UPLC-MS/MS测定降糖类中药制剂及保健品中8种化学药的研究

 目的建立一种测定降糖类中药制剂及保健品中违禁添加8种化学药的超高效液相-串联四级杆质谱方法。方法使用超高效液相-串联四极杆质谱的多反应监测(MRM)模式测定。结果8种化学药测定的线性范围在0.5～200.0μg·L^-1之间,r分别在0.9971～0.9998之间;盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、格列奇特、盐酸吡格列酮、格列吡嗪、格列美脲、格列苯脲和格列喹酮的检出限分别为5.2,1.1,5.4,0.2,5.1,0.2,0.7和3.1μg·kg^-1;3个水平的回收率分别在84.3%～121.1%间。结论该方法快速、准确、灵敏,可用于降糖类中药制剂及保健品中违禁添加8种化学药的测定。     

基于实心核颗粒色谱技术结合HPLC法快速测定保健食品中非法添加13种降糖化学成分

目的建立保健食品中非法添加13种降糖性化学成分(甲苯磺丁脲、格列本脲、格列齐特、格列吡嗪、格列喹酮、格列美脲、马来酸罗格列酮、瑞格列奈、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、盐酸丁二胍、格列波脲)的HPLC快速检测方法。方法以高色谱性能的实心核颗粒色谱柱CORTECS-C18(100 mm×4.6 mm,2.7μm)快速分离,二极管阵列检测器(PDA)检测,进行定性定量检测分析,样品以甲醇为溶剂超声提取,在10 min内同时检测添加在保健食品中的甲苯磺丁脲、格列本脲、格列齐特、格列吡嗪、格列喹酮、格列美脲、马来酸罗格列酮、瑞格列奈、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、盐酸丁二胍、格列波脲13种化学成分。结果 13种降糖化学成分色谱检测的分离度好,线性范围宽,相关性好,r2≥0.998 7;方法精密度以6次测定值的RSD表示,为0.6%~1.5%;方法回收率用3个质量浓度进行添加实验,回收率为95.9%~104.7%;定量限为1.1~3.3μg/m L;日间精密度的RSD为0.5%~1.6%(n=9)。86批降糖类保健食品中检出17批添加化学药,检出率为20%;样品中检出了格列本脲、盐酸苯乙双胍、马来酸罗格列酮、格列美脲、盐酸二甲双胍、盐酸吡格列酮。结论本方法通用性强,操作简单、快捷,可作为保健食品中非法添加13种降糖化学成分的有效检测方法。     

HPLC-MS/MS检测中药及保健品中添加的11种降糖类化学药物

 目的 建立HPLC-MS/MS方法 检测中药及保健品中非法添加的11种降糖类化学药物。方法 采用Phenomenex C₁₈ (4.6 mm×250 mm,5 μm) 色谱柱,梯度洗脱：流动相A为0.1％甲酸溶液(用氨水调节pH值至 3.2),流动相B为乙腈,检测波长为230 nm,流速为1 mL·min^-1(分流比为4∶1)。选择正离子全扫描方式检测,扫描范围：50～1 000 m/z。电喷雾参数：雾化器压力276 kPa,干燥气（N₂）温度350 ℃,流速9.0 L·min^-1,静电喷雾电压3 200 V,碰撞电压2 V。结果 在本色谱条件下, 11种临床常用的降糖药均有很好的分离。二甲双胍、苯乙双胍、罗格列酮、盐酸吡格列酮、格列吡嗪、甲苯磺丁脲、格列奇特、格列本脲、格列美脲,格列喹酮,瑞格列奈检测限均在1～25 ng之间。结论 本法简便准确,可作为保健品及中成药中非法添加降糖化学成分的快速筛查方法 。
     

