Integrin αvβ3靶向超声微泡的制备及体外寻靶实验

目的 制备Integrin α_vβ₃靶向超声微泡,对其一般理化性质及体外寻靶能力进行检测。方法 采用巯基-马来酰亚胺连接法制备携FITC标记iRGD肽的Integrin α_vβ₃靶向微泡(MB_{Integrin αvβ3}),并制备空白微泡(MB_control)。检测两组微泡的一般理化性质,在荧光显微镜下观察两组微泡荧光显像,流式细胞仪检测两组微泡FITC荧光含量。于光学显微镜及荧光显微镜下观察两组微泡与小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)的黏附情况。结果 ①MB_{Integrin αvβ3}粒径为(0.84±0.26)μm,与MB_control粒径(0.79±0.19)μm差异无统计学意义(P>0.05);②荧光显微镜下观察,MB_control组微泡无荧光显示,MB_{Integrin αvβ3}组微泡表面显示绿色荧光;③流式细胞仪测得MB_{Integrin αvβ3}组微泡FITC荧光含量为98.4%,MB_control组微泡FITC荧光含量为2.5%;④体外寻靶实验显示,MB_{Integrin αvβ3}组微泡能聚集结合于bEnd.3细胞表面。结论 成功制备了携iRGD肽的Integrin α_vβ₃靶向微泡,其具有良好的体外寻靶能力。     

携抗ICAM-1靶向微泡定向转染Ang-1基因治疗急性心肌梗死

研究背景 基因治疗为难治性心肌缺血提供了新方法,但通过静脉途径导入体循环的外源性基因缺乏组织特异性,难以在靶组织局部停留,疗效较低。目的 利用缺血时心肌内皮细胞黏附分子-1(ICAM-1)表达增高的特点,探讨心肌梗死时利用抗ICAM-1靶向微泡能否提高血管生成素-1基因在体内的转染效率。方法 体外实验检测抗ICAM-1靶向微泡与经人白细胞介素-1β刺激后的ECV304细胞结合的程度。体内实验分三组:①对照组:hAng-1基因+超声照射;②非靶向微泡组:携hAng-1基因微泡+超声照射;③靶向微泡组:携hAng-1基因的抗ICAM-1靶向微泡+超声照射。制作兔急性心肌梗死模型,分别用上述三种方法从静脉导入hAng-1基因,各组动物均于梗死模型建立后当天和基因转染2周后进行常规超声检查和心肌造影;2周后心肌造影检测转染区心肌灌注状况,RT-PCR检测hAng-1基因的mRNA 表达以评价转染疗效。结果 携抗ICAM-1抗体的微泡在体外能大量靶向结合到产生炎性反应的ECV304内皮细胞周边。应用靶向微泡转染后缺血心肌2周后,左心室内径减小,左心室射血分数升高,但与非靶向微泡组无显著性差异,而心肌造影显示心肌内造影剂填充量较非靶向微泡组增多,RT-PCR定量灰度分析hAng-1mRNA高于非靶向微泡组(1.04±0.08vs0.53±0.04,P<0.01)。结论 微泡与抗ICAM-1抗体连接后形成靶向微泡载体,可明显提高hAng-1基因在体内的转染效率,增加心肌梗死后局部的血管新生效应。     

诊断超声联合微泡对肿瘤微循环的作用

目的 探讨高机械指数诊断超声联合微泡对大鼠Walker-256肿瘤微循环的作用。 方法 将29只皮下荷Walker-256肿瘤SD大鼠随机分为超声微泡组(n=15)、单纯超声组(n=7)和假照组(n=7):对超声微泡组采用声辐射力脉冲(ARFI)成像模式下诊断超声连续激励20次辐照肿瘤,同时经尾静脉推注微泡0.04 ml;对单纯超声组在行超声辐照的同时以等量生理盐水代替微泡;对假照组则采用假照方式,仅推注等量微泡溶液,但不发射超声能量。对所有动物于辐照前、辐照后即刻、10、20 min行CEUS检查。最后每组随机选取3只动物获取肿瘤组织标本,行病理学检查。 结果 辐照后即刻,超声微泡组辐照区几乎无造影剂充填,呈负性显影,肿瘤区平均造影峰值强度(PI)由25.17%减低到12.01%(P<0.01);单纯超声组及假照组辐照后即刻可见造影剂快速充填,灌注良好(P>0.05)。10 min后,超声微泡组造影可见血流逐渐恢复,但PI仍降低;20 min后肿瘤血流基本完全恢复,呈高灌注(P>0.05)。 结论 高机械指数诊断超声联合微泡能特异性地暂时降低大鼠Walker-256皮下移植瘤的微循环。     

