他克莫思对rhHGF刺激ECV304细胞株表达MMP-的抑制作用

目的探讨重组人类肝细胞增殖因子(rhHGF)刺激ECV304细胞株表达基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的作用及他克莫思(Tacrolimus,FK506)的抑制作用.方法绘制正常ECV304细胞株生长曲线,明确最适生长浓度及对数生长期;明确rhHGF及FK506的作用浓度;流式细胞仪(FCM)检测ECV304细胞株的MMP-9水平.结果①ECV304细胞的最适生长浓度为1.0E+4/ml,对数生长期为3～5 d;rhHGF的作用浓度为8 ng/ml,IC50为8.27 ng/ml;FK506的作用浓度为50 ng/ml,IC50为51.63 ng/ml.②对照组MMP-9的表达量为39.74%;培养基中加入rhHGF 8 ng/ml后,细胞存活率为1.388169±0.102033(P<0.01),MMP-9的表达量为40.32%;培养基中加入FK506 50 ng/ml后,细胞存活率为0.398764±0.092476(P<0.01),MMP-9的表达量为14.61%;培养基中加入FK506 50 ng/ml 15 min后加入rhHGF 8 ng/ml,细胞存活率为0.767203±0.02639(P<0.01),MMP-9的表达量为35.08%.结论rhHGF可刺激ECV304细胞增殖,使MMP-9的表达量增加;FK506可抑制ECV304细胞增殖,使MMP-9的表达量降低;FK506可拮抗rhHGF所引起的ECV304细胞增殖,从而使MMP-9的表达量降低.     

姜黄素抑制ECV304细胞增殖及对基质金属蛋白酶2表达的影响

目的:探讨姜黄素对人脐静脉内皮细胞(ECV304)的作用以及对ECV304表达的基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响。方法:采用MTT法,台盼蓝染色法测定姜黄素对ECV304的量效关系和时效关系,Giemsa染色观察姜黄素对ECV304的抑制作用;通过RT-PCR检测姜黄素作用ECV304后MMP-2 mRNA表达,明胶酶谱法检测MMP-2的活性,免疫组化检测细胞MMP-2表达。结果:姜黄素对ECV304的抑制作用呈浓度依赖性和时间依赖性,Giemsa染色显示浓度为8μg/mL和10μg/mL的姜黄素可诱导ECV304凋亡,凋亡率分别是21.6%和34.7%;在10μg/mL姜黄素作用24 h下,MMP-2的mRNA显著减少,其分解明胶的活性也显著降低,免疫组化显示与阴性对照组相比内皮细胞MMP-2表达减少。结论:姜黄素能够抑制血管内皮细胞的生长、降低血管内皮细胞MMP-2的表达。     

CTGF基因转染对宫颈癌细胞MMP-2、MMP-9表达及细胞增殖的影响

目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因对人宫颈癌Hela细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及细胞增殖的影响,探讨CTGF在宫颈癌侵袭和转移中的作用机制。方法:经脂质体介导将含有CTGF重组表达质粒转染人宫颈癌Hela细胞株,用G418筛选阳性细胞克隆及实时荧光定量PCR、蛋白质印迹鉴定;采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测阳性克隆细胞MMP-2及MMP-9的表达;噻唑盐(MTT)比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果:成功建立稳定高表达CTGF的阳性Hela细胞克隆,证实其MMP-2、MMP-9表达及细胞增殖活性均显著增高。结论:CTGF转染可显著增加宫颈癌细胞MMP-2及MMP-9的表达并促进其细胞增殖,CTGF可能是宫颈癌基因治疗的潜在靶点。     

CTGF基因转染对胰腺癌细胞MMP-9、VEGF表达及增殖的影响

目的：通过研究结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）基因对人胰腺癌SW1990细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）表达及细胞增殖的影响,深入探讨CTGF在胰腺癌侵袭和转移中的作用机制。方法：经脂质体介导将含有CTGF重组表达质粒转染人胰腺癌SW1990细胞株,用G418筛选阳性细胞克隆及RT-PCR、蛋白质印迹法鉴定;采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测阳性细胞克隆MMP-9及VEGF表达的改变;噻唑盐（MTT）比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果：成功建立稳定高表达CTGF的阳性SW1990细胞克隆,与对照组相比,阳性克隆MMP-9、VEGF mRNA及蛋白表达显著增高,细胞增殖活性也显著增加。结论：CTGF转染可显著增加胰腺癌细胞MMP-9、VEGF的表达并促进其细胞增殖,CTGF可能是胰腺癌基因治疗的潜在靶点。     

生存素反义寡核苷酸对乳腺癌MCF-7细胞株MMP-2及MMP-9表达的影响

目的:研究生存素(survivin)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人乳腺癌MCF-7细胞株基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2及MMP-9表达的影响,以进一步阐明生存素介导乳腺癌浸润及转移的机制.方法:经脂质体介导将生...     

