TGF-β1及其信号蛋白Smad2,3在大鼠心肌细胞肥大中的作用

目的 探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)及其信号蛋白Smad2，3在诱导大鼠心肌细胞肥大中的作用。方法 培养新生大鼠心肌细胞，用不同剂量TGF-β1刺激，检测[^3H]-Leu掺入量，RT—PCR检测信号蛋白Smad2，3mRNA的表达。结果 不同剂量的TGF-β1均能明显增加心肌细胞[^3H]-Leu掺入量，TGF-β1增加肥大心肌细胞Smad2，3mRNA的表达。结论 TGF-β1能诱导大鼠心肌细胞肥大，信号蛋白Smad2，3在其中发挥了重要作用。     

Smad4和转化生长因子-β1在肝细胞癌组织芯片中的表达和意义

目的 研究Smad4和转化生长因子-β1(TGF-β1)在肝细胞癌组织芯片中的表达和意义.方法 使用组织芯片技术,选取200例肝细胞癌患者癌组织及癌旁肝组织,32例肝血管瘤患者瘤旁正常肝组织进行对照,分别进行Smad4和TGF-β1免疫组织化学染色,在显微镜下观察其表达的阳性率.结果 Smad4在对照组肝组织、癌旁肝组织、肝细胞癌中的表达呈逐渐下降的趋势,即Smad4在癌组织中表达有缺失,差异有统计学意义.在表达强度上,癌旁肝组织以强阳性表达为主,肝细胞癌中主要以弱阳性表达为主.TGF-β1在癌旁肝组织中的阳性表达率为96％,高于对照组,但在肝细胞癌中的阳性表达率降低为49.5％.对照组肝组织中的TGF-β1表达以弱阳性为主,占40.6％,在癌旁肝组织中以中度阳性为主,占51.5％,在肝细胞癌组,以阴性表达为主,占50.5％.由对照组到癌旁组织到肝细胞癌组,TGF-β1的表达呈现先升后降的趋势.结论 Smad4、TGF-β1与肝细胞癌的发生和肿瘤的生物学行为密切相关,TGF-β1可能作为肿瘤抑制因子和促进因子,发挥双向调节作用,缺失导致肝细胞癌发生,但过高表达可能使肿瘤细胞侵袭能力加强.     

TGF-β1、TGF-βR1、Smad4在乳腺癌发生、发展中的作用及其相互关系

目的:探讨TGF-β1、TGF-βR1及Smad4三者在乳腺癌中的表达与其发生、发展、转移等生物学行为以及预后的关系,为乳腺癌发病和治疗机制提供理论和实验依据。方法:提取30例乳腺癌临床标本(经液氮、研磨等处理)和MCF-7、T47D、SKBR-3三种乳腺癌细胞(取指数增长期细胞)总RNA,反转录cDNA第一链,克隆TGF-βR1、Smad4基因片段,测定质粒浓度,制备标准样品,并作出标准曲线,探针法荧光定量PCR(FQ-PCR)检测TGF-βR1和Smad4基因mRNA表达。结果:FQ-PCR检测发现恶性程度高的SKBR-3细胞,其TGF-βR1和Smad4的基因拷贝数明显低于恶性程度低的MCF-7细胞(P均<0.01),T47细胞两种基因拷贝数介于两者之间。结论:随着乳腺癌细胞病理类型恶性程度增加,TGF-βR1和Smad4 mRNA表达逐步下降,表明TGF-β1和Smad4可能具有类似乳腺癌抑癌基因的作用。     

