PCR—RFLP法检测上海地区汉和载脂蛋白E基因型

载脂蛋白Ｅ基因位于第１９号染色体上，与载脂蛋白ＣＩ及ＣⅡ基因紧密连锁，其编码第１２及第１５８位氨基酸的密码子具有多态性。研究运用聚合酶链反应扩增该基因第４号外显子内２９２ｂｐ片段，以限制性内切酶ＨｈａⅠ酶解，最后对酶解产物进行聚丙烯胺凝胶电泳，根据电泳带型判断载脂蛋白Ｅ基因型。     

小鼠T细胞淋巴瘤在同基因鼠内传代的遗传学分析

作者研究了甲基亚硝基脲（ＭＮＵ）诱发ＲＦ／Ｊ系小鼠Ｔ细胞淋巴瘤及肿瘤细胞在同基因小鼠体内连续传代后的染色体变化。胸腺肿瘤细胞及其传代培养细胞染色体异常，皆发生在１５、１４、Ｘ、１、５、６、３号染色体，说明这些染色体含有促进肿瘤多步发生过程的基因即癌基因及抑癌基因。ＭＮＵ不仅具有组织特异性而且累及特异染色体，结果也说明相同组织病理类型的肿瘤可产生于不同的特定位点的基因变化。     

筑巢式PCR等多项指标对小儿急性白血病微量残留病的监测

①目的　探讨采用筑巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ）等多项指标监测小儿急性白血病（ＡＬ）微量残留病（ＭＲＤ）的临床意义。②方法　对１５２ 例ＡＬ在形态学、免疫学和细胞遗传学（ＭＩＣ）分型诊断的基础上,结合Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ,姐妹染色单体交换（ＳＣＥ）、染色体核型分析方法进行ＭＲＤ监测。③结果　对５８ 例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）进行了Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖδ２Ｄδ３ 基因重排监测,其中８３％ 的Ｂ－ＡＬＬ和２５％ 的Ｔ－ＡＬＬ具有此基因重排,检测灵敏度为１０－ ５～１０－ ６ ．对４４ 例ＡＬＬ进行了ＭＲＤ动态监测,结果显示化疗期间ＰＣＲ由阴性转为阳性或持续阳性者,易引起骨髓复发、死亡。ＰＣＲ转阴时间有明显个体差异性。持续完全缓解３ 年以上的ＡＬＬ病儿ＰＣＲ持续阴性可作为停药治疗的可靠指标。对７６ 例ＡＬ进行了ＳＣＥ动态监测,结果表明ＳＣＥ频率变化与疾病的严重程度呈平行关系。对６１ 例ＡＬ进行了染色体核型动态监测,结果表明初发ＡＬ染色体核型正常者亦有ＤＮＡ 严重损伤。④结论　在ＭＩＣ分型诊断的基础上,采用Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ,ＳＣＥ,染色体核型分析等多项指标进行ＡＬ的ＭＲＤ动态监测、综合分析评价,对指导治疗、预测复发及判断     

肿瘤转移基因调控的研究进展

肿瘤转移是一个复杂多步骤的癌细胞与宿主细胞相互作用的连续过程 ,原发肿瘤细胞必须先脱离原发部位 ,侵入胞外基质 (ＥＣＭ)与基底膜 (ＢＭ)和ＥＣＭ中一些大分子蛋白黏附 ,并激活细胞合成分泌各种降解酶类 ,降解ＢＭ与ＥＣＭ而移动并穿过ＥＣＭ ,侵入脉管壁进入循环 ,在循环中运行并逃避免疫系统攻击 ,再穿出脉管壁达到继发部位形成克隆 ,增殖形成转移灶。肿瘤转移过程受到多种因子的调控 ,本文就主要的调控基因综述如下。1　肿瘤转移分子机制的基因调控1.1　癌基因和抑癌基因与肿瘤转移的关系　癌基因的活化及过度表达和抑癌基因的失活 ,…     

抗病毒药物对CHB病人离体培养外周血淋巴细胞的遗传学影响

应用３种不同抗乙型肝炎病毒药物，以单独和联合用药的方式，离体处理慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）病人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ），分别观察姊妹染色单体交换（ＳＣＥ）平均频率、脆性位点（ＦＳ）和ＨＢＶ标记物（ＨＶＢＭ）等多项实验指标。结果表明，９个实验组均能显著地降低ＣＨＢ病人ＰＢＬ－ＳＣＥ频率，具有显著的ＨＢｅＡｇ，ＨＢＶ－ＤＮＡ的阴转率和ＡＬＴ的复常率，说明人白细胞干扰素等３种抗病毒药物均具有体外诱导ＣＨＢ病人ＤＮＡ损伤的修复作用。染色体核型中第１，２，３号染色体可能易受ＨＢＶ的侵袭。     