盐酸吡格列酮胶囊生物等效性研究

 目的研究盐酸吡格列酮胶囊在健康人体内的药动学和相对生物利用度，进行生物等效性评价。方法20名男性健康志愿者双周期随机交叉单剂量po盐酸吡格列酮片剂和胶囊30 mg，服药间隔为1周，采用高效液相色谱法测定血浆中吡格列酮浓度。结果两种制剂主要药动学参数无显著性差异，片剂和胶囊的c_max分别为(1172.43±347.01)和(1 108.8±375.55)μg·L^-1；t_max分别为(2.16±0.89)和(1.79±1.10) h；t_1/2分别为(7.75±1.79)和(8.20±2.10) h；AUC_0～tn分别为(12 268.01±3 542.93)和(11623.17±4 038.65) μg·h·L^-1。盐酸吡格列酮胶囊的相对生物利用度为(94.48±15.78)%。结论方差分析和双向单侧t检验结果表明两种制剂具有生物等效性。     

TLC法和HPLC法测定保健食品山药片中非法添加化学药物

目的:寻找保健食品山药片中非法添加化学药物的定性鉴别方法。方法:采用TLC法、HPLC法对山药片中的化学药物进行定性分析。结果:两种方法均能清晰检出山药片中含有格列本脲、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍。结论:用TLC法快速筛查出样品中含有格列本脲、盐酸吡格列酮、盐酸二甲双胍后,使用HPLC法进行验证。     

HPLC-MS研究格列吡嗪片人体药动学和生物等效性

 目的建立准确、灵敏的HPLC-MS测定格列吡嗪片在血浆中的浓度,研究格列吡嗪片在健康人体中的药动学及生物等效性。方法18名健康男性受试者单次po 10 mg格列吡嗪片受试制剂和参比制剂后,按规定时间采集肘静脉血,经液-液萃取处理后选用Kromasil C₁₈分析柱(4.6 mm×150 mm,5μm);甲醇-水-甲酸(75∶25∶0.625)为流动相,采用LC-MS测定格列吡嗪的血药浓度,并计算两制剂的主要药动学参数及相对生物利用度。结果测定血浆中格列吡嗪的最低检测限为20μg·L^-1,在20～5 000μg·L^-1内线性关系良好;血药浓度测定的日内、日间精密度RSD均小于10%,测得格列吡嗪受试制剂和参比制剂的主要药动学参数t_max分别为(2.4±0.9)和(2.1±1.0)h,ρ_max分别为(1.2±0.3)和(1.3±0.4)mg·L^-1,t_1/2分别为(5.6±2.2)和(5.1±1.6)h,AUC_0-t分别为(7.6±2.9)和(7.5±3.1)mg·h·L^-1,AUC_0-∞分别为(8.4±3.3)和(8.1±3.3)mg·h·L^-1,受试制剂的相对生物利用度为(102.3±23.7)%。结论建立的HPLC-MS灵敏,准确;测定结果经统计学分析,表明格列吡嗪两种片剂生物等效。     

HPLC-MS同时测定人血浆中吡格列酮及其活性代谢产物的浓度

 目的建立高效液相色谱质谱联用测定人血浆中吡格列酮及其活性代谢产物M-Ⅲ(酮类衍生物)和M-Ⅳ(羟化衍生物)的方法。方法采用WatersXTerraTN C₁₈色谱柱(2.1mm×150mm,3.5μm),Phenomenex C₁₈保护柱,柱温50℃,流动相:乙腈-30mmol·L^-1醋酸铵溶液(含0.1%的甲酸和0.05%的三氟醋酸)(35:65),流速0.22mL·min^-1。质谱采用电喷雾电离源正离子模式(ESI⁺),选择性监测质荷比(m/z)357.4(吡格列酮),358.2(内标),371.5(M-Ⅲ),373.2(M-Ⅳ)的准分子分子离子峰;血浆样品经盐酸酸化后,采用叔丁基甲醚-氯仿提取,内标法定量。结果吡格列酮,M-Ⅲ和M-Ⅳ分别在11.16～1748.60,3.33～520.50,5.00～687.50ng·mL^-1内线性良好(r≥0.9997),最低检测浓度分别为2.90,1.10,1.20ng·mL^-1,3个化合物的方法回收率均在90%-110%范围内,日间和日内RSD皆小于15%。结论本方法操作简单,灵敏准确,稳定性好,适用于临床吡格列酮治疗药物监测,药动学及其药物相互作用的研究。     

