的研究及其应用

应用淋巴细胞杂交瘤技术，建立了４株抗人血清肿瘤碱性蛋白（Ｔｕｍｏｕｒｂａｓｉｃｐｒｏ－ｔｅｉｎ，ＴＢＰ）杂交瘤细胞株（１Ｃ３、４Ｆ４、５Ｆ４、３Ｇ９），并以制备的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）对其抗原决定簇及免疫学特性进行了分析。Ｉｇ亚类测定：均为ＩｇＧ２ａ，腹水效价为１×１０－６～１×１０－８。特异性测定：ＴＢＰＭｃＡｂ与ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ和Ａｌｂ无交叉反应。单抗相加试验证实：５Ｆ４、４Ｆ４和１Ｃ３为识别ＴＢＰ上同一抗原决定簇，３Ｇ９则为识别ＴＢＰ上另一抗原决定簇。分别利用单株和混合株ＭｃＡｂ标酶建立了可应用于人血清ＴＢＰ含量测定的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，并用于人血清ＴＢＰ含量测定。     

人脐血细胞在C.B—17SCID小鼠体内HLA—DR抗原表达及移植物抗宿主反应

本文观察了人脐带血和骨髓单个核细胞在Ｃ．Ｂ－１７ＳＣＩＤ（Ｔ．Ｂ）细胞联合免疫缺陷）小鼠体内ＨＬＡ－ＤＲ抗原（人白细胞抗原）表达和移植物抗宿主反应（ＧＶＨＲ），结果发现，人脐带血细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原在小鼠体内表达随着时间的延长，有一定量的增加，但低于骨髓细胞；人脐细胞异种移植６０天内，仅表现轻度ＧＶＨＲ，比骨髓细胞所致者弱，这为脐血造血细胞临床应用提供了实验根据。     

皮肤源性前体细胞的生物学特性与临床应用

背景:皮肤源性前体细胞是一种神经嵴来源的前体细胞,具有多向分化潜能.目的:对皮肤源性前体细胞的培养分离、生物学特性以及临床应用前景作一综述.方法:应用计算机检索PubMed数据库2001-01/2011-01相关文献,以skin-derived precursor cells,skin-derived precurs...     

肽文库及其在免疫学研究中的应用

<正>肽文库是一定长度肽段的混合物,里面包含所有可能的氨基酸排列信息。肽文库可被分为两种,一种是合成肽文库（synthetic peptide library）,另一种是噬菌体肽文库（Phage peptide library）。关于这两种肽文库及其在免疫学的研究中的应用,在1997年国外医学免疫学分册上已有较好的综述。在此文中,仅对合成肽文库及其在免疫学研究中的应用谈一点我的理解,并介绍一下我采用合成肽文库做的一点工作。     

转基因鼠及其在免疫学研究中的应用

将外源基因导入哺乳动物胚系(germ line)及其所产生的转基因鼠(transgenic mice)是近年来人们开辟的新的研究领域。转基因鼠的问世,为不通过有性杂交的方式使动物获得新基因打开了通路,并能使动物生产基因工程产品成为可能,同时它为追踪个体发育过程中复杂的基因调     

裸鼠概况及其在免疫学研究中的应用

一、裸鼠的发现 裸鼠是通常小鼠中的一种突变基因品种,顾名思义,是没有被毛的小鼠。由Grist首先发现,1962年Issacson作了正式报道。1966年Flanagan证实该鼠是由常染色体隐性遗传所致,并命名为裸鼠(Nude mice)。1968年Paulelouris和1969年De Souisa相继报告裸鼠无胸腺,其淋巴结中缺少胸腺依赖性T淋巴细胞,从而引起免疫学工作者的重视。值得注意的是实验小鼠中若干不同突变基因,都可以在不同部位产生不同程度的无毛表现型。如无胸腺鼠、裸鼠、无毛鼠、以及无鼻毛鼠等,其突变基因各有不同,不应相互混淆,因为它们是由不同位点上     