TGF-β在糖尿病肾病信号传导中的作用

在糖尿病肾病的进展中 ,TGF β作为一关键性的细胞因子介导糖尿病诱生的系膜区基质沉积 ,这一事实无庸质疑 ;TGF β导致的肾小球硬化、肾动脉玻璃样变性、小管间质纤维化也不必赘述。现仅就几个较新颖的信号传导途径对TGF β如何发挥其上述病理效应简述如下。1　TGF β诱导基质合成可能涉及的信号传导通路在糖尿病肾病中 ,TGF β的特征性作用是刺激系膜区基质沉积。尽管TGF β通过Smad家族分子调控细胞周期的信号传导通路已得到了细致的论证 ,但TGF β调节系膜区基质的信号传导通路远未明晰。因为 ,细胞外基质有无数的成分 ,并且刺…     

TGF-β3拮抗TGF-β1诱导的FMT 改善小鼠肺纤维化

目的 研究转化生长因子(transforming growth factor, TGF)-β3是否能够抑制TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞(human lung fibroblast, HLF)间质转化。方法 在体外培养原代HLF进行细胞实验,分为3组:对照组:给予等体积超纯水;TGF-β1组:细胞给予TGF-β1(4ng/ml)处理HLF 24h;TGF-β3组:细胞给予20ng/ml的TGF-β3预处理24h后加入TGF-β1(4ng/ml)处理24h。Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)和纤连蛋白(Fibronectin)蛋白的表达水平。在体内构建小鼠肺纤维化模型,分为3组:对照组:给予等体积0.9%氯化钠溶液气管滴注;模型组:博来霉素溶于0.9%氯化钠溶液,按2.0U/kg的浓度给予小鼠气管内滴注;TGF-β3干预组:于造模前1天,将TGF-β3(100μg/kg)给予小鼠尾静脉注射。HE和Masson染色法观察肺组织病理学变化,免疫荧光法检测α-SMA和Fibronectin蛋白的变化。结果 在体外,与TGF-β1组比较,TGF-β3组细胞迁移和侵袭能力降低,α-SMA和Fibronectin蛋白表达下调。在体内,与模型组比较,TGF-β3组小鼠肺组织病理变化改善,胶原沉积减少,α-SMA和Fibronectin蛋白荧光强度降低。结论 TGF-β3抑制TGF-β1引起的HLF间质转化,并改善博来霉素诱导的小鼠肺纤维化。     

Smad 1/5和TGF-β1 mRNA在舌鳞状细胞癌组织中的表达

目的研究舌鳞状细胞癌(SCC)组织中Smad 1/5和转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA的表达,探讨其与肿瘤临床分期、病理分级及淋巴结转移的关系。方法采用原位杂交法检测49例舌SCC、20例上皮异常增生以及10例正常口腔舌黏膜组织中Smad 1/5和TGF-β1 mRNA的表达。运用χ2检验,分析Smad 1/5和TGF-β1 mRNA表达与临床病理指标的关系;应用Spearman等级相关分析,检验Smad 1/5 mRNA与TGF-β1 mRNA表达间的相关性。结果舌SCC、上皮异常增生和正常黏膜组织中,Smad 1/5 mRNA的表达阳性率分别为73.5%、35%和30%;TGF-β1 mRNA表达阳性率分别为67.3%、25%和20%。Smad 1/5和TGF-β1 mRNA在癌组织中的表达显著高于正常黏膜组织(P<0.05)。Smad 1/5 mRNA表达阳性率,在有或无淋巴结转移及不同TNM分期间有显著差异(P<0.05)。Smad 1/5 mRNA与TGF-β1 mRNA表达呈显著正相关(r=0.405,P=0.039)。结论舌SCC的发生和发展可能与TGF-β mRNA及其下游信号通路相关。     