UPLC-MS定性定量检测稳糖安胶囊中降糖类化学药品

目的:建立UPLC-MS方法,快速定性定量检测稳糖安胶囊中非法添加的降糖类化学药品.方法:采用超高效液相色谱串联四极杆质谱仪,色谱条件:Agela Venusil-C18(2.1 mm×50 mm,3μm)色谱柱,柱温35℃,流动相乙腈-0.01 mol·L-1乙酸铵(50∶50),流速0.2 mL· min-1.质谱条件:ESI源,多反应检测(MRM),监测离子对(m/z):瑞格列奈(453.4→86.0,453.4→230.3)、格列美脲(491.4→ 126.2,491.4→352.3)、格列本脲(494.2→168.5,494.2→368.9)、吡格列酮(357.2→119.0,357.2→134.1)、格列齐特(342.2→90.9,324.2→109.9)、格列吡嗪(446.2→92.6,446.2→102.6)、苯乙双胍(206.2→59.7,206.2→104.6)、二甲双胍(130.1→60.0,130.1→71.0).以保留时间和定性离子对之间的相对丰度定性,以定量离子对峰面积定量.结果:8种降糖化学药品瑞格列奈、格列美脲、格列本脲、盐酸吡格列酮、格列齐特、格列吡嗪、盐酸苯乙双胍、盐酸二甲双胍分别在4.056 ～ 129.792,13.912 ～ 125.184,3.92 ～ 125.44,3.944 ～ 126.208,4.056 ～ 129.792,4.232 ～ 135.424,4.072 ～130.304,4.264 ～136.448 ng·L-1均呈现良好的线性关系(r＞0.999);平均加样回收率均在98.18 ～100.95％;8种降糖化学药品含量重复性试验RSD ＜2.95％.结论:方法定性可靠、定量准确,且快速简便,可用于稳糖安胶囊中非法添加的降糖类化学药品检测.     

RP-HPLC检查中药保健品中的西药降糖成分

格列吡嗪、格列齐特、格列本脲、格列美脲、格列喹酮、盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍是临床上应用广泛的降糖类药物,由于这些原料的成本相对偏低,且见效快,一些不法分子经常在降糖类保健品和中药中擅自加入某种西药成分用来治疗糖尿病,为了快速鉴定出药物中是否含有这几种降糖药,本实验建立了两种HPLC,分别用于测定格列类降糖药和双胍类降糖药.两种HPLC检测均能在30 min内完成,由于中药的成分较多,相对于薄层色谱,本方法有较好的专属性.     

吡格列酮对糖尿病大鼠肾脏骨桥蛋白表达的影响

 目的 观察吡格列酮对糖尿病大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和造模组。链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠。造模成功的大鼠随机分为糖尿病组、吡格列酮3,15 mg·kg^-1·d^-1组。8周末测大鼠24 h尿微量白蛋白、血糖,血肌酐。HE染色观察肾组织形态,免疫组织化学法及逆转录-聚合酶链反应法分别测大鼠肾组织骨桥蛋白及骨桥蛋白mRNA的表达。结果 吡格列酮3 mg·kg^-1·d^-1组、吡格列酮15 mg·kg^-1·d^-1组血肌酐、微量白蛋白、肾质量/体质量较糖尿病组明显下降（P<0.05）。与糖尿病组比较,吡格列酮15 mg·kg^-1·d^-1组血糖明显降低（P<0.05）,吡格列酮3 mg·kg^-1·d^-1组血糖无明显改善,差异无统计学意义（P>0.05）。糖尿病组肾组织骨桥蛋白及骨桥蛋白mRNA表达水平较正常对照组明显升高（P<0.05）。吡格列酮3,15 mg·kg^-1·d^-1组肾组织骨桥蛋白、骨桥蛋白mRNA表达水平较糖尿病组均明显下降（P<0.05）。结论 糖尿病大鼠肾组织骨桥蛋白表达增加,提示骨桥蛋白可能参与糖尿病肾脏病变的发病过程。吡格列酮干预可以减少糖尿病大鼠尿微量白蛋白,对肾脏有保护作用。吡格列酮对肾脏的保护作用部分可能与吡格列酮抑制肾脏骨桥蛋白的表达有关。     

