何首乌饮对大鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶蛋白表达的影响

目的探究何首乌饮影响大鼠睾丸间质(Leydig)细胞类固醇激素合成急性调节蛋白(St AR)和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)蛋白表达的变化。方法选用10~20 d的幼年雄性Wistar大鼠,分离、培养Leydig细胞,然后收集。采用氧化损伤的方法建立Leydig细胞衰老模型。实验分组:间质细胞衰老模型组,何首乌饮处理组,首乌丸处理组,正常组和何首乌饮对照组。结果衰老模型组Leydig细胞St AR和P450scc的免疫组织化学染色强度明显低于正常组和何首乌饮对照组(P0.01)。另一方面,何首乌饮和何首乌丸干预组St AR和P450scc的免疫组织化学染色强度明显高于衰老模型组(P0.05),何首乌饮组好于何首乌丸组。结论何首乌饮可提高睾丸Leydig细胞St AR和P450scc蛋白的表达,提高睾酮的合成能力,从而延缓Leydig细胞衰老。     

胰岛素受体底物与信号转导

胰岛素受体底物 (IRS)家族包括 4种异构体蛋白 ,是多种信号转导受体的共同底物 ,其中通过与胰岛素受体 (IR)及胰岛素样生长因子 1(IGF 1)受体结合而介导的信号转导系统与糖代谢及生长发育 ,胰腺功能密切相关。IRS异构体具有组织特异性及不同亚细胞定位 ,共同介导胰岛素和IGF 1信号转导网络 ,发挥胰岛素和IGF 1的多向性细胞信号转导效应。蛋白激酶C等因素通过抑制IRS的酪氨酸磷酸化影响胰岛素和IGF 1的信号转导效应并与糖尿病的发生有关     

无生长追赶SGA幼鼠生长激素和胰岛素受体后信号交联对话的研究

目的：在生长激素（GH）和胰岛素（INS）共享受体后PI3K通路基础上探讨无生长追赶的出生低体重（NCU-SGA）幼鼠GH和INS抵抗的受体后机制，以及2者受体后信号通路的交联对话（cross-talk）。方法:取4周龄NCU-SGA雄性大鼠，采用Western印记及免疫共沉淀技术分别测定NCU-SGA幼鼠在基础状态下、胰岛素激发以及先给予GH受体后信号通路JAK2阻滞剂AG490后再行胰岛素激发后（AG490+INS组）肝组织胰岛素受体底物-1（IRS-1）及其下游信号磷酸化Akt(p-Akt)的表达。结果:（1）IRS-1信号表达： SGA鼠基础状态、INS激发后和AG490+INS组，3组间的IRS-1总蛋白及IRS-1磷酸化水平与正常对照组（C组）无显著差异（P＞0.05）。（2）p-Akt信号表达： C组基础状态时无p-Akt信号表达，INS刺激后表达明显增强。SGA鼠基础状态时p-Akt已有显著表达（慢性激活），INS刺激后表达较基础状态增加，但增殖显著低于正常对照组（P＜0.01）；AG490+INS组的p-Akt较JAK2未被阻断时明显增强（P＜0.01），但仍显著低于正常对照组（P＜0.01)，提示GH的信号干扰了INS受体后IRS-1至Akt的信号转导。结论:NCU-SGA幼鼠INS抵抗的发生与IRS-1-Akt通路受损有关，GH抵抗经GH和INS 2者受体后信号通路间的交联对话（cross-talk）使IRS-1至Akt间的信号转导解偶联,诱导和加重了INS抵抗；而PI3K-Akt可能是发生该解偶联的主要交汇点。     

