CPUHY002对人肝微粒体CYP450酶体外抑制作用研究

目的：评价CPUHY002在体外对人肝微粒体细胞色素P450（CYP450）酶6种亚型酶活性的影响.方法：将CPUHY002与CYP450酶6种亚型的特异性探针底物非那西丁、双氯酚酸钠、奥美拉唑、右美沙芬、氯唑沙宗、丙酸睾酮与人肝微粒体进行孵育,采用LC-MS/MS法测定对应6种代谢产物对乙酰氨基酚、4-羟基双氯酚酸、5-羟基奥美拉唑、右啡烷、6-羟基氯唑沙宗、6β-羟基睾酮的浓度,求算出IC50.结果：CPUHY002对CYP2C19和CYP2E1的IC50值分别为48.02 μmol/L和47.19 μmol/L,对CYP1 A2、CYP2D6、CYP3A4和CYP2C9的IC50值＞100 μmol/L.结论：CPUHY002对于CYP2C19和CYP2E1具有弱抑制作用,对CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4和CYP2C9无抑制作用.     

“Cocktail”体外探针法评价补骨脂素对人肝微粒体P450酶亚型活性的影响

[目的]利用Cocktail体外探针法,测定补骨脂有效成分补骨脂素对人肝微粒体多种P450酶亚型活性的影响,为补骨脂临床联合用药安全提供参考。[方法]建立液质联用方法,同时测定人肝微粒体P450酶中各探针代谢产物6α-OH紫杉醇、α-OH咪达唑仑、4-OH甲苯磺丁脲、去甲基右美沙芬、7-OH香豆素、对乙酰氨基酚和6-OH氯唑沙宗的含量。通过Cocktail体外探针实验中补骨脂素对人肝微粒体P450酶各亚型的影响,证明补骨脂对人体肝脏的代谢有影响作用。[结果]所建立的液质联用方法精密可靠,符合生物样品测定要求,可用于人肝微粒体中各P450酶探针的代谢产物的定量分析。与对照组相比,补骨脂素组各底物的转化率均下降,其中香豆素的转化率下降最为显著,补骨脂素对其转化的抑制率为95.84%,而紫杉醇的转化的抑制最不明显,仅为10.39%。补骨脂素对其他几种底物的转化抑制率均在82%～91%之间。[结论]补骨脂素对人肝微粒体的CYP1A2、2A6、2C8、2C9、2D6、2E1和3A4亚型均有抑制,其中对CYP2A6、1A2和2D6 3种亚型的影响较为显著,表明补骨脂素对人肝微粒体P450酶不同亚型影响差异显著,长期给药补骨脂应关注药物联合用药安全。     

细胞色素P450介导的补骨脂酚代谢减毒

目的:分析补骨脂酚代谢的细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)表型,并在体外研究人肝微粒体(hu-man liver microsomes,HLM)对补骨脂酚代谢减毒的机制。方法:用HLM与化学抑制剂合用法以及人源重组CYP酶法分析代谢补骨脂酚的CYP酶亚型。用HPLC-MS法分析CYP亚型酶特异底物的代谢产物生成量,研究CYP酶广谱抑制剂1-氨基苯并三唑(1-aminobenzotriazole,ABT)对HLM中CYP亚型酶活性的抑制作用。用HPLC法分析补骨脂酚在HLM孵育液中的浓度,研究ABT对其代谢的影响。应用MTT法检测人肾近曲小管上皮细胞(human kid-ney-2,HK-2)的存活率来评价补骨脂酚对HK-2的毒性作用以及HLM中CYP酶和ABT对其毒性的影响。结果:HLM中的CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4参与了补骨脂酚的代谢,其中以CYP2C19的代谢转化率最高;2.5 mmol/L ABT能明显抑制0.5 g/L HLM中上述4种CYP同工酶活性,抑制率达到90%以上;2.5 mmol/L ABT对补骨脂酚在HLM的代谢抑制率为83.24%±2.13%。在HK-2细胞存活率实验中,ABT能显著降低HLM对30～90μmol/L补骨脂酚的代谢减毒作用(P0.05)。结论:HLM减低补骨脂酚HK-2细胞毒性的作用与HLM中CYP酶将补骨脂酚代谢转化为无毒或毒性较小的代谢产物有关,应用CYP酶广谱抑制剂能逆转HLM对补骨脂酚的代谢解毒作用。     

