涎腺肿瘤中细胞凋亡及其调控基因的表达

目的：探讨涎腺肿瘤中细胞财亡及调控基因p53、bcl-2、c-myc间的关系。方法：采用脱氧核糖核酸末断转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术，免疫组织化学染色和HE染色对18例多形性腺瘤和52例恶性涎腺肿瘤中细胞凋亡和bcl-2、p-53、c-myc蛋白表达进行观察和比较。结果：恶性涎腺肿瘤的凋亡细胞指数明显高于多形性腺瘤（P＜0．05），恶性涎腺肿瘤中bcl-2、p53和c-myc蛋白表达率及表达强度明显高于多形性腺瘤（P＜0．05）。结论：细胞凋亡的调控基因异常在涎腺肿瘤中可能起重要作用，bcl-2和c-myc蛋白的共同作用可抑制细胞凋亡。     

胰腺癌组织中细胞凋亡与bcl-2 蛋白表达关系的研究

目的：探讨胰腺癌组织中细胞凋亡与bcl-2基因表达的关系。方法：采用原位末端标记法（ISEL）和免疫组织化学技术检测40例胰腺癌组织及14例慢性胰腺炎组织细胞凋亡指数（AI），凋亡相关基因bcl-2蛋白的表达情况。结果：胰腺癌组织中的AI均值明显高于慢性胰腺炎组织（P＜0．01），随肿瘤进展，AI逐渐降低，在胰腺癌组织中bcl-2蛋白阳性表达率为30．0％（12／40），bcl-2蛋白高表达组与低表达组的AI均值相比较无显著性差异（P＞0．05），结论：细胞凋亡相对减少在胰腺 癌发生发展中起重要作用。bcl-2蛋白参与胰腺癌组织中细胞凋亡的调节。     

脑膜瘤细胞凋亡与增殖活性的研究

 目的　通过对良性脑膜瘤组织细胞凋亡的原位观察和增殖性抗原 Ki- 67表达状态的研究 ,探讨不同级别脑膜瘤组织中细胞增殖和凋亡情况。方法　对 40例术前未经任何治疗的脑膜瘤手术标本 ,分别进行凋亡细胞的 DNA缺口原位末端标记 ( TUNEL)法和 Ki- 67抗原的免疫组化染色。结果　恶性及非典型脑膜瘤中 Ki- 67标记指数明显高于良性脑膜瘤 ( P<0 .0 1 ) ,恶性和非典型脑膜瘤之间也有显著性差异 ( P<0 .0 1 )。在恶性及非典型脑膜瘤中凋亡指数显著性高于良性脑膜瘤 ( P<0 .0 1 )。结论　恶性及非典型脑膜瘤中自发性细胞凋亡增多。 Ki- 67指数和病理分级有很好的一致性 ,能较好的反映脑膜瘤的增殖特性.     

bcl-2、p53蛋白表达在卵巢子宫内膜异位症癌变过程中的作用

目的 探讨p53、bcl-2蛋白表达在卵巢子宫内膜异位症（内异症）癌变过程中的作用。方法 采用免疫组化法检测卵巢子宫内膜异位症组（内异症组,22例）、卵巢异位子宫内膜腺上皮不典型增生组（不典型增生组,14例）、卵巢子宫内膜异位症癌变组（癌变组,22例）的p53、bcl-2蛋白表达。结果 癌变组bcl-2蛋白表达阳性率显著高于内异组（P＜0．05）,不典型增生组bcl-2 蛋白表达阳性率显著高于内异组（P＜0．01）;癌变组p53蛋白表达阳性率显著高于不典型增生组（P＜0．01）及内异组（P＜0．01）,癌变组癌变区p53蛋白表达阳性率显著高于内异区（P＜0．05）;癌变组内异区bcl-2蛋白表达阳性率显著高于内异组（P＜0．05）,不典型增生组内异区bcl-2蛋白表达阳性率显著高于内异组（P＜0．01）。bcl-2、p53蛋白表达与绝经与否、肿瘤期别、生存期无明显相关性（P＞0．05）;癌变组癌变区p53、bcl-2蛋白表达无明显相关性（P＞0．05）。结论 p53、bcl-2的过度表达可能参与了内异症癌变的过程,p53蛋白阳性或bcl-2蛋白阳性的内异症可能是癌前病变。     