胰岛素样生长因子2通过磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路调控人卵巢颗粒细胞增殖的机制

目的 检测胰岛素样生长因子2（IGF2）对人卵巢颗粒细胞（KGN细胞）增殖的调控作用及作用机制。 方法 将体外培养的KGN细胞,分不同浓度IGF2处理组（对照组和25 μg/L、50 μg/L、100 μg/L IGF2组)和磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路干预组（以LY294002干预处理将细胞分对照组、100μg/L IGF2组、LY294002组和IGF2+LY294002组）。采用MTS和5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)法检测IGF2对KGN细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞培养液上清中雌激素、孕激素的含量,Western blotting法检测各组胰岛素样生长因子受体1（IGF1R）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化的蛋白激酶B（p-Akt）及CYP19A1蛋白表达。 结果 随着IGF2的浓度梯度增高,KGN细胞的增殖率及雌激素、孕激素的分泌量逐渐升高,以 100 μg/L IGF2处理组的细胞增殖率和激素水平最高 (P<0.01),而抑制PI3K/Akt信号通路,细胞增殖率和激素的分泌量均明显降低(P<0.01);Western blotting结果显示,IGF1R、p-Akt及CYP19A1 蛋白表达水平随着IGF2的浓度梯度逐渐升高(P<0.05),而干预PI3K/Akt信号通路可影响上述蛋白的表达,与对照组相比,IGF2组和IGF2+ LY294002组IGF1R及p-Akt蛋白表达均明显升高（P<0.01）,CYP19A1在IGF2组明显升高（P<0.01）,LY294002组p-Akt及 CYP19A1蛋白明显降低（P<0.05）,IGF1R的表达差异无统计学意义。与IGF2组相比,IGF2+LY294002组p-Akt及CYP19A1蛋白表达降低（P<0.01）,IGF1R的表达差异无统计学意义,LY294002组p-Akt 及CYP19A1蛋白表达量均显著降低（P<0.01）。 结论 IGF2 可能由IGF1R介导通过PI3K/Akt 信号通路促进人卵巢颗粒细胞的增殖及分泌功能。     

胰岛素对高糖培养的人系膜细胞表达SGK1及合成细胞外基质的影响

目的：研究胰岛素对高糖培养的人系膜细胞（HMC）血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(SGK1)的表达及细胞外基质（ECM）合成的影响，初步探讨其主要作用环节。方法:用含有5.5 mmol/L、25 mmol/L葡萄糖和100 nmol/L胰岛素的DMEM培养基培养HMC细胞，即为对照组（NG）、高糖组（HG）、胰岛素干预对照组（NI）和胰岛素干预高糖组（HI）。4 h后检测SGK1的表达、胰岛素受体底物（IRS1和IRS2）蛋白的表达及磷酸化水平；24 h后检测结缔组织生长因子（CTGF）和纤连蛋白（FN）的表达。结果:HG组、NI组和HI组SGK1蛋白表达均显著高于NG组（P<0.01），高糖主要导致IRS2蛋白表达及磷酸化水平的增高（P<0.01）。胰岛素干预后，HI组IRS1蛋白表达及磷酸化水平明显高于HG组（P<0.05），而IRS2蛋白表达及磷酸化水平出现部分抑制（P<0.05）。高糖促进CTGF和FN的表达，胰岛素加强高糖此作用。结论:胰岛素和高糖能够通过不同的分子途径促进体外肾小球系膜细胞SGK1的表达，并最终促进ECM的合成；胰岛素的这种作用与IRS1信号转导通路密切相关。     

胰岛素对长骨成骨细胞的影响及受体后机制的研究

目的:研究胰岛素对长骨成骨细胞增殖和功能的影响并探讨其受体后分子机制。方法:培养生长期大鼠股骨和胫骨成骨细胞，MTT法检测不同浓度胰岛素和不同作用时间对成骨细胞增殖的影响，并观察骨钙素、胰岛素样生长因子（IGF-1）mRNA、IGF-1蛋白合成及成骨细胞胞内P44/42MAPK及其磷酸化的变化。结果:胰岛素对成骨细胞的增殖和功能的影响具有浓度和时间依赖性，10-7 mol/L时促增殖作用最强，96 h后细胞增殖进入平台期。促进骨钙素合成的最佳胰岛素浓度亦为10-7 mol/L，之后骨钙素合成减少。培养时间对骨钙素合成无明显影响。胰岛素浓度超过10-7 mol/L后IGF-1 mRNA的表达也明显低于对照组。各胰岛素组的IGF-1蛋白浓度均明显高于对照组（P<0.05），但各浓度组间无明显差别（P>0.05）。胰岛素急性刺激成骨细胞后各组的P44/42MAPK表达量无明显差别（P>0.05），但P44/42MAPK磷酸化程度随加入胰岛素浓度的增高而增强(组间P<0.05)；胰岛素慢性处理后各组的P44/42MAPK表达量仍无显著差别（P>0.05），P44/42MAPK磷酸化程度却随着胰岛素浓度的升高而逐渐下降(组间P<0.05)。结论:胰岛素能以生长因子样的作用呈剂量依赖性的方式刺激成骨细胞生长及功能，但高胰岛素状态以及长时间的胰岛素作用后此种增强效应消失。其受体酪氨酸蛋白激酶介导的MAPK信号途径参与了促成骨细胞的生长增殖的作用。     

