尿透明质酸酶、透明质酸及其联合检测对膀胱癌诊断和治疗的意义

目的：探讨尿透明质酸酶（HAase）和透明质酸（HA）联合检测对膀胱癌诊断和治疗的意义。方法：取自40位膀胱癌患者术前（40份）及术后（40份）尿液标本80份，另20份尿液取自对照组（包括正常人、泌尿生殖系其他疾病患者）。采用酶联免疫标记技术检测尿液HAase和HA水平。并对其结果进行讨论分析。结果：患者术前组中HAase水平是术后组的1．5倍（P〈0．05），是对照组的2～4倍（P〈0．05）；而术前组中HA水平是术后组的1．5倍（P〈0．05），是对照组的1．5～3倍（尸〈0．05），HAase、HA联合检测在膀胱癌诊断中具有较高的灵敏度（91％）、特异度（82％）和精确度（89％）。结论：HAase和HA联合检测是诊断膀胱癌和手术评估的一种非侵入性、高灵敏度、高特异度的检测方法。     

尿液内毒素定量检测对泌尿系统革兰阴性菌感染的诊断价值研究

目的：评估尿液内毒素定量检测对泌尿系统革兰阴性菌感染的诊断意义。方法采用鲎试剂动态浊度法对100份来自不同病区的尿液标本进行内毒素浓度检测,并同时进行尿液细菌培养检测。分析内毒素水平与泌尿系统革兰阴性菌感染的关系。结果尿液细菌培养检出革兰阴性菌阳性标本18份,其内毒素水平显著高于检出革兰阳性菌、真菌及培养阴性的尿液标本（P＜0．05）。统计学分析显示,尿液内毒素检测结果与尿液细菌培养检测结果的一致性较好,前者对革兰阴性菌感染的诊断灵敏度为88．9％、特异度为85．4％。随着泌尿系统革兰阴性菌感染患者经治疗后症状好转,尿液内毒素水平亦显著降低（P＜0．05）。结论尿液内毒素定量检测对泌尿系统革兰阴性菌感染的诊断及患者疗效评价方面有重要意义。     

尿分析仪测女性患者尿隐血及白细胞结果分析

目的：了解clinick-500尿分析仪测女性患者尿隐血及白细胞结果是否可靠。方法：500份女性患者的新鲜尿液标本分别用clinick-500尿分析仪和显微镜进行检查，比较分析两种方法检测隐血及白细胞的结果。结果：尿液分析仪测隐血结果与镜检法比较，阴性符合率为97．9％（142／145），阳性符合率为65．9％（234／355），其结果偏高占47．4％（237／500），结果偏低占3．4％（17／500）；检测白细胞结果与镜检法比较，阴性符合率为89．4％（143／160），阳性符合率为93．2％（317／340），其结果偏高占15．8％（79／500），结果偏低占8．4％（42／500）。结论：在尿分析仪检测女性尿液中红、白细胞时，检验医师要留意标本是否被白带污染，同时报告镜检尿标本中的上皮细胞数及镜检情况，这对提高尿检结果的临床应用价值是非常必要的。     

血液和尿液中巨细胞病毒DNA的检测研究

目的探讨血液和尿液不同类型标本中巨细胞病毒(CMV)-DNA的检测研究。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对52例患者4种不同类型的血液标本和85例患者3种不同类型的尿液标本的CMV-DNA载量进行检测,比较血液和尿液不同类型标本的CMV-DNA检出率和病毒载量的差异。结果 52例患者血清、全血、血浆和外周血单个核细胞(PBMC)的CMV-DNA检出率分别为48.08%、71.15%、57.69%和69.23%;全血和PBMC的CMV-DNA检出率较高,差异有统计学意义(P0.05)。PBMC的定量结果较高。85例患者混合尿、尿上清和尿沉渣的CMV-DNA检出率分别为72.94%、62.35%和84.71%,尿沉渣的CMV-DNA检出率较高,混合尿的定量结果较高。结论血液和尿液标本CMV-DNA的检测结果差异较大,在CMV感染的临床诊疗和监测中使用同一标本类型检测具有重要的临床意义。     

