肺癌患者血清可溶性Apo-1/Fas浓度检测

[目的]探讨肺癌患者血清可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)浓度的变化及其在临床上的应用价值。[方法]采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)对60例肺癌患者以及31例正常人sApo-1/Fas浓度进行了检测,并比较41例肺癌患者手术前后血清sApo-1/Fas浓度。[结果]肺癌患者血清sApo-1/Fas浓度明显高于正常对照组(P<0.01),血清sApo鄄1/Fas浓度与临床分期有关,与肺癌患者性别、年龄、病理类型无相关,Ⅳ期肺癌血清sApo鄄1/Fas浓度明显高于其他各期(P<0.05或P<0.01),Ⅲ期明显高于Ⅱ期(P<0.05),Ⅱ期明显高于Ⅰ期(P<0.01),Ⅰ期与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);手术后肺癌患者血清sApo-1/Fas浓度低于手术前(P<0.01)。[结论]血清sApo-1/Fas检测可能对指导肺癌治疗、判断预后有积极临床意义。     

化疗对肝癌患者血清可溶性Apo-1/Fas水平的影响及其临床意义

目的：评价肝癌患者化疗前后血清可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)水平变化的临床意义。方法：采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测30例正常人及58例肝癌患者化疗前后血清sApo-1/Fas水平，并作对比分析。结果：肝癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于正常对照组（P＜0．01），Ⅲ期肝癌血清sApo-1/Fas水平明显高于Ⅱ期（P＜0．01），化疗后有效（完全缓解和部分缓解）患者血清sApo-1/Fas水平明显低于化疗前者（P＜0．01），血清sApo-1/Fas水平与肝癌患者性别、年龄均无相关。结论：血清sApo-1/Fas可能参与调控肝癌的发生、发展过程，可作为化疗疗效和判断预后观察指标。     

抗APO-1单克隆抗体诱导HL-60抗药株细胞凋亡

肿瘤细胞对化疗药物的抗性，包括抵制药物诱导的凋亡，是临床肿瘤化疗效果差的主要原因之一。Fas／APO-1(CD95)是一个接收特异细胞凋亡信号(apoptotic signal）的受体分子。位于细胞膜表面。属于TNFR／NGFR家族，国外学者报道Fas／APO-1的天然配体FasL和识别Fas／APO-1的单克隆抗体均可激发表达该分子的正常T、B细胞和多种肿瘤细胞凋亡(apoptosis)，     

大肠癌患者化疗前后血清可溶性Apo-1/Fas水平变化及其临床意义

目的：探讨可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)在大肠癌患者化疗前后血清中的水平及其临床价值。方法：采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）对55例大肠癌患者化疗前后血清sApo-1/Fas水平进行测定，并同时检测30例正常人血清sApo-l/Fas水平作为对象。结果：大肠癌患者血清sApo-l/Fas水平明显高于正常对照组（P＜0．05），血清sApo-1/Fas水平与临床分期有关、与大肠癌患者性别、年龄、细胞分化程度无关；Dukes D期大肠癌患者血清sApo-l/Fas水平明显高于其它各期（P＜0．01），Dukes C期明显高于Dukes B及Dukes A期（P＜0．01），Dukes B期与Dukes A期比较无显著性差异（P＞0．05）；分化程度较好（高分化腺癌及中分化腺癌）大肠癌患者血清sApo-l/Fas水平，与分化程度较差（低分化腺癌及黏液腺癌）大肠癌患者比较无显著性差异（P＞0．05）；化疗后有效（完全缓解和部分缓解）患者血清sApo-l/Fas水平明显低于化疗前（P＜0．05）。结论：血清sApo-1/Fas的检测对探讨大肠癌的发生机理、病情判断及指导化疗有一定价值。     