胰岛素样生长因子I受体与细胞凋亡信号转导

胰岛素样生长因子Ⅰ 受体 (IGF ⅠR)是一种跨膜受体 ,属于酪氨酸激酶受体家族 ,与胰岛素受体有高度的同源性。在接受其相应的配体刺激后 ,IGF ⅠR可以激活包括IRS 1,IRS 2 ,shc和PI3 激酶等多种胞内亚单位 ,产生级联信号转导反应 ,通过启动相关的信号转导通路来发挥抗细胞凋亡的生物学作用。     

白杨素对胰岛素抵抗小鼠的干预研究

目的:研究白杨素对胰岛素抵抗小鼠模型的干预作用及其相应机制。方法:40只雄性C57小鼠,根据饮食随机分为对照组、胰岛素抵抗组、白杨素低剂量组及高剂量组,每组各10只。喂养24周后检测各组小鼠体重、肝指数和脂肪指数,评价胰岛素抵抗状况(血糖、胰岛素水平及HOMA-IR)及氧化应激水平(SOD、GSH-Px和MDA);real-time PCR检测肝脏胰岛素信号通路分子(IR、IRS1、IRS2、Glut2和Glut4)及炎症分子(TNF-α、IL-1β、IL-6和NF-κB)mRNA表达水平。Western blot检测肝脏关键信号蛋白(IRS1和p65)及其磷酸化的水平。结果:经过24周干预后,胰岛素抵抗组小鼠明显肥胖,体脂沉积显著(P0.01),血糖、胰岛素水平及HOMA-IR指数均高于对照组(P0.01),且肝脏氧化应激增加(P0.05),成功建立胰岛素抵抗模型。白杨素干预后,无论低剂量组还是高剂量组小鼠体重、血糖较胰岛素抵抗组上升缓慢(P0.05),血清胰岛素水平及HOMA-IR亦明显降低(P0.05),肝脏氧化应激水平明显下降(P0.05)。白杨素能够上调胰岛素信号通路中IR、IRS1、IRS2、Glut2及Glut4的mRNA表达,同时降低各炎症因子的表达,对NF-κB有抑制作用(P0.05)。其中高剂量组在炎症抑制方面更强(P0.05)。Western blot实验结果提示白杨素的改善作用与上调p-IRS1及下调p-p65相关。结论:白杨素降低了肥胖、高血糖及高胰岛素血症,缓解了胰岛素抵抗及氧化应激,这一作用可能与其调控胰岛素信号通路及抑制炎症因子表达密切相关。     

胰岛素样生长因子1在新生大鼠短暂脑缺血损伤修复中的关键作用

目的7日龄新生大鼠短暂脑缺血诱导侧脑室室管膜下区（SVZ）神经干细胞增殖,观察胰岛素样生长因子1（IGF-1）对神经干细胞增殖的影响。方法 7日龄新生SD大鼠64只,随机分为缺血组（n =24）、假手术组（n =24）、缺血阻断剂组（n =8）和缺血生理盐水组（n=8）。利用免疫组织化学方法观察缺血组和假手术组在缺血后1、4、7d SVZ新生细胞数量和IGF-1表达的变化,并观察缺血阻断剂组和缺血生理盐水组在IGF-1受体阻断剂（JB1）阻断7d后SVZ新生细胞数量和IGF-1表达的变化。结果 与同时间点假手术组比较,缺血后1、4、7d的SVZ新生细胞和IGF-1阳性细胞数量均显著增加,差异有统计学意义（P ＜0.05）;使用JB1后,缺血阻断剂组IGF-1的表达被阻断,IGF-1阳性细胞缺如,而缺血生理盐水组IGF-1表达正常;使用JB1后,缺血阻断剂组SVZ新生细胞数量显著减少,与缺血生理盐水组相比,差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论 新生大鼠缺血再灌注损伤上调了IGF-1的表达,IGF-1表达增加促使SVZ神经干细胞增殖;使用JB1后,IGF-1的表达被阻断,神经干细胞增殖也显著减少,提示IGF-1在脑缺血损伤修复中起关键作用。     