尿Survivin mRNA检查对膀胱移行细胞癌的诊断价值

目的探讨检测尿Survivin mRNA诊断膀胱移行细胞癌（TCC）的临床价值。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应法（PT-PCR）对30例TCC患者、30例对照组（泌尿系统非肿瘤患者）尿脱落细胞Survivin mRNA进行检测。结果30例TCC患者尿脱落细胞中均检测出Survivin mRNA表达,而对照组中仅1例尿脱落细胞中检测出Survivin mRNA表达。病例组与对照组Survivin mRNA表达阳性率差异有统计学意义（P〈0．01）。以RT-PCR检测TCC患者尿脱落细胞中Survivin mRNA的方法敏感性为100％,特异性为96．7％。结论检测尿脱落细胞中Survivin mRNA的表达可作为早期诊断TCC的敏感性指标。     

IQ-200全自动尿沉渣分析仪检测尿液有形成分的评价

目的评价IQ-200全自动尿沉渣分析仪检测尿液有形成分的方法。方法对1295份尿标本分别做干化学分析，尿沉渣显微镜检测及IQ-200全自动尿沉渣分析仪检测，并比较结果。结果白细胞检测方面，IQ-200与显微镜法基本上一致，阳性符合率为99．65％，干化学法与显微铣法阳性符合率为82．2％，两者有显著性差异（P〈0．05）。红细胞检测方面，IQ-200与显微镜法基本上一致，阳性符合率为92．1％；干化学法与显微镜法阳性符合率为62．7％，两者有显著性差异（P〈0．01）。结论IQ-200全自动尿沉渣分析仪检测尿液有形成分方法简便、快速，无主观因素干扰，结果敏感准确、客观可靠，并能在一定范围内对尿液有形成分进行准确计数，作出定量报告，进行动态监测。     

电化学发光免疫分析法检测尿细胞角蛋白19及其在膀胱癌诊断中的应用

目的探讨电化学发光免疫分析法（ECLIA）检测尿细胞角蛋白19（CK19）对膀胱癌诊断的意义。方法应用Roche Elecsys 2010电化学发光仪检测尿CK19并评价其在膀胱癌诊断中的价值。结果该方法平均回收率为98．47％;ECLIA检测尿CK19变异系数（CV）明显〈放射免疫法（RIA）;尿液标本于-30、0和4℃保存1个月后,测定值分别下降4．29％、10．33％和15．03％,室温保存24h下降26．67％;99％可信区间界定厦门地区尿CK19参考值为≤3．8ng／ml;尿CK19值3．9ng／ml为诊断膀胱癌的最佳阀值,该阈值的诊断敏感度为92．8％,特异度为78．6％。结论ECLIA检测尿CK19重复性好;以3．9ng／ml作阀值对膀胱癌诊断有较高的灵敏性和特异性。     

尿液脱落细胞UCA1在前列腺癌的表达及临床意义

目的探讨尿液脱落细胞尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)基因定量检测在前列腺癌中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测30例前列腺癌、30例前列腺增生患者以及30例健康对照者尿液脱落细胞中UCA1基因的表达情况。结果前列腺癌患者尿液脱落细胞中UCA1基因的表达水平明显高于前列腺增生组(P0.05)。以前列腺增生组为参照人群,尿液脱落细胞中UCA1检测诊断前列腺癌的ROC曲线下面积为0.675,敏感性为38.1%,特异性高达95.7%。结论UCA1基因在前列腺癌患者尿液脱落细胞中明显高表达,其诊断敏感性低但特异性极高,对前列腺癌的鉴别诊断有一定应用价值。     

泌尿系统感染患者尿沉渣检测结果分析

目的：分析泌尿系统感染患者尿沉渣检测结果。方法回顾性分析2011年8月至2013年2月新乐市医院收治的100例泌尿系统感染患者临床资料，其中50例患者（观察组）采用尿沉渣分析仪进行尿沉渣检测，50例患者（对照组）采用干化学法进行尿标本检测。结果观察组、对照组患者尿白细胞数量超过参考区间上限的患者所占比例分别为50．0％和30．0％，尿微生物培养阳性率分别为48．0％和24．0％，组间比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论泌尿系统感染患者尿沉渣检测可明显提高尿白细胞数量异常检出率，值得在临床推广应用。     

