益生菌拮抗大肠杆菌O157:H7感染研究进展

由于使用抗生素治疗大肠杆菌O157H7感染出现一些争论,运用其他方法如益生菌来拮抗这种细菌就越来越引起人们的重视.不同的益生菌具有不同的生物学性质,抑制大肠杆菌O157H7存在多种机制,如竞争性排斥、增强免疫应答、抑制细菌内化及中和志贺毒素等.     

益生菌拮抗大肠杆菌O157：H7感染研究进展

由于使用抗生素治疗大肠杆菌O157：H7感染出现一些争论，运用其他方法如益生菌来拈抗这种细菌就越来越引起人们的重视。不同的益生菌具有不同的生物学性质，抑制大肠杆菌O157：H7存在多种机制，如竞争性排斥、增强免疫应答、抑制细菌内化及中和志贺毒素等。     

四川省大肠杆菌O157∶H7分子流行病学、耐药性及对消毒剂抗性研究

目的研究从四川省分离的大肠杆菌O157∶H7菌株流行病学特征。方法用多重PCR测定67株大肠杆菌O157∶H7的slt、eaeA、hly毒力基因;对不同来源的大肠杆菌O157∶H7进行质粒和PFGE分型;测定67株大肠杆菌O157∶H7的耐药性和对消毒剂的抗力。结果62.7%的株菌(42/67)携带有毒力基因,毒力图谱类型主要为slt1+slt2+eaeA+hly。67株菌共有6种质粒谱型和7种PFGE谱型。64.2%(43/67)的菌株分别对7种不同的抗生素耐药,其中有23、35、34株菌分别对氨苄青霉素、四环素和SMZ耐药。不同来源的大肠杆菌O157∶H7抗性谱不同,80.6%(54/67)的菌株对酒精和季铵盐产生了抗性,所有菌株对洗必泰敏感。结论四川省不同来源的大肠杆菌O157∶H7带毒率相似,但毒力基因谱型不完全相同。细菌有较高的耐药性。菌株对常用消毒剂有很高的抗性,在消毒灭菌时需要用较大剂量的消毒剂才能将其杀灭。不同来源的大肠杆菌O157∶H7耐药性、质粒和PFGE谱型有一定的相似性,提示菌株可能在人、动物、食品以及外环境之间相互传播并存在流行的可能。     

郑州市2005年肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染状况调查

目的：了解郑州市肠出血性大肠杆菌O157∶H7在腹泻病人中的检出情况和宿主动物带菌及毒力基因情况.方法：对采集的宿主动物和腹泻病人粪便及食品应用免疫磁珠富集分离法进行大肠杆菌O157∶H7分离和鉴定.结果：郑州市内共发现3例肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染病例,首次从腹泻病人中检出产毒O157∶H7菌株,采集5种以上动物粪便标本共计475份,从牛粪（247份）中分离到16株O157∶H7,检出率为6.48%,从羊粪（33份）中分离到3株O157∶H7,检出率为9.10%,并检出3株产毒O157∶H7菌株.采集5类市售食品共146份,未分离到O157∶H7.结论：郑州市存在发生肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染暴发或流行的潜在危险.     

鹿肉为大肠杆菌O157:H7感染散发病例的来源

大肠杆菌O157∶H7是人类急性感染性腹泻的 病因和溶血性尿毒综合征的主要原因。许多动物带有大肠杆菌O157∶H7,牛是动物源性人类感染的最重要来源;近年常从猪、羊和家禽等动物肉中分离出该菌。曾有文献报告鹿可携带大肠杆菌O157∶H7,并有食鹿肉者感染该菌的证据。作者首次报道了1例因食用弗吉尼亚鹿肉而感染大肠杆菌O157∶H7的病例。     

PCR检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7

目的研究快速、特异、灵敏的检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法,并比较单一PCR和多重PCR对检测灵敏度的影响.方法选择O157∶H7的O抗原、H鞭毛抗原及SLT1和SLT2毒素基因特异的4对引物,分别或共同进行PCR扩增,检测40株O157∶H7和非O157∶H7菌株,将细菌按10+1～10+6稀释后比较PCR的检测灵敏度.结果所有O157∶H7菌株均在497 bp和625 bp处出现O157抗原基因和H7抗原基因产物,其产毒株在484 bp和(或)210 bp处出现SLT2和(或)SLT1基因产物,非O157∶H7菌株PCR结果均为阴性;单一PCR检测灵敏度为150 CFU/PCR反应,多重PCR为＞1 500 CFU/PCR反应.结论在经过增菌后,多重PCR比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏和简便,为产毒和非产毒O157∶H7的诊断提供了新的手段.     