血清可溶性Apo-1/Fas水平对监测胃癌生物学行为和预后的临床价值

背景与目的:国内外研究检测发现一些恶性肿瘤血清可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)水平明显高于正常人,但有关化疗对血清sApo-1/Fas影响的研究不多;本课题通过检测胃癌患者血清sApo-1/Fas水平及化疗对血清sApo-1/Fas影响的研究,探讨其临床价值。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测42例胃癌患者化疗前后血清sApo-1/Fas水平,并与30例正常人作对比分析。结果:胃癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于正常对照组(P<0.01),血清sApo-1/Fas水平与临床分期、细胞分化程度有关,与患者性别、年龄无关。Ⅳ期胃癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于Ⅲ期和Ⅱ期(P<0.05～0.01),Ⅲ期明显高于Ⅱ期(P<0.05)。中、高分化胃癌患者血清sApo-1/Fas水平低于低分化胃癌患者(P<0.05～0.01),化疗后有效(完全缓解和部分缓解)患者血清sApo-1/Fas水平明显低于化疗前(P<0.01)。结论:血清sApo-1/Fas与胃癌的发生、发展相关,可作为胃癌生物学行为和预后的标记物。sApo-1/Fas有可能成为胃癌治疗的新靶点。     

Fas/Fasl系统及凋亡与骨髓增生异常综合征关系的研究

目的 :研究 F as/Fasl系统及凋亡与骨髓增生异常综合征 ( myelodysplastic syndrome,MDS)发生发展的关系。方法 :分别用 TU NEL方法和免疫组化标记方法检测凋亡细胞和 Fas、Fasl表达细胞。而后在光镜下计数相应的阳性细胞并计算其百分率。另外 ,还以 EL ISA方法检测患者血清中的 s Fas的含量。结果 :( 1) MDS组BMMNC中的凋亡细胞百分率 [( 2 2 .83± 10 .14 ) % ]高于正常对照组 [( 2 .2 7± 0 .74) % ] ( P<0 .0 5 ) ;( 2 ) MDS组BMMNC中的 F as表达细胞百分率 [( 2 4.37± 6 .42 ) % ]高于正常对照组 [( 1.93± 0 .32 ) % ] ( P<0 .0 5 ) ;( 3) MDS组BMMNC中的 Fasl表达细胞百分率 [( 2 2 .2 7± 10 .5 0 ) % ]高于正常对照组 [( 4 .18± 1.0 2 ) % ] ( P<0 .0 5 ) ;( 4 ) MDS组血清 s Fas的含量 [( 9.2 4± 10 .5 0 ) μg/L]高于正常对照组 [( 7.5 5± 0 .79) μg/L] ( P<0 .0 5 ) ;( 5 ) MDS组凋亡细胞百分率与 Fas+细胞或 Fasl+细胞百分率之间无直线相关关系 ( P>0 .0 5 )。结论 :实验结果表明 Fas/Fasl系统介导的凋亡以及机体对其调控的失常参与了 MDS骨髓无效造血的病理生理过程。但体内可能还存在另外的机制可引起MDS患者 BMMNC凋亡增加     

Fas/FasL与肿瘤关系研究的进展

Fas抗原(APO-1／CD95)与Fas配体(FasL)组成的Fas系统，在将凋亡信号转导入细胞内发挥重要作用。效应细胞FasL结合靶细胞Fas抗原后，在数小时内通过细胞凋亡途径使靶细胞死亡。近年来很多研究发现Fas在多种细胞表面均有表达，而FasL表达只限于少量细胞类型，诸如淋巴细胞、免     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体与肝癌

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及受体能在肝癌细胞中特异性地表达,并通过死亡受体特异性地诱导肿瘤细胞凋亡;TRAIL联合放疗、化疗能有效地克服肿瘤细胞的TRAIL耐受,促进肿瘤细胞凋亡,同时TRAIL的基因治疗在抗肿瘤临床治疗上已得到广泛的应用.     

人急性白血病细胞中Fas(CD95)的表达及其功能

目的：研究急性白血病细胞中Fas的定性和定量表达及功能。方法：应用流式细胞术及RT-PCR方法检测急性白血病患者外周血或骨髓中白血病细胞的Fas定性和定量表达,并用Annexin V染色法检测其功能。结果：急性白血病细胞中Fas蛋白呈单峰状表达,具有不同的密度,并且在不同类型细胞中表现出不同的定量特征;Fas呈定性阴性或定量弱表达的患者中,其全长和剪接体mRNA的表达水平与蛋白的表达水平有关;新分离出来的白血病细胞在体外与pokeweed(PWA)抗原共同培养后,可引起Fas表达水平的上调;新鲜的急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性髓系白血病(AML)细胞对于抗Fas IgM抗体有抵抗能力,而鬼臼乙叉苷(etoposicIe,ETP)能够引起所有类型的急性白血病细胞产生凋亡。抗FaslgM抗体和ETP的联合使用并不能产生协同效果。结论：Fas是ALL和AML细胞的一个生物学标志,该研究为探讨细胞毒素制剂和细胞因子治疗作用的机制提供了线索。     

