血小板活化因子抑制T细胞蛋白激酶C的激活

目的：观察PAF对T细胞PKC激活的调节作用。方法：以CD3mAb(30ng/ml)或PMA（50ng/ml)/ionomycin(500ng/ml)活化T细胞，T细胞增生以3H胸腺嘧啶掺入法测定，IL－2生成用MTTI地测定，IL－2R（CD25）表达以流式细胞仪测定，PKC活性用Hauschildt所述方法测定。结果：PAF抑制由CD3mAb诱导的T－细胞增生，IL－2生成，CD25的表达和PKC的激活，虽然PAF对PMA／ionomycin诱导的T－细胞增生和CD25的表达也具有抑制作用，但是，对IL－2生成的抑制作用并不显著，结论：PAF除抑制PKC激活外，对PKC激活之前的信号传导过程亦有调节作用。     

白细胞介素16研究进展

白细胞介素 16 (IL 16 )过去称之为淋巴细胞趋化因子 (LymphocyteChemotacticFactor ,LCF) ,主要由CD8+T淋巴细胞分泌 ,属分泌型糖蛋白。IL 16能诱导CD4 +淋巴细胞 ,单核细胞及嗜酸性细胞迁移 ,诱导人CD4 +淋巴细胞和单核细胞的IL 2R表达 ,抑制混合淋巴细胞反应 ,抑制免疫缺陷病毒 1(HIV 1)的复制。     

结核杆菌抗原活化的γδT细胞中ZAP-70的酪氨酸磷酸化特点

目的　观察结核杆菌抗原 (Mtb Ag)活化的γδT细胞信号转导分子ZAP 70酪氨酸磷酸化的特点。方法　用Mtb Ag和抗CD3单克隆抗体 (CD3McAb)体外刺激人外周血单个核细胞(PBMC) ,诱导活化 ,在含IL 2的培养液中扩增培养 ,分别获得Mtb Ag激活的T细胞 (MtbAT)和CD3McAb激活的T细胞 (CD3AT)。再分别用Mtb Ag和CD3McAb刺激 ,在不同时间内提取细胞裂解液 ,用抗 酪氨酸磷酸化蛋白抗体作免疫沉淀 ,用抗ZAP 70单克隆抗体进行免疫印迹。结果　MtbAT中γδT细胞可达 6 0 %～ 80 % ,CD3AT中CD3 细胞可达 90 %以上 ,而γδT细胞 <10 % ;MtbAT细胞用Mtb Ag再刺激后 15min时出现ZAP 70的酪氨酸磷酸化 ,30min达高峰 ,可持续到 6 0～ 12 0min ,而CD3AT用CD3McAb再刺激后仅在 5min时检测到ZAP 70的磷酸化。结论　与CD3McAb对普通T细胞的作用比较 ,Mtb Ag刺激可优先活化γδT细胞 ,其对γδT细胞ZAP 70活化的特点是 :较慢、较强、较持久     

银杏内酯B对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖与凋亡的影响

目的银杏内酯B(GB)是已知的天然而强效的血小板激活因子(PAF)受体(PAFR)拮抗剂,本文研究GB对小鼠T淋巴细胞活化、增殖及凋亡3大体外行为的影响,初步探讨其潜在的免疫调节作用与机制,从而为临床应用提供可靠的实验依据。方法分离小鼠淋巴细胞,培养前以不同浓度的GB预孵;以刀豆蛋白A(Con A)诱导细胞的活化与增殖,以荧光抗体双色标记(anti-CD3 mAb-PE/anti-CD69 mAb-FITC、anti-CD3 mAb-PE/anti-CD25 mAb-FITC)结合流式细胞术分别检测T淋巴细胞早、中期活化标志--表面抗原CD69与CD25的表达,以活体荧光染料CFDA-SE标记结合流式细胞术检测细胞增殖并用MTT法佐证;以地塞米松(Dex)诱导细胞的凋亡,以荧光染料双色标记[DiOC6(3)/PI]结合流式细胞术区别凋亡、死亡与活细胞群。结果 Con A刺激后6 h和24 h,T细胞早期活化标志CD69和中期活化标志CD25分别大量表达,Con A刺激后48 h活化的T细胞增殖至第4代,而经终浓度为5、10、20μmol/L GB在Con A刺激前对细胞进行4 h预孵处理可以显著下调T细胞表面抗原CD69、CD25的表达并能有效抑制细胞增殖。Dex诱导后12 h细胞凋亡和死亡群显著增大,而经同样的GB预孵处理可以在一定程度上抑制细胞的凋亡进程,对细胞凋亡显示出一定的保护作用。结论 GB能有效抑制小鼠T淋巴细胞的活化与增殖,并且对细胞凋亡起到一定的保护作用,凭借GB对T细胞此3大行为出色的调节作用,理应将其作为天然的免疫抑制剂候选者进行更深入的研究。     