厚朴提取物对人肝微粒5种药物代谢酶活性的影响

目的观察厚朴提取物对人体肝微粒中5种主要药物代谢酶CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4活性的影响,为临床中西药联用提供理论依据。方法采用人体肝微粒体外孵育方法,以非那西丁、甲苯磺定脲、美芬妥因、氢溴酸右美沙芬和咪达唑仑作为CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的探针药物,采用液相色谱一质谱联用检测探针药物代谢产物生成速率,通过与空白组探针药物代谢产物生成速率比较,计算厚朴提取物对这5种酶活性是否具有影响。结果厚朴提取物在10mg／L浓度下,对CYP2C9和CYP2C19具有明显抑制作用,分别抑制了（94．9±0．4）％、（90．3±0．3）％的活性;对CYPlA2、CYP2D6和CYP3A4没有明显抑制作用;经对数拟合计算,得出CYP2C9和CYP2C19的IC50值分别为0．470、0．717mg／L。结论厚朴提取物对CYP2C9和CYP2C19的活性有较强的抑制作用,若与其他药物同时服用,可能会引起药物之间的相互作用,临床用药需谨慎。     

Cocktail探针药物评价姜黄对肝细胞色素P_(450)酶的影响

用Cocktail探针药物法 ,研究姜黄对大鼠肝细胞P4 50 (CYP4 50 )的影响。将SD雄性大鼠分组 ,给予姜黄的水提物 ,以生理盐水组为空白对照 ,以苯巴比妥组为阳性对照 ,通过HPLC检测Cocktail探针药物的代谢率来评价各组的CYP4 50 。结果 :给予姜黄组的大鼠CYP1A2和CYP2E1的水平显著低于对照组 ,CYP3A4的水平没有显著变化。表明 :姜黄对大鼠CYP1A2和CYP2E1有抑制作用 ,但对大鼠CYP3A4的影响不显著。     

Screening of the whole human cytochrome P450 complement (CYPome) with enzyme bag cocktails

We have previously introduced the use of permeabilized fission yeast cells (enzyme bags) that recombinantly express full-length CYPs for drug metabolism studies. Such enzyme bags are cells with pores that function as enzymes in situ. They can easily be prepared without a need for ultracentrifugation and may be used in similar protocols as microsomes. In this study we report the preparation of enzyme bag cocktails that permit the testing of multiple CYPs in a single enzyme bag reaction. Moreover, we established a convenient testing scheme that permits a rapid screen of all human CYPs for activity towards any given candidate substrate. An important aspect of this approach is the reduction of individual CYP test assays. If a cocktail containing many CYPs tests negative, it follows that all CYPs included in that cocktail need not be tested individually, thus saving time and resources. The new protocol was validated using two probe substrates.     

Inhibitory potential of three Yin-tonification herbal formulas on the activities of human major cytochrome P450 and UDP- glucuronosyltransferases isozymes in vitro

OBJECTIVE

To investigate the influence of Yin-tonification herbal formulas Jaeumganghwa-tang (Ziyin Jianghuo Tang, JEGHT), Ssanghwa-tang (Shuanghe Tang, SHT) and Yukmijihwang-tang (Liuwei Di huang Tang, YMJHT) on the activities of human major cytochrome P450 (CYP450s) and UDP-glucuronosyltransferases isozymes (UGTs) in vitro.

Effects of Traditional Herbal Formulae on Human CYP450 Isozymes

Objective:To assess the effects of traditional herbal formulae Sijunzi Decoction(四君子汤,Sagunja-tang,SJZD),Siwu Decoction(四物汤,Samul-tang,SWD),Bawu Decoction(八物汤,Palmul-tang,BWD)and Shiquan Dabu Decoction(十全大补汤,Sipjeondaebo-tang,SDD) on the activities of human cytochrome P450(CYP450),a drug-metabolizing enzyme.Methods:Herbal formula water extracts were filtered and lyophilized after the powder extracts were dissolved in distilled water.The activities of major human CYP450isozymes(CYP3A4,CYP2C19,CYP2D6 and CYP2E1) were measured using in vitro fluorescence-based enzyme assays.The inhibitory effects of the herbal formulas on the activities of CYP450 were characterized as half maximal inhibition concentration(IC_(50)) values.Results:All the tested herbal formulae inhibited CYP2C19activity(IC_(50):SJZD,83.28 μg/mL;SWD,235.54 μg/mL;BWD,166.82 μg/mL;SDD,178.19 μg/mL);SJZD(lC_(50) = 196.46 μ g/mL),SWD(IC_(50) = 333.42 μ g/mL) and SDD(IC_(50) = 163.42 μg/mL) inhibited CYP2E1-mediated metabolism;whereas BWD exhibited comparatively weak inhibition of CYP2E1(IC_(50) = 501.78 μg/mL).None of the four herbal formulas significantly affected CYP3A4 or CYP2D6.Conclusions:These results suggest that SJZD,SWD,BWD and SDD could potentially inhibit the metabolism of co-administered synthetic drugs whose primary route of elimination is via CYP2C19.In addition,clinically relevant pharmacokinetic interactions could occur when SJZD,SWD or SDD is co-administered with drugs metabolized by CYP2E1.Our findings provide information for the safety and effective clinical use of these four classic herbal formulas.     