转染外源性Fas配体基因的正常骨髓CD34+细胞诱导U937细胞凋亡的实验研究

目的:观察转染外源性FasL的CD34 细胞对白血病细胞系U937的凋亡诱导作用,探讨通过向CD34 细胞转染FasL以增强移植后GVL效应的可能性.方法:免疫磁珠法分选骨髓CD34 细胞并进行体外扩增培养;FasL基因逆转录病毒途径转染CD34 细胞,并与白血病细胞U937混合培养,加入或不加入柔红霉素、阿糖胞苷,借助TUNEL、流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果:逆转录病毒上清转染后48～72h,流式细胞仪检测24.2%±2.4?34 细胞表达FasL(P＜0.01)(未转染的CD34 细胞FasL阳性率为7.6%±1.1%).未转染或转染外源FasL的CD34 细胞与白血病细胞U937以1:1的比例混合培养18h后,细胞凋亡率分别为5.0%±1.3%、10.8%±0.6%(P＜0.01);FasL CD34 DNR或FasL CD34 Arac作用后,细胞凋亡率分别为13.4%±1.0%(P＜0.05)、17.95%±1.3%(P＜0.01).结论:表达外源性FasL的骨髓CD34 细胞可诱导白血病细胞U937凋亡.提示植入转染外源性FasL基因的骨髓CD34 细胞可增强BMT后的GVL效应.     

胰腺癌患者血清可溶性Apo-1/Fas水平变化及其临床意义

目的探讨胰腺癌患者血清可溶性Apo1/Fas(sApo1/Fas)水平的变化,以及化疗对血清sApo1/Fas的影响。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测并比较58例胰腺癌患者和30例正常人的血清sApo1/Fas水平,比较48例胰腺癌患者化疗前后血清sApo1/Fas水平。结果胰腺癌患者血清sApo1/Fas为(8.37±1.49)ng/L,明显高于正常对照组(P<0.01)。胰腺癌患者血清sApo1/Fas水平与临床分期有关,Ⅳ期胰腺癌血清sApo1/Fas水平明显高于其他各期(P<0.01),Ⅲ期明显高于Ⅱ期(P<0.01);与胰腺癌患者的性别、年龄、病理类型无关。近期有效(完全缓解和部分缓解)的患者化疗前后血清sApo1/Fas分别为(8.07±1.54)ng/L和(7.39±1.49)ng/L,化疗后血清sApo1/Fas水平低于化疗前(P<0.01)。结论血清sApo1/Fas水平可能与胰腺癌的病情发展有关,血清sApo1/Fas检测对胰腺癌的疗效观察、病情监测及预后判断有重要的参考意义。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体与肺癌治疗

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是近年新发现的一种凋亡诱导配体,可以激活多信号传导途径诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞没有杀伤作用.TRAIL能诱导肺肿瘤细胞发生凋亡而对正常细胞没有毒性,这为肺癌的治疗提供了新的途径.     

结直肠肿瘤中Fas／FasL的相关研究现状

凋亡 ( apoptosis)是在基因控制下细胞的自我消亡过程。细胞凋亡异常在肿瘤发生发展过程中有重要的病理生理意义 [1]。自从凋亡理论提出以来 ,对肿瘤的发生发展有了新的认识 ,目前肿瘤发病的观念已经从细胞生长过度扩展到细胞不死。近年来认识的与凋亡相关的 Fas/Fas L这一对免疫成分使我们对凋亡在肿瘤免疫中的特征有了新的认识。现就将 Fas/Fas L在结直肠肿瘤及其相关方面的研究综述如下。1　 Fas和 Fas LFas(又称 CD95 ,Apo-1)人 Fas基因位于 10号染色体长臂 3区 3带 ,Fas为细胞膜 型糖蛋白 ,分子量为 48k D[2 ]。Fas为非谱系特…     