Smad 1/5和TGF-β1 mRNA在舌鳞状细胞癌组织中的表达

目的 研究舌鳞状细胞癌(SCC)组织中Smad 1/5和转化生长因子β1 (TGF-β1)mRNA的表达,探讨其与肿瘤临床分期、病理分级及淋巴结转移的关系.方法 采用原位杂交法检测49例舌SCC、20例上皮异常增生以及10例正常口腔舌黏膜组织中Smad 1/5和TGF-β1 mRNA的表达.运用χ2检验,分析Smad 1/5和TGF-β 1 mRNA表达与临床病理指标的关系;应用Spearman等级相关分析,检验Smad 1/5 mRNA与TGF-β1 mRNA表达间的相关性.结果 舌SCC、上皮异常增生和正常黏膜组织中,Smad 1/5 mRNA的表达阳性率分别为73.5%、35%和30%;TGF-β1 mRNA表达阳性率分别为67.3%、25%和20%.Smad 1/5和TGF-β1 mRNA在癌组织中的表达显著高于正常黏膜组织(P＜0.05).Smad 1/5 mRNA表达阳性率,在有或无淋巴结转移及不同TNM分期间有显著差异(P＜0.05).Smad 1/5 mRNA与TGF-β1 mRNA表达呈显著正相关(r＝0.405,P＝0.039).结论 舌SCC的发生和发展可能与TGF-β mRNA及其下游信号通路相关.     

TGF-β1诱导鼠肝细胞凋亡信号转导机制的研究

目的：本研究旨在明确转化生长因子β1(TGF-β1)诱导鼠肝细胞凋亡与caspase-3及caspase-8的关系。方法：通过50％CCl4腹腔注射，用8W时间诱发BALB／c小鼠形成肝硬化模型。应用改良的胶原酶原位灌注法分离小鼠的肝细胞。为检测TGF-β1(5ng／ml)诱导的凋亡，利用1．5％的琼脂糖凝胶电泳观察：DNA梯形条带，应用DNA荧光染料Hoechst 33342对正常肝细胞进行了染色，并在荧光显微镜下观察比较caspase-3和caspase-8在TGF-β1诱导的凋亡中的作用。结果：胶原酶原位二步灌流法分离肝细胞活率为95．2％。正常肝细胞予以TGF-β1处理后，应用1．5％的琼脂糖凝胶电泳可以发现具有凋亡特征的梯形条带。硬化肝细胞则很少出现梯形条带。经TGF-β1处理的鼠正常肝细胞应用Hoechst染色发现，其凋亡率明显高于未处理组，分别为58．76％和18．03％，两组具有明显的差别。但凋亡可以被caspase-3和caspase-8抑制剂阻止。结论：硬化肝细胞不能象正常肝细胞那样发生TGF-β1诱导的凋亡，提示硬化肝细胞的抑制性生长调控机制已受损。TGF-β1通过caspase-8和caspase-3的活化诱导鼠肝细胞产生凋亡。     

转化生长因子β1、转化生长因子β1RⅡ在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

目的：探讨转化生长因子β1（TGF—β1）和转化生长因子DRⅡ（TGFβ1RⅡ）的表达与肝癌临床病理因素的关系，了解TGF—β1和TGFl3RⅡ在肝癌浸润、转移中的作用。方法：用免疫组化方法（S—P法）检测原发性肝细胞肝癌和癌旁组织57例中TGF—β1和TGFβ1RⅡ的表达水平。结果：TGF-β1，在肝癌组织中的阳性表达47例（82．46％）显著高于癌旁组织38例（66．67％）（P〈0．05）；TGFβ1RⅡ在肝癌组织中的阳性表达20例（35．09％），显著低于癌旁组织48例（84．21％）（P〈0．05）。TGF—β1在有转移的患者中的表达率为（92．31％）明显高于无转移的患者（74．19％）（P〈0．05），而TGFβ1RⅡ在有包膜浸润、转移、组织分化Ⅲ-Ⅳ的患者中染色较浅且阳性表达率明显下降，分别为19．52％、19．23％和7．14％，明显低于相对应组50．00％、49．39％和62．07％的阳性表达率（P〈0．01）。结论：TGF—β1过度表达和TGFβ1RⅡ表达下降可能增强了肝癌细胞的浸润、转移。     