福建省食品污染物监测O157∶H7大肠杆菌的调查与分析

目的:对福建省食品中O157∶H7大肠杆菌进行分离调查,并对分离菌株的O157抗原编码基因(rfbO157)和H7抗原编码基因(flicH7)以及毒力基因(志贺毒素基因stx、粘附抹平因子基因eaeA、溶血素基因hlyA)进行检测。方法:按照《全国食品污染物检测相关实验室操作手册(食源性致病菌部分)》的要求,用EC肉汤增菌,快诊金卡筛选,接种CHROM agar O157显色平板,血清和生化系列证实。结果:1 380件食品中分离到O157∶H7大肠杆菌4株,分别为福州的生猪肉和水产品蚶中各1株、尤溪的冻鸡肉2株,检出率0.29%。结论:福建省食品中存在O157∶H7大肠杆菌的污染,虽检出率较低,这可能与福建不是O157∶H7大肠杆菌的流行地区有关,但监测是一项长期的工作,防患于未然,同时福建省也将O157∶H7大肠杆菌列入了食品安全预警系统的一部分。     

漳州市首次检出O157∶H7大肠杆菌

[目的] 建立食品污染微生物监测点,调查O157∶H7大肠杆菌在生肉类食品中污染状况. [方法]采用 E.Coli O157∶H7检测卡对样品初筛,对阳性样品再进行分离培养鉴定. [结果] 从生猪肉和生羊肉中分离出2株O157∶H7 大肠杆菌,生肉类食品检出率3.7%. [结论] 首次证实了漳州市有O157∶H7大肠杆菌的存在,动物性食品是该菌感染人类的主要来源,应引起有关部门高度重视.     

大肠杆菌O_(157)∶H_7实时荧光PCR快速检测方法的建立

[目的]利用特异性荧光探针为特点的TaqM an荧光定量PCR技术,建立大肠杆菌O157∶H7污染的快速敏感特异的检测方法。[方法]以大肠杆菌O157∶H7的rfbE基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以大肠杆菌O157∶H7菌株提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和Mg2+浓度,以大肠杆菌O157∶H7和10种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性。[结果]建立的反应体系在引物和探针的浓度为0.6μmoL/L、0.8μmoL/L,Mg2+浓度为4mmoL/L时,具有良好的特异性和敏感性。在10株相关菌株的检测中,除大肠杆菌O157∶H7出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性。在纯菌条件下,定量检测低限为17 cfu/mL。同一样品重复检测3次C t值的变异系数均小于5%。[结论]该方法特异性强,稳定性高,操作简便快捷,适应食品微生物检验发展需要,具有较大的推广及应用价值。     

福州家畜O_(157)∶H7大肠杆菌调查分析

目的　了解福州市家畜中O157∶H 7大肠杆菌的带菌情况 ,为防制提供依据。　方法　采集本市家畜中的牛、猪粪便标本 ,直接划种于SMAC培养基 ,经血清学试验、生化试验鉴定确诊的菌株做志贺样毒素测定和药物敏感性测定。　结果　首次在福州地区 195头牛和 2 45头猪中各检出 2株O157∶H7大肠杆菌。　结论　本市牛、猪等家畜中存在O157∶H7大肠杆菌 ,要加强监测。     

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术抑制肠出血性大肠埃希菌O157∶H7 StxⅡ基因表达