系统性红斑狼疮患者血清HGF与MMP-9的检测及与疾病活动性的关系

目的:探讨血清肝细胞增殖因子(HGF)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的水平与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动程度的关系和意义.方法:采用双抗体夹心ELISA法检测SLE患者(36例)血清HGF及MMP-9水平.结果:①与正常人(30例)相比,患者血清HGF水平明显升高(P<0.001),而血清MMP-9水平明显降低(P<0.001);经糖皮质激素治疗后血清HGF浓度下降(P<0.05),血清MMP-9浓度升高(P<0.05);②活动期患者(24例)血清HGF水平高于非活动期(P<0.05),血清MMP-9水平低于非活动期(P<0.05);③血清HGF水平肾损组(16例)明显高于非肾损组(P<0.001),而血清MMP-9水平则低于非肾损组 (P<0.05);④血清HGF水平关节炎组(23例)明显高于非关节炎组(P<0.01),而血清MMP-9水平两组之间无显著性差异(P>0.05);⑤如果以血清HGF水平作为SLE的诊断指标,则ROC曲线下面积为0.707,灵敏度为66.7%;如果以血清MMP-9水平作为SLE的诊断指标,则ROC曲线下面积为0.984,灵敏度为97.2%;如果同时检测血清HGF水平及MMP-9水平,灵敏度为66.7%(24/36).结论:HGF及MMP-9可能参与SLE的发病机制,血清HGF及MMP-9水平可作为反映疾病活动程度、肾脏损害以及疾病进展与改善的指标,且血清MMP-9水平诊断准确性更高.     

苦参碱抑制人肝癌HepG2细胞增殖及其对VEGF、MMP-9表达的影响

目的研究苦参碱(matrine,Ma)抑制人肝癌HepG2细胞增殖及其对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-9(matrix meta-lloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,探讨其抗肝癌作用可能的分子机制。方法设Ma组和阴性对照组,Ma组设5个药物梯度,采用0.2 mg/ml、0.4 mg/ml、0.8 mg/ml、1.6mg/ml、3.2mg/ml浓度的苦参碱分别作用于对数生长期的HepG2细胞,MTT法检测苦参碱对细胞生长的抑制作用,Real-time PCR检测VEGF mRNA表达,蛋白质印迹法(Western Blot,WB)检测VEGF和MMP-9蛋白的表达。结果苦参碱能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,呈时间和剂量依赖性。苦参碱能下调VEGF mRNA表达(P<0.05)和VEGF、MMP-9蛋白的表达(P<0.05)。结论苦参碱在体外能抑制肝癌细胞增殖,呈时间和剂量依赖性,其可能的分子机制是通过下调VEGF和MMP-9蛋白表达,抑制肝癌血管生成,进而起到抗肝癌作用。     

他克莫司对TGF-β1刺激人肾小管上皮细胞表达血管内皮生长因子的影响

目的 研究他克莫司(FKS06)对转化生长因子-β 1(TOF-β 1)刺激人肾小管上皮细胞(HKC)表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响,以探讨其抗肾小管间质纤维化的机制.方法 以体外培养的HKc为研究对象,分为以下4组:①阴性对照组.②TOF-β 1(8ng/m1)阳性对照组,③TOF-β 1(8ng/m1)加FK506(10、30、60ng/m1)组.应用免疫组化方法检测VEOF蛋白的表达,应用RT-PCR方法检测VEOFmRNA、α-SMAmRNA的转录水平.结果 阴性对照组HKC有基础量的VEGF和微量的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.阳性对照组细胞呈现出长梭形外观,α-SMA与VEGF表达明显上调与阴性对照组有显著差异(P<0.01).FK506以剂量依赖的方式抑制TGF-β 1诱导的β-SMA及VEGF的表达(P<0.0或P相似文献   

婴幼儿早期喘息血清MMP-9、TIMP-1及VEGF的变化及临床意义

目的探讨早期喘息的婴幼儿血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)及血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验检测116例喘息婴幼儿(喘息组)和36例健康婴幼儿(对照组)血清MMP-9、TIMP-1和VEGF水平。结果喘息组血清MMP-9、TIMP-1和VEGF水平明显高于对照组(P<0.05);喘息组MMP-9与VEGF之间呈直线正相关关系(P<0.05);喘息组MMP-9/TIMP-1比值低于对照组(P<0.05)。结论早期喘息婴幼儿存在气道重塑的危险因素;检测血清MMP-9、TIMP-1和VEGF水平对判断预后,尽早进行干预治疗具有一定的指导意义。     