TGF-β1及其信号蛋白在大鼠腹膜纤维化模型腹膜组织中的表达及可能作用

目的了解TGFβ1/Smads信号蛋白在高浓度葡萄糖透析液及炎症所致大鼠腹膜纤维化模型腹膜组织中的表达及在腹膜纤维化发生中的可能作用。方法24只SD雄性大鼠(180～200g)随机分为4组,每组6只。正常对照组,大鼠不做任何处理;LPS组,LPS用生理盐水稀释为0.6mg/100ml,在第1、3、5、7日按0.6mg/kg体重腹腔注射;4.25%透析液组,大鼠给予每日腹腔注射100ml/kg体重高糖透析液;LPS+4.25%透析液组,除每日腹腔注射100ml/kg体重高糖透析液外,LPS用4.25%透析液稀释为0.6mg/100ml,在第1、3、5、7日按0.6mg/kg体重腹腔注射;于实验第28天杀检动物,取壁层和脏层腹膜组织行光镜及电镜检查。用RTPCR及间接免疫荧光、Western杂交的方法检测αSMA、TGFβ1、Smad3、Smad7、pSmad2/3、ColⅠmRNA和蛋白的表达水平。结果Masson染色显示,与正常对照组比较,4W时各组壁层腹膜组织明显增厚,有大量胶原沉积,其中LPS+4.25%透析液组厚度最为显著(vsLPS组:42μm±3μmvs35μm±4μm,P=0.007,vs4.25%透析液组,42μm±3μmvs20μm±4μm,P=0.000);与正常对照组比较,三组αSMA、ColⅠ和TGFβ1、Smad3、pSmad2/3在脏层腹膜组织中的表达水平显著上调,上述变化以LPS+4.25%透析液组改变最为显著,TGFβ1mRNA为正常对照组的2倍,Smad3mRNA为正常对照组的1.8倍;与正常对照组比较,抑制性信号蛋白Smad7mRNA和蛋白表达水平在其他三组也有不同程度的上调,但Western杂交结果显示,pSmad/Smad7蛋白比值仍明显升高;电镜结果显示,除正常对照组外,各组间皮细胞均有损伤,LPS+4.25%透析液组的间皮细胞损伤最为明显,而且胞浆中出现明显的肌丝和密体。结论TGFβ1/Smads信号蛋白的活化是高浓度葡萄糖透析液和LPS导致大鼠腹膜发生纤维化的共同作用途径。高浓度葡萄糖透析液和LPS可能协同作用通过TGFβ1/Smads通路刺激腹膜间皮细胞转分化,介导腹膜纤维化的发生。     

转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肝癌细胞系的凋亡与p53及Smad4活化相关

目的:明确转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肝肿瘤细胞系凋亡及其与Smad的关系.方法:选用3种含有不同p53基因状态的人肝肿瘤细胞系,应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)对TGF-β1诱导的肝肿瘤细胞的凋亡进行了定量检测.为明确凋亡机制,还应用LF2000把含有Smad结合元件和荧光素酶基因的TGF-β1可诱导的荧光素酶报告质粒对细胞进行了转染,后经TGF-β1作用,分别检测其相对荧光素酶活性.结果:在应用TUNEL检测的3个细胞系中,TGF-β1仅能诱导HepG2细胞(野生型p53)凋亡,而Huh-7(突变型p53)和Hep3B细胞(缺失型p53)则凋亡较少.荧光素酶检测显示,HepG2细胞对TGF-β1反应较强,而Huh-7和Hep3B细胞其荧光素酶的表达较低.结论:HepG2细胞系比Huh-7和Hep3B细胞系更易发生TGF-β1诱导的凋亡,Smad4也许是TGF-β1信号转导途径的主要调控因子之一.     

