补体C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞合成NO的机制探讨

目的:探讨人C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(MC)合成一氧化氮(NO)的机制。方法:用人C5b-9复合物刺激培养的大鼠肾小球MC诱生肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素1β(IL-1β),并用抗TNFα或抗IL-1β单克隆抗体进行处理。在上述基础上,分析处理3 h、6 h及24 h时与NO升高有关的某些指标的变化。结果:经C5b-9复合物刺激6、24 h后的MC(C5b-9组)产生TNFα明显高于对照组,并能被TNFα单抗逆转。用C5b-9复合物刺激MC未见IL-1β的产生。另用C5b-9刺激3 h时可见MC表达iNOS mRNA,而在刺激6 h和24 h时,MCiNOSmRNA表达,MC内cGMP含量及培养上清液中NO³_-/NO²_-含量均显著高于对照组。不过,C5b-9刺激时加用TNFα单抗处理,这些指标在6 h、24 h时均较C5b-9组低。结论:C5b-9复合物早期(3 h)能诱导MC表达iNOS mRNA,而6h后NO的升高则与MC释放的TNFα作用有关。     

Th17细胞及其相关细胞因子在幽门螺杆菌感染中的作用研究

目的 探讨Th17细胞及其相关细胞因子在幽门螺杆菌(H.pylri)感染中的作用.方法 建立幽门螺杆菌感染的小鼠模型,同时设立治疗组与对照组.HE染色评价小鼠胃组织学改变;RT-PCR法检测胃组织IL-17 mRNA、IL-23 mRNA表达水平;ELISA法检测胃组织匀浆上清IL-17、IL-23含量;FCM检测脾脏单细胞悬液中Th17细胞应答情况.结果 与对照组相比,H.pylori感染组小鼠胃组织IL-17、IL-23在mRNA及蛋白水平表达均升高,脾淋巴细胞中Th17细胞比例显著升高;而且H.pylori感染组小鼠IL-17、IL-23 mRNA和蛋白含量以及脾淋巴细胞中Th17细胞比例随感染时间延长而增加;治疗组小鼠IL-17、IL-23表达量及脾淋巴细胞中Th17细胞比率,与治疗前即感染后4周的小鼠相比较均有所下降;感染后不同时期小鼠胃黏膜的炎症程度与IL-17、IL-23的表达量存在正相关.结论 H.pylori感染后可以诱导Th17细胞应答且IL-17、IL-23表达均上调;H.pylori感染后胃炎程度与胃组织1L-17、IL-23含量存在正相关.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对二氧化硅致成纤维细胞纤维连接蛋白表达的影响

背景:过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对转化生长因子β1致矽肺肺间质纤维化作用的影响及机制尚不明确,罕见报道。 目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对转化生长因子β1致矽肺肺纤维化作用的影响。 方法：200 mg/L SiO₂刺激SD大鼠肺泡巨噬细胞培养上清液作用于中国仓鼠肺成纤维细胞株(CHL)建立矽肺纤维化的体外细胞模型。RT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ配体15d-PGJ2及其激动剂曲格列酮和齐格列酮对转化生长因子β1诱导CHL的纤维连接蛋白mRNA表达的影响。利用Western印迹技术观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对转化生长因子β1诱导CHL的纤维连接蛋白表达的影响。 结果与结论：①转化生长因子β1 mRNA表达呈一定范围内的剂量(0~5 μg/L)和时间(0~24 h)依赖效应。②过氧化物酶体增殖物激活受体γ配体及激动剂降低了纤维连接蛋白mRNA和蛋白的表达。结果提示过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂可以抑制转化生长因子β1诱导的SiO2致肺成纤维细胞纤维连接蛋白合成,具有抗SiO₂所致肺间质纤维化的潜在作用。     