尿脱落细胞中细胞分裂周期蛋白6基因的检测

目的：通过对膀胱癌患者尿液脱落细胞中DNA复制起始复合物中的关键 蛋白－细胞分裂周期蛋白6（CDC6）的检测，探讨可早期发现，常规筛查膀胱癌，且不给患者带来痛苦的方法，方法：留取膀胱癌及其他泌尿系疾病患者的新鲜全程尿液200ml，离心获得尿沉渣标本，提取总RNA，经逆转录聚合酶链反应（RT－PCR），检测cdc6基因的表达。结果：30例膀胱癌患者中，cdc6阳性28例，阴性2例，阳性符合率为93．3％，30例其他泌尿系疾病患者和健康人尿液中，cdc6检出率16．7％，与尿液脱落细胞学检查相比较，cdc6 RT-PCR具有较高的敏感性（P＜0．05），结论：在膀胱癌患者尿液的脱落细胞中cdc6基因表达明显增加。     

尿路上皮癌特异新基因尿路上皮癌抗原1表达强度与尿路上皮癌分级相关性研究

目的 找到与尿路上皮癌抗原1(UCA1)表达强度相关的临床病理学参数,为该基因在膀胱癌发生或进展中的功能学研究提供依据.方法 用逆转录PCR检测83例尿路上皮癌(膀胱癌48例,肾盂癌23例,输尿管癌12例)组织中UCA1的表达强度,同时用Northern印迹法分别检测3例尿路上皮癌(3种癌各1例)的UCA1表达.用Spearman′s非参数分析研究UCA1表达强度与4个临床病理学参数(患者性别,肿瘤分期、分级及数量)的相关性.按照4个临床病理学参数将尿路上皮癌分为不同亚组,用Mann-Whitney检验来比较UCA1在不同亚组中的表达差异.结果 UCA1在83例尿路上皮癌中总体表达率达84.3%(70/83),在3种尿路上皮癌中的表达率分别为85.4%(41/48)、83.3%(10/12)、82.6%(19/23).UCA1表达强度与肿瘤分级有相关性,相关系数0.269(P=0.014),且高级别肿瘤的表达强度明显高于低级别肿瘤,差异有统计学意义(P=0.019),而患者性别、分期及肿瘤数量与UCA1表达强度均无相关性.结论 UCA1与尿路上皮癌分级的显著相关性说明该基因可能与尿路上皮癌的进展有关,对此需要更深入的功能学研究加以证实.     

膀胱尿路上皮癌患者外周血中MMP-7mRNA的表达及意义

目的探讨膀胱尿路上皮癌患者外周血中MMP7mRNA的表达及其临床意义。方法采用荧光定量逆转录聚合酶链反应检测36例膀胱尿路上皮癌患者外周血中MMP-7mRNA表达含量,以30例健康人作为对照。结果36例膀胱尿路上皮癌患者中,28例（77．8％）外周血MMP7mRNA表达阳性,阳性表达率与肿瘤大小、数目及初复发无明显相关性,但不同病理分期及分级间的阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．05）,肿瘤浸润和病理高级别者的阳性表达率明显高于肿瘤表浅和低级别者（P〈0．05）。30例对照组无阳性表达。结论检测膀胱尿路上皮癌患者外周血中MMP-7mRNA表达有助于识别高危患者、预测肿瘤浸润与转移和预后评估。     