携抗ICAM-1抗体SonoVue微泡造影剂靶向识别受损内皮的实验研究

目的 应用常规超声心动图及应变率成像技术评价兔心肌梗死模型携重组人促红细胞生成素(rhEPO)水凝胶复合物原位注射前、后局部心功能的变化,观察其治疗心肌梗死的疗效。方法 以1mlα环糊精溶液与1ml葡聚糖-聚己内酰胺-2-羟乙酯(Dex-PCL-HEMA)水凝胶混合制备rhEPO 水凝胶复合物(100UrhEPO)备用。以32只家兔建立兔心肌梗死模型,造模成功后5分钟行梗死区多点心肌内注射:①处理组(n=8):rhEPO 水凝胶复合物(含600UrhEPO);②材料组(n=8):等量水凝胶(不含rhEPO);③对照组(n=8):含600UrhEPO 的等量PBS;④空白组(n=8):等量PBS。分别于造模前、心肌内注射后2天、心肌内注射后1个月行超声检查。常规超声心动图测量参数主要包括:左心室舒张末内径(LVEDd)、左心室前壁厚度(AMT)及左心室射血分数(LVEF)。应变率成像(SRI)分析收缩期径向峰值应变率(SRS)及舒张早期径向峰值应变率(SR_E)。结果 造模前及心肌内注射后2天,四组间LVEDd、AMT、LVEF、SRS、SRE差异均无统计学意义。心肌内注射后1个月,与对照组及空白组相比,处理组及材料组LVEDd减小、AMT 增厚、LVEF增高(P 均<0.05),以处理组变化更为显著;处理组及材料组SR_S、SR_E 增高(P 均<0.05),处理组增高更明显;处理组与材料组左心室收缩压(LVSP)、左心室压力最大上升速率(dp/dt)升高,而左心室舒张末压(LVEDP)下降(P 均<0.05),以处理组变化更为显著。常规HE染色和VG染色示处理组与材料组梗死范围明显小于对照组及空白组,处理组梗死范围最小。结论 携rhEPO 水凝胶复合物原位注射可有效改善心肌梗死后局部心肌收缩、舒张功能。     

以短肽K237为配体的靶向脂质体超声造影剂构建方法

目的 探讨以与血管内皮生长因子(VEGF)的主要受体KDR特异性结合的短肽K237(P)为配体制备靶向脂质体超声造影剂(P-Bio-Av-Bio-Mbs)的方法。 方法 采用生物素-亲和素桥接法构建P-Bio-Av-Bio-Mbs,流式细胞术筛选最佳配体适配剂量,光镜及荧光显微镜观察靶向微泡与KDR强阳性表达的人大肠癌LOVO细胞结合情况,计算花环形成率。分别以5、50、99 ml/h速率水流冲刷,光镜观察靶向微泡与LOVO细胞结合情况。 结果 不同亲和素剂量下(0、2、6、10、30 μg),微泡表面亲和素携带率差异有统计学意义(P<0.05)。M_avidin=6 μg时,携带率增长达平台期;不同短肽剂量下(0、30、40、50、60、70、100 μg),微泡表面短肽携带率差异有统计学意义(P<0.05),当M_K237=50 μg时,微泡表面短肽携带率增长达平台期。光镜下KDR强阳性表达的LOVO细胞周围花环形成率高达90.52%,荧光显微镜下微泡外壳发出明亮绿色荧光。随冲刷速度增加,靶细胞周围黏附的靶向微泡减少,在99 ml/h冲刷速度下,靶细胞周围仍可见花环结构。 结论 通过生物素-亲和素桥连作用,短肽K237被有效装配在P-Bio-Av-Bio-Mbs表面,体外具有靶向特异性及一定稳定性。流式细胞术是筛选靶向微泡配体适配剂量的可靠方法。     