转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肝癌细胞系的凋亡与p53及Smad4活化相关

目的:明确转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肝肿瘤细胞系凋亡及其与Smad的关系.方法:选用3种含有不同p53基因状态的人肝肿瘤细胞系,应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)对TGF-β1诱导的肝肿瘤细胞的凋亡进行了定量检测.为明确凋亡机制,还应用LF2000把含有Smad结合元件和荧光素酶基因的TGF-β1可诱导的荧光素酶报告质粒对细胞进行了转染,后经TGF-β1作用,分别检测其相对荧光素酶活性.结果:在应用TUNEL检测的3个细胞系中,TGF-β1仅能诱导HepG2细胞(野生型p53)凋亡,而Huh-7(突变型p53)和Hep3B细胞(缺失型p53)则凋亡较少.荧光素酶检测显示,HepG2细胞对TGF-β1反应较强,而Huh-7和Hep3B细胞其荧光素酶的表达较低.结论:HepG2细胞系比Huh-7和Hep3B细胞系更易发生TGF-β1诱导的凋亡,Smad4也许是TGF-β1信号转导途径的主要调控因子之一.     

四氯化碳/乙醇诱导乙型肝炎病毒转基因小鼠发生肝纤维化与肝癌的实验观察

目的 观察四氯化碳/乙醇诱导乙型肝炎病毒转基因小鼠实验性肝纤维化和肝癌的过程.方法 采用四氯化碳/乙醇分别诱导野生型小鼠、乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)转基因小鼠、HBsAg转基因小鼠20周,观察每组小鼠发生肝纤维化和肝癌的情况,并采用RT-PCR方法检测HBx及HBsAg基因的表达.结果 转基因小鼠肝脏有HBx或HBsAg基因表达,而野生型小鼠则没有.3组小鼠之间及雌、雄性之间发生肝纤维化的程度差异无统计学意义.四氯化碳/乙醇诱导显著加快了HBx和HBsAg转基因小鼠发生实验性肝癌的进程,雄性小鼠肝癌发生率显著高于雌性小鼠.结论 HBx和HBsAg基因整合进小鼠肝脏细胞内并不能增加肝纤维化程度,但能促进肝癌的发生发展;雄性小鼠较雌性更易发生肝癌;四氯化碳/乙醇诱导能显著促进乙型肝炎病毒转基因小鼠发生肝癌.四氯化碳/乙醇诱导乙型肝炎病毒转基因小鼠形成肝癌是一个较好的肝癌动物模型.     

miRNA-10a对小鼠肝纤维化细胞增殖及TGFβ1/Smads信号转导通路表达的影响

目的 通过观察肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)小鼠肝组织TGFβ1/Smads信号转导通路的表达与HF进展的关系,探讨微小RNA(microRNA,miRNA)-10a对于HF的作用机制.方法 选用9周龄健康雄性小鼠(C57 BL6/J) 40只,按照数字表法随机分为对照组和HF模型组(观察组),对照组生理盐水5μl/g腹腔注射,每周2次,注射8周;观察组10％ CCL4橄榄油5 μl/g腹腔注射,每周2次,注射8周,制作小鼠HF模型.RT-PCR法检测HF细胞中miRNA-10a表达后,将观察组HF细胞进行培养及miRNA-10a模拟物转染(转染组),CCK-8法检测HF细胞增殖能力,Western blotting检测HF细胞中TGFβ1、Smad7的表达水平.结果 与对照组比较,观察组miRNA-10a表达水平明显增加(P＜0.05);与对照组比较,转染组肝细胞miRNA-10a表达水平明显降低(P＜0.05);与对照组相比,低表达miRNA-10a明显降低观察组TGFβ1的表达水平,提高Smad7的表达水平(均P＜0.05).结论 小鼠HF细胞中低表达miRNA-10a,转染miRNA-10a模拟物可明显促进小鼠HF细胞增殖,其作用机制是通过miRNA-10a调控TGFβ1/Smads信号转导通路促进小鼠HF.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对大鼠肾成纤维细胞转化生长因子β1/Smad信号途径的作用研究