小儿急性白血病的细胞遗传学研究

对８０例小儿急性白血病（ＡＬ）进行了骨髓染色体检查。结果表明，在７１例初诊及复发的ＡＬ中，７０．０％的急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）、５２．６％的急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）及６６．７％的杂合性白血病（ＨＡＬ）有异常核型，６例完全缓解（ＣＲ）及３例长期持续完全缓解（ＣＣＲ）病儿的核型均正常。对２７例病儿进了不同时期染色体核型的动态观察表明，染色体核型类型与临床及预后的关系十分密切。具有ｔ（８；２１）伴Ｙ染色体丢失者多见于ＡＭＬ－Ｍ２型且预后不良；６ｑ－多见于ＡＬＬ－Ｌ，Ｌ２型，预后较好；ｉｎｖ（１６）主要见于ＡＮＬＬ－Ｍ４ＥＯ型。出现继发性染色体改变及亚二倍改变的ＡＮＬＬ较ＡＬＬ预后差，具有多倍体核型者预后极差。提示骨髓染色体检查对小儿急性白血病诊断分型、指导治疗及判断预后都有一定的价值。     

CD_(44)变异体、p16基因蛋白在肿瘤中的研究进展

1　ＣＤ44 的结构、主要功能及异常表达的临床意义细胞与细胞间、细胞与基质间互相连接 ,形成特定的组织结构 ,这种互相连接的分子基础就是细胞间黏附分子。ＣＤ44是一种分布广泛的跨膜糖蛋白 ,属于未分类的黏附分子 ,具有促进细胞间黏附、参与信号传递等多种生物学功能 ,近年来研究发现 ,高表达ＣＤ44 分子的肿瘤细胞通过与细胞外基质(ＥＣＭ)、血管内皮细胞的黏附 ,赋予肿瘤细胞很强的侵出行为及迁移能力 ,从而构成肿瘤细胞的侵袭性和易转移性。1.1　ＣＤ44 的结构　人类ＣＤ44 基因位于 11号染色体短臂上 ,有 2 0个高度保守的外显子 ,按…     

恶性疟原虫海南,云南,安徽株裂殖子表面抗原MSA1第二区基因…

应用ＰＣＲ技术扩增并克隆恶性疟原虫海南，云南，安徽３个地理株ＭＳＡ１第二区基因，测定并分析其基因序列。结果表明，海南，云南安徽株扩增片段长度为４２３ｂｐ，基因序列完全相同，我国虫株ＭＳＡ１与ＷＥＬＬＣＯＭＥ株最为相似，存在ＭＡＤ和Ｋ１两种等位基因型的基因内重现现象。     

鼻咽癌细胞中MDM2基因扩增与表达的研究

应用斑点杂交和半定量逆转录－多聚酶链反应技术对３２例鼻咽癌（ＮＰＣ）标本,１０例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）标本,ＮＰＣ细胞株进行ＭＤＭ２基因扩增与表达的检测。结果显示;１例ＮＰＣ有ＭＤＭ２基因的扩增,ＮＰＣ细胞株ＨＯＮＥ１和１０例ＮＰＣ有ＭＤＭ２ ｍＲＮＡ高表达,ＣＩＮＥ无ＭＤＭ２基因的扩增及ｍＲＮＡ的高表达。     

恶性疟原虫海南、云南、安徽株裂殖子表面抗原MSA1第二区基因的克隆和序列分析

应用ＰＣＲ技术扩增并克隆恶性疟原虫海南、云南、安徽３个地理株ＭＳＡ１第二区基因，测定并分析其基因序列。结果表明，海南、云南、安徽株扩增片段长度为４２３ｂｐ，基因序列完全相同，我国虫株ＭＳＡ１与ＷＥＬＬＣＯＭＥ株最为相似，存在ＭＡＤ和Ｋ１两种等位基因型的基因内重组现象。     

白血病细胞系APAF-1 cDNA类型与基因表达关系的研究

目的:探讨白血病细胞系APAF-1cDNA的结构差异及其与基因表达的关系。方法:应用RT-PCR结合测序方法研究白血病细胞系K562和CEM/VLB100APAF-1cDNA类型;应用RT-PCR和Westernblot方法分析两个细胞系APAF-1基因的表达水平;检测caspase-3活性以比较APAF-1基因在两个细胞系的功能差异。结果:测序结果K562和CEM/VLB100APAF-1cDNA分别属于APAF-1XL和APAF-1L型,两个细胞系APAF-1mRNA表达水平无差异。K562细胞中APAF-1蛋白表达水平和caspase-3活性明显低于CEM/VLB100。结论:APAF-1的结构差异影响了APAF-1蛋白表达水平,可能是造成caspase-3活性降低的重要原因。     

