加味四逆散对脂肪肝大鼠肝组织PPARα mRNA表达的影响

目的观察加味四逆散对脂肪肝大鼠肝组织PPARα mRNA表达的影响,探讨其治疗脂肪肝的机理.方法采用复合致病因素造成大鼠脂肪肝模型,以加味四逆散为治疗组,脂必妥片作对照,研究加味四逆散对脂肪肝大鼠肝组织PPARα mRNA表达的影响.结果模型组大鼠肝组织PPARαmRNA表达减少,加味四逆散能增加脂肪肝大鼠肝组织PPAR α mRNA的表达.结论加味四逆散促进PPAR α mRNA表达可能是临床治疗脂肪肝的重要机制之一.     

酒肝颗粒对酒精性肝病大鼠NF-KB mRNA表达的影响

目的：观察慢性酒精性肝病（ALD）大鼠肝组织中核因子-kB（NF-kB）mRNA表达的变化及酒肝颗粒的干预作用,探讨NF-kB在酒精性肝病中的作用。方法：将100只Wistar大鼠随机分为对照组12只、观察组88只,参照相关文献复制大鼠慢性酒精性肝损伤模型,造模期间,分别于4周、8周、12周、16周末各随机处死观察组大鼠10只,16周末随机处死对照组大鼠10只;将观察组剩余大鼠随机分为3组,分别给予高、中、低不同浓度的酒肝颗粒灌胃;8周后处死大鼠。观察肝组织病理学变化,并采用RIA法检测血清TNF-α水平,采用RT-PCR法检测肝组织中NF-kB（P65亚单位）mRNA的表达。结果：NF-kB mRNA在酒精性肝病中表达增加,随造模时间的延长,其表达水平进行性升高,且血清TNF-α、IL-6水平、肝组织病理学变化之间存在一定的效应关系,呈正相关;酒肝颗粒可以有效地抑制NF-kB mRNA的表达,降低细胞因子TNF-α,IL-6水平,改善肝组织的脂肪变性及炎症反应。结论：NF-kB在酒精性肝病的发病机制中具有重要作用;酒肝颗粒可以明显抑制NF—kBmRNA的表达。     

痛经康口服液对痛经大鼠子宫组织中催产素受体及加压素受体mRNA的表达的影响

目的观察痛经康口服液(延胡索、当归、川芎、香附等)抗痛经作用及相关机制。方法大鼠股部皮下注射己烯雌酚,1次/d,连续11 d,其中第1天及第11天注射量为0.8 mg/只,第2天至第10天注射量为0.4 mg/只。于最后1次给药40 min后,所有大鼠按4 U/kg体质量腹腔注射缩宫素致大鼠扭体反应。采血,处死,取子宫组织采用RT-PCR方法检测大鼠子宫组织催产素受体(OTR)及加压素受体(VPR)mRNA的表达情况。结果痛经康低、中、高剂量组出现扭体反应的动物数量均较模型对照组少。田七痛经胶囊组、痛经康中、高剂量组出现扭体反应潜伏期较模型对照组延长,30 min扭体反应次数较模型对照组减少,其中痛经康中剂量组与模型对照组比较扭体反应潜伏期明显延长(P<0.01),但扭体反应次数无统计学差异。痛经康低、中、高剂量组可不同程度降低痛经大鼠子宫催产素及加压素受体mRNA表达,与模型组比较差异显著(P<0.01,P<0.05)。结论痛经康口服液具有明显的抗痛经作用,机制可能与下调痛经大鼠子宫催产素及加压素受体表达有关。     

通痹灵对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA表达的影响

目的:探讨中药复方制剂通痹灵(以桂枝芍药知母汤为基础)对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞单核细胞趋化蛋白 1(MCP-1)mRNA表达的影响。方法:采用半定量RT-PCR法测定佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA表达水平。结果:通痹灵明显抑制了佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA的表达,提示通痹灵治疗类风湿性关节炎的分子机制与抑制MCP-1基因表达有关。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌组织基因fgl2mRNA表达的影响

目的：比较糖尿病性心肌病大鼠和中药复方糖心康治疗组大鼠心肌组织中基因表达的差异,并用Eve green实时荧光RT-PCR技术定量检测凝血酶原酶（fgl2mRNA）在各组大鼠心肌组织的表达水平。方法：（1）差异表达基因的筛选;（2）荧光定量RT-PCR的检测。结果：本文仅对筛选出差异表达基因谱中的fgl2mRNA进行报告。糖尿病性心肌病模型组心肌组织基因fgl2mRNA表达上调,中药复方糖心康治疗组心肌组织基因fgl2mRNA表达下调。结论：fgl2mRNA在糖尿病状态下心肌组织也有表达,并且表达上调,而中药复方糖心康可使其下调,这也是中药复方糖心康对糖尿病性心肌组织损伤具有保护作用的机制之一。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因ubiquitin mRNA表达的影响