胃癌p53基因与细胞凋亡的检测及其关系的研究

目的：研究p53基因与细胞凋亡在胃癌中的检测及其之间的关系。方法：采用p53原因杂交、原位脱氧核糖核酸末端转移酶标记法（TUNEL）和免疫组织化学技术对56例胃癌进行检测。结果：56例胃癌p53蛋白表达48．2％,p53原位杂交567．9％,二者的检测结果不完全一致,但均与胃癌的分期有关。晚期胃癌高于早期胃癌,差异有显著性（P＜0．01）。56例胃癌抗凋亡基因bcl－2阳性率为58．9％。TUNEL标记细胞凋亡指数平均为4．78,均与组织学分型和胃癌的分期有关,但又有相反的表达。未发化型腺癌和早期胃癌抗凋亡基因bcl－2高表达,而分化型腺癌和晚期胃癌低表达;TUNEL显示未分化型腺癌和早期胃癌凋亡细胞指数明显高地分化型腺癌和晚期胃癌,差异有显著性（P＜0．01）。p53基因与抗凋亡基因bcl－2呈负相关,与细胞凋亡指数呈正相关。结论：胃癌p53基因和细胞凋亡共同参与调节细胞的生存与死亡;二者均与胃癌的分期有关。     

34例胰头胆管癌梗阻性黄疸胆道引流后肝细胞凋亡分析

[目的]探讨胆道引流对恶性肿瘤梗阻性黄疸病人肝细胞凋亡的影响。[方法]用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记（TUNEL）技术和免疫组织化学方法检测34例胰头癌、胆管癌恶性阻塞性黄疸病人胆道引流后肝细胞增殖、凋亡状态及凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白的表达。[结果]胆道引流后，bax蛋白表达减弱（27．34％±8．26％vs．7．24％±2．45％），差异有显著性（P＜0．01）；bcl-2蛋白表达增强（9．25％±3．23％vs．24．53％＋7.64％），差异有显著性（P＜0．01）；凋亡指数（AI）迅速下降（53．67％±15．26％vs．7．57％±3．26％），差异有显著性（P＜0．01）。[结论]早期引流有利于改善肝功能、降低肝细胞凋亡率，bcl-2和bax蛋白均参与了阻塞性黄疸肝细胞凋亡的调节。     

膀胱移行细胞癌P—gp表达与凋亡相关蛋白p53、bcl—2的关系

目的探讨膀胱移行细胞癌组织中MDR1基因产物P-gp表达与凋亡相关蛋白p53、bcl-2的相互关系及其临床意义.方法采用免疫组化S-P法检测107例原发性膀胱移行细胞癌组织中P-gp、p53、bcl-2蛋白的表达情况.结果P-gp、p53、bcl-2蛋白的阳性表达率分别为63.6%、72.9%、54.2%,三者的过度表达均与膀胱癌的病理分级、临床分期和术后腔内化疗后复发有关;P-gp表达与p53、bcl-2蛋白的表达密切相关(P＜0.01或P＜0.05).结论P-gp、p53、bcl-2蛋白的过度表达不仅是判定原发性膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的重要指标,而且凋亡相关蛋白p53、bcl-2可能参与膀胱移行细胞癌多药耐药的形成.     

