大鼠创伤性脑损伤后肝肾功能的变化

目的通过测定创伤性脑损伤后大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)含量变化,观察脑创伤对肝、肾功能的影响。方法采用自由落体打击装置制备大鼠创伤性脑损伤模型,分别于伤后12小时和24小时在股静脉取血测定血清ALT、AST、BUN和Cr含量。结果与假手术组相比,脑损伤组在损伤后12小时、24小时ALT和AST均显著升高;BUN和Cr在脑损伤后24h显著升高。结论创伤性脑损伤发生后会出现肝肾功能的障碍。     

大鼠创伤性脑损伤后血脑屏障通透性变化的研究

目的研究大鼠创伤性脑损伤后血脑屏障（BBB）通透性的变化。方法参照Feeney’s自由落体致伤法,制作大鼠顶叶局灶皮质挫裂伤模型。应用伊文氏兰（Evans Blue,EB）示踪,测定伤后不同时点皮层和海马脑组织中EB含量;应用荧光显微镜观察皮层和海马是否存在EB的渗出。结果损伤灶皮层和同侧海马中EB含量在伤后1～6h与伤后1～7d明显增多,高峰期在3h和3d。荧光显微镜下发现血脑屏障中间期损伤灶同侧海马仍然存在EB的渗出。结论大鼠顶叶局部脑挫裂伤后,损伤灶皮层和同侧海马BBB开放呈双相性变化,BBB开放中间期仍然有很少量EB渗出。     

大鼠创伤性脑损伤后Numbl的表达变化

目的：观察大鼠创伤性脑损伤后Numbl的表达变化及其与脑损伤的关系。方法：构建大鼠创伤性脑损伤模型,收集蛋白并做冰冻切片,采用Western Blot及免疫组化分析Numbl的表达变化及分布,免疫荧光双标分析Numbl的细胞定位。结果：大鼠创伤性脑损伤后Numbl的表达降低,其主要分布在损伤区域的皮质中,免疫荧光显示Numbl主要定位于皮质的神经元中。结论：Numbl在大鼠创伤性脑损伤后表达减少,其主要定位于损伤区域的神经元中,有可能参与损伤诱导的神经元的凋亡及再生。     

大鼠创伤性脑损伤后Nrf2通路相关因子的表达

目的 观察大鼠创伤性脑损伤后脑组织内核因子E2相关性因子2(Nrf2)及该通路下游分子血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)的表达.方法 采用改良Feeney自由落体模型制作大鼠脑外伤模型,对照组仅开骨窗不制作脑外伤.采用Western Blot法检测脑外伤24h后损伤灶周围脑组织细胞核内Nrf2蛋白含量,RT-PCR法检测HO-1 mRNA、NQO1mRNA水平.结果 脑外伤后脑组织细胞核内Nrf2蛋白含量显著增加,HO-1 mRNA、NQO1 mRNA水平亦明显增加(均P＜0.01).结论 脑外伤后脑组织内Nrf2通路被激活.     

二次脑损伤后大鼠脑皮层代谢型谷氨酸受体亚型4 mRNA的变化

目的：研究弥漫性脑损伤（DBI）及其合并二次脑损伤（SBI）后大鼠脑皮层代谢型谷氨酸受体亚型4（mGluR4)的变化及意义。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、单纯SBI组、单纯DBI组及合并SBI组,在Marmarou弥漫性脑损伤模型的基础上,制成SBI模型,于伤后1,6,12,24和72h进行HE染色和代谢型谷氨酸受体4亚型（mGluR4)mRNA原位杂交。结果：与正常对照组相比,假手术组和单纯SBI组阳性神经元数以及信号灰度均无明显改变（P＞0．05）;与假手术组相比,单纯DBI组和合并SBI组,mGluR4mRNA表达于脑损伤后1h即有明显增加（P＜0．01）,单纯DBI组在6h达到高峰,合并SBI组于12h达到高峰,此刻与单纯DBI组相比,合并SBI组亦明显增加（P＜0．01）。结论：mGluR4参与了DBI和SBI的病理生理过程。可能为临床救治重型颅脑损伤提供新的理论依据。     