经动脉超声导管印压检测犬梗死心肌硬度

目的 探讨经动脉导管超声印压检测梗死心肌硬度的可行性,并观察其与心肌胶原含量和Ⅰ/Ⅲ型胶原比值的关系。方法 将18只犬随机分为心肌梗死组(n=9)及假手术组(n=9),通过股动脉或颈动脉途径插管,将7F超声印压导管送入左心室,印压测量左心室前壁和心尖部硬度,并测量相应区域心肌胶原容积分数(CVF)、积分光密度(IOD)和Ⅰ、Ⅲ型胶原CVF比值(CVFⅠ/CVFⅢ)。结果 心肌梗死组前壁、心尖部心肌硬度值分别为(140.69±30.71)kPa、(49.08±6.17)kPa,均显著高于假手术组 。两组犬前壁心肌应力和相关形变均呈线性关系(心肌梗死组Y=138.17X,r=0.90,假手术组Y=18.69X,r=0.84,P均<0.05)。梗死组前壁、心尖部心肌CVF、IOD、CVFⅠ/CVFⅢ与假手术组相比均显著升高(P均<0.05)。结论 介入超声印压能够区分活体犬梗死心肌与正常心肌之间的硬度差异。     

脊髓型颈椎病患者小视野扩散张量成像参数与临床评价的相关性

目的 探讨脊髓型颈椎病(CSM)患者颈脊髓的扩散张量参数变化特点及与临床评分的相关性。 方法 收集39例临床诊断明确的CSM患者(病例组),以21名无脊髓功能损害的志愿者作为对照组,行常规颈椎MR检查及小FOV DTI,分别测量病例组C_2~3水平、病变水平及对照组C_2~3、C_3~7水平FA值及平均扩散系数(MD)值,并对CSM患者进行JOA问卷调查。 结果 病例组脊髓受压水平FA值明显低于对照组C_3~7水平FA值(P<0.05),C_3~7各水平FA值组间比较差异有统计学意义(P<0.05);病例组病变水平MD值明显高于对照组C_3~7水平MD值(P<0.05)。病例组C_3~4和C_4~5水平FA值与JOA评分呈明显正相关(r=0.633,P=0.003;r=0.446,P<0.05)。 结论 CSM患者病变水平FA值明显减低,C_3~5水平FA值随CSM患者临床症状的加重而减低。     

靶向微泡造影剂促进兔心肌梗死骨髓干细胞移植后血管新生及心肌力学改变

目的 应用斑点追踪技术评价靶向微泡造影剂注射后兔心肌梗死区域骨髓干细胞移植疗效。 方法 制备靶向微泡超声造影剂(携CD34单克隆抗体)。将36只新西兰大白兔随机分为对照组(单纯移植组)、普通造影剂组(移植+C组)及靶向造影剂组(移植+T组),分别于急性心肌梗死(AMI)前、AMI后3天、干细胞移植术后4周行心肌超声造影(MCE),采用彩色编码参数量化(PQ)技术对比各组干细胞移植前后梗死区域心肌灌注参数,同时对3组动物心肌梗死干细胞移植区域心肌的径向应变率(SrR)、圆周应变率(SrC)、旋转率(RotR)、收缩期S峰值及心肌扭转角度(Rot)进行斑点追踪分析,并于移植4周后检测微血管密度。 结果 干细胞移植后各心肌节段的A、β和A×β值均较本组内移植前改善,移植+T组改善最为明显(P均<0.05)。各组左心室前壁的SrR、SrC、RotR及Rot均较本组内移植前增高(P均<0.01),并与左心室射血分数相关。 结论 靶向微泡造影剂对兔骨髓干细胞移植后微血管新生具有一定作用。     