高效液相色谱-串联质谱法测定中药制剂中西地那非的含量

 目的建立一种简单、快速、灵敏、准确地鉴定中药制剂中是否添加西地那非的高效液相色谱串联质谱(LC/MS/MS)的分析方法。方法样品经C₁₈(4.6mm×250mm,5μm),流速200μL·min^-1,乙腈-0.05mol·L^-1乙酸铵(1:1)流动相进行分离。在ESI正离子采集模式下,采用LC/MS/MS的多反应监测(MRM)对西地那非进行定量监测,采用外标法定量。结果本方法满足分析要求,并对12种市场上中药中西地那非进行定量测定。结论目前市场中药制剂中存在添加西地那非的现象。     

HPLC-MS/MS 检测中药制剂及保健食品中添加 6 种减肥药物的研究

 目的 建立专属、灵敏的 HPLC-MS/MS 方法甄别中药制剂及保健食品中可能添加的氯噻嗪、盐酸西布曲明、酚酞、吲哒帕胺、布美他尼、吉非罗齐等 6 种化学减肥药物。 方法 样品经甲醇提取, 采用液相色谱 - 离子阱质谱联用法测定。色谱条件： Inertsil ODS-3 色谱柱 (4.6 mm × 250 mm , 5 m m) ,梯度洗脱： 流动相 A 为 0.1% 醋酸溶液;流动相 B 为乙腈, 质谱条件：离子源 ESI , 选择正负离子全扫描、选择离子监测 (SIM) 、多反应监测 (MRM) 方式检测临床常用的 6 种化学减肥药物,研究了这 6 种药物的质谱裂 解规律。 通过比较样品峰与对照品峰的相对分子质量、二级质谱碎片信息和液相色谱保留时间,确定样品中是否违法添加了化学药物 。 结果 应用本法 检测了 12 批市售减肥类中药制剂及保健食品 , 其中 1 种减肥保健食品中检出西布曲明及酚酞, 1 种减肥保健食品中检出西布曲明,另外 2 种减肥保健食品检出酚酞 。 结论 该法 简便、快捷,灵敏度高、 专属性强,可作为 检测中药制剂及保健食品中非法掺入减肥类化学药的有效手段 。     

UPLC-MS/MS测定降压类中成药及保健品中30种化学药

 目的 建立一种测定降压类中成药及保健品中添加30种化学药的超高效液相-串联四级杆质谱方法。方法 多反应监测模式测定,以Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱进行分离,甲醇-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速：0.2 mL·min^-1。离子化模式：ESI⁺。结果 30种化学药测定的线性范围分别在10～1 000.0, 0～400.0, 2.0～400.0 μg·L^-1,r分别在0.990 3～0.999 8之间,检出浓度分别在0.01~0.83 μg·L^-1之间, 3个水平的回收率分别在72.2%～123.4%之间。结论 该方法快速、准确、灵敏,可用于降压类中成药及保健品中添加30种化学药的测定。     

HPCE测定治疗哮喘中药中非法添加的氨茶碱药物成分

 目的建立治疗哮喘中药中可能非法添加化学药物成分氨茶碱的HPCE检测方法。方法以100mmol·L^-1磷酸盐缓冲液(磷酸调节pH7.0)为电泳介质,未涂层弹性石英毛细管(50μm×48cm,有效长度40cm)为分离通道,检测波长270nm,压力进样(5kPa×10s),内标法测定含量。结果2种治疗哮喘中药中检测到化学药物成分氨茶碱;氨茶碱在10～250mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9996),样品加样回收率为98.05%,RSD为1.32%。结论方法简便快捷,准确可靠,可作为治疗哮喘中药中非法掺入化学药物成分氨茶碱的有效检验方法。     