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂阻断转化生长因子（TGF）β1致肾间质纤维化作用的机制，探讨其抗肾间质纤维化的潜在作用。方法体外培养大鼠肾成纤维细胞株（NRK／49F），观察PPARγ配体15d-PGJ2及其激动剂曲格列酮和齐格列酮对TGFβ1诱导的纤维连接蛋白（FN）mRNA表达的影响。利用Western印迹技术观察PPARγ激动剂对TGFβ1诱导的FN和Smad蛋白表达的影响。结果（1）与1ng／ml TGFβ1组比较，5ng／ml TGFβ1组FN mRNA表达量增加了3．6倍（P〈0．01），5ng／ml TGFβ1刺激24h时较刺激前增加了2．4倍（P〈0．01），TGFβ1诱导FN mRNA表达呈一定范围内的剂量（0—5ne／ml）和时间（0—24h）依赖效应。（2）与5ng／ml TGFβ1组比较，10μmol 15d-PGJ2、曲格列酮和齐格列酮预处理组FN mRNA表达量分别降低37．3％、41．5％和22．7％，FN蛋白表达量分别降低20．6％、38．1％和28．6％。（3）5ng／ml TGFβ1以时间（0．2h）依赖方式诱导p-Smad2／3蛋白表达量增加，作用1h时达到高峰；5ng／ml TGFβ1组p-Smad2／3蛋白表达量较对照组和2ng／ml TGFβ1组分别增加3．42倍和0．97倍。（4）15d-PGJ2、曲格列酮和齐格列酮预处理组p-Smad2／3蛋白表达量与5ng／ml TGFβ1组比较分别降低61．2％、53．0％和59．S％。3种药物干预组之间p-Smad2／3蛋白表达量比较差异无统计学意义，各组Smad2和Smad3蛋白表达量无显著变化。结论PPART激动剂可以抑制TGFβ1诱导的肾间质成纤维细胞细胞外基质合成，其机制可能与阻断TGF-β1／Smad信号途径有关，提示PPARγ激动剂具有抗肾间质纤维化的潜在作用，可能成为延缓终末期肾功能衰竭的治疗新手段之一。     

Smad4 and ERK2 stimulated by transforming growth factor beta1 in rhabdomyosarcoma

Background Transforming growth factor beta (TGF-beta) plays an essential role in the regulation of normal physiologic processes of cells. TGF-beta has been shown to regulate several mitogen-a ctivated protein kinases (MAPK) pathways in several epithelial cells. However, the effects of TGF-beta on soft tissue sarcoma are seldom reported. Our previous studies suggested that there should be some other signal transduction pathways besides Smads, which are important to regulate the growth of human embryonal rhabdomyosarcoma (RMS) cells. In the present study, we examined the expression and functional relations of extracellular signal-regulated kinase 2 (ERK2) and Smad4 in human RMS tissue and a RMS cell line, RD.Methods RD cells and normal human primary skeletal myoblasts (Mb) were treated with TGF-beta1 to establish the expression profile of ERK2 at the mRNA and protein levels detected by RT-PCR and immunofluorescence.Immunohistochemistry was used to detect the expression of ERK2 and Smad4 in 50 tissue specimens of human RMS and 23 specimens of normal skeletal muscles. Follow-up of specimens was performed 6 months to 70 months later.Results RD cells and human RMS tissues showed the higher expression of ERK2 and Smad4 than the normal control,either the protein level or the mRNA level. And, exogenous TGF-beta1 stimulation can lead to higher expression of ERK2and its nuclear translocation, so TGF-beta1 can also activated MAPK (ERK2) pathway, resulting in a sustained activation of ERK2 for at least 2 hours. Immunohistochemistry analysis, however, showed that there was no correlation between ERK2 and Smad4 protein. The overexpression of ERK2 and Smad4 had no indicative effects on histological subtypes,histological grading, gender, age, and prognosis.Conclusions In RMS, signaling of TGF-beta1 from cell surface to nucleus can also be directed through the MAPK (ERK2) pathway besides the TGF-beta1/Smads pathway. The activation of ERK2 by TGF-beta1 may be Smad4independent. Moreover, there may be some other tanglesome relationships between the TGF-beta1/Smads pathway and the MAPK pathway which takes part in the development, invasion and metastasis of tumor cells.     