普通肝素通过抑制炎症反应和细胞凋亡缓解内毒素血症小鼠肝损伤

目的探讨普通肝素对内毒素血症小鼠肝损伤的保护作用及其机制。方法成年雄性C57BL/6小鼠,随机分成3组(每组8只):正常对照组,脂多糖组,脂多糖+普通肝素组。脂多糖(30mg/kg)腹腔内注射建立内毒素血症小鼠模型。造模前0.5h予以普通肝素(8单位/20g体重)或等量生理盐水腹腔注射,造模后8h处死小鼠,留取血及肝脏组织做进一步分析。血清ALT和AST的水平用商业试剂盒测定,小鼠肝脏的组织病理学用苏木精-伊红(HE)染色观察,用免疫组织化学(IHC)染色观察肝组织内巨噬细胞(F4/80阳性)的浸润情况,肝组织caspase-3蛋白的表达用免疫组化和Western-blot法检测,实时荧光定量PCR测定肝脏IL-1β和IL-6m RNA的表达,TUNEL染色技术检测肝细胞凋亡。结果普通肝素预处理显著降低内毒素血症小鼠肝脏炎症因子(IL-1β和IL-6)的表达水平,减少肝脏巨噬细胞浸润,减轻脂多糖诱导的肝脏损伤与肝细胞凋亡。结论普通肝素可能通过抑制炎症反应和细胞凋亡对脂多糖诱导的肝损伤发挥保护作用。     

重组人生长激素对败血症大鼠的实验治疗

目的:观察重组人生长激素(rhGH)对败血症大鼠的治疗效果并探讨其作用机制。方法:观测正常对照组、败血症组及败血症+rhGH组大鼠平均动脉压(MAP)、白细胞计数、血浆TNFα、IL-1β和内毒素(ET)水平及1周存活率。结果:(1)rhGH能明显减轻败血症大鼠MAP的下降、降低血浆TNFα及ET水平并提高其中性粒细胞比例;rhGH能显著提高败血症大鼠1周存活率。(2)各组血浆IL-1β浓度在各时点均无明显变化。结论:rhGH对败血症大鼠具有较理想的治疗效果, 其机制可能与rhGH改善败血症大鼠的循环功能障碍、保护肠粘膜屏障、减轻肠道细菌/ET移位及抑制TNFα的生成和释放等有关。     

IL-1β基因多态性对RA患者PBMC IL-1β mRNA表达的影响

目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者中白细胞介素-1β(IL-1β)基因多态对IL-1β mRNA表达的影响。方法: 应用荧光定量RT-PCR技术检测不同IL-1β基因型的RA病人外周血单个核细胞(PBMC)中IL-1β mRNA表达量的差异。结果: 携带IL-1β(-511)纯合子等位基因2组RA病人PBMC表达IL-1β mRNA量明显较非纯合子及正常人组为高(均P<0.01)。结论: IL-1β基因多态性改变对IL-1β mRNA的表达产生影响,IL-1β(-511)纯合子等位基因2促进了IL-1β mRNA的表达。     

小檗碱和育亨宾对内毒素血症小鼠脾脏TLR4信号通路中相关基因表达的影响

目的: 观察小檗碱和α₂肾上腺素能受体拮抗剂育亨宾对内毒素血症小鼠脾脏Toll样受体4(TLR4)信号通路84种基因表达的影响,并初步探讨其作用机制。方法: 雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、脂多糖(LPS)组、小檗碱+LPS组、小檗碱+育亨宾+LPS组、育亨宾+LPS组、小檗碱组、小檗碱+育亨宾组和育亨宾组。分别用蒸馏水、小檗碱(50 mg/kg)、小檗碱+育亨宾(50 mg/kg+2 mg/kg) 和育亨宾(2 mg/kg)灌胃,每天1次,连续3 d,第3 d灌胃1 h后,腹腔注射LPS(20 mg/kg)或生理盐水。腹腔注射1 h后,用RT² Profiler^TM PCR Array分析技术检测小鼠脾脏TLR4信号通路84种基因mRNA的表达;用Western blotting分析小鼠脾脏TLR4信号通路的抑制分子细胞因子信号抑制物(SOCS)1、SOCS3和白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK)-M蛋白的表达。结果: LPS可上调小鼠脾脏TLR4信号转导通路中相关炎症因子的mRNA表达,包括CXCL10、TNF-α、IL-1α、IL-1β、IL-6、IFN-γ和IFN-β。小檗碱能显著下调下调髓样分化因子(MyD88)依赖信号通路下游TNF-α、IL-1α、IL-1β和IL-6 mRNA的表达,也能MyD88非依赖信号通路下游基因IFN-β和CXCL10 mRNA的表达(P<0.05)。育亨宾能显著下调内毒素血症小鼠脾脏IL-1α、IL-1β 和IFN-β mRNA的表达(P<0.05),但对TNF-α、IL-6和CXCL10 mRNA表达的下调作用与LPS组相比没有显著差异(P>0.05)。小檗碱与育亨宾合剂能显著下调内毒素血症小鼠脾脏IFN-β和CXCL10 mRNA的表达,但不能显著下调内毒素血症小鼠脾脏IL-1α、IL-1β、TNF-α 和IL-6 mRNA的表达。LPS攻击后1 h,小檗碱和(或)育亨宾均不能增强内毒素血症小鼠脾脏SOCS1、SOCS3和IRAK-M蛋白的表达。结论: 小檗碱和育亨宾均能抑制LPS诱导的MyD88依赖和非依赖信号通路下游部分基因的表达,这种抑制作用的机制与SOCS1、SOCS3和IRAK-M蛋白无关。     