桑叶提取物对大鼠体内细胞色素P450酶活性的影响

目的 采用“Cocktail”混合探针药物法,探究桑叶水提物（aqueous extract of mulberry leaves,AML）、桑叶醇提物（ethanol extract of mulberry leaves,EML）对大鼠体内细胞色素P450（cytochrome P450,CYP450）酶活性的影响,从代谢酶的角度预测它可能引起的药物相互作用,为临床合理用药提供参考。方法 选用非那西丁、安非他酮、双氯酚酸钠作为大鼠体内3种CYP450酶（CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9）的探针药物。雄性SD大鼠连续灌胃桑叶提取物14 d,第14天灌胃后30 min尾静脉注射混合探针药物,根据不同时间点采血。采用超高效液相色谱- 串联质谱测定各组血药浓度,用DAS 2.0和SPSS 21.0软件拟合药物代谢动力学参数并进行统计学分析。结果 连续灌胃桑叶提取物14 d后,与9.0 g/L氯化钠注射液相比,AML组中非那西丁、双氯酚酸钠代谢减慢,安非他酮则不明显;与羧甲基纤维素钠组相比,EML组中安非他酮、双氯酚酸钠代谢减慢,非那西丁则不明显。结论 AML对大鼠体内CYP1A2、CYP2C9可能存在一定的抑制作用,对CYP2B6可能无显著性影响;EML对大鼠体内CYP2B6、CYP2C9可能存在一定的抑制作用,对CYP1A2可能无显著性影响。     

脾肾阳虚大鼠脾中Ⅰ相和Ⅱ相药物代谢酶活性变化的研究

【目的】观察脾肾阳虚状态下大鼠脾脏中主要Ⅰ相和Ⅱ相药物代谢酶活性的改变。【方法】采用连续17 d灌胃大黄水煎液同时注射氢化可的松的方法复制大鼠脾肾阳虚模型,观察脾脏中6种Ⅰ相代谢酶(CYP2C19、CYP2D6、CYP2C9、CYP1A2、CYP2C8、CYP3A4)和4种Ⅱ相代谢酶[苯酚磺基转移酶(PST)、尿苷二磷酸葡醛酸转移酶1(UGT1)、谷胱甘肽转移酶(GST)、雌激素硫酸转移酶(SULT1E1)]的活性变化。【结果】模型组PST、UGT1、GST、SULTl E1活性显著低于正常组(P0.05或P0.01);CYP1A2活性显著高于正常组(P0.01),而CYP2C19、CYP2D6、CYP2C8、CYP3A4、CYP2C9等酶的活性无显著变化(P0.05)。【结论】脾肾阳虚状态下脾脏药物代谢酶特别是II相代谢酶的活性会发生显著改变。     

Identification of the metabolites of polybrominated diphenyl ether 99 and its related cytochrome P450s