目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术抑制肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157∶H7StxⅡ基因表达,并评价其对细菌生长的影响及细胞毒性。方法针对EHEC O157∶H7StxⅡ基因设计引物,构建CRISPR/Cas9表达质粒pdCas9-StxⅡ并转化EHEC O157∶H7感受态细胞,采用RT-PCR及胶体金法检测StxⅡ基因表达情况,绘制菌株生长曲线,将菌株培养上清液接种Vero细胞观察细胞病变情况。结果测序分析显示pdCas9-StxⅡ表达质粒被成功构建;转化EHEC O157∶H7(00G097)感受态细胞后,StxⅡ基因mRNA、蛋白表达均受抑制,EHEC O157∶H7生长曲线未受影响(P值均0.05)。pdCas9-StxⅡ-00G097菌株培养上清液对细胞的毒性效应(CPE为30%)显著低于对照菌株00G097和pdCas9-00G097(CPE均80%)。结论成功构建的pdCas9-StxⅡ表达质粒能特异抑制EHEC O157∶H7StxⅡ基因表达、降低细胞毒性,为进一步研究志贺毒素StxⅡ在EHEC O157∶H7致病机理和基因工程减毒活菌苗奠定了基础。     

多重PCR法检测猪头肉中O157:H7的毒力因子

O157：H7大肠杆菌属于埃希氏菌属,是人和动物肠道的正常菌群之一,但有部分大肠杆菌能使人发病。由于O157︰H7大肠杆菌感染剂量极低,食入不足10个细菌就可以引起疾病。因此筛检的方法是否灵敏、快速极为重要,随着PCR技术在实际工作中的应用,使得快速准确地检测O157：H7大肠杆菌成为可能。     

食品的大肠杆菌O157污染检测及预防控制

大肠杆菌O157∶H7是一种感染剂量小、危害性大的新型肠道致病菌,是当前食品卫生和安全、给水卫生及流行病学领域最重要的研究对象之一。本文就大肠杆菌O157∶H7在食品中污染、致病性、检测方法以及预防控制加以综述。     

武汉市出血性大肠杆菌O157∶H7的调查

O157∶H7大肠杆菌是肠出血性大肠杆菌的主要血清型,其致病力强,对人类健康构成重大威胁.近几年来,EHEC的感染已成为世界性问题,由O157∶H7引起的食物中毒的暴发流行在发达国家和一些发展中国家不断发生[1].本文通过对湖北省武汉市动物、肉类制品、水产品的调查,发现并掌握了出血性大肠杆菌O157∶H7在本市的分布特征和菌型特征,制定了相应的防治对策.现将结果报告如下.     

上海市由腹泻综合监测系统发现的1例O157∶H7感染性腹泻病例的确认及流行病学调查

目的分析上海市首例由腹泻综合监测系统报告的肠出血性大肠杆菌(E.coli)O157∶H7感染性腹泻病例的发现过程及流行病学特征,为防制O157∶H7感染提供依据。方法收集病例的流行病调查资料及临床病史,结合实验室检查结果和历史监测数据进行描述性分析。结果 2013—2015年上海市腹泻综合监测点累计采样8 441例,未检出肠出血性大肠杆菌。2016年6月首次由腹泻患者粪便标本中,检出肠出血性大肠杆菌O157∶H7产毒株,采集密切接触者共8份粪便标本和环节样本3份,均未检出O157∶H7。结论本起E.coli O157∶H7感染散发疫情由腹泻综合监测系统发现,应强化腹泻综合监测系统的作用,及时发现传染源,有效控制肠道传染病传播风险。     

由罕见的发酵山梨醇O157∶H-大肠杆菌引起的HUS大暴发

O157∶H7及其它肠出血性大肠杆菌(EHEC)感染者(尤其是幼儿)约有5%～10%发生溶血性尿毒综合征(HUS)。O157∶H7不发酵山梨醇这种特性被用于区别其它大肠杆菌,但1988年德国巴伐利亚HUS暴发期间首次发现一株产志贺毒素(Stx)O157大肠杆菌能发酵山梨醇(sf),并表现β-葡萄糖醛酸苷酶活性,随后各地零星检出这种细菌。1995年底至1996年初巴伐利亚许多患儿出现出血性腹泻,粪样中检出sfO157∶H-大肠杆菌。本文报告这次暴发的调查结果。收集了1990～1996年3月巴伐利亚4个儿科血液透析中心的HUS病例,病例限定为暴发期具有溶血性贫血(血红蛋白<10…     