RNA 干扰抑制BAG-1 基因表达对皮肤鳞状细胞癌增殖及凋亡的影响研究

目的:探讨抑制BAG-1(Bcl-2-associated athanogene-1)基因表达对皮肤鳞状细胞癌增殖及凋亡的影响。方法:采用LipofectamineTM2000 将BAG-1 的siRNA 转染皮肤鳞状细胞癌A431,转染后48 h,RT-PCR 检测BAG-1 的mRNA 表达,Western blot 检测BAG-1 的蛋白表达;CCK8 和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况;Western blot 检测B 细胞淋巴瘤/ 白血病-2(Bcl-2)家族促凋亡蛋白Bcl-2 相关X 蛋白(Bax)及Wnt/β-catenin 信号通路β-连环蛋白(β-catenin)、Survivin 的蛋白表达;ELISA 试剂盒检测白介素6 (IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果:与空白组和阴性对照组比较,转染BAG-1 的siRNA 可明显抑制BAG-1 在转录和翻译水平上的表达;与空白组较,BAG-1-siRNA 组细胞增殖显著降低,细胞凋亡率显著增加,Bax 蛋白表达上调, β-catenin、Survivin 蛋白表达下调,IL-6、VEGF 含量均显著降低(P<0.05)。结论:BAG-1 表达沉默可降低皮肤鳞状细胞癌增殖,促进细胞凋亡,上调Bax 及下调Wnt/ β-catenin 信号通路表达,降低IL-6、VEGF 因子的分泌。     

地龙对哮喘模型小鼠肺组织α-SMA及纤维蛋白的抑制作用

目的： 探讨地龙对哮喘小鼠肺组织平滑肌肌动蛋白-α（α-SMA）及纤维连接蛋白（FN）的影响。方法： BALB/c小鼠80只,随机分为对照组（A组）、哮喘组（B组）、地龙大剂量治疗组（C组）及地龙小剂量治疗组（D组）各20只。以腹腔注射0.02%鸡卵清蛋白和1%鸡卵清蛋白雾化吸入建立慢性哮喘模型。治疗组在每次雾化激发前给予地龙干预。肺泡灌洗计数各炎症细胞,ELISA检测血清总IgE水平,分离右肺固定,石蜡切片,免疫组化,用Leica QWIN V3分析系统,计算表达阳性结果;取左肺置液氮中保存,留作RT-PCR,用AlphaImager 2200半定量分析系统分析。结果： 与对照组相比,哮喘组气道平滑肌肌动蛋白-α（α-SMA）及纤维连接蛋白（FN）阳性表达显著升高,哮喘组α-SMA mRNA及FN mRNA的表达上调;地龙大剂量治疗组的α-SMA及FN的阳性表达、α-SMA mRNA及FN mRNA的表达均显著低于哮喘组;地龙小剂量治疗组的α-SMA及FN的阳性表达、α-SMA mRNA及FN mRNA的表达亦低于哮喘组,但无显著差异。结论： 地龙可抑制慢性哮喘模型小鼠肺组织中α-SMA及FN表达,提示抑制α-SMA及FN的表达可能是地龙抑制哮喘气道重构的重要机制之一。     