鸟苷酸环化酶C在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的：探讨鸟甘酸环化酶 C （ GCC ）在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR法对32例大肠癌患者、25例大肠良性病变患者、30例健康体检者外周血中GCC表达情况进行检测,并对大肠癌病理指标与GCC mRNA 表达阳性率之间关系进行研究。结果32例大肠癌患者中,GCC mRNA 的阳性检出率为65.63％（21／32）,良性组中 GCC mRNA 的阳性检出率为20.00％（5／25）,而对照组中未见 GCC mRNA 表达;三组外周血中表达阳性率差异具有统计学意义（P〈0.05）。大肠癌患者 GCC mRNA 表达水平与Duke 分期、淋巴结转移和肝转移密切相关（P〈0.05）,与年龄、性别、肿瘤大小等无关（P〉0.05）。结论 GCC mRNA 在大肠癌患者外周血中阳性表达率较高,特别是复发或转移病例,可作为大肠癌术后复发、转移的早期检测指标之一。     

大肠癌外周血循环肿瘤细胞数的检测及临床意义

目的 检测大肠癌（CRC）患者外周血循环肿瘤细胞（CTCs）数,探讨其临床意义.方法 58例CRC患者术前静脉采血,使用多重聚合酶链式反应（PCR）结合荧光定量PCR（RTFQ PCR）方法检测外周血细胞角蛋白20（CK20）及癌胚抗原（CEA） mRNA表达,比较CTCs细胞阳性率与临床病理参数的关系.结果 58例CRC患者外周血中CK20及CEAmRNA表达的阳性率为93.1％.CTCs的阳性检出率与Ducke＇s分期及淋巴结转移相关（P＜0.05）.结论 多重RTFQ PCR方法可应用于CRC患者外周血中CTCs检测,对预后判断有着重要的临床意义.     

端粒酶PCR SCE检测对诊断膀胱癌的价值及应用

目的 探明膀胱癌患者端粒酶阳性率及姊妹染色单体互换（SCE）率，以确定其诊断及应用价值。方法 采用膀胱癌及对照正常膀胱的组织进行端粒酶活性检测（TRAP-银染法）、外周血淋巴细胞SCE检测，然后进行比较分析。结果 （1）组织标本的端粒酶阳性率：膀胱癌93．75％（30／32），正常膀胱组织0％（0／30），表明膀胱癌端粒酶高度表达，其与正常对照组比较差异有显著性（P〈0．001）。（2）外周血淋巴细胞SCE率（X）：膀胱癌32例（10．06），膀胱癌的SCE率均显著高于正常对照组（P〈0．001）；（3）膀胱癌患者的端粒酶活性与SCE率的关系：阳性组32例SCE率10．06；膀胱癌患者端粒酶阴性组30例SCE率9．17（P〈0．05）。结论 端粒酶PER及SCE检测对于膀胱癌诊断及鉴别良恶性均具有重要的价值，可作为辅助诊断及攀别诊断指标．SCE率可作为膀胱肿瘤的疗效评价指标。     

核小体结合蛋白1在膀胱癌中的表达和意义

目的通过检测核小体结合蛋白1（NSBP1）在膀胱癌组织和正常黏膜组织中的表达,探讨其与膀胱癌发生、发展的关系。方法采用逆转录PCR检测NSPB1在20例膀胱癌组织和正常黏膜组织中RNA水平的表达差异,采用免疫组织化学染色方法检测NSBP1在80例膀胱癌组织和正常黏膜组织中的表达差异,采用Western blot方法检测NSBP1在20例膀胱癌组织和正常黏膜组织中的蛋白表达差异。用配对t检验比较两种组织的逆转录PCR和Western blot的结果,用卡方检验比较两种组织免疫组织化学染色阳性率的差异。用Spearman相关性分析验证免疫组织化学结果与膀胱癌病理分期和组织学分级之间的关系。结果在膀胱癌组织和正常黏膜组织中,NSBP1的mRNA平均相对表达量分别为0.555±0.146和0.411±0.111（t=5.647,P〈0.01）。膀胱癌组织的免疫组织化学染色的阳性率、弱阳性率和阴性率分别为58.8%（47/80）、26.2%（21/80）和15.0%（12/80）,正常膀胱黏膜组织染色均为阴性,两种组织的染色阳性率存在明显差异（χ^2=66.55,P〈0.01）。Western blot提示两种组织中NSBP1蛋白的相对表达量分别为0.127±0.044和0.089±0.019（t=5.615,P〈0.01）。Spearman相关性分析显示NSBP1的表达与膀胱癌的病理分期及组织学分级存在正相关（P〈0.01）。结论NSBP1在膀胱癌中高表达,其表达与膀胱癌的病理分期、组织学分级呈正相关,可能参与了膀胱癌的发生与发展过程。     