红霉素对人类白血病细胞系CCRF-CEM/VLB100耐药性逆转作用的研究

本文报告,亲脂性抗生素红霉素在体外培养条件下,成功地逆转了人类淋巴细胞白血病细胞系CCRF-CEM/VLB100对长春花碱的耐药性。免疫荧光检测证实,耐药细胞膜上有P-糖蛋白高表达,阳性率为94％;敏感细胞则无P-糖蛋白表达。耐药细胞经红霉素作用后,P-糖蛋白阳性半降至30％以下。据此认为,红霉素使耐药细胞膜上P-糖蛋白表达降低,阻断了耐药细胞泵出药物的功能,可能是其逆转耐药性的基础。我们首次将红霉素用于人类白血病细胞系,对耐药性逆转作用的实验研究及临床应用均有积极的意义。     

STUDY OF GIANT GROUP A MARKER CHROMOSOME IN SEVERAL BURKITT'S LYMPHOMA AND LYMPHOBLASTOID CELL LINES WITH EPSTEIN-BARR VIRUS FROM DIFFERENT ORIGINS

Several Burkitt's lymphoma and lymphobla- stoid cell lines with Epstein-Barr virus derived from different origins have been investigated cytogenetically. Giant group A marker chromosome was detected only in three lymphoblastoid cell lines from nasopharyngeal carcinoma (NPC'). With the exception of the HS2-1B lymphoblastoid cell line derived from a normal donor, the giant group A marker chromosome could not be found in the cell lines from the other sources, including P3HR-l, B95-8, Raji and lymphoblastoid cell lines from tonsil and so on. The results suggest that the giant group A marker chromosome might be associated with NPC. It has been proved by G-banding technic that this giant submetacentric group A chromo- some was formed by the translocation of the short arm of chromosome 3, breaking at the point near to or even involving its centromere, to the distal light band region of the long arm of chromosome l, namely t (1;3) (lp ter ->lq 44:: 3p11+3p ter) and t (1;3) Qp ter+lq 44::3q2b 3p ter). The occurrence rate of the marker chromo- some was only 6.670 half a year after CNL8 cell line was established; 82.0'70 after two years; and 100'/o after five years. The occurrence rate of the marker chromosome was 32To half a year after the NPC80 cell line had been established, and 72a/o after three years. Increase in the oc- currence rate of the marker chromosome in these cell lines was clearly paralleled to the time of the cell lines culture in vitro. In addition, the occurrence rate of the marker chromosome was not the same in differ- ent cell lines. It was only 6.670 half a year after CNL8 cell line was established, while it was 32% for NPC 80 and 63.3'70 for CNL5.     

雄黄对T淋巴细胞白血病细胞系CEM的促凋亡作用

目的 观察雄黄对人类T淋巴细胞白血病细胞凋亡的影响。方法 人类T淋巴细胞白血病细胞系CEM体外培养，采用MTT法测定对细胞生长的抑制率，流式细胞仪分析细胞周期，并检测凋亡相关蛋白Apo2．7和Fas的表达。结果 雄黄体外对CEM细胞的生长有抑制作用，流式细胞仪检测可见亚二倍体的凋亡细胞和凋亡相关蛋白Apo2．7表达的升高，对细胞周期的影响表现为G2／M期的阻滞，而对Fas蛋白的表达没有影响。结论 雄黄有诱导CEM细胞凋亡的作用。     

CEM／ADM多耐药细胞株的P170－糖蛋白的表达

本文利用免疫荧光法对肿瘤细胞ＣＥＭ，ＣＥＭ／ＡＤＭＰ１７０－糖蛋白进行了检测，结果显示：敏感细胞全部为阴性，而耐药细胞株Ｐ１７０－糖蛋白呈过度表达，其过度表达细胞数随肿瘤细胞对抗癌药物耐受性增强而增加，其中ＣＥＭ／ＡＤＭ多耐药细胞株的Ｐ１７０－糖蛋白过度表达细胞为９２％。     