抑制或过表达GRK5 基因对星形胶质细胞凋亡及IL-1β和TNF-α表达的影响

目的:探讨抑制或过表达G 蛋白偶联受体激酶5(GRK5)基因对星形胶质细胞(AS)凋亡及IL-1β和TNF-α 表达的影响。方法:培养原代AS,将干扰GRK5 表达的siRNA(GRK5-siRNA)及GRK5 的过表达质粒(pcDNA3.1-GRK5)分别转染AS,通过Western blot 检测转染24 h 后的细胞中GRK5 蛋白的表达;缺氧处理AS,细胞分为空白组、缺氧组、缺氧+pcDNA3.1-GRK5 组和缺氧+GRK5-siRNA 组,缺氧处理24 h 后通过流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率及ROS 含量;RT-PCR检测IL-1β和TNF-α的mRNA 表达;Western blot 检测p53、信号转导与转录因子3(STAT3)和p-STAT3 蛋白表达。结果:与空白组比较,转染GRK5-siRNA 的AS 中GRK5 的表达显著降低,转染pcDNA3.1-GRK5 的细胞GRK5 的表达显著升高(P <0.05);与空白组比较,缺氧组细胞凋亡率、ROS 水平及IL-1β、TNF-α、p53 和p-STAT3 的表达均显著升高(P<0.05);与缺氧组比较,缺氧+pcDNA3.1-GRK5 组细胞凋亡率、ROS 水平及IL-1β、TNF-α、p53 和p-STAT3 的表达均显著降低,缺氧+GRK5-siRNA组细胞凋亡率、ROS 水平及IL-1β、TNF-α、p53 和p-STAT3 的表达均显著升高(P<0.05)。结论:过表达GRK5 可降低AS 凋亡和ROS 水平,下调IL-1β、TNF-α、p53 表达及STAT3 信号通路,抑制GRK5表达反之。     

四氢嘧啶类衍生物ZL-5015抗内毒素作用的实验研究

目的:探讨1,3-二环戊基-1,2,3,6-四氢嘧啶-4,5-二甲酸二乙酯(ZL-5015)对内毒素攻击小鼠的保护作用及机制。方法:腹腔注射脂多糖(70 mg/kg)制备小鼠内毒素中毒死亡模型和内毒素血症模型。脂多糖(10mg/L)刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生炎症相关细胞因子作为体外炎症模型。ELISA法检测细胞白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。Real-time PCR检测细胞因子mRNA的表达水平。结果:ZL-5015(100和200 mg/kg)预防性灌胃给药能小幅提高内毒素中毒小鼠的存活率和存活时间,在中毒早期能降低内毒素血症小鼠血清中IL-1β和TNF-α的水平,提高IL-10的水平。体外实验表明,ZL-5015(10、20和40μmol/L)能抑制内毒素刺激的腹腔巨噬细胞IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA的表达,促进IL-10蛋白及mRNA的表达。结论:四氢嘧啶类化合物ZL-5015能提高内毒素中毒小鼠的存活率和存活时间,但作用较弱,其作用机制可能与抑制促炎细胞因子IL-1β和TNF-α、促进抑炎细胞因子IL-10的表达有关。     

大鼠枯否细胞CD14表达的实验研究

目的:探讨大鼠枯否细胞(KC)中CD14表达的变化。方法:应用不同浓度(1μg/L-10mg/L)或同一浓度(10mg/L)的脂多糖(LPS)在不同时间(0.5h-24h)刺激培养大鼠48h的KC并测定其CD14、肿瘤坏死因子α(TNFα)和白介素6(IL-6)表达的变化。结果:LPS能明显上调KC中CD14、TLR4表达,且其表达量与LPS浓度及时间呈正相关,且在3-6h左右达到高峰;同时,KC产生的活性介质亦能明显上调其CD14的表达。结论:LPS及其刺激KC后产生的活性介质能明显上调CD14的表达,且在CD14的表达中存在一个自身调节环。     

LPS、TNF-α、IL-1β对人脐静脉内皮细胞COX-2表达的影响

目的:探讨LPS、TNF-α、IL-1β对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)环氧合酶2(COX-2)表达及前列腺素(PGs)的影响。方法:在分离培养的HUVEC细胞给予LPS、TNF-α、IL-1β刺激24h后,采用原位杂交、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化检测HUVECCOX-2mRNA及蛋白的表达并观察了培养液前列腺素(PGs)的变化。结果:静息状态的HUVEC表达极少量的COX-2;受炎性刺激后,HUVEC大量表达COX-2mRNA及蛋白,同时伴有PGs的升高。结论:结果提示,静息状态下HUVEC表达极少量的COX-2,炎性刺激可诱发COX-2高表达和PGs升高,因此内皮细胞可通过COX-2的调节参与炎症反应。     