Objective: To investigate the metabolites of polybrominated diphenyl ether 99 (BDE-99) and its related cytochrome P450s in an in vitro system. Methods: Rat primary hepatocytes were isolated and treated with BDE-99 for 24-72 h. Metabolites were then extracted from the hepatocytes and media, and detected by GC/MS. Several mRNAs of metabolic enzymes were also extracted from the same cells and the gene expression levels were determined using quantitative real-time PCR. In addition, selected recombinant cytochrome P450s (CYPs) were expressed in a bacurovirus/sf9 system, and these were further used to explore the metabolism of BDE-99 in vitro. The parent depletion approach was used for screening the ability of CYPs to eliminate BDE-99. Results: A reductively debrominated metabolite, BDE-47, and three oxidative metabolites, 2, 4, 5-tribromophenol, 5-OH-BDE-47, and 5'-OH-BDE-99, were identified from the BDE-99-treated rat hepatocytes, whereas no MeO metabolite was detected in the system. RT-PCR analysis showed that CYP 3A23/3A1, 1A2, and 2B1/2 were induced by BDE-99. Furthermore, using the heterological expressed CYP proteins in in vitro BDE-99 metabolism experiments we found that CYP1A2 and CYP3A4 showed the highest metabolic efficiency for BDE-99, with the metabolic clearance rates of CYP1A2 and CYP3A4 being 30.3% and 27.7%, respectively. CYP1A1 and CYP2A6 displayed relatively low clearance rates, while CYP2E1 seemed not to be associated with the BDE-99 metabolism. Conclusions: In our in vitro rat primary hepatocyte metabolism system, four metabolites of BDE-99 were identified, and CYP3A4 and CYP1A2 were demonstrated to be involved in the BDE-99 metabolism.     

芦荟大黄素的体外肝微粒体代谢动力学和代谢酶表型研究

目的 研究芦荟大黄素在人肝微粒体(HLM)和大鼠肝微粒体(RLM)的代谢特征,并确定其代谢酶表型.方法 将芦荟大黄素分别与加入不同辅酶因子的人和大鼠肝微粒体孵育,LC-MS/MS法定量分析芦荟大黄素的剩余含量,考察芦荟大黄素的代谢稳定性和酶动力学.将芦荟大黄素分别与一组重组人源CYP同工酶(CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6、3A4)孵育,或在HLM中加入各同工酶的特异性抑制剂,确定其CYP酶代谢表型.结果 在HLM和RLM中,芦荟大黄素均可发生依赖于NADPH的Ⅰ相代谢消除.经加热法确定,Ⅰ相代谢主要由CYP酶介导,30 min的代谢百分率分别为85.8%和81.7%,消除半衰期t1/2分别为(10.3±0.3)min和(11.5±3.3)min;内在清除率CLint分别为(420.1±10.9)和(573.4±188.2)ml/(min·kg);表观酶动力学参数Km分别为(2.4±0.9)和(3.9±1.4)μmol/L,Vmax分别为(1492±170.5)和(2783±595.8)nmol/(min·g protein).在RLM中还观察到芦荟大黄素的葡糖醛酸结合反应,30 min代谢转化率为38.5%,消除半衰期t1/2为31.6 min,CLint为(197.1±15.5)ml/(min·kg).CYP酶代谢表型研究表明,芦荟大黄素的肝微粒体代谢由多个CYP同工酶介导,其中CYP1A2、3A4、2B6和2C9的整体归一化贡献率分别为35.4%、21.9%、6.6%和6.8%.结论 芦荟大黄素在HLM和RLM中,主要发生多个CYP同工酶介导的Ⅰ相代谢消除,其中CYP1A2和3A4的代谢贡献率>20%;HLM和RLM代谢存在一定的种属差异,RLM还存在葡糖醛酸结合反应.     

Hsa-miR-660负调控人类肝脏组织中药物代谢酶CYP3A4的表达

 【摘要】目的 探讨Hsa-miR-660 (简称miRNA-660)是否参与调控人类重要I相药物代谢酶CYP3A4的表达,是否影响人类肝脏组织中的CYP3A4酶活性。方法 生物信息学预测出miRNA-660可以作用于CYP3A4基因mRNA 3′端非编码区(3′untranslated region,3′UTR);细胞转染和双萤光素酶报告实验进一步验证miRNA-660能直接作用于CYP3A4 mRNA 3′UTR;收集28例人肝脏组织,检测其成熟miRNA-660表达量、CYP3A4的mRNA和蛋白质表达量及酶活性;将miRNA-660表达水平与CYP3A4 3种表达水平进行Pearson两两回归分析,探索miRNA 660与CYP3A4表达之间的相关性,从而推测miRNA-660在调控CYP3A4表达中的作用。结果miRNA-660能直接作用CYP3A4 mRNA 3′UTR(t检验,P=0.017),miRNA-660表达量与CYP3A4 mRNA表达量无显著相关性(P=0.20),但与CYP3A4蛋白表达量、酶活性负相关(P<0.05)。结论 在肝脏组织中,miRNA 660虽然不影响CYP3A4基因的mRNA表达,但可能在翻译水平抑制其蛋白质表达及酶活性,负调控CYP3A4基因的翻译过程。miRNA 660可能直接参与调控人肝脏组织中CYP3A4的表达,miRNA可能是引起人群中CYP3A4酶活多态性的重要原因之一。     