Effects of insulin-like growth factor binding protein-related protein 1 in mice with hepatic fibrosis induced by thioacetamide

Background Insulin-like growth factor binding protein-related protein 1 （IGFBPrP1） can activate hepatic stellate cells and increase extracellular matrix （ECM） in vitro. However, the effects of IGFBPrP1 in mice with hepatic fibrosis, and the mechanisms of these effects, are currently unknown. We aim to address these issues in this study. Methods Intraperitoneal injection of thioacetamide （TAA） is a classic method for establishing a mouse model of hepatic fibrosis. Using this model, we administered anti-IGFBPrP1 antibody, again via intraperitoneal injection. The morphological changes of liver fibrosis were observed with both HE and Masson stainning. The immunohistochemical assays and Western blotting were used to measure changes in IGFBPrP1, a-smooth muscle actin （a-SMA） and ECM in liver tissues, and the expression of transforming growth factor-β1 （TGF-β1） and Smad3. Data were statistically analyzed using one-way analysis of variance （ANOVA）, the SNK-q test for inter-group differences. Results The Masson staining analysis showed that compared with normal control group, content of collagen fiber in TAA5w group was significantly increased （P 〈0.01）, and it was significantly decreased in TAA5w/alGFBPrP1 group compared with in TAA5w group （P 〈0.01）. The expression of hepatic IGFBPrP1, a-SMA, TGF-β1, Smad3, collagen 1 and fibronectin （FN） was significantly up-regulated in the TAA5w group （P 〈0.01）. Anti-IGFBPrP1 treatment reversed these changes （P 〈0.01）. Conclusions IGFBPrP1 plays an important role in the development of hepatic fibrosis. Anti-IGFBPrP1 prevents fibrosis in mice by suppressing the activation of hepatic stellate cells, inhibiting the synthesis of major components of the ECM （namely, collagen I and FN）. The mechanism for this suppression of fibrosis is associated with the TGF-β1/Smad3 signaling pathways.     

转化生长因子β1对人胚肺成纤维细胞结缔组织生长因子及低密度脂蛋白受体相关蛋白表达的影响

目的:探讨体外培养人胚肺成纤维细胞(human pulmonary fibroblasts-1,HPF-1)在外源性转化生长因子β1(transforming growth factor beta, TGF-β1)作用下结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)与低密度脂蛋白受体相关蛋白(low density lipoprotein receptor related proteins, LRP) 的表达变化及意义.方法:将HPF-1用5 μg/L的TGF-β1分别作用0, 3, 6, 12和 24 h.用RT-PCR方法检测CTGF及LRP mRNA的表达;用蛋白免疫印迹检测LRP蛋白表达变化;用免疫沉淀方法检测TGF-β1作用不同时间,与LRP结合的CTGF的数量变化;用细胞免疫荧光检测细胞中LRP表达情况.结果:相关分析显示,以3 h为关键点,CTGF mRNA(131.53±2.86)与LRP mRNA(224.87±7.00)表达变化具有正相关性(r=0.840 2,P＜0.05);LRP蛋白随TGF-β1作用时间不同,表达水平先升高,于3 h达高峰,而后逐渐下降,用免疫印迹法分析,相对于0 h组(190.85±2.86),3 h组(222.45±3.66)表达具有统计学意义(F=18.06,P＜0.05);用免疫荧光标记细胞LRP也得到类似的结果,比较0 h组(27.56±6.72)和3 h组(88.66±15.72)LRP蛋白表达(F=244.36,P＜0.01)差异具有统计学意义.结论:LRP作为CTGF的受体蛋白,在TGF-β1作用不同时间的情况下,表达量发生变化,并与CTGF的表达成正相关,提示其在肺间质纤维发生中发挥作用.