可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导肝癌细胞凋亡的研究

方法 采用原位杂交方法检测肝癌组织、肝癌细胞株以及正常肝组织中TRAILR的表达。采用不同浓度TRAIL蛋白处理肝癌细胞株Hep2和SMMC7721,应用流式细胞仪和原位末端标记,观察经药物处理前后该细胞株的凋亡发生率。结果 60例肝癌组织及20例正常肝组织均表达死亡受体DR5和DR4,但肝癌组织DR表达量显著强于正常肝组织。54例(90．0％)肝癌组织不表达诱捕受体DcR1,25例(41．7％)肝癌组织不表达DcR2,而20例正常肝组织均表达DcR。肝癌组织中DR的高表达及DcR的低表达,不同于正常肝组织中DR的低表达及DcR的高表达,两者间差异有显著性。两种肝癌细胞株中均可检测到DR5、DR4、DcR2的表达,但DcR1表达缺失。肝癌组织中DR的表达与肿瘤的分化、肿瘤分期有关,低分化的肿瘤DR表达减少(P＜0．01),Ⅲ、Ⅳ期肿瘤DR表达显著低于I、Ⅱ期(P＜0．05)。DR表达与患者的性别、年龄、HBsAg阳性与否、AFP水平、肿瘤大小以及是否转移无关。经TRAIL(100ng/ml)处理24h,肝癌细胞凋亡发生率约10％,而Jurkat细胞凋亡率达70％以上,胆管癌细胞QBC939凋亡发生率约50％。结论 肝细胞肝癌普遍存在TRAILR的表达,并存在受体类型的表达差异。但单一的TRAIL治疗只能有限的诱导肝癌细胞HepG2、SMMC7721发生凋亡,HCC对TRAIL诱导的凋亡存在耐药现象。     

康莱特注射液对肾癌细胞Fas／Apo—1,FasL和PCNA表达的研究

目的探讨康莱特注射液（KLT）对肾癌细胞（GRC－1）Fas／Apo－1、FasL和PCNA基因表达的影响。材料和方法利用免疫细胞化学法分析KLT对肾癌细胞Fas／Apo－1、FasL和PCNA基因表达的影响。结果免疫细胞化学证明康莱特注射液组GRC－1细胞Fas／Apo－1基因表达标记指数（LI）为74．6％,而空白乳组为21．2％。空白乳组和0．2mg／ml康莱特组GRC－1细胞无FasL基因表达改变,康莱特组GRC－1细胞PCNA表达的LI为15．2％,空白乳组GRC－1细胞几乎无PCNA表达。结论康莱特注射液的抗肾癌细胞作用可能是通过上调Fas／Apo－1和PCNA基因表达,对FasL基因表达没有明显的影响。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对非小细胞肺癌细胞凋亡诱导的基础研究

目的:观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对非小细胞肺癌小鼠模型肿瘤细胞凋亡诱导的作用。方法:30只小鼠接种浓度为5×106/ml非小细胞肺癌细胞Tc-1。荷瘤小鼠随机分为6组（空白对照组和5种浓度rhTRAIL实验组）。空白对照组每天注射一次灭菌生理盐水,实验组每天注射浓度不同的rhTRAIL溶液,各组均连续注射15d。每2d测量小鼠肿瘤长短直径,计算肿瘤体积。取小鼠脾脏细胞培养,测量培养液上清TNF-α浓度。结果:rhTRAIL给药组小鼠肿瘤体积明显低于空白对照组（P<0.05）,随着rhTRAIL浓度的增加,肿瘤体积相应减小;小鼠的Tc-1细胞凋亡率随着rhTRAIL浓度增高,其凋亡率逐渐升高;rhTRAIL给药组小鼠的TNF-α浓度均明显高于空白对照组,组间差异具有显著性（P<0.05）。结论:rhTRAIL能有效增强非小细胞肺癌小鼠体内的细胞因子分泌,诱导荷瘤小鼠的肿瘤细胞凋亡,表明rhTRAIL对非小细胞肺癌小鼠的肿瘤细胞具有一定的抑制作用。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体对胰腺癌细胞抗肿瘤作用的研究