单探针与混合探针底物法在细胞色素P450酶底物酶促动力学中的比较研究

[目的] 研究5种细胞色素P450酶亚型的特异性探针底物非那西丁（CYP1A2）、右美沙芬（CYP2D6）、甲苯磺丁脲（CYP2C9）、奥美拉唑（CYP2C19）、咪达唑仑（CYP3A4）在人和大鼠肝微粒体中的酶动力学特征,比较两种探针底物法的适用性。[方法] 5种特异性探针底物分别经人或大鼠的肝微粒体代谢反应后,采用高效液相色谱法测定特异性探针底物的代谢速率,根据底物浓度-代谢速率曲线计算酶动力学常数。[结果] 单探针与混合探针两种方法在人肝微粒体中所得的V_max、K_m值具有一致性;而在大鼠肝微粒体中所得的K_m具有一定差异,表明该混合探针底物法在用于药物对大鼠肝微粒体中的细胞色素P450酶活性评价时可能会出现一定程度的影响。[结论] 在人肝微粒体中,两种探针底物法的V_max、K_m值具有一致性,因而混合探针底物法可代替单探针法用于细胞色素P450酶活性评价;在大鼠肝微粒体中,探针底物混合后可使得部分探针底物的K_m值升高,与酶亲和力下降,在细胞色素P450酶活性评价中可能出现假阴性结果。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂S25的代谢稳定性和表型研究

目的:探讨抗癌药物组蛋白去乙酰化酶抑制剂S25在不同种属中代谢稳定性差异并确定S25药物的代谢表型。方法:将S25置于人、小鼠、大鼠、犬和猴的肝微粒体中孵育,运用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)方法检测经过孵育代谢后S25剩余浓度,分析其代谢稳定性并推导出其在体内的半衰期及清除率;通过肝微粒体中细胞色素P450酶(CYP450)同工酶特异性抑制剂的化学抑制剂方法鉴定S25在小鼠肝微粒体中的代谢表型。结果:S25在人、小鼠、大鼠、犬和猴5个种属肝微粒体中半衰期(t1/2)分别为45.00、187.30、43.31、130.75、198.00 min;肝微粒体中固有清除率CLint分别为30.8、7.4、32、10.6、7/m L·min-1·mg-1;在人肝微粒体中S25主要通过CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19催化代谢。结论:在肝微粒体研究体系中,S25通过多种酶催化而迅速代谢降解;该药在人和小鼠的代谢动力学无差异,小鼠肝微粒体代谢系统可用于S25在人体内发生不良反应的风险评估。     

人血浆中阿戈美拉汀浓度的测定及其药代动力学

建立测定人血浆中阿戈美拉汀浓度的LC-MS/MS方法,测定单剂量口服25 mg阿戈美拉汀片后其在中国健康受试者体内的血药浓度,利用Phoenix WinNonlin 6.3.0软件计算药代动力学参数。该方法中阿戈美拉汀浓度的线性范围为0.051 3~10.38 ng/mL(r=0.999 4),最低检测浓度为0.051 3 ng/mL。日内、日间精密度测定RSD均小于15%。单次口服给药后,阿戈美拉汀的c_max为(13.25±15.78)ng/mL,t_max为(0.68±0.41)h,AUC_last为(14.00±19.26)ng/mL·h,AUC_inf为(14.14±19.35)ng/mL·h,t_1/2为(0.78±0.44)h。本方法简便、准确、重现性好,可用于阿戈美拉汀血药浓度的测定及其人体药代动力学研究。     