抗T细胞单克隆抗体(Anti-CD28)和单核细胞产生的IL-6在诱导T细胞对IL-2应答中的协同作用

CD28(原名TP44)是分子量为44kd 的膜抗原,表达于大多数外周血CD4~+细胞和部分CD8~+细胞表面;在CD11b~+细胞、B 细胞和Ts 前体细胞均不表达。已往研究发现,抗CD28单抗(McAb9.3)能促进外周血T细胞对丝裂原及抗原的增殖应答;与PMA共同作用,抗CD28McAb 对T 细胞有丝裂原作用;用抗小鼠IgG 抗体与McAb9.3交联后,再与T 细胞表面的CD28结合,可诱导T细胞内钙离子浓度升高并表达IL-2受体。因而称之为T 细胞活化的第三途径。本文进一步分析了McAb9.3对T 细胞的作用。     

抗-CD2单克隆抗体诱导受体变化-CD2和CD3的相互作用

抗CD3MCAb和抗CDZMcAb都能延长移植物存活期并使各自的受体表达暂时下凋。抗CD2McAb也能协同抗CD3McAb延长移植物存活期和诱导耐受。该文用免疫荧光染色后细胞计数仪在体外进一步研究了抗CD2和抗CD3单抗联合作用对小鼠T细胞及其亚群受体表达的影响，并用Northern杂交法测定了细胞内CD2和CD3mRNA的水平。结果显示抗CD2McAb12－15加入用尼龙棉纯化的小鼠脾脏T淋巴细胞培养物中，使T淋巴细胞CD2的表达从72.6％（McF0.68）下降到41.5％（McF为0．45），而CD3的表达不变。抗CD3MCAb2C11使CD2表达从72.6％（McF为0．68）上…     

IL-13与支气管哮喘

支气管哮喘是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的慢性气道炎症。哮喘的发生过程中有多种细胞因子参与 ,白介素 13(IL 13)是近年来新克隆的淋巴因子。IL 13作为Th2型细胞因子成员 ,具有多种生物学功能。通过激活嗜酸性粒细胞 ,减少其凋亡 ,促进IgE分泌等机制 ,参与哮喘炎症的维持 ,诱导气道高反应性及小气道结构重建     

淋巴细胞趋化素──IL-6

IL－16又名淋巴细胞趋化素，是多肽细胞团子，既可诱导细胞的能动性，又可活化T淋巴细胞，其单作为14KD，必须自凝集为56KD的四聚作才能发挥生物活性。IL－16由CD8＋T淋巴细胞产生，作用于表面表达CD4的细胞。根据IL－16的生物活性作用方式，它与人类疾病密切相关。     

057 白细胞介素16研究进展

白细胞介素-16(IL-16)过去称之为淋巴细胞趋化因子(Lymphocyte Chemotactic Factor，LCF)，主要由CD8+T淋巴细胞分泌，属分泌型糖蛋白。IL-16能诱导CD4+淋巴细胞，单核细胞及嗜酸性细胞迁移，诱导人CD4+淋巴细胞和单核细胞的IL-2R表达，抑制混合淋巴细胞反应，抑制免疫缺陷病毒-1(HIV-1)的复制。     

γc家族新成员:白细胞介素21

白细胞介素 2 1(Interleukin 2 1,IL 2 1)是最近发现的γc家族新成员 ,和IL 2、IL 15、IL 4高度同源 ,主要由活化的CD4 + T细胞产生。IL 2 1受体复合体由特异的IL 2 1受体识别亚单位和γc信号传导亚单位组成 ,高表达于胸腺、骨髓基质细胞、外周B细胞和NK细胞。IL 2 1能促进骨髓NK细胞增殖与分化 ,与抗CD4 0抗体协同刺激B细胞增殖 ,与抗CD3抗体协同刺激T细胞增殖。     