冬凌草甲素抗T细胞急性淋巴细胞白血病效应的实验研究

目的 探讨冬凌草甲素对T细胞急性淋巴细胞白血病的抗白血病效应及其机制。方法 以T细胞急性淋巴细胞白血病细胞株CEM为研究对象,应用改良MTT法测定不同浓度及不同时间冬凌草甲素对CEM细胞增殖和生存率的影响,计算72 h的半数抑制浓度（IC50）;显微镜下观察5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素处理24 h后CEM细胞的形态学变化;流式细胞术检测0.5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素作用24 h后CEM细胞的凋亡百分率;应用Western blot法检测7.5 μmol/L冬凌草甲素作用后细胞mTOR、P70、4EBP1、RAF、ERK、STAT5信号蛋白水平,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果 ①冬凌草甲素呈浓度及时间依赖性抑制CEM细胞增殖,作用72 h的IC50值为（7.37±1.99）μmol/L ;② 5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素作用24 h后CEM细胞边界不清晰,部分细胞崩解,且浓度越高,细胞形态改变越明显;③ 0、5、7.5、10 μmol/L冬凌草甲素作用24 h后,细胞凋亡百分率分别为（4.8±2.11）%、（19.03±2.54）%、（40.27±3.31）%;（57.23±6.69）%;④冬凌草甲素明显抑制CEM细胞mTOR、P70、4EBP1、RAF、ERK、STAT5信号蛋白的活化;下调CEM细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达。结论 冬凌草甲素可能通过抑制mTOR/P70(4EBP1)、RAF/ERK、STAT5信号蛋白的活化,以及上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2而发挥抗白血病作用。     

细胞培养法制备中华按蚊有丝分裂染色体及其G.C分带

用中华按蚊(Anopheles sinensis)的卵巢建立的细胞系(Anso242)的细胞制备高质量染色体,核型分析结果表明:双倍体细胞由3对染色体组成,两条X染色体的长臂不等长。长臂较短者(X_1)为亚中着丝粒,长臂较长的X染色体(X_2)和Ⅱ号、Ⅲ号常染色体均为中着丝粒染色体。细胞收获前用5—溴尿嘧啶(BrdU)处理,胰酶消化G带可显示丰富的带纹,类似于一般动物的G带带型、常染色体在着丝粒区为C带阳性,X_1染色体为长臂阳性,X_2长臂的近着丝粒端为阳性,末端有阴性带,这个阴性带是否在该蚊种的多线染色体中表达,并在性别作用中起作用?本文对此作了讨论。     

28例原发性闭经患者细胞遗传学研究

28例原发闭经患者经GTG核型分析,其中46,XX者10例,45,XO者9例,45,XO/46,XY者2例,45,X/47,XYY者1例,46,X,i(Xq)者3例,45,X/46,X,i(Xq)者1例,45,X/46,XXr者1例及46,XY睾丸女性化1例。染色体数目及结构异常皆属于Turner综合征,她们大多数有体矮,外阴幼稚型,第二性征发育差等体征。一例45,X/47,XYY已剖腹探查具两种性服亦属两性畸形。一例环状染色体为Xp~-,部分枝型分析为45,X/46,X,r(X)(p~(11)q~(28))。此外,本文对X染色体异常导致原闭及其对临床表型影响作了讨论。     

CYTOGENETIC STUDIES OF T-LEUKEMIA AND LYMPHOMA CELL LINES (MT-1 AND HUT-102) FINDING OF AN EARLY DUPLICATION REGION

The chromosomes of MT-I, an adult T-leukemic cell line, were studied, using the Brdu high resolu- tion technique. A particular chromosome region was found in the second cycle metaphases. The frequency of MT-1 cell with early duplication region (EDR) was about 6%. Five marker chromosomes (MI-M5) were found, 2 0f them, M1 and M4, were identified by the high resolution Gbanding technique. M1 was iso-2q and M4 10p-. EDR was located on the long arm (10ql1 10q25.1) of M4. The mechanism of EDR formation and its relationship with fragile site and HTLV are discussed.     

ESTABLISHMENT OF A HUMAN T-LYMPHOMA CELL LINE（H-TL90） AND ANALYSIS OF ITS BIOLOGICAL CHARACTERISTICS

We established a human T-lymphoma cell line from the cancerous ascites of a male patient with prostate cancer which was named H-TL90. This cell line was characterized by its histological features, and by chromosomal and immunological analysis. Immunophenotypic analysis revealed that the cells expressed surface antigen CD3^- CD4^- CD7^ CD8^-. Biological analysis revealed that the cell can promote lymphocyte proliferation. This suggested that the cell line has an autosecretion function. Cytogenetic analysis revealed that H-TL90 was a hyperdlploid with 47 chromosomes and had characteristic translocation between chromosome 3 and 11, and the deletion of the long arm of chromosome 6. These results demonstrated the H-TL90 cell line can be a useful modal for the study of human T-lymphoma.