脐带血造血前体细胞在间质干细胞微环境中的增殖和分化特性研究

目的： 用间质干细胞（MSC）体外模拟造血微环境，探讨脐带血造血前体细胞在MSC微环境中的增殖和分化特性。方法： 实验组（CK+MSC组）以MSC为基质层细胞，建立基于MSC的体外造血细胞扩增体系，接种脐带血单个核细胞，培养体系中加入外源性造血生长因子SCF、Flt3L、TPO和IL-6，培养第1、2、3、4周对扩增的细胞进行细胞计数、集落培养，对照组为单纯细胞因子组（CK组，无MSC基质层细胞）和单纯MSC组（无脐带血单个核细胞）。结果： (1)第4周时CK+MSC组的细胞数扩增108倍，而CK组只有7.8倍。(2)CK+MSC组和CK组扩增的集落形成细胞（CFC）数量在第3周时达高峰，第4周时CFC数量已迅速下降。(3)红系CFC和高增殖潜能集落形成细胞（HPP-CFC）均于扩增1周后到达高峰，CK+MSC组的扩增效率要优于CK组，到第3周时两组均降为零。(4)粒单系CFC则在扩增第3周时到达高峰，CK+MSC组扩增效率优于CK组，从第4周开始出现回落。(5)扩增1周后，单位细胞（10⁴个MNC）中的CFC数到达高峰，CK+MSC组优于CK组，从第2周开始每104个MNC中的CFC数迅速呈下降趋势，到第4周时已降至低于扩增前水平。(6)单纯MSC组无造血细胞生长。结论： (1)体外扩增脐带血造血前体细胞时，基于MSC的扩增体系要优于单纯细胞因子体系。(2)MSC在体外有利于脐带血造血前体细胞扩增的同时，并不能阻止其分化。(3)红系扩增出现在体外扩增的早期，粒单系扩增持续的时间比红系长，扩增的CFC数量更多。     

大鼠松果体细胞体外培养及其生物学特性研究

目的 :了解体外培养条件下松果体细胞的形态、生长、增殖及其生物学特性。方法 :无菌技术手术显微镜下剥离、收集乳鼠松果体 ,胰酶消化分离细胞 ,用含 1 0 %小牛血清的DMEM培养液体外培养 ,倒置显微镜观察 ,四唑盐比色测定细胞活性和增殖 ,Hortega染色及 5 -HT免疫细胞化学法鉴定松果体细胞及其功能状态。结果 :体外培养可获得生长旺盛的松果体细胞 ,细胞的生长倍增时间为第 9d ,第 1 0d达高峰。Hortega染色后松果体细胞呈黑色 ,5 -HT免疫阳性细胞占培养细胞的决大部分。在生存期内 ,阳性细胞数量恒定 ,不因培养时间的延长而改变。结论 :体外培养可获得有增殖潜力的松果体细胞 ,细胞在体外功能活跃 ,其活性不因培养时间的延长而降低     

人脐带血中内皮样前体细胞的初步研究

目的 观察脐带血中内皮细胞的前体细胞，并研究该前体细胞分化成熟所需条件。方法 采用常规分离方法，分离脐带血中的单个核细胞，培养于含小牛下丘脑提取液和地塞米松的MCDB131培养液中，以获得具有粘附性的细胞，于倒置相差显微镜下每日观察两次一并记录。结果 初步的实验结果表明脐带血中存在内皮细胞的前体细胞，小牛下丘脑提取物对该细胞的生成有促进作用，而地塞米松对其生成有抑制作用。结论 初步证实脐带血中有内皮细胞的前体细胞存在，并对其分化发育条件有了初步认识，为对其进一步的研究及应用打下了基础。     

汉滩病毒核蛋白纯化及其免疫学特性的研究

目的　研究汉滩病毒核蛋白及其免疫学特性,研制新一代的肾综合征出血热(HFRS)亚单位疫苗。方法　用亲和层析法纯化重组杆状病毒表达的汉滩病毒核蛋白及野生汉滩病毒76-118的核蛋白,以聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹实验(Westernblot)鉴定纯化蛋白。用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,分别以福氏佐剂(FCA)和氢氧化铝［Al(OH)     

应用LAK细胞净化骨髓中肿瘤细胞的研究

<正> 近年来,应用自体骨髓移植治疗恶性肿瘤越来越受到人们重视,但治疗白血病时,因回输含有残留肿瘤细胞的自体骨髓而复发率较高,严重影响自体骨髓移植的疗效,因此极需采用各种方法清除移植物中残留的肿瘤细胞。