创伤性脑损伤后大鼠脑组织miRNA-9表达变化及意义

目的 观察创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后大鼠损伤皮质区miRNA-9的表达变化规律,探讨其对脑微血管内皮细胞的保护作用.方法 选取成年雄性SD大鼠60只制作控制性皮质撞击损伤模型(controlled cortical impact,CCI),分别应用荧光定量PCR和Western blot检测伤后6h及1、3、7、14、28 d各时间点伤灶周围组织中miRNA-9及CD31的表达情况.培养原代大鼠脑微血管内皮细胞,将内皮细胞分为正常组、损伤模型组[用依托泊苷(etoposide,ETO)损伤]、miRNA-9过表达损伤模型组、空转染损伤模型组,应用CCK-8检测各组细胞活力;应用Western blot检测各组B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X,Bax)、活化半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3蛋白(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase 3,cl-caspase-3)表达水平.结果 (1)脑创伤后伤灶周围区域miRNA-9表达明显增加,于伤后第14天达高峰(P＜0.01);内皮细胞标志物CD31蛋白表达水平从伤后第3～28天持续高于正常组(P＜0.05);(2)内皮细胞建模转染后,qPCR结果提示损伤模型组较正常组miRNA-9表达显著降低(P＜0.01),但miRNA-9过表达损伤模型组miRNA-9表达显著高于损伤模型组(P＜0.01);CCK-8结果同样显示miRNA-9过表达损伤模型组细胞活力明显高于损伤模型组(P＜0.01);(3)相比于损伤模型组,miRNA-9过表达损伤模型组内皮细胞Bcl-2蛋白表达增加(P＜0.01),Bcl-2/Bax值增加(P＜0.05),但Bax蛋白、cl-caspase-3蛋白表达降低(P＜0.05).结论 创伤性脑损伤后伤灶周围区域miRNAO表达增多且过表达miRNA-9可提高依托泊苷诱导损伤的内皮细胞活力,提示脑创伤后miRNA-9表达增加有助于脑血管重塑的发生.     

NGF对大鼠创伤性脑损伤后大脑皮质神经元的影响

目的研究神经生长因子(NGF)对大鼠创伤性脑损伤后大脑皮层神经元的影响，为NGF的临床应用提供实验依据。方法用原代培养的胎龄17d SD大鼠胎鼠大脑皮质细胞，机械划痕法建立体外创伤性脑损伤模型，通过细胞形态学、MTT法及琼脂糖凝胶电泳观察NGF的保护作用。结果培养10d的神经细胞行机械性损伤，神经细胞皱缩，突起消失，神经网络减少，胞浆内尼氏颗粒减少、溶解、消失，出现典型的DNA梯状断裂带；给予NGF后，NGF中、高剂量组倒置显微镜下及尼氏染色后观察细胞形态结构损伤减轻；MTT比色法数值增高；DNA Ladder无梯状断裂带出现。结论NGF对创伤性脑损伤所致的大脑皮层神经细胞损伤具有保护作用。     

大鼠创伤性脑损伤后血糖与血清胰岛素变化规律的研究

目的：研究大鼠创伤性脑损伤后血糖与血清胰岛素的变化规律。方法：采用大鼠自由落体脑损伤模型(Feeney’s model)，分别在伤前1／2h及伤后6、12、24、48、72、120h测定各组动物的血糖和血清胰岛素值。结果：大鼠创伤性脑损伤后血糖升高。脑损伤程度越重，血糖升高的速度越快，峰值越高。轻型脑损伤后血清胰岛素变化不明显。中、重型脑损伤后血清胰岛素水平升高，而且脑损伤越重，血清胰岛素含量升高的速度越快，峰值越高，但血清胰岛素水平下降的时间越早，至伤后72h血清胰岛素水平有低于伤前水平的趋势。结论：创伤性脑损伤后血糖升高可能与多种升血糖激素(如肾上腺素、胰高血糖索、糖皮质激素、生长激素等)和降血糖激素(如血清胰岛素)之间的动态变化及机体存在胰岛素抵抗有关。     

硫酸镁对大鼠创伤性脑损伤后神经细胞凋亡的影响

目的:观察创伤性颅脑损伤(TBI)后大鼠神经细胞凋亡现象.应用硫酸镁观察其对损伤后大鼠神经细胞凋亡的影响.方法:采用Feeney损伤模型,运用原位末端标记(Tunel)技术,观察中度脑损伤后2h～5d伤侧大脑皮层、海马神经细胞凋亡情况,结果:1.Tunel染色:伤侧大脑半球广泛存在细胞凋亡,以受伤区周缘为甚,伤后2h即可见凋亡细胞,2～3d达高峰,5d时减少.2硫酸镁治疗后8h～3d,伤侧皮层、海马区细胞凋亡数与损伤组比较明显减少(P＜0.05).结论:TBI后,神经元发生变性、坏死的同时,存在凋亡现象.硫酸镁能阻滞TBI后神经细胞的凋亡,具有脑保护作用.     