R848协同CD3抗体诱导C57BL/6小鼠脾脏淋巴细胞功能改变

目的观察并初步分析1-[4-amino-2-(ethoxymethyl)imidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-2-methylpropan-2-ol(R848)协同CD3抗体诱导C57BL/6小鼠脾脏中淋巴细胞发生的功能改变。方法分离正常C57BL/6小鼠脾脏的淋巴细胞,分别在anti-CD3、R848及anti-CD3+R848的作用下培养72 h。通过MTT法观察淋巴细胞的增殖情况;采用ELISA的方法检测脾脏淋巴细胞的IFN-γ和IL-4的产生情况;使用细胞内细胞因子染色的方法检测CD4+T和CD8+T细胞的IFN-γ和IL-4的产生情况;再用细胞表面分子染色的方法检测R848诱导不同淋巴细胞群活化的情况。结果单独使用R848对淋巴细胞的增殖作用不明显,但anti-CD3+R848可促进淋巴细胞的增殖;R848能辅助anti-CD3明显诱导脾CD4+T和CD8+T细胞分泌IFN-γ和IL-4;R848能够使淋巴细胞活化,且以B细胞亚群为主。结论 R848能够协助CD3抗体促进脾脏淋巴细胞的增殖,分泌IFN-γ和IL-4,其机制与R848能明显促进B淋巴细胞活化有关。     

嗜酸性粒细胞活化趋化因子与支气管哮喘的研究进展

嗜酸性粒细胞活化趋化因子(Eotaxin)是CC趋化因子家族成员之一,由结构性细胞和渗出性炎症细胞产生,是嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和Th2型细胞因子的化学激活趋化剂,通过其受体(CCR3)选择性地诱导嗜酸性粒细胞在肺内黏附、募集和脱颗粒。     

地塞米松或茶碱对血小板活化因子诱导的嗜酸性粒细胞活化的影响

目的:血小板活化因子(PAF)可诱导嗜酸性粒细胞(EOS)脱颗粒产生低密度嗜酸性粒细胞(HE),本研究旨在探讨地塞米松、茶碱对上述过程产生的影响。方法:分离正常人外周血EOS,观察不同密度EOS的组织学差别,测定地塞米松、茶碱对PAF诱导的EOS脱颗粒和正常密度EOS(NE)向低密度EOS(HE)转化的影响。结果:低密度嗜酸性粒细胞颗粒缩小;10^-5mmol/L地塞米松或10mg/L茶碱可使17.87%±2.16%或14.08%±2.42%的正常密度嗜酸性粒细胞转化为低密度嗜酸性粒细胞,与血小板活化因子组比较差异显著(P<0.05,P<0.01);同样浓度的地塞米松和茶碱分别使PAF诱导的嗜酸性粒细胞过氧化物酶的释放量下降至(101.17±10.32)mg/L、(110.85±4.16)mg/L及(100.53±9.65)mg/L、(106.94±10.11)mg/L(P<0.05,P<0.01)。结论:EOS脱颗粒是HE产生的原因之一;地塞米松、小剂量茶碱可以抑制PAF对EOS的活化,这可能是它们抗炎作用的机制之一。     

TGF-β诱导猪CD4+ T细胞来源的foxp3high调节性T细胞

目的:应用TGF-β2诱导猪CD4 T细胞,分析其细胞表型,并鉴定其免疫生物学特性。方法:用磁珠阳性分选的方法从健康猪外周血淋巴细胞中获取CD4 T细胞,应用TGF-β2诱导培养、扩增CD4 T细胞,监测其细胞表型和foxp3表达,采用混合淋巴细胞培养鉴定其免疫生物学特性。结果:TGF-β2能够诱导CD4 T细胞高表达foxp3,诱导扩增的细胞能抑制同基因CD4 CD25-T细胞的活化,具有免疫抑制功能。结论:TGF-β2能够诱导CD4 T细胞成为具有与天然CD4 CD25 调节性T细胞相似抑制活性的细胞。     

外周血嗜酸粒细胞释放的O_2~-的检测

为探讨外周血嗜酸粒细胞在IL 3、TNF α、IFN γ、佛波酯 (PMA )等刺激剂诱导下释放超氧离子 (O2 )的能力 ,我们采用超氧化物歧化酶 (SOD ) 抑制细胞色素C还原法检测嗜酸粒细胞产生O2 的量 ,结果发现 :(1)一定浓度的IL 3、PMA、TNF α能诱导嗜酸粒细胞释放大量的O2 ,与空白对照有显著性差异 ,而且以PMA的诱导能力最强 ;(2 )IFN γ的刺激量高达 10 0 0u/ml时 ,也不能有效促进嗜酸粒细胞释放O2 ,与空白对照无显著性差异 ;(3)健康献血者与哮喘等变应性疾病患者的外周血嗜酸粒细胞在相同的刺激剂诱导下释放的O2 量无显著性差异。以上结果说明 :IL 3、PMA和TNF α是嗜酸粒细胞产生O2 的强有力的诱导剂 ,而IFN γ则无此作用 ,从而提示应用IL 3、PMA和TNF α的拮抗剂有可能抑制嗜酸粒细胞释放O2 。     