尿膀胱癌抗原、CYFRA21-1和透明质酸在膀胱癌诊断中的价值

目的：评价尿膀胱癌抗原（urinary bladder cancer antigen,UBC）、CYFRA21-1和透明质酸（hyaluronic acid,HA）在膀胱癌诊断中的应用价值。方法：采用ELISA法检测53例膀胱癌患者、25例泌尿系统良性疾病患者和13名健康志愿者的尿UBC,并采用RIA法检测其CYFRA21-1和HA,同时行尿细胞学检查。结果：①通过ROC曲线确定UBC、CYFRA21-1和HA的最适临界值分别为7.5μg/L、2.85ng/mL和154.47ng/mL,3种尿肿瘤标志诊断膀胱癌的灵敏度分别为86.8%、86.8%、71.7%,与尿细胞学检查（32.1%）相比差异均有统计学意义（P〈0.01）;4种方法的特异度分别为76.3%、78.9%、84.2%、97.4%;阳性预期值分别为83.6%、85.2%、86.4%、94.4%;阴性预期值分别为80.6%、81.1%、68.1%、50.7%。②3种尿肿瘤标志联合检测诊断灵敏度可提高至96.2%。结论：尿UBC、CYFRA21-1和HA检测技术简便,具较高的灵敏度和特异度,其联合检测更有助于诊断膀胱癌。     

人乳腺癌特异性基因1 mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测试剂盒的建立及应用

目的建立人乳腺癌特异性基因1(BCSG1)mRNA实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)检测试剂盒,并评价其在乳腺癌循环肿瘤细胞检测中的应用价值。方法优化试剂盒中各组分的浓度、确定试剂盒的稳定性、灵敏度及特异性,并检测外周血样品中BCSG1 mRNA的表达水平。结果优化了试剂盒中的引物、探针,成功制备了定值标准品,通过设立阴、阳性质控品的方法,解决了试剂盒的特异性、灵敏性、准确性及质量控制等关键技术问题,特异度及准确性均为95%以上,灵敏度为100拷贝/ml(全血)。外周血标本中BCSG1 mRNA的检测结果为,12例临床确诊已转移的乳腺癌患者均为阳性,21例临床未确诊转移的乳腺癌患者中12例为阳性,其余9例为阴性,15例乳腺良性疾病患者、10例正常人均为阴性。结论建立的BCSG1 mRNA实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒具有很高的临床应用价值,可用于检测外周血样品中BCSG1mRNA的表达量,检测结果可作为乳腺癌患者诊疗过程中的重要监测指标。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂盒的临床应用评价

目的采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙型肝炎病毒核心抗原（HCVcAg）。方法对苏州市吴中人民医院2011年2月至2012年2月的2 523份输血、手术前住院患者血清标本进行抗-HCV初、复检检测。将初、复检均阳性的其中10份、仅初检阳性的15份和仅复检阳性的17份血清标本分别采用ELISA检测HCVcAg和采用RT聚合酶链反应（RT-PCR）检测HCV。结果 ELISA检测HCVcAg阳性结果为4份（40%）。32份仅初检或复检抗-HCV阳性标本采用ELISA检测HCVcAg阳性6份,阳性率为18.75%。采用RT-PCR荧光定量检测HCV 10份初、复检抗-HCV均阳性的血清标本结果均为阳性,32份仅初检或复检抗-HCV阳性标本采用RT-PCR荧光定量检测HCV阳性5份,阳性率为15.63%。结论 HCVcAg的敏感性与RT-PCR荧光定量检测HCV类似,能对HCV的感染作出早期诊断。