目的观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨DN的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机理,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据。方法采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型。运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、RT-PCR等先进检测手段和方法,观察多项指标,通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT-PCR法做验证实验研究。结果泛素mRNA(ubiquitin mRNA)在糖尿病大鼠肾脏表达上调,肾消康治疗组表达下调。结论应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,ubiquitin mRNA基因是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一。糖尿病状态下,ubiquitin mRNA基因表达上调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中ubiquitinm RNA表达下调。肾消康对ubiquitin mRNA基因表达具有良性调节作用。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因CcL5mRNA表达的影响

目的:比较糖尿病肾病（DN）大鼠和中药复方肾消康治疗组大鼠肾脏组织中基因表达的差异,并用Eve green实时荧光RT-PCR技术定量检测CcL5mRNA在各组大鼠肾脏组织的表达水平。方法:（1）差异表达基因的筛选:实验大鼠分为空白组、模型组、治疗组。从肾脏组织中抽提mRNA,由纯化的总RNA合成双链cDNA,并将其纯化,以生物素标记cRNA合成,纯化和质控体外转录（IVT）产物,片断化cRNA,然后进行杂交、洗脱、染色、芯片扫描并用软件进行统计分析,筛选出差异表达数据。不同肾脏组织样本用灰度扫描图和杂交信号强度散点图表示。（2）荧光定量RT-PCR的检测: RNA样品反转录,荧光定量PCR反应。结果:仅对筛选出差异表达基因谱中的CcL5mRNA进行报告。糖尿病肾病模型组肾脏组织基因CcL5mRNA表达上调,中药复方肾消康治疗组肾脏组织基因CcL5mRNA表达下调。结论:CcL5mRNA在糖尿病状态下肾脏也有表达,并且表达上调,而中药复方肾消康可使其下调,这也是中药复方对糖尿病性肾组织损伤具有保护作用的机制之一。     

滋水降火饮对实验性高血压大鼠淋巴细胞AngⅡ受体mRNA表达的影响

目的 :探讨高血压神经免疫调节的内在机制和滋水降火饮作用的可能环节。方法 :采用反转录扩增(RT-PCR)技术检测二肾一夹高血压大鼠 (2K1C-RHR)AngⅡ受体 (AT-1)mRNA在淋巴细胞的表达水平的改变及滋水降火饮的干预作用。结果 :模型对照组大鼠淋巴细胞AT-1mRNA表达明显增强 ,滋水降火饮组 (20,40 g·kg^-1)对此有抑制作用。结论 :滋水降火饮降低淋巴细胞AT-1mRNA的过度表达 ,可能是其发挥神经免疫调节作用的机理所在。     

降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织PPARα及Trx mRNA表达的影响

目的观察降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪肝(nonal coholic fatty liver,NAFL)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)及硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)mRNA表达的影响,探讨其治疗脂肪肝的机理。方法采用高脂胆固醇饮食造成大鼠脂肪肝模型,以降脂益肝冲剂为治疗组,研究降脂益肝冲剂对NAFL大鼠肝组织PPARα及Trx mRNA表达的影响。结果模型组大鼠肝组织PPARα及Trx mRNA表达均减少,降脂益肝冲剂能上调二者的表达。结论降脂益肝冲剂促进PPARα及Trx mRNA表达可能是其治疗NAFL的重要机制之一。     

抵当汤对血脂异常大鼠ET-1mRNA、VCAM-1mRNA表达影响

目的:观察抵当汤不同剂量对血脂异常大鼠血脂、黏附因子及内皮功能影响。方法:采用经典喂养法复制大鼠血脂异常的模型,喂高脂饲料,同时每天灌胃抵当汤。连续喂养8周。实验结束断头取血,测定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C。取主动脉采用RT-PCR方法测定组织中ET-1 mRNA、VCAM-1 mRNA表达。结果:血清TC、TG、LDL明显降低,HDL显著升高;主动脉组织ET-1 mRNA、VCAM-1 mRNA表达显著降低。结论:抵当汤具有调节血脂,保护内皮功能的作用,是防治血脂异常理想的药物。     

咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织MMP-9mRNA表达的影响

目的观察咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织MMP-9 mRNA表达的影响。方法取SD大鼠40只,随机分为正常对照组、模型对照组、咳喘宁高、低剂量组(27,13.5 g/kg)和桂龙咳喘宁组(0.41 g/kg),每组8只。除正常对照组外,其余各组以卵蛋白致敏并吸入激发法制备大鼠支气管哮喘模型,各给药组均从第1次哮喘激发开始(造模第3周)至处死前每天灌胃给药,激发并给药4周后处死大鼠,采用RT-PCR法检测MMP- 9 mRNA的表达,HE染色法观察肺和支气管病理组织学变化。结果与正常对照组相比较,模型对照组大鼠支气管管壁和平滑肌厚度、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞数以及肺组织MMP-9 mRNA表达均明显增加(P<0.01);与模型对照组比较,各治疗组均可显著降低支气管管壁和平滑肌厚度、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞数以及MMP-9 mRNA的表达(P<0.01)。结论咳喘宁能够降低肺组织MMP-9 mRNA的表达,抑制气道炎症和气道重塑。     

艾灸对类风湿关节炎大鼠下丘脑POMC mRNA 和PDYN mRNA表达的影响

目的:探讨艾灸镇痛作用的中枢机制.方法:将雄性Wistar大鼠在实验前进行压痛阈值筛选,将压痛阈在(250±25)g之间的48只保留.从中随机选取12只为正常组,其余大鼠采用风、寒、湿环境因素结合弗氏完全佐剂的方法复制类风湿性关节炎模型,然后再随机分成模型组、艾灸组、艾油组,每组12只.后两组选用“肾俞”和“足三里”穴,以艾灸和涂抹艾油为治疗手段,疗程15 d;模型组、正常组不予治疗干预.观察大鼠患足压痛阈值的改变和下丘脑前阿黑皮素(POMC) mRNA和前强啡肽原(PDYN) mRNA的表达量.结果:与正常组比较,模型组大鼠压痛阈值、下丘脑POMC mRNA和PDYN mRNA的表达量升高(均P＜0.01);与模型组比较,艾灸组大鼠压痛阈值、下丘脑POMC mRNA和PDYN mRNA表达量进一步升高(均P＜0.01),而艾油组的变化无统计学意义(P＞0.05);与艾油组比较,艾灸组大鼠压痛阈值、下丘脑POMCmRNA和PDYN mRNA表达量均升高(均P＜0.01).结论:艾灸具有镇痛作用,其机制可能与艾灸的温热作用提高大鼠下丘脑POMC mRNA和PDYN mRNA的表达量有关.     

氧化苦参碱对大鼠溃疡性结肠黏膜细胞NF-κB mRNA表达的影响

目的探讨氧化苦参碱对溃疡性结肠黏膜细胞中核因子-κB(NF-κB)mRNA表达的影响及机理。方法SPF级SD大鼠随机分成正常对照组、溃疡性结肠炎(UC)模型组、UC+氧化苦参碱组、UC+柳氮磺胺吡啶组,实验结束时,剖取病灶结肠,实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测各实验组动物结肠黏膜细胞中NF-κB mRNA表达水平。结果氧化苦参碱可显著抑制NF-κB mRNA在溃疡性结肠炎症细胞中的表达(P<0.01)。结论氧化苦参碱可干预NF-κB mRNA在炎症性结肠黏膜细胞中的表达,进而抑制溃疡性结肠炎症反应。     

女贞子不同提取部位对肾阴虚大鼠内分泌系统的影响

目的:观察女贞子不同提取部位对甲状腺片致大鼠肾阴虚体内甲状腺激素、性激素及环核苷酸的影响。方法:采用甲状腺片灌胃造成大鼠肾阴虚模型。大鼠70只随机分为正常对照组,模型对照组,六味地黄丸组,女贞子水部位组、正丁醇部位组、乙酸乙酯部位组和石油醚部位组;灌胃给药,连续7天,每日1次。末次给药后取血测定血清中雌二醇、睾酮、三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素、环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷含量。结果:女贞子水(3.6g/kg)、正丁醇(3.6g/kg)、乙酸乙酯(3.6g/kg)及石油醚(3.6g/kg)部位均能降低肾阴虚大鼠血清三碘甲状腺原氨酸水平(分别由模型组(1.47±0.52)nmol/L降至(0.30±0.14)nmol/L、(0.34±0.17)nmol/L、(0.27±0.10)nmol/L、(0.36±0.12)nmol/L),降低甲状腺素水平(分别由模型组(51±13)nmol/L降至(26±4)nmol/L、(29±7)nmol/L、(26±10)nmol/L、(30±8)nmol/L),均能升高雌鼠雌二醇水平(分别由模型组(28±11)pmol/L升至(41±8)pmol/L、(50±21)pmol/L、(72±31)pmol/L、(42±10)pmol/L);女贞子正丁醇(3.6g/kg)、乙酸乙酯(3.6g/kg)及石油醚(3.6g/kg)部位能降低环磷酸腺苷水平(分别由模型组(26±4)pmol/ml降至(23±3)pmol/ml、(22±4)pmol/ml、(22±4)pmol/ml)。女贞子能在一定程度上能改善肾阴虚大鼠体内雌二醇、三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素及环磷酸腺苷水平,可能通过升高雌二醇水平从而改善肾阴虚证之经少闭经,通过降低三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素水平从而改善肾阴虚证之形体消瘦、潮热盗汗,通过降低环磷酸腺苷水平从而改善五心烦热等阴虚症状。结论:女贞子可能是通过影响机体雌二醇、三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素及环磷酸腺苷这些共同的潜在的物质基础而达到改善肾阴虚证的。     