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??OBJECTIVE To establish a method for rapid screening and quantification of 24 anti-inflammatory painkillers illegally added in traditional Chinese medicines and health foods by UPLC-quadrupole/electrostaticfield orbitrap high resolution mass spectrometry. METHODS The separation was performed on a Thermo Acquity UPLC system with a Hypersil Gold C₁₈ column with gradient elution of acetonitrile and 20 mmol??L^-1 ammonium acetate solution.Electrospray ionization of positive and negative ions and one and two high precision full scan were used for the MS detection. The qualitative and quantitative analyses were carried out by accurate and precise parent ion mass and product ion mass information. RESULTS The limits of detection(S/N??3) were 10.0-45.0 ??g??kg^-1. The average recoveries were 79.6%-98.3%. Thirty positive samples were detected among a total of 45 samples, resulting a positive rate of 66.7%. The detected components were paracetamol, diclofenac sodium, indometacin, and ibuprofen. CONCLUSION The method is simple, highly accurate, sensitive and selective, and can be used in rapid screening and quantitative analysis of illegally added anti-inflammatory painkillers in traditional Chinese medicines and health foods.     

同位素内标-气相色谱串联质谱法测定中药材中多环芳烃残留量

 目的 建立GC-MS/MS测定中药材中16种多环芳烃的残留量,为评价中药质量安全提供有效分析手段。方法 采用同位素内标法,样品以乙酸乙酯提取后,经C₁₈固相萃取小柱净化。GC-MS/MS测定,加入分析保护剂校正基质效应,色谱柱为DB-5 ms(0.25 mm×30 m,0.25 μm),程序升温,MRM模式检测。结果 16种典型多环芳烃在1~100 ng·mL^-1内呈线性关系;在1~25 μg·kg^-1内的平均回收率为88.53%~119.03%,RSD为1.25%~14.70%(n=3);方法定量限为0.2~1 μg·kg^-1。结论 本方法专属性强、灵敏度高、测定结果准确,可用于中药材中16种典型多环芳烃的残留检测。     

UPLC-MS定性定量检测中成药中非法添加的盐酸克仑特罗

目的:建立UPLC-MS方法,快速定性定量检测中成药中非法添加的盐酸克仑特罗.方法:采用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱仪.色谱条件:Agela Venusil MP-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3μm),柱温35℃,流动相甲醇-0.2％甲酸水溶液(50:50),流速0.3 mL·min-1.质谱条件:ESI源,多反应检测(MRM).以保留时间及定性离子对之间的相对丰度定性,以定量离子对峰面积定量.结果:盐酸克仑特罗在1.092～27.300 μg·L-1呈现良好的线性关系(r＞0.9998);平均加样回收率97.26％;定量限为0.19 pg.结论:本方法定性可靠、定量准确,且快速简便,可用于中成药非法添加盐酸克仑特罗化学药品的检测.     

LC-MS/MS测定盐酸他利克索与美多芭联合用药的人体药动学

 目的建立液相色谱-串联质谱法研究盐酸他利克索与关多芭联合用药在健康志愿者体内的药动学行为。方法以盐酸克仑特罗为内标,血浆样品经乙酸乙酯提取,Lichrospher C_6H_6柱分离后电喷雾正离子化选择性反应检测。12名健康志愿者(男女各半)按随机双交叉试验设计,研究单剂量口服盐酸他利克索片(0.4 mg)及与美多芭片(0.25 g)联合用药后的药动学。结果盐酸他利克索在0.10～10.0μg·L^-1内呈现良好线性,方法回收率为80.8%～86.2%。日内、日间精密度的RSD分别为0.5%～4.8%和2.4%～8.6%。两种服药方式后盐酸他利克索的主要药动学参数ρ_max,t_max,t_1/2,MRT,AUC_0-36,AUC_0-∞,CL/F和V_d/F分别为(0.96±0.12)和(0.89±0.16)μg·L^-1,(1.4±0.9)和(1.4±0.9)h,(11.37±1.99)和(11.61±1.80)h,(15.90±2.95)和(16.35±2.60)h,(9.66±1.33)和(9.36±1.58)μg·h·L^-1,(11.07±1.72)和(10.82±1.98)μg·h·L^-1,(37.9±7.50)和(40.5±10.0)L·h^-1,(650±186)和(601±167)L。经单因素方差分析及独立样本t检验分析单剂量口服盐酸他利克索片及与美多芭片联合用药后的主要药动学参数均无显著性差异。结论建立的LC-MS/MS测定法准确、灵敏,专属。美多芭对盐酸他利克索的药动学行为没有明显影响。