SEB活化的人外周血T细胞CD25,CD69的表达

本文用超抗原葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导外周血淋巴细胞增殖。结果显示出微量超抗原能诱导外周血淋巴细胞的增殖,大量的增殖反应发生在SEB刺激后的第5天,增殖的细胞是CD4~+T细胞,它们由刺激前的27％增加到42％。外周血活化的T细胞不依赖外源性IL-2:大量内源性IL-2的存在抑制T细胞的增殖反应。伴随CD4~+T细胞的增殖,CD25和CD69分子表达明显增加。提示SEB能改变外周血T细胞表面的分子表达。     

T200类糖蛋白参与人T细胞旁路活化途径

T细胞可通过T细胞受体和CD_2旁路途径活化。为了研究影响T细胞旁路活化途径的细胞表面分子,作者检测了分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤上清对anti T11_2+anti-T11_3(anti T11_(2/3)刺激的T 细胞旁路活化途径的影响。结果发现,名叫TA/211的McAb 其本身并不激活T 细胞增殖,但能引起亚适量的anti T11_(2/3)刺激T 细胞产生强烈的增殖反应,经免疫沉淀和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析发现,TA/211从静止T 细胞沉淀分子量为180KD、190KD、200KD 和220KD 的四条带上,表明TA/211识别人CD45分子上的共同抗原决定簇。有     

树突状细胞负载肝癌可溶性抗原后的免疫应答

目的 用负载肝癌可溶性抗原的DC诱导肝癌特异性T细胞。方法 在体外用GM－CSF和IL－4诱导健康人外周血单核细胞，使其分化为高纯度树突状细胞（DC）。用负载人肝癌细胞株SMMC－7721可溶性抗原的DC诱导自身淋巴细胞。结果 诱导后淋巴细胞增殖指数大于1．5，表面CD56分子表达下降，CD3^ T/CD4^ T和CD3^ T/CD8^ T细胞比例增加，以CD3^ T/CD4^ T细胞比例增加最为明显。CD4／CD8比例由诱导前的0．84增加为1．04，活化前后γδ比例没有改变。活化后的淋巴细胞不但可杀伤SMMC－7721细胞，同时还可不同程度的杀伤其它3株肝癌细胞。另外，诱导7d的DC可不同程度的抑制4株肝癌细胞和胃癌细胞。结论 实验结果为肝癌DC疫苗的研究提供了理论基础。     

强直性脊柱炎TH亚群激活及T细胞活化状态研究

目的 :研究强直性脊柱炎 (AS)患者TH1 TH2细胞激活状态及T细胞活化状况 ,探讨其发病机理。方法 :运用流式细胞仪 (CBA)法检测 35例AS患者TH1(INF γ、TNF α、IL 2 )、TH2 (IL 10、IL 5、IL 4 )细胞因子水平以及外周血淋巴细胞CD3 、CD4 、CD8 T细胞、B细胞 (CD19 )、NK细胞 (CD16 5 6 )和CD3 HLA DR 、CD4 HLA DR 、CD8 HLA DR T细胞百分率 ,并与健康对照组比较。结果 :AS患者血浆TNF α水平、IL 2水平均显著低于健康对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,IL 10水平显著高于健康对照组 (P <0 0 5 )。CD3 、CD3 CD8 T细胞百分率显著低于健康对照。CD8 HLA DR T细胞百分率均显著低于健康对照 (P <0 0 5 ) ,CD4 HLA DR T显著高于健康对照 (P <0 0 5 )。结论 :AS患者血浆低水平的TNF α、IL 2和高水平的IL 10提示其体内存在着TH1 TH2平衡的偏移 ;TH1激活程度低下 ,而TH2激活程度增强 ,细胞因子水平的改变尤以TH1细胞因子TNF α改变特别明显。AS患者在多个层面存在细胞免疫功能紊乱     

逆转录病毒介导的小鼠IL-21基因在食管癌细胞中的表达

白细胞介素 2 1(interleukin 2 1,IL 2 1)是 2 0世纪末发现的细胞因子 ,与IL 2、IL 4及IL 15有同源性 ,但与IL 15相比 ,IL 2 1仅表达于活化的外周血CD4 T细胞上 ;IL 2 1受体也仅表达在淋巴组织 ,特别是活化的T细胞、B细胞和NK细胞。IL 2 1能诱导活化的T细胞增殖 ,促进自然杀伤细胞 (naturalkiller,NK)成熟 ,在抗肿瘤免疫应答中起重要作用 ,用鼠源IL 2 1进行的动物实验已显示出有效的抗肿瘤效果。本研究将小鼠IL 2 1基因 ,利用逆转录病毒载体转染人食管癌细胞T .Tn细胞株 ,得到阳性表达的肿瘤细胞克隆 ,用RT PCR、流式细胞…