APP17肽对糖尿病脑病小鼠海马IRS—1、IGF—1R表达的影响

目的 通过对胰岛素受体底物－1（IRS－1）、胰岛素样生长因子－1受体（IGF－1R）在海马表达的观察，研究APP17肽对糖尿病脑病小鼠海马神经元IRS－1、IGF－1R的影响。方法 用链脲佐菌素（STZ）诱发小鼠糖尿病模型，并皮下注射APP17肽对糖尿病小鼠进行治疗，4周后取脑组织做IRS－1、IGF－1R免疫组织化学染色。结果 糖尿病小鼠海马内IRS－1、IGF－1R阳性反应神经元胞浆与突起深染，而正常小鼠及APP17肽保护的糖尿病小鼠海马阳性细胞数目小，染色淡。结论 糖尿病小鼠海马IRS－1、IGF－1R广泛表达；APP17肽能影响糖尿病脑病小鼠脑内IRS－1，IGF－1R的表达，使之接近正常。     

何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织P450胆固醇侧链裂解酶和类固醇激素急性调节蛋白的影响

目的 探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)的影响.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为安静对照组(A组)、安静何首乌饮组(B组)、模型组(C组)、自然恢复组(D组)、何首乌饮治疗组(E组);何首乌饮预防组(F组),每组10只.C、D、E和F组大鼠复制运动疲劳动物模型,其中F组每天训练前给何首乌饮20g/(kg·d)(含生药4.8kg/L)灌胃60 d.模型成功后E组给何首乌饮20 g/(kg·d)(含生药4.8kg/L)灌胃治疗60 d.采用美国Beckmancoulter Unicel Dxl 800仪器测定睾酮水平; 采用RT-PCR、Western blotting和免疫组织化学法检测各组睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达变化.结果 P450scc免疫组织化学阳性颗粒主要表达于间质细胞及精母细胞,B组和F组表达最强,C组最弱,与其余各组相比差异有统计学意义.P450scc蛋白和mRNA表达变化为B、F组明显高于E、D和A组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A组和D组以及B组和F组两两之间差异无显著性;StAR免疫组织化学阳性颗粒主要表达于睾丸间质细胞胞质,阳性强度表现为E组和F组最强,C组最弱.StAR蛋白和mRNA表达变化为E和F组明显高于A、D组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A、D组之间无差异.结论 何首乌饮可以提高睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达.     

何首乌饮减轻β-淀粉样蛋白诱导的海马神经元损伤的作用机制

目的 探讨何首乌饮对β 淀粉样蛋白（Aβ）诱导的大鼠原代培养海马神经元损伤保护作用及可能机制。方法 采用新生24h 内的SD大鼠进行原代培养海马神经元,将培养10d的海马神经元分为模型组、何首乌饮保护组、何首乌饮治疗组、何首乌饮对照组及空白对照组。Hoechst33258染色观察海马神经元的凋亡率;免疫组织化学、Western blotting和RT-PCR检测各组海马神经元硫氧还蛋白1（Trx1）蛋白和mRNA的表达情况。 结果 模型组细胞凋亡率增高（P<0.05）,Trx1蛋白和mRNA的表达量明显减少（P<0.05）;与模型组相比,何首乌饮治疗组和预防组的凋亡率明显降低（P<0.05）,Trx1蛋白和mRNA的表达量明显增加（P<0.05）。 结论 何首乌饮可明显减轻Aβ诱导的海马神经元的损伤,其机制可能与增加抗氧化蛋白Trx1的表达有关。     