细胞凋亡调节与宫颈癌发生

目的：探讨子宫颈癌发生中的影响细胞凋亡的调节因素。方法：检测对象为194例经福尔马林固定石蜡包埋的手术切除标本，包括上皮内瘤样病变（CIN）78例[其中重度非典型增生（SD）41例；原位癌（CIS）37例]早期浸润癌（MIC）35例；大细胞非角化型浸润癌（IC）40例及正常宫颈鳞状上皮（NE）41例。凋亡细胞的检出使用TDT－mediated dUTP-biotin nick end labeling(TUNEL)方法；细胞凋亡相关基因蛋白p53、bcl-2、bax的表达采用单克隆抗体免疫组化ABC染色方法；HPV16、18型E6 DNA感染使用PCR方法进行检测。结果：1）凋亡细胞标记率仅在CIN呈现有意义地进行性减少（P＜0．01），癌变以后不再继续下降；2）在SD、CIS组，p53、bcl-2及bax基因蛋白的表达与TUNEL标记率呈现有意义地相关性变化（P＜0．05）；3）HPV16、18型E6 DNA感染与凋亡细胞及相关基因蛋白表达未呈现相关性改变。结论：以上结果提示细胞凋亡的改变与宫颈癌发生的早期过程有关，p53、bcl-2、bax基因蛋白参与其调节，而HPV16、18型E6 DNA感染与其未呈现直接的相关性。     

凋亡抑制蛋白Survivin在胃癌中的表达及其与bcl-2、p53蛋白相关性研究

目的：研究凋亡抑制蛋白Survivin、bcl-2、p53在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系，并探讨Survivin与bcl-2、p53蛋白表达的相关性。方法：采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接（S-P）免疫组化方法，检测Survivin、bcl-2、p53蛋白在正常胃粘膜组织及胃癌组织中的表达。结果：Survivin蛋白在正常胃粘膜组织中无表达，而在58例胃癌中41例（70．7％）表达阳性，差异有统计学意义（P〈0．01）；Survivin蛋白表达与胃癌组织病理分化程度、淋巴结转移、TNM分期相关，而与浸润程度不相关；胃癌bcl-2蛋白表达的阳性与阴性中，Survivin蛋白表达阳性率分别为81．0％（34／42）和43．8％（7／16），两者比较差异显著（P〈0．01）；p53蛋白表达的阳性和阴性中，Survivin蛋白表达阳性率分别为58．1％（18／31）和22．2％（6／27），两者比较亦有显著性差异（P〈0．05），Survivin蛋白的表达与胃癌组织中的bcl-2蛋白及p53蛋白表达密切相关。结论：Survivin蛋白异常表达可引起细胞凋亡抑制，在胃癌的发生中起一定作用，其过度表达提示胃粘膜细胞增生极度活跃；Sur-vivin蛋白表达与胃癌中bcl-2蛋白及p53蛋白的异常表达密切相关。     

Hp感染与胃癌及癌前病变中p53、bcl-2、c-myc基因表达关系的研究

目的：研究幽门螺杆菌（Hp)感染的胃癌及癌前病变患者胃粘膜p53,bcl-2,c-myc基因的表达，以探讨Hp在胃癌发生，发展过程中的作用机制，方法：应用免疫组化方法测定60例胃癌组织，18例异型增生，29例肠上皮化生，35例萎缩性胃炎，29例浅表性胃炎组织中Bcl-2,c-myc基因蛋白表达情况，PCR／SSCP测定p53基因第5－8外显子突变，Hp阳性由快速尿素酶法和HE染色确定，结果：胃癌组Hp阳性41例，阴性19例，在胃癌组织中p53,bcl-2,c-myc基因阳性表达分别为38例（63．3％），38例（63．3％），18例（30．0％），p53,c-myc基因在胃癌中阳性表达率显著高于异型增生（P＜0．05）,bcl-2在异型增生组织中的阳性表达率与胃癌，肠上皮化生相比无显著性差异（P＞05），p53,bcl-2,c-myc基因表达与胃癌分期，淋巴结转移均无显著性关系（P＞0．05），但bcl-2与胃癌类型，分化程度显著相关（P＜0．05），每一种病变类型Hp阳性组p53,bcl-2,c-myc基因蛋白的阳性表达率均高于Hp阴性组，两者之间有显著性差异（P＜0．05），结论：Hp感染者具有更多肿瘤生物学行为，可以引起抑癌基因p53第5－8外显子突变，癌基因c-myc，凋亡调节基因bcl-2表达增加,Hp可能为促癌剂，在胃癌的发生发展中起一定作用。     