体外替代安全评价方法的验证-代谢性相互作用对细胞毒性的影响

目的随着近20年实验动物伦理原则的逐步普及,学术界、工业界和政府管理部门开始研究和推广动物试验的替代方法,用于药品、食品和化妆品的安全评价。美国15个政府管理机构和研究机构成立了“替代评价方法协调委员会（ICCVAM）”并指定和验证了评价方法。作者按照ICCVAM推荐的方法,应用体外细胞毒性评价方法和代谢性相互作用评价方法,研究出入境天然产物制品的毒性作用及其代谢性活化或代谢性解毒机制。方法用人肝微粒体,研究了天然产物制品对肝细胞色素P450亚酶的作用。用超低温冻存的人肝原代细胞,评价了5个进口天然产物制品的细胞毒性（MTT方法）。应用化学抑制法,研究了细胞色素P4502A6,2C9,2C19和3A4对天然产物制品细胞毒性的影响。结果天然产物制品TA-07—004和TA-07—005对CYPIA2有明显的抑制作用,它们的Ic50分别为初始浓度的0．22％和0．03％,且它们对CYP3A4也有明显的抑制作用,它们的IC50分别为初始浓度的0．49％和0．20％。天然产物制品TIA-07．003没有肝细胞毒性,其余4个天然产物制品观察到有肝细胞毒性,它们的IC50分别为初始浓度的0．37％,0．26％,0．62％和0．19％。在研究与天然产物制品TA-07—005细胞毒性有关的细胞色素P450亚型酶中,发现CYP2C9、CYP2A6、CYP2C19和CYP3A4活性被抑制后能减轻TA-07—005对肝细胞的毒性,说明TA-07-005被CYP450生物活化后毒性增加。结论用人原代肝细胞模型为基础的替代方法研究细胞毒性及代谢性相互作用对细胞毒性的影响是可行的。     

CYP2C19基因多态性及与其代谢相关药物的研究

细胞色素P450酶系(CYP450)是人体内参与药物代谢的主要酶,CYP2C19是细胞色素P450酶系中的一种。临床上多种药物在体内代谢时,均需要CYP2C19酶的参与。许多研究显示,CYP2C19酶的活性受CYP2C19基因多态性的影响。本文就CYP2C19基因多态性及其在体内参与几种药物的代谢情况进行分析与总结。     

氯吡咯雷抗血小板作用与CYP2C19基因多态性关系的探讨

目的探讨CYP2C19基因多态性与氯吡咯雷对血小板抑制率之间的关系。方法选取某院诊断为急性冠脉综合征患者76例,均口服氯吡格雷,利用血栓弹力图方法测定氯吡咯雷对血小板的抑制率,利用基因芯片试剂盒原理测定CYP2C19基因型。本试验共检测六种基因亚型。结果我国人群以CYP2C19＊1＊1,CYP2C19＊1＊2基因亚型为主。比较六种CYP2C19基因亚型患者氯吡咯雷对血小板的抑制率。结果无统计学差异,P〉0.05。结论 CYP2C19基因型与氯吡咯雷对血小板抑制率无明显关系,所以,对于ACS患者无论CYP2C19基因型如何均应按指南推荐剂量使用氯吡咯雷。     

细胞学结合串联质谱诊断线粒体脂肪酸β-氧化代谢障碍方法的建立及其临床应用研究

目的建立应用成纤维细胞体外培养结合串联质谱酰基肉碱谱分析的诊断方法,诊断并鉴别不同的遗传性线粒体脂肪酸β-氧化代谢障碍病。方法取健康对照标本6例和已确诊的遗传性线粒体脂肪酸β-氧化代谢障碍病患儿标本14例,包括SCAD（n=1）、MCAD（n=3）、VLCAD（n=3）、CPT-II（n=2）、MTP（n=2）、MCD（n=2）和CACT（n=1）等酶的缺陷共7种病症。以棕榈酸（C16酸）为培养溶媒底物,成纤维细胞株37℃持续培养96h后,应用串联质谱分析相应培养液中的酰基肉碱谱并计算比较相应结果,行诊断和鉴别诊断。结果所有病人的C2均显著低于对照组,其它酰基肉碱的浓度在不同病种的表现各不相同,SCADD呈现C4异常增高;MCADD显示C8的特异性增高;VLCADD则以C12的异常增高为特征;CPTD-II表现为C16异常增高同时C2显著减低;MAD缺陷的特点是从C4到C12大范围的异常增高;MTPD则表现C12和C16的同时增高;CACTD类似于CPTD-II呈现C16增高而C2降低,但异常的幅度较CPTD-II小。此外,计算比较各酰基肉碱与乙酰肉碱的比值（Cn/C2）在不同病症亦呈现出特异性结果。结论应用成纤维细胞体外特定条件培养结合串联质谱酰基肉碱谱分析,可诊断和鉴别诊断各种遗传性线粒体脂肪酸β-氧化代谢障碍病,是一个较为简便特异的方法。