有氧运动对小鼠骨骼肌结节性硬化复合物蛋白2基因表达及胰岛素受体底物1丝氨酸磷酸化的影响

背景：研究表明,胰岛素受体底物蛋白1(insulin receptor substrate 1,IRS1)的丝氨酸磷酸化和结节性硬化复合物蛋白2的表达及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/核糖体S6激酶1信号通路的异常可诱导机体产生胰岛素抵抗。 目的：观察有氧运动对小鼠骨骼肌结节性硬化复合物蛋白2基因表达及IRS1丝氨酸磷酸化的影响。 方法：将C57BL/6小鼠随机分为安静组和运动组,运动组进行6周的75%VO2max强度的有氧跑台运动,安静组不做任何干预。采用RT-PCR,Western blot和免疫荧光组织化学染色等方法检测各组大鼠骨骼肌结节性硬化复合物蛋白2,IRS1,pIRS1-Ser307和pIRS1-Ser636/639的表达和定位。 结果与结论：运动组结节性硬化复合物蛋白2 mRNA及蛋白表达高于安静组(P < 0.05),两组间胰岛素受体底物蛋白1 mRNA及蛋白表达差异无显著性意义。运动组胰岛素受体底物蛋白1的丝氨酸307和丝氨酸636/639位点的磷酸化明显低于安静组(P< 0.05)。结果提示,有氧运动可增强骨骼肌组织结节性硬化复合物蛋白2基因表达,进而抑制胰岛素受体底物蛋白1的丝氨酸磷酸化。     

L6大鼠成肌细胞胰岛素信号传导通路中磷脂酰肌醇3激酶、蛋白激酶B和葡萄糖转运蛋白4的表达

背景：血管紧张素Ⅱ可损伤胰岛素信号中的下游信号分子引起胰岛素抵抗,但其机制不清。 目的：观察血管紧张素Ⅱ对L6大鼠成肌细胞胰岛素信号传导通路中磷脂酰肌醇3激酶、蛋白激酶B和葡萄糖转运蛋白4的影响。 方法：L6细胞培养及诱导分化肌管,根据干预措施不同实验分为对照组、胰岛素组、胰岛素+血管紧张素Ⅱ组及胰岛素+血管紧张素Ⅱ+H89组。采用RT-PCR检测4组磷脂酰肌醇3激酶、蛋白激酶B mRNA表达,免疫荧光检测胰岛素受体底物1、酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1、葡萄糖转运蛋白4表达。 结果与结论：胰岛素组、胰岛素+血管紧张素Ⅱ组及胰岛素+血管紧张素Ⅱ+H89组的磷脂酰肌醇3激酶mRNA表达均较对照组显著升高(P < 0.05)。各组间蛋白激酶B mRNA表达差异无显著性意义(P> 0.05)。相比对照组,其余3组间胰岛素受体底物1、酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1和葡萄糖转运蛋白4(膜蛋白)表达均升高(P < 0.05);胰岛素+血管紧张素Ⅱ+H89组酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1和葡萄糖转运蛋白4表达低于胰岛素组但高于胰岛素+血管紧张素Ⅱ组(P < 0.05)。结果显示,血管紧张素Ⅱ在骨骼肌细胞中通过JAK2-PKA通路引起胰岛素下游信号传导受阻,葡萄糖转运蛋白4表达减少,葡萄糖转运障碍,进而导致胰岛素抵抗。     

何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸组织17β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响

目的 探讨何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸组织17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)的影响.方法 50只雄性SD大鼠随机分为5组,A组为安静对照组;B组为安静何首乌饮组;C组为模型组;D组为何首乌饮治疗组;E组为何首乌饮预防组,每组10只.C、D和E组大鼠复制运动性疲劳动物模型,其中E组每天训练前给予何首乌饮20g/(...     