TLR4在LPS诱导的结肠炎症恢复中的作用

目的:研究Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR-4)在结肠炎症中的作用,探讨LPS在炎症性肠病中的治疗作用。方法:取正常肠上皮细胞进行体外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)干预培养。采用慢病毒转染技术,构建TLR4低表达、正常表达及高表达的肠上皮细胞亚组。正常表达组(normal组)及高表达组(high组)培养基中加入LPS诱导细胞炎症,刺激时间分别为0、2、4 h。Western blot法检测TLR4的表达;收集细胞上清液,ELISA检测各亚组细胞炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8的水平。收集细胞,qPCR检测细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和IL-1βmRNA的表达水平。划痕试验观察对比2组细胞的迁移能力。结果:LPS干预培养细胞后,TLR4的表达量显著增加(P0.05)。ELISA和qPCR检测高表达组与正常表达组组间细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和IL-1β的蛋白和mRNA水平的差异均有统计学意义(P0.05)。划痕试验提示TLR4高表达组的细胞迁移能力明显高于正常对照组。结论:LPS影响TLR4炎症通路的活化,促进前炎症因子及辅助刺激分子的释放,起到调节炎症反应的作用。     

可乐定通过激活胆碱能抗炎通路抑制肺损伤小鼠炎性反应

目的:探讨可乐定对肺损伤小鼠炎性反应的影响及其作用机制。方法:以脂多糖(lipopolysac charide,LPS)诱导的肺损伤小鼠为模型,静脉注射可乐定,取左肺上叶组织,检测肺湿干重比(W/D)和总肺含水量(TLW),ELISA试剂盒检测炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量,RT-PCR和Western blot检测α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的变化;鼻内吸入法将α7nAChR基因RNA干扰慢病毒载体导入肺损伤模型小鼠肺内,或者静脉注射HMGB1外源性蛋白,检测炎性因子和HMGB1的变化。结果:可乐定可减轻LPS诱导的小鼠肺损伤,并通过降低细胞因子IL-6、IL-10和TNF-α水平从而抑制LPS诱导的炎性反应;可乐定促进α7nAChR表达从而激活胆碱能抗炎通路,并抑制HMGB1的表达。结论:可乐定对肺损伤小鼠具有抗炎作用,这可能与激活胆碱能抗炎通路,抑制HMGB1的表达有关。     

去甲肾上腺素减轻脂多糖所致内皮细胞损伤

目的:探讨去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)减轻脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)对内皮细胞损伤的作用。方法:用100 mg/L LPS诱导人脐静脉血管内皮细胞HUVEC-12损伤,用不同浓度NE处理后,使用realtime PCR及Western blot法检测各组内皮细胞血管内皮型钙黏素(VE-cadherin)表达的变化,ELISA法测定细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10的浓度,活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测细胞内的ROS水平。结果:LPS可显著抑制内皮细胞中VE-cadherin m RNA和蛋白的表达水平,同时伴有TNF-α、IL-1β和IL-2升高及IL-10下降,ROS含量明显增加;不同浓度的NE呈剂量依赖性地上调VE-cadherin的m RNA和蛋白表达,减轻细胞内的氧化应激水平,并部分逆转TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-10的变化。结论:不同浓度NE能明显逆转LPS造成的内皮细胞损伤,其机制可能与上调VE-cadherin、减轻细胞的氧化应激及炎性介质水平有关。     

青蒿素减轻LPS诱导的肠上皮细胞屏障功能损伤的实验研究

目的:探究青蒿素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠肠上皮IEC-6细胞屏障功能损伤的影响。方法:体外培养IEC-6细胞,随机分为5组:对照组、LPS(100 mg/L)组和LPS+青蒿素(30、50和100μmol/L)组,MTT法检测各组细胞毒性变化,ELISA检测各组细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平的变化,电阻仪检测肠上皮细胞跨上皮电阻(TER),酶标仪检测单层细胞对辣根过氧化物酶(HRP)的通透性,RT-qPCR和Western blot检测各组细胞紧密连接蛋白(ZO-1、claudin-1和occludin)以及TLR4/My D88/NF-κB mRNA和蛋白表达的变化。结果:LPS与青蒿素在本实验浓度范围对IEC-6细胞均无毒性。与对照组相比,LPS处理下,细胞分泌TNF-α、IL-1β和IL-6水平以及TLR4/My D88/NF-κB的mRNA和蛋白表达明显增加,ZO-1、claudin-1和occludin的mRNA和蛋白表达降低。而青蒿素干预下,细胞分泌TNF-α、IL-1β和IL-6水平以及TLR4/My D88/NF-κB mRNA和蛋白表达明显降低,ZO-1、claudin-1和occludin的mRNA和蛋白表达升高(P0.05),均呈现浓度依赖性。结论:青蒿素可能通过抑制TLR4/My D88/NF-κB通路减轻LPS诱导的肠上皮细胞屏障功能损伤。     