梭曼急性中毒对大鼠GABA受体影响的研究

梭曼 (Ｓｏｍａｎ)是一种主要引起胆碱能神经紊乱的有机磷酸酯类化合物 (Ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ ,ＯＰ)。本实验通过观察梭曼中毒大鼠脑神经末梢微囊ＧＡＢＡ受体的变化 ,探讨梭曼中毒的机制 ,现将结果报告如下。1　材料与方法　　实验器材 :梭曼 (Ｓｏｍａｎ)由中国军事医学科学院毒物所提供。3Ｈ ＧＡＢＡ由中国科学院上海原子能研究所提供。液体闪烁计数仪 ,瑞典。　　实验动物 :健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ ,由第三军医大学实验动物中心提供。动物体内实验分对照组、染毒未发作组和染毒发作组。对照组 :…     

大鼠颅脑损伤基因差异表达及生物信息学研究

目的利用生物信息学找到大鼠颅脑损伤后的差异表达基因信息,为后期研究提供线索。方法在公共基因芯片数据库GEO中找到大鼠颅脑损伤基因芯片数据,并利用其筛选工具找到差异表达基因,随后对其进行生物学分析。结果在大鼠损伤脑组织中共找到190条表达基因,上调159条,下调31条。通过STRING网站筛选到23条关键基因。结论利用生物信息学方法能有效分析基因芯片数据并获取生物内在信息,大鼠颅脑损伤后多种基因表达发生改变,为确定其早期诊断标志与新治疗靶位开辟了新的思路。     

外源性NGF对液压脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响

目的　研究脑创伤后外源性NGF对神经细胞凋亡的影响及其意义。方法　建立大鼠流体脑创伤模型 ,采用免疫细胞化学、电镜及图像分析等方法 ,观察脑创伤后单纯致伤组和NGF处理组神经细胞凋亡的变化。结果　正常及对照组的皮层及海马区域偶见TUNEL染色阳性的细胞。电镜超微结构观察凋亡细胞的染色阳性信号在胞核内 ;脑创伤后 12h即见大量凋亡细胞 ,并随时间延长而逐渐增多 ,主要分布在伤侧皮层、海马等区域。单纯致伤组在伤后 3d即出现凋亡高峰 ,为 (6 1.4± 3.7)个 /mm2 ,明显高于对照组 (P <0 .0 1)。NGF处理组在伤后第 7天达凋亡高峰 ,为 (2 4 .9± 2 .5 )个 /mm2 ,明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,并显著低于单纯致伤组 (P <0 .0 1)。结论　外源性NGF能够明显减轻脑创伤后神经细胞的凋亡 ,可能与NGF对脑创伤后神经细胞的保护作用有关     

颅脑创伤患者伤后早期血浆中内皮细胞特异性分子-1浓度变化及临床价值

目的 探讨颅脑创伤(traumatic brain injury,TBI)患者伤后早期血浆中内皮细胞特异性分子1(endothelial cell specific molecule-1,ESM-1)的浓度变化及其与创伤严重程度和预后的关系.方法 选取2017年6月至2019年12月复旦大学附属金山医院神经外科收治的T...     

CRM1在创伤性脑损伤大鼠脑中的表达变化

目的:研究靶向调控运输蛋白(Chromosome region maintenance1,CRM1)在创伤性脑损伤中的表达变化。方法:采用Western blot和免疫组织化学荧光法检测脑损伤后CRM1在脑中的表达变化。结果:(1)假手术组皮质CRM1蛋白水平低,在损伤后12小时逐步增加,在损伤后3天达到高峰,之后恢复到正常水平。非手术对侧皮层中CRM1表达没有明显改变。(2)免疫组化荧光测定:损伤后CRM1表达水平不但上升,且有入核的亚定位变化,主要定位在神经元中。而假手术组和对侧则主要定位在胞浆中。结论:推测CRM1在创伤性脑损伤后与神经元凋亡有关。     

CAPON及其相关分子在大鼠创伤性脑损伤后的表达变化

目的:探讨创伤性脑损伤(TBI)后神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ配体(CAPON)及其相关分子的表达变化及定位。方法:利用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹技术研究大鼠脑损伤后CAPON及其相关分子Daxras1、nNOS的mRNA及蛋白水平表达变化,利用免疫荧光双标技术检测脑损伤后CAPON分子的细胞定位情况。结果:大鼠TBI后1 d-3 d,CAPON分子mRNA和蛋白表达增加;Dexras1及nNOS的表达变化趋势与CAPON的相一致。在损伤区CAPON主要表达于NeuN阳性的神经元;在损伤周边皮质中,CAPON与星型胶质细胞的标记物GFAP有少量共定位;此外,CAPON在OX-42阳性的小胶质细胞中也有少量的表达。结论:创伤性脑损伤后,CAPON及其相关分子(Daxras1、nNOS)可被诱导表达,损伤神经细胞内的CAPON及其相关分子可能参与了TBI的病理进程。     

大鼠颅脑液压损伤的实验研究

目的:制作稳定的液压性颅脑损伤动物模型,重点探讨液压损伤装置制作方法,为进一步研究颅脑外伤提供基础.方法:将40只SD大鼠分损伤组3组,对照组1组分别给予不同打击造成轻中重颅脑液压打击伤并观察生命体征及病理学变化.结果:损伤组大鼠均有不同程度的脑损伤病理改变,造成的损伤稳定.结论:制作的液压损伤装置可以复制出大鼠分级液压打击脑损伤,模型冲击力定量准确,重复性好.     