骨肉瘤细胞凋亡与p53和bcl-2表达的关系

目的：探讨骨肉瘤细胞凋亡的和５３、ｂｃｌ－２表达及细胞增殖的相关性,及其对患者预后的影响。方法：在８０例骨肉瘤标本中,用ＤＮＡ末端标记方法检测细胞凋亡,免疫组化检测Ｐ５３、ｂｃｌ－２和增殖细胞核怕的表达。结果：８０例骨肉瘤中凋亡指数范围为０．６３￣１８．８％,Ｐ５３和ｂｃｌ－２蛋白检出率分别为３７．５％和６０％,ＰＣＮＡ指数范围为１２￣９６％。统计学分析表明,细胞凋亡与Ｐ５３、ＰＣＮＡ表达呈正相关     

survivin、p53和bcl-2蛋白在非霍奇金淋巴瘤的表达及其意义

 目的 探讨survivin、p53和bcl-2蛋白在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的表达与肿瘤细胞凋亡和预后的关系。方法 应用TdT介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术和免疫组织化学SP法,检测82例NHL和17例良性淋巴结病变中细胞凋亡和survivin、p53和bcl-2蛋白的表达水平。结果 40.2 %（33／82）NHL表达 survivin,在BCL、TCL的表达阳性率分别为46.5 %、33.3 %,而仅在11.8 %（2／17）良性淋巴结病变中弱阳性表达,二者差异有统计学意义（P＜0.05）,但与NHL的免疫表型无关（P＞0.1）。NHL中survivin的表达与突变型p53蛋白积聚（P＜0.05）和肿瘤细胞凋亡的下降相关（P＜0.001）,但与bcl-2蛋白表达无关（P＞0.1）,且阳性表达患者的平均生存时间明显短于无表达患者（P＜0.05）。结论 survivin基因可能通过其凋亡抑制功能在NHL的发生、发展中有一定作用,且其与突变型p53蛋白的积聚显著相关,但与bcl-2蛋白表达无关;并可能是NHL的一个新的预后不良因子。     

bcl-2、bax、p53蛋白表达与外阴鳞癌细胞凋亡的相关性研究

目的　探讨bcl 2、bax、p5 3基因与外阴鳞癌细胞凋亡的关系。方法　应用原位末端标记及免疫组化S P法检测 30份外阴鳞癌石蜡包埋组织中的细胞凋亡API和bcl 2、bax、p5 3的表达情况。 结果　外阴鳞癌组织和正常外阴皮肤中均有细胞凋亡和bcl 2、bax、p5 3的表达。随着外阴鳞癌恶性程度的增高 ,API、bcl 2、bax表达降低 ;p5 3表达增高。在外阴鳞癌的部位凋亡细胞的分布与突变型 p5 3蛋白表达呈负相关 ,p5 3分别与bcl 2及bax的表达呈负相关 (P <0 .0 5 )。在正常外阴皮肤组织中 ,凋亡细胞的分布区域与表达bcl 2及bax蛋白的细胞分布区域一致 ,bcl 2与bax的表达呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论　外阴鳞癌的发生、发展与细胞凋亡被抑制有关 ,这一过程可能主要由 p5 3基因调控 ,bcl 2可能仅在早期起作用。     