超声微泡介导血管内皮生长因子基因转染大鼠阴茎组织

目的 探讨超声靶向破坏微泡介导血管内皮生长因子165(VEGF₁₆₅)转染于高脂模型大鼠阴茎海绵体组织的可行性。方法 以含4％胆固醇及1％胆酸饲料饲养36只2月龄雄性SD大鼠3个月,建立大鼠高脂模型,将其随机均分为高脂模型组(对照组)、VEGF₁₆₅组和1.0 W/cm²超声+微泡+VEGF₁₆₅组(US+MB＋VEGF₁₆₅组)。于基因转染后7天处死大鼠,采用荧光定量PCR检测VEGF₁₆₅基因表达水平,以Western Blot检测大鼠阴茎组织VEGF蛋白质的表达水平,用免疫组织化学法(IHC)检测大鼠阴茎组织内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)蛋白质表达。结果 转基因7天后,US+MB＋VEGF₁₆₅组VEGF₁₆₅基因水平明显高于VEGF₁₆₅组及对照组(P均<0.05),其阴茎海绵体组织VEGF蛋白质表达较VEGF₁₆₅组及对照组增加(P均<0.05);IHC结果显示,US+MB＋VEGF₁₆₅组大鼠阴茎组织eNOS较其他组高表达(P均<0.05)。结论 超声靶向破坏微泡可介导VEGF₁₆₅基因在大鼠高脂模型阴茎海绵体组织的高效转移,为基因治疗高脂勃起功能障碍提供了实验依据。     

实时三维超声心动图评价冠心病患者经皮冠状动脉介入术后左心室功能及收缩同步性

目的 探讨实时三维超声心动图（RT-3DE）评价经皮冠状动脉介入术（PCI）后患者左心室功能和心肌收缩同步性的价值。方法 将研究对象分为两组,PCI组为30例经冠状动脉造影（CAG）证实左前降支狭窄患者,对照组20例为CAG检查证实冠状动脉狭窄<30%患者,对所有患者术前3天及PCI组患者术后3天、术后3个月进行RT-3DE检查,获得左心室17节段时间-容积曲线及时间位移牛眼图和相应参数,心功能参数包括左心室舒张末期容积（EDV）、左心室射血分数（EF）,左心室前壁及前室间隔基底段、中间段、心尖段的平均舒张末期容积（rEDV’）、平均射血分数（rEF’）,峰值充盈率（PFR）;同步性参数包括左心室16节段达到最小容积时间的最大差值、标准差及其校正值（Tmsv16dif、Tmsv16sd、Tmsv16dif%、Tmsv16sd%）,左心室17节段最大位移（E_max）、最小位移（E_min）、平均位移（Ea）、位移标准差（Esd）及节段位移离散度（Esd/Ea）,不同步节段数（DS）、缺血或梗死节段数（IIS）。对以上参数进行统计学分析。结果 术前PCI组EDV、rEDV’、Tmsv-16dif、Tmsv-16sd、Tmsv-16dif%、Tmsv-16sd%、E_max、Esd、Esd/Ea、DS、IIS均大于对照组（t=2.24~3.19,P均<0.05）,EF、rEF’、PFR、Ea、E_min均小于对照组（t=-3.07~-2.12,P均<0.05）。PCI组术前3天与术后3天各参数比较差异无统计学意义（P均>0.05）;术后3个月与术前3天比较,EDV、rEDV’、Tmsv-16dif、Tmsv-16sd、Tmsv-16dif%、Tmsv-16sd%、E_max、Esd、Esd/Ea、DS、IIS减小;EF、rEF’、PFR、E_min、Ea增大（F=3.79~17.28,P均<0.05）。PCI组患者术前3天、术后3个月的rEF’与EF、Esd/Ea与Tmsv-16sd%呈正相关（r=0.793、0.478,P均<0.01）,Esd/Ea与EF、PFR与IIS呈负相关（r=-0.454、-0.739,P<0.01）。结论 RT-3DE可定量测量PCI术后患者的心功能及同步性参数,进而评价缺血心肌的恢复情况,为PCI术后疗效的评估提供一种新的无创性方法。     