乌司他丁对百草枯急性中毒大鼠肺组织MMP-9mRNA表达的影响

目的 探讨乌司他丁（UTI）对百草枯（PQ）急性中毒大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA的影响及肺损伤的肺保护作用机制.方法 将80只SD大鼠随机分成8组,每组10只,分别为正常对照组、UTI组和PQ中毒后12、24、48h组及PQ＋UTI 12、24、48h组,同时应用RT-PCR技术对各组大鼠肺组织中MMP-9的表达进行观察.结果 （1）通过大鼠行为学改变及肺组织切片证实PQ急性中毒模型成立.（2）PQ急性中毒组早期肺组织毛细血管扩张充血,肺组织炎症细胞浸润.（3） PQ组大鼠12、24、48h时肺组织MMP-9mRNA水平分别为（1.13士0.02）、（1.28士0.04）、（1.38士0.06）,PQ组大鼠经UTI干预后上述各时段肺组织MMP-9mRNA水平分别为（1.05士0.03）、（1.09士0.05）、（1.12士0.05）,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 UTI可明显减低PQ急性中毒大鼠肺组织MMP-9mRNA表达水平,可能是其防治PQ致肺损伤的机制之一.     

基质金属蛋白酶-9和表皮生长因子受体在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的 :探讨基质金属蛋白酶 9(MMP 9)和表皮生长因子受体 (EGFR)在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达关系和预后意义。　方法 :采用免疫组化 (S P)法检测MMP 9和EGFR在 6 2例NSCLC组织和 18例正常肺组织中的表达。　结果 :6 2例NSCLC中MMP 9和EGFR阳性表达率分别为 6 7.7%和 5 8.1% ,显著高于 18例癌旁正常肺组织 (P <0 .0 0 5 )。MMP 9和EGFR的表达与肿瘤TNM分期、分化程度及淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。MMP 9和EGFR的表达呈正相关 (χ2 =6 .4 5 ,P <0 .0 5 )。MMP 9和EGFR与患者的预后密切相关 (P <0 .0 5 )。　结论 :MMP 9、EGFR可作为判断NSCLC恶性程度及预后的指标     

乙酰肝素酶、MMP-9在胰腺癌侵袭转移中的表达相关性及临床意义

目的：检测乙酰肝素酶（heparanase,HPA）和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）在胰腺癌、慢性胰腺炎、正常胰腺组织中的表达及相互关系,分析其与临床预后及浸润转移的关系。方法：应用免疫组化SP法检测92例胰腺癌、24例慢性胰腺炎和10例正常胰腺组织中HPA、MMP-9的表达水平,分析两者的表达与临床病理指标的关系,建立Pearson等级相关分析。结果：HPA在胰腺癌中的表达明显高于慢性胰腺炎和正常胰腺组织（77.2%、25.0%、0,P〈0.05）,HPA阳性表达与周围组织浸润、淋巴结转移呈正相关（P〈0.05）,与性别、年龄、组织学分级及1年生存率呈负相关（P〈0.05）;胰腺癌组织中MMP-9表达明显高于慢性胰腺炎和正常胰腺组织（70.7%、20.8%、20.0%,P〈0.05）,且MMP-9阳性表达与周围组织浸润、远处转移呈正相关（P〈0.05）,与性别、年龄、组织学分级及1年生存率呈负相关（P〈0.05）。HPA与MMP-9有较高的共同阳性表达率（P=0.018）。HPA和MMP-9表达呈正相关（r=0.729,P〈0.05）,其共同表达率与肿瘤对周围脏器浸润和淋巴结转移有相关性（P〈0.05）。多因素分析显示,HPA和MMP-9均非影响预后的独立因素。结论：HPA、MMP-9在胰腺癌组织中的表达可能与胰腺癌浸润、转移相关,可作为新的胰腺癌标志物用于联合检测,具有重要的临床意义,且MMP-9可能上调HPA表达水平,促进HPA介导的肿瘤浸润和转移。     

高压氧下大鼠脑缺血区域脑组织MMP-9表达及作用

目的研究高压氧下大鼠脑缺血区域脑组织基质金属酶-9（MMP-9）表达及促进大鼠脑缺血损伤恢复的机制。方法将32只大鼠分为模型组（16只）和假手术组（16只）,两组均分别行高压氧治疗（8只）和高压空气治疗（8只）。高压空气组与高压氧治疗组在时间、治疗次数方案上相同,均1次/d,共3d。大鼠治疗第4天分别用半湿法检测脑含水量,脑组织伊文思蓝（EB）定量检测脑组织,ELISA试剂盒检测MMP-9。结果治疗第4天,大鼠模型组在高压氧治疗下脑含水量、脑组织EB定量及MMP-9含量均小于高压空气下的治疗（均〈0.05）。假手术组用高压氧治疗和高压空气治疗差异均无统计学意义（均〉0.05）。结论 MMP-9参与脑缺血再灌注损伤后的炎症反应过程,高压氧治疗下可通过抑制MMP-9表达,干扰脑缺血再灌注损伤后炎症的发生发展过程,减轻血脑屏障的破坏,继而减轻脑水肿,发挥良好的脑保护作用。     