NSCLC中DNA-PKcs的表达及其与凋亡相关蛋白关系的研究

目的　检测非小细胞肺癌 (NSCLC)中DNA依赖蛋白激酶催化亚基 (DNA PKcs)的表达 ,探讨其与凋亡相关蛋白表达之间的关系。方法　采用免疫组化SP法检测 113例NSCLC患者肿瘤组织中DNA PKcs、p5 3和bcl 2的表达。 结果　NSCLC中DNA PKcs、p5 3和bcl 2的检出率分别为 89.3 8%、61.95 %及5 9.2 9% ;DNA PKcs的表达顺序依次为细支气管肺泡癌 >腺癌 >腺鳞癌 >鳞癌 ,而且DNA PKcs表达水平随肿瘤分化程度的增高亦逐渐增高 ,差异均具有高度显著性 (P <0 .0 5 ) ,但其表达与淋巴结转移无明显关系 ;p5 3在不同临床病理类型NSCLC中的表达无明显差别 ;bcl 2在不同组织学类型NSCLC中的表达顺序依次为鳞癌 >腺鳞癌 >腺癌 >细支气管肺泡癌 ,差异具有高度显著性 (P <0 .0 1) ,但其表达与肿瘤分化程度及淋巴结转移无关 ;DNA PKcs与 p5 3 (P <0 .0 1)、p5 3和bcl 2 (P <0 .0 5 )的表达之间有显著相关性。 结论　DNA PKcs高表达导致的DNA损伤修复系统活性增高以及突变型p5 3和bcl 2过表达导致的凋亡抑制相互影响、共同作用 ,可能是形成NSCLC放疗抗拒性的重要因素     

Meningiomas in Singapore: Demographic and Biological Characteristics

We sought to determine the relative incidence of meningiomas compared to other central nervous system tumours in an Asian surgical series, as well as the demographic and biological characteristics of these meningiomas. A review of 655 consecutive cases of central nervous system tumours from 583 patients representing the last five years admissions to one hospital in Singapore was undertaken. A total of 33 malignant/atypical tumours from 19 patients and 196 benign meningiomas from 187 patients were identified. Twenty malignant/atypical and 20 benign tumours were selected at random and subjected to histochemical and immunohistochemical analysis using antibodies directed against p53, bax and 3-DNA hydroxy groups (TUNEL). Meningiomas comprised some 35.2% of all central nervous system tumours with malignant/atypical meningiomas representing 9.2% of meningiomas. Histochemically, necrosis was the predominant finding. However, peri-necrotic areas displayed p53 positivity in 10% of cases and bax positivity in 25% of cases. Apoptotic cells were detected in the peri-necrotic areas in 90% of benign and 75% of malignant/atypical meningiomas. Meningiomas represent the predominant form of central nervous system tumour in the Singaporean population, and aberration of p53 expression is not associated with tumour formation or progression. There was a slight but non-significant reduction in apoptosis in the progression from benign to malignant meningioma, suggesting that in contrast to many other tumour types disruption of cellular apoptosis is not a predominant driving force in Asian meningioma tumourigenesis.     

Extent, relationship and prognostic significance of apoptosis and cell proliferation in synovial sarcoma.

AIMS: To analyse the extent, relationship and clinical significance of apoptosis and cell proliferation in synovial sarcoma. METHODS: Apoptosis was detected by TUNEL, and expression of Ki-67, Bcl-2, Bax and p53 was examined immunohistochemically in 72 synovial sarcomas. Their relation and correlation with clinicopathological parameters and survival rate were analysed. RESULTS: The average values of apoptosis index (AI) and Ki-67 labelling index (LI) were 0.76% and 28.30%, respectively. Both AI and Ki-67 LI in large-volume, high-grade and advanced-stage synovial sarcomas were significantly higher than those in small-volume, low-grade and early-stage ones (P<0.05 for all). And there was a linear relationship between AI and Ki-67 LI (r=0.751, P<0.001). All examined synovial sarcomas were positive for Bcl-2 and Bax, and only 20.8% cases showed expression of p53 protein. The expressions of Bcl-2, Bax and p53 were also significantly correlated with AI (P=0.005, P=0.002, P=0.037, respectively). In addition, patients with high AI (>0.76%) had poor prognosis (log-rank test; P=0.007). CONCLUSIONS: Alterations in apoptosis and cell proliferation activity might be responsible for the pathogenesis and behaviour of synovial sarcoma. Increased rate of apoptosis in synovial sarcoma was considered to be an indicator of poor prognosis. In addition, apoptosis in synovial sarcoma may be controlled by multiple apoptosis-regulating mechanisms, including the Bcl-2 family and p53 protein.     