不同浓度青藤碱对大鼠滑膜细胞因子mRNA表达的影响

目的：观察不同浓度的青藤碱(SIN)体外作用对佐剂性关节炎(从)大鼠滑膜细胞TNF-αmRNA、IL-1 β mRNA、IL-10 mRNA表达的影响。方法：以佐剂性关节炎大鼠为模型,收集滑膜细胞培养,随机分为5组：正常对照组,从组,AA SIN 30μg／mL,AA SIN 60μg／mL,AA SIN 120μg／mL,反转录PCR检测TNF-α mRNA、IL-1b mRNA、IL-10 mRNA的表达。结果：佐剂性关节炎后滑膜细胞内TNF-α mRNA、IL-1 β mRNA、IL-10 mRNA的表达均显著升高,青藤碱在一定的浓度范围内呈浓度依赖性抑制TNF-α mRNA、IL-1b mRNA的表达,而对IL-10 mRNA的抑制效应与浓度无关。结论：青藤碱可能通过降低滑膜细胞内TNF-α mRNA及IL-1 β mRNA的表达而发挥治疗AA的效应。     

益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA 和Podocin mRNA表达的影响

目的观察益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,其中造模组采用抗近端小管刷状缘抗原(抗Fx1A)血清一次性尾静脉注射诱导被动型海曼(Heymann)肾炎模型,造模成功后将造模组随机分为模型组、洛丁新组及益气活血化瘀汤低、中、高剂量组,每组6只。每组按相应剂量灌胃4周,每周收取大鼠24 h尿量,检测24 h尿蛋白定量(UTP)。4周末处死大鼠,心脏取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-c)、三酰甘油(TG)水平,取肾脏行Masson、PASM染色观测肾脏组织病理改变,免疫荧光法观察Ig G、C3改变,实时荧光PCR检测Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达。结果与正常对照组比较,其余5组UTP均升高(P0.05),Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达量均减少(P0.01);与模型组比较,给药组UTP均减少(P0.05),Nephrin和Podocin mRNA表达量均增加(P0.01),TP、ALB有所升高但差异无统计学意义(P0.05),Scr、BUN、TC、HDL-c、TG差异无统计学意义(P0.05);与洛丁新组比较,益气活血化瘀汤低、中、高剂量组UTP有所减少,但差异无统计学意义(P0.05),各生化指标差异无统计学意义(P0.05),益气活血化瘀汤低、中、高剂量组肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达均有所增加,但差异无统计学意义(P0.05);益气活血化瘀汤各组之间各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论益气活血化瘀汤可明显减少膜性肾病大鼠的尿蛋白程度,减少肾脏病理损伤,上调肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达,延缓膜性肾病的进展。     

五龙颗粒对变态反应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织白细胞介素mRNA表达的影响

目的通过五龙颗粒对脾虚型变态反应性鼻炎(AR)大鼠白细胞介素-2、4、6 mRNA表达影响的研究,为健脾益气固表的五龙颗粒治疗AR提供理论依据。方法采用病证结合的方法造模,用RT-PCR法检测鼻黏膜白细胞介素mRNA的表达。结果五龙颗粒对实验性AR大鼠鼻黏膜处白细胞介素-2、4、6 mRNA的表达具有调节作用,升高的白细胞介素-4、6下降,降低的白细胞介素-2恢复。结论五龙颗粒可能通过调节细胞因子白细胞介素-2、4、6 mRNA的表达,对实验性AR大鼠发挥治疗作用。     

抵当汤对血脂异常大鼠ET—1mRNA、VCAM—1mRNA表达影响

目的：观察抵当汤不同荆量对血脂异常大鼠血脂、黏附因子及内皮功能影响。方法：采用经典喂养法复制大鼠血脂异常的模型，喂高脂饲料，同时每天灌胃抵当汤。连续喂养8周。实验结束断头取血，测定血清TC、TG、HDL-C、LDb-C。取主动脉采用RT-PCR方法测定组织中ET-1mRNA、VCAM-1mRNA表达。结果：血清TC、TG、LDL明显降低，HDL显著升高；主动脉组织ET-1mRNA、VCAM—1mRNA表达显著降低。结论：抵当汤具有调节血脂，保护内皮功能的作用，是防治血脂异常理想的药物。