TRPV1激活对内毒素血症小鼠肺组织炎症损伤的影响及机制

 目的：探讨用辣椒素（CAP）激活瞬时受体电位阳离子通道V亚族成员1(TRPV1)对内毒素血症所致肺损伤在炎症反应产生的影响及相关机制。方法：SPF级ICR小鼠108只随机分为6组：正常对照组、CAP对照组、抗辣椒碱（CAPZ）对照组、内毒素血症组、CAP干预组和CAPZ干预组。脂多糖（LPS）经腹腔注射,CAP及CAPZ均在LPS注射前30 min经皮下注射。分别在LPS注射后3 h、8 h和16 h取肺组织,ELISA法检测肺组织TNF-α、IL-6、IL-10、P物质（SP）和降血钙素基因相关肽（CGRP）,Western blotting法检测肺组织Toll样受体4（TLR4）和核内NF-κB的表达水平,光镜下观察肺组织病理学改变。结果：内毒素血症组小鼠3 h、8 h和16 h肺组织TNF-α、IL-6和IL-10水平较正常对照组均显著升高（P<0.05）;CAP干预组各时点肺组织TNF-α和IL-6水平较内毒素血症组显著降低（P<0.05）,而IL-10均明显升高（P<0.05）;CAPZ干预组3 h、8 h和16 h 肺组织TNF-α和IL-6较内毒素血症组显著升高（P<0.05）,而IL-10水平均显著降低(P<0.05)。内毒素血症组和CAP对照组各时间点SP和CGRP较正常对照组均显著升高（P<0.05）,CAP对照组SP和CGRP水平明显低于内毒素血症组（P<0.05）;与同时点内毒素血症组相比,CAP干预组SP和CGRP显著升高（P<0.05）,而CAPZ干预组显著降低（P<0.05）。内毒素血症组小鼠肺组织TLR4和核内NF-κB表达较正常对照组显著升高（P<0.05）;与内毒素血症组相比,CAP干预组和CAPZ干预组小鼠肺组织TLR4表达均无显著差异（P>0.05）,而CAP干预组核内NF-κB表达显著降低（P<0.05）,CAPZ干预组核内NF-κB表达显著升高（P<0.05）。光镜下,CAP对照组和CAPZ对照组较正常对照组病理学变化不明显,内毒素血症组肺组织在8 h和16 h损害明显,CAP干预组较内毒素血症组损害减轻,CAPZ干预组较内毒素血症组肺组织损害加重。结论：TRPV1激活后能显著降低内毒素血症小鼠肺组织TNF-α、IL-6和核内NF-κB水平,升高IL-10水平,提高肺组织SP和CGRP表达,减轻肺组织炎症损伤程度,但不改变肺组织TLR4水平。     

Endotoxemia enhances expression of the signaling receptor (GP130) on protein and molecular level

Interleukin 6 (IL-6) performs a prominent role during sepsis. To examine the molecular regulation of IL-6, IL-6 receptor, and signaling receptor gp130 during endotoxemia, nine healthy young volunteers received a bolus injection of lipopolysaccharide (LPS) on day 1 and saline on day 2 in a double blind, randomized, placebo-controlled trial. LPS enhanced IL-6 release 300-fold. IL-6 mRNA expression was not significantly altered in blood samples at any time after LPS infusion in vivo, while incubation of whole blood with 50 pg/ml LPS up-regulated IL-6 mRNA levels 8000- to 50,000-fold in vitro. LPS infusion increased synthesis of gp130 mRNA 5.5-fold compared to baseline at 4 h (P < 0.05), while no significant change was observed in the placebo period (P = 0.001 between groups). LPS increased the percentage of gp130 positive neutrophils gp130 700% over baseline at 8 h (P < 0.01 versus baseline and placebo). IL-6 receptor levels were not significantly altered by low-grade endotoxemia. In conclusion, endotoxemia up-regulates gp130 expression in vivo and in vitro. Quantification of IL-6 mRNA expression in circulating leukocytes is unlikely a suitable marker for monitoring of endotoxemia.