Objective To investigate the antitumor effect of tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL)gene transfection mediated by adenovirus into human pancreatic carcinoma cell line Panc-1, and the mechanisms involved in this effect. Methods TRAIL gene was transfected into pancreatic cancer cell line Panc-1 by an adenovirus vector (Ad-TRAIL).Level of TRAIL mRNA expression was determined using RT-PCR, and TRAIL protein synthesis was evaluated with Western blot. Cell-growth activities were determined by MTT assay. The bystander effect was observed by co-culturing the Panc-1cells with the transfected TRAIL gene at different ratios. Apoptosis in pancreatic cancer cells was detected by flow cytometry.Procaspase-8 and procaspase-3 were determined by Western blot. Results The stable overexpression of TRAIL was detected in Panc-1 cells transfected by Ad-TRAIL. Ad-TRAIL significantly inhibited of cell viability of Panc-1 cells. Furthermore,co-culture of cancer cells transfected with TRAIL with that nontransfected resulted in the cell death of both cells by bystander effect. Moreover, the percentage of apoptotic cells was significantly higher in the Ad-TRAIL-treatment group compared to the control groups (P ＜ 0.01). And there was a diminished amount of procaspase-8 and procaspase-3 after infection with Ad-TRAIL. Conclusion The overexpression of TRAIL gene in Panc-1 cells by Ad-TRAIL exerts its antitumor effects, and themechanisms involved in this effect may be proapoptosis and bystander effect.     

血浆SAPO-1/Fas变化与白血病疗效关系的初步探讨

目的 :探讨 SAPO- 1/ Fas在急性白血病患者血浆浓度的变化及与化疗效果的相关性。方法 :用双抗体夹心 EL ISA法对 92例初诊的急性白血病进行血浆 SAPO- 1/ Fas浓度测定 ,并对其中 6 8例进行了化疗中、化疗后动态观察 ,同时设健康对照组。结果 :急性白血病患者血浆 SAPO- 1/Fas较正常对照组明显升高 (P<0 .0 1) ,化疗缓解者化疗中、化疗后 SAPO- 1/ Fas显著下降 ,而化疗未缓解者化疗中、化疗后 SAPO- 1/ Fas水平仍明显高于正常对照组 (P<0 .0 1)。结论 :血浆 SAPO- 1/ Fas浓度与急性白血病患者及其治疗效果有明显相关性     

喷他脒增强K562细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导凋亡敏感性

背景与目的：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）是一种理想的抗肿瘤药物，但许多肿瘤细胞常对TRAIL。诱导凋亡耐受。本研究探讨了喷他脒增强白血病K562细胞对TRAIL。诱导凋亡敏感性方法：利用光镜彤态学和Annexin V FITC／PI双标记凋亡细胞的流式细胞仪（FACS）测定两种方法观察喷他脒预处胛K562细胞并继用TRAIL后凋亡的发生，应用蛋白印迹方法观察此过程中半胱氯酸一天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3，-8和聚ADP核糖聚合酶（PARP）等3种蛋白的蛋白剪切与X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）蛋白表达的改变，结果：在10μg／ml喷他脒作用K562细胞20h，K562细胞未发生凋亡，继用200ng／ml TRAIL。作用4h后，光镜和Annexin V FITC／PI双标记流式细胞仪方法均观察到细胞发生明显凋亡，井出现了Caspase-3，-8和PARP蛋白剪切．两者单独作用则无明显细胞凋亡发生．另外，喷他脒明显降低了XlAP表达结论：喷他眯联合TRAIL可能成为肿瘤治疗的一种新策略。     

DFMO通过Fas/FasL通路诱导人肺癌细胞凋亡的研究

背景与目的:Fas/FasL系统是细胞凋亡的重要通路。为了解Fas/FasL系统在肿瘤多胺生物合成抑制导致恶性表型逆转中的作用,本研究拟探讨多胺生物合成抑制剂α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)对人肺癌A549细胞生长、凋亡的影响及其与人肺癌相关抗原、rasP21蛋白及Fas/FasL表达的相关性。方法:用MTT法观察细胞生长,流式细胞仪分析细胞周期,DNAladder电泳法观察细胞凋亡,SP免疫组化法及RT-PCR法检测细胞蛋白及基因表达。结果:DFMO可抑制A549细胞生长并诱导凋亡,使G1期细胞增多(61.0±2.08)%,S期细胞减少(21.2±0.88)%,出现DNAladder;同时下调A549细胞人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达,上调Fas基因mRNA及蛋白表达。结论:DFMO通过Fas/FasL通路诱导肺癌A549细胞的凋亡,并可能与人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达调控有关。