太康县部分腹泻病人、家畜家禽、外环境O_(157)∶H_7大肠杆菌携带情况调查

[目的 ]了解O157∶H7大肠杆菌的分布特征和污染程度。 [方法 ] 2 0 0 1年 5～ 10月在太康县采集腹泻病人、家畜家禽、外环境标本 ,用O157∶H7大肠杆菌特异性筛查法进行病原体分离培养 ,应用细胞学技术进行毒素因子测定。 [结果 ]检测 12 14份标本 ,5 2份检出O157∶H7大肠杆菌 ,并测出毒素基因 ,显示有 5个毒素因子组合型。其中 ,3 40份腹泻病人标本 12份检出 ,70 4份家畜家禽粪便 3 2份检出 ,13 3份坑塘水、蔬菜、生熟肉食等标本 7份检出 ,3 7份苍蝇标本 1份检出。[结论 ]O157∶H7大肠杆菌在腹泻病人及家畜家禽中散在而较为广泛存在 ,并对环境造成污染。     

大肠杆菌O157∶H7的噬菌体分型

目的探讨江苏省大肠杆菌O157∶H7菌株的噬菌体型别分布及菌株之间的同源性。方法应用大肠杆菌分型噬菌体对87株O157∶H7分离株进行噬菌体裂解试验,通过其裂解模式进行噬菌体分型。结果 87株O157∶H7可分为11个噬菌体型别,其中37/12型最多,占35.63%。同一时期同一地区的临床病人、宿主动物和食品分离株有相同的噬菌体型别(36/12和36/10),来自不同地区的宿主动物分离株有相同的噬菌体型别。结论同种噬菌体型别的O157∶H7在本省不同地区的宿主动物间水平传播,本省O157∶H7感染病人可能是因食用被该病原体污染的食物或通过直接接触宿主动物而感染。     

四川省大肠杆菌O157:H7分子流行病学、耐药性及对消毒剂抗性研究

目的研究从四川省分离的大肠杆菌O157：H7菌株流行病学特征。方法用多重PCR测定67株大肠杆菌O157：H7的sit、eaeA、hly毒力基因；对不同来源的大肠杆菌O157：H7进行质粒和PFGE分型；测定67株大肠杆菌O157：H7的耐药性和对消毒剂的抗力。结果62．7％的株菌（42／67）携带有毒力基因，毒力图谱类型主要为slt1＋slt2＋eaeA＋hly。67株菌共有6种质粒谱型和7种PFGE谱型。64．2％（43／67）的菌株分别对7种不同的抗生素耐药，其中有23、35、34株菌分别对氨苄青霉素、四环素和SMZ耐药。不同来源的大肠杆菌O157：H7抗性谱不同，80．6％（54／67）的菌株对酒精和季铵盐产生了抗性，所有菌株对洗必泰敏感。结论四川省不同来源的大肠杆菌O157：H7带毒率相似，但毒力基因谱型不完全相同。细菌有较高的耐药性。菌株对常用消毒剂有很高的抗性，在消毒灭菌时需要用较大剂量的消毒剂才能将其杀灭。不同来源的大肠杆菌O157：H7耐药性、质粒和PFGE谱型有一定的相似性，提示菌株可能在人、动物、食品以及外环境之间相互传播并存在流行的可能。     

河北省食品中大肠杆菌O157∶H7分布及毒力研究

目的:掌握河北省食品中大肠杆菌O157∶H7分布状况及菌株的毒力研究.方法:运用免疫磁珠富集进行分离培养,并用PCR进行毒力基因分析.结果:共采集食品530份,检出O157∶H7大肠杆菌5株,总检出率为0.9%.其中,以生牛、羊肉检出率较高,分别为6.7%和4.4%.5株O157∶H7菌株中,4株带有SLT2、eae和Hly 3种毒力基因,1株带有SLT1、SLT2、eae和Hly 4种毒力基因.结论:掌握食品中O157∶H7分布及生物学特性对预防食源性疾病暴发有重要意义.