何首乌饮对衰老大鼠生精细胞线粒体凋亡通路关键基因表达的影响

目的探讨何首乌饮对衰老大鼠睾丸生精细胞线粒体凋亡通路关键基因表达的影响。方法选用12月龄Wistar雄鼠45只,随机分为3组:青年对照组、自然衰老组、何首乌饮组,每组15只,何首乌饮组和自然衰老组于16个月开始分别灌胃何首乌饮和等量蒸馏水,连续60d。青年对照组于12月龄,其余两组于18月龄分别进行实验,通过Real-time PCR、免疫荧光染色和免疫印迹法,观察各组大鼠睾丸组织线粒体凋亡通路关键基因DR6、BAX、Caspase-3、Cyt-C、14-3-3σ的表达变化。结果自然衰老大鼠线粒体凋亡通路关键基因14-3-3σ表达明显低于青年对照组,DR6、BAX、Caspase-3、Cyt-C表达明显高于青年对照组;而何首乌饮用药后能明显逆转上述现象。结论何首乌饮提高衰老大鼠精子质量与线粒体凋亡通路有关。     

观察炎症状态和高脂状态对mTOR/S6K/IRS1-Ser和IRS1-Tyr信号通路表达的影响

目的观察在体内外炎症状态下哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-70S核糖体蛋白S6激酶(S6K)-胰岛素受体底物1(IRS1)信号传导通路异常磷酸化表达对胰岛素抵抗的影响。方法体外实验,将HepG2分为4组:对照组、高脂组[给予100 mg/L低密度脂蛋白(LDL)处理]、炎症介入组[给予20μg/L肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理]、联合干预组(给予20μg/L TNF-α+100 mg/L LDL处理)。采用实时定量PCR和Western blotting方法检测mTOR、S6K和IRS1 mRNA及蛋白表达水平;体内实验,8周龄c57BL/6J小鼠随机分为4组(正常饮食组、正常饮食加炎症组、高脂饮食组和高脂饮食加炎症组),分别给予隔日皮下注射生理盐水和酪蛋白建立炎症模型,8周后将实验小鼠于深度麻醉下处死并检测其肝脏组织中mTOR、S6K和IRS1 mRNA及蛋白表达水平。结果体内外实验均显示与对照组相比,炎症组与高脂组mTOR、S6K和IRS1-Ser mRNA及蛋白表达增加,而联合干预组表达明显增高,IRS1-Tyr mRNA及蛋白表达下降,联合干预组表达明显降低。结论炎症及高脂状态激活mTOR/s6k/IRS1-Ser信号通路,而抑制IRS1-Tyr信号通路,从而加重胰岛素抵抗。     

长期酒精暴露引起小鼠胰岛素抵抗：神经酰胺的可能作用

目的 探讨长期酒精暴露与胰岛素敏感性之间的关系并探讨其相关的分子机制;观察神经酰胺在酒精引起胰岛素抵抗过程中的可能作用。 方法 建立C57BL/6J野生型（WT）小鼠和神经鞘磷脂合成酶2基因敲除（SMS₂^-/-）3月龄小鼠的长期酒精暴露模型,两基因型小鼠又分为对照组、中剂量酒精组和高剂量酒精组,共计90只。建模5个月后,用血糖仪测定小鼠空腹血糖值,用酶学法检测血清胰岛素浓度,并计算胰岛素抵抗指数。利用免疫荧光染色法观察各组小鼠海马CA1区胰岛素受体底物2（IRS2）阳性细胞表达情况,免疫印迹法检测小鼠海马组织IRS2蛋白的相对表达量。 结果 1.长期酒精暴露导致WT和SMS-/-2小鼠空腹血糖值和胰岛素抵抗指数升高,且具有剂量依赖性（P<0.05）;但SMS₂^-/-小鼠随着酒精剂量的增加胰岛素抵抗指数升高幅度较小。 2.免疫组织化学染色显示,酒精暴露诱导WT和SMS₂^-/-小鼠海马IRS2阳性细胞数降低,有剂量依赖性（P<0.05）;与相同处理条件的WT小鼠相比,酒精诱导SMS₂^-/-小鼠海马IRS2阳性细胞数降低增多（P<0.05）。 3.免疫印迹法检测各组间小鼠海马组织IRS2蛋白相对表达量与上述结果一致。 结论 长期酒精暴露可引起胰岛素抵抗,IRS2蛋白表达降低,且存在剂量依赖性,因此酒精导致IRS2表达下降可能是胰岛素抵抗的分子机制之一;神经酰胺可能参与酒精暴露诱导IRS2表达下降的过程,且有促进胰岛素抵抗形成的作用。