大鼠创伤性脑损伤后海马细胞PARP的表达

目的:观察大鼠创伤性脑损伤后海马部位不同时相聚二磷酸腺苷核糖多聚酶(PARP)阳性细胞的表达变化.方法:采用大鼠自由落体脑损伤模型,伤后2 h、6 h、12 h、24 h、72 h、168 h取脑切片,行PARP、Hoechst荧光双标检测.结果:海马CA3区转角处锥体细胞层于伤后2 h即可观察到PARP阳性细胞;之后PARP阳性细胞出现部位逐渐向邻近海马CA2、CA3区迁移;至伤后72 h CA3区转角处锥体细胞层PARP阳性细胞渐减少至消失:伤后168 h海马各区锥体细胞层未见明显PARP阳性细胞.伤后各时相点均可观察到部分PARP、Hoechst荧光双标阳性细胞,其中部分双标阳性细胞Hoechst呈高亮.结论:大鼠创伤性脑损伤后各时程PARP阳性细胞数量在海马不同部位变化各异.     

促红细胞生成素及其受体在脑外伤后的表达及意义

目的观察促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在急性重型脑外伤后大脑皮质内的动态表达规律,并探讨其意义。方法将130只Wistar大鼠分为3组:正常组10只、对照组60只(仅行开颅术)和脑损伤组60只(Feeney法)。分别在伤后5、12、24h及3、5、7d断头取脑。采用RT-PCR、免疫荧光法检测EPO和EPOR的mRNA及蛋白的表达。结果正常组和对照组各时间点有微量EPO及EPOR的表达,脑损伤组在伤后5h见少量EPOmRNA和蛋白的表达,12h和24h表达升高,至3d(mRNA0.691±0.035,免疫阳性细胞78.4±6.32)达到高峰,5d时下降,7d时降至正常水平。而EPORmRNA和蛋白在伤后5h见少量表达,12h时表达升高,至24h(mRNA0.736±0.017,免疫阳性细胞70.2±6.31)达到高峰,3d(mRNA0.641±0.027,免疫阳性细胞74.8±5.49)、5d(mRNA0.656±0.011,免疫阳性细胞69.5±7.21)和7d(mRNA0.771±0.017,免疫阳性细胞70.2±6.59)时仍维持在高表达水平,未见减弱。结论大鼠急性重型颅脑损伤后大脑皮质内EPO短暂升高,而EPOR持续高水平表达且呈时间依赖性,提示颅脑损伤后外源性EPO能与持续高表达的EPOR结合产生神经保护作用。     

重型颅脑损伤36例临床分析

目的：总结重型颅脑损伤患者的救治方法及经验。方法：对我科收治的36例GCS评分在3～8分的重度颅脑损伤患者的资料进行回顾性分析。结果：36例患者手术治疗23例,非手术治疗13例;共存活26例,死亡10例。结论：重型颅脑损伤患者病情重,变化快而且并发症多,选择有效的治疗方法,保持内坏境稳定,可改善患者的预后,减少并发症及后遗症的发生,促进患者临床康复。     

IL-1β及其受体在机械性脑损伤大鼠脑干中的表达

【目的】通过复制Marmarou′s大鼠机械性脑损伤模型,研究脑损伤后白细胞介素1β(interlukin-1β,IL-1β)及其受体IL-1RI在脑干中表达的时序性特点及二者之间的相互关系。【方法】将60只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、手术对照组及损伤后30 min、1、2、4、8、12、24、48、72、120 h组。采用组织芯片及免疫组化技术检测脑干中IL-1β、IL-1RI的表达情况。【结果】对照组脑干部位可表达少量IL-1β及IL-1RI。与对照组相比,脑干中IL-1β的表达在损伤后30 min~12 h显著升高(P<0.01),并在2 h达高峰,然后逐渐降低,损伤后24 h降至正常水平,而脑干中IL-1RI的表达在损伤后1~8 h显著升高(P<0.01),并在4 h达高峰,然后逐渐降低,损伤后24 h降至正常水平。【结论】在闭合性脑损伤早期脑干中IL-1β及IL-1RI的表达即显著升高,后期逐渐恢复正常,共同参与脑损伤的病理生理过程。