VEGF对乳腺癌细胞MMP-9m-RNA表达的影响

目的:观察血管内皮细胞生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)对乳腺癌细胞基质金属蛋白酶- 9(MMP- 9)表达的影响。方法:乳腺癌细胞系培养,VEGF干预,RT- PCR测定乳腺癌细胞MMP- 9m- RNA表达。结果:VEGF作用后,乳腺癌细胞MMP- 9m- RNA表达升高,P<0 .0 1,作用1h出现峰值。VEGF浓度升高,MMP- 9m- RNA表达增强。结论:VEGF明显促进乳腺癌细胞MMP- 9表达。     

hCG对小鼠间充质细胞(K9)转醛醇酶活性的调节

目的:研究小鼠间充质细胞(K9)中人绒毛膜促性腺激素(hCG)对转醛醇酶(TAL)活性的调节. 方法:K9细胞培养,加hCG, cAMP孵化,测定TAL活性、Western blot检测TAL蛋白表达、Northern blot检测TAL mRNA表达、2D-Western blot测定TAL蛋白迁移表达. 结果:① hCG促使TAL mRNA表达升高. 2,4,8和16 h TAL mRNA表达密度的扫描结果依次为:hCG组(32.7±2.3),(62.2±3.5),(27.5 ±2.9)和(18.1±1.1),对照组(32.3±2.7),(25.2 ± 1.9),(31.4±3.3)和(22.5 ±2.6),其中4 h组间差异显著( P<0.01),8及16 h表达显著下降;②hCG对TAL蛋白表达无显著差异;③hCG和cAMP促使TAL活性升高,hCG组2,4,8,16和20 h的TAL活性依次为(417±33),(438±47),(508±24),(576±18)和(593±29) nkat/g,均高于同期对照组(288±18),(302±20),(334±24),(393±14)和(399±10 ) nkat/g,组间差异显著(P<0.05);④2D-Western blot:hCG导致TAL第二亚型出现新的蛋白迁移点b6,并向酸性端迁移. 结论:hCG促使小鼠K9细胞TAL的转录及活性升高,但hCG对TAL活性调节与转录水平无关,提示TAL活性调节发生在翻译后修饰,可能是通过第二信使cAMP促进了TAL磷酸化过程.     

贝伐珠单抗综合治疗Ⅲ期非小细胞肺癌患者的疗效及其对VEGF、MMP-9及COX-2表达的影响

目的 探讨贝伐珠单抗综合治疗Ⅲ期非小细胞肺癌（NSCLC）患者的疗效及其对患者血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及环氧化酶-2（COX-2）表达的影响。方法 回顾性分析安徽省第二人民医院2017年1月至2019年12月收治的95例Ⅲ期NSCLC患者临床资料,并按照治疗方案不同分为联合组47例、化疗组48例。化疗组实施常规化疗,联合组则于常规化疗的基础上增用贝伐珠单抗治疗。比较两组临床疗效,治疗前后血清VEGF、MMP-9及COX-2水平及毒副反应（包括胃肠道反应、神经毒性、血液毒性、手足综合征以及高血压等）差异。结果 联合组症状缓解的总体有效率为85.11%,高于化疗组的62.50%,差异有统计学意义（χ²=6.259,P=0.012）。联合组血清VEGF、MMP-9及COX-2水平治疗前后差值均高于化疗组,差异均有统计学意义（t=121.293、55.989、23.538;P均<0.05）。两组胃肠道反应、神经毒性、血液毒性、手足综合征以及高血压发生率比较,差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论 贝伐珠单抗综合治疗Ⅲ期NSCLC患者疗效尚可,且能有效下调VEGF、MMP-9及COX-2水平,安全性较好,值得临床推广应用。     

全反式维甲酸对人子宫内膜癌细胞MMP-9表达影响的研究

目的全反式维甲酸（all trans retinoic acid，ATRA）对多种肿瘤细胞具有明显的诱导分化作用，对人子宫内膜癌细胞亦如此，本文通过观察ATRA对子宫内膜腺癌细胞株（RL95—2）中基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase 9，MMP-9）的作用，进一步探讨ATRA对肿瘤细胞浸润性的影响。方法体外培养的子宫内膜癌细胞分为两组，一组给予ATRA处理，另一组设为对照组，用免疫组织化学方法检测两组RL95—2细胞中MMP9的表达。结果经ATRA处理后的子宫内膜癌细胞中MMP-9呈阴性表达，未用药组MMP-9呈阳性表达，定位于细胞浆。结论ATRA对体外培养的RL95—2细胞中MMP-9的表达具有抑制作用，可能降低子宫内膜癌细胞的浸润性。