bcl－2、p53蛋白在甲状腺肿瘤中的表达研究

研究癌基因蛋白ｂｃｌ－２和Ｐ５３与甲状腺肿瘤生物学行为的关系,探讨其在预后评估中的意义。方法：采用免疫组织ＳＡＢＣ法检测５０例甲状腺肿瘤中ｂｃｌ－２和ｐ５３蛋白的表达。结论：ｂｃｌ－２和Ｐ５３蛋白表 甲六腺肿瘤的发生与分化,且其表达水平的不同有助于预后评估。     

bcl-2、p53、c-myc 蛋白在胃癌中表达的研究

 目的　研究胃癌组织中 bcl- 2、p5 3、c- myc表达与其临床病理的相关性。方法　对有随访的不同分化的胃癌 5 0例、癌旁不典型增生粘膜病变 47例 ,及 2 0例正常胃粘膜进行免疫组化ABC法标记。结果　 bcl- 2蛋白在癌旁轻、中、重度不典型增生的阳性率分别为 5 %、1 7.6 %、2 0 .0 % ,它们间无显著差异 P>0 .0 5 % ) ,在高分化胃癌中阳性率为 80 .0 %。与低分化的 5 0 .0 %相比 ,有显著差异 (P<0 .0 5 )。p5 3在高分化胃癌中阳性率为 5 0 .0 %。明显低于低分化的 84.6 % (P<0 .0 5 )。结论　bcl- 2和 p5 3可作为肿瘤分化和估计预后的主要参考指标之一。     

Spontaneous apoptosis in ovarian carcinomas: a positive association with p53 gene mutation is dependent on growth fraction

Changes in cell survival contribute to tumour development, influence tumour biology and its response to chemotherapy. p53 gene alterations should negatively affect apoptosis by impaired p53-dependent apoptotic response. We looked for associations between spontaneous apoptosis, p53 gene mutation, p53 protein accumulation, growth fraction, bcl-2 expression and histological parameters in 64 ovarian, four tubal and three peritoneal carcinomas. Apoptotic cells were detected with the TUNEL method. p53 gene variants were detected by the single-strand conformation polymorphism and were sequenced directly. P53, Ki-67 and bcl-2 protein expressions were detected immunohistochemically. A weighed multiple logistic regression model was applied. Apoptotic index (AI) ranged 0.02-0.18 (mean 0.11); proliferation index (PI) ranged 3-90% (mean 54%). p53 gene mutations were present in 51, p53 protein accumulation in 46, and diffuse bcl-2 expression in 29 of 71 tumours. The AI was positively associated with the presence of p53 gene mutation (P = 0.011). However, the PI included into the analysis did positively influence the AI (P = 0.02) and diminished the association with p53 gene mutation (P = 0.082). The AI was negatively associated with good histological differentiation (P = 0.0006), the serous tumour type (P = 0.002), and diffuse bcl-2 expression (P = 0.025). Strong bcl-2 expression was associated with endometrioid tumour type (P = 0.002). FIGO stage and p53 protein accumulation were the only parameters that influenced overall survival time. Thus, our results suggest that histological tumour type and grade are major determinants of spontaneous apoptosis in ovarian carcinomas; p53 alterations do not adversely but rather positively affect spontaneous apoptosis by increasing growth fraction. This, in turn, suggests p53-independency of spontaneous apoptosis in ovarian carcinomas.