Targeting an Ultrasound Contrast Agent to Folate Receptors on Ovarian Cancer Cells

Objective. The purpose of the study was to synthesize and characterize folate‐targeted microbubbles (MB_F) as an ultrasound contrast agent and to evaluate their affinity to the folate receptor (FR) in vitro. Methods. Folate‐targeted microbubbles were prepared by incorporating 1,2‐distearoyl‐sn‐glycero‐3‐phosphoethanolamine‐N‐[amino(polyethylene glycol)‐2000]‐folate into the lipid membrane of microbubbles. The diameter and concentration of the MB_F were determined by a cell counter and sizer. The MB_F, control microbubbles (MB_C), and MB_F with a free folic acid block‐ade were tested for binding specificity to human ovarian carcinoma SKOV3 cells, which overexpress the FR, by microscopy and confocal imaging, respectively. Results. The basic physical characteristics of MB_F were similar to those of MB_C. In the cell binding test, the adherence efficiency of MB_F to the SKOV3 cells (mean ± SD, 16 ± 5 microbubbles per cell; P < .01) was significantly higher than that of MB_C (0.7 ± 0.4 microbubbles per cell) or MB_F with the free folic acid blockade (0.7 ± 0.6 microbubbles per cell). Conclusions. Folate‐targeted microbubbles showed high affinity to SKOV3 cells with FR overexpression. They are potentially useful for ultrasonic molecular imaging and treatment of FR‐positive tumors and warrant further investigation.     

Targeted Contrast-Enhanced Ultrasound Imaging of Angiogenesis in an Orthotopic Mouse Tumor Model of Renal Carcinoma

Previous studies have reported that microbubbles bearing targeting ligands to molecular markers of angiogenesis can be successfully detected by ultrasound imaging in various animal models of solid cancer. In the present study, we sought to investigate the activity of microbubbles targeted to vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR2) in an orthotopic model of renal cell carcinoma (RCC). Microbubbles conjugated to an anti-VEGFR2 antibody (MB_V) were compared with microbubbles conjugated to an isotype control antibody (MB_C) or naked microbubbles (MB_N). An orthotopic mouse model of human RCC was established by surgically implanting an established tumor within the renal capsule in mice. Tumor growth and blood flow were verified by B-mode and color Doppler ultrasound imaging. VEGFR2 expression within the tumor and renal parenchyma was detected by immunohistochemistry. The duration of contrast enhancement of MB_V was much longer than those of MB_N and MB_C when assessed over 10 min. The baseline-subtracted contrast intensity within the tumor was higher for MB_V than for MB_C and MB_N (p < 0.01). Additionally, the contrast intensity for MB_V was significantly higher in the tumor region than in normal parenchyma (p < 0.01). Microbubbles targeting VEGFR2 exhibit suitable properties for imaging angiogenesis in orthotopic models of renal cell carcinoma, with potential applications in life science research and clinical medicine.     

Comparison of Magnetic Microbubbles and Dual-modified Microbubbles Targeted to P-selectin for Imaging of Acute Endothelial Inflammation in the Abdominal Aorta

Purpose

Ultrasound molecular imaging (UMI) has potential to evaluate an inflammatory profile of endothelium. However, it is less successful in large arteries. This study compared magnetic microbubbles (MBs) selectively targeted to endothelial P-selectin and dual-targeting MBs in vitro and in vivo.

Procedures

MBs were modified with P-selectin antibody (MB_PM) or isotype control antibody (MB_CM) via a magnetic streptavidin bridge, and MBs were conjugated to P-selectin antibody (MB_P) or both P-selectin antibody and PAA-sialyl Lewis^x (MB_D) via regular streptavidin linker. Adherence of MBs was determined by using a parallel plate flow chamber at variable shear stress (0.5–24 dyn/cm²). Adhesive and magnetic behaviors of MBs were analyzed at 4.0 dyn/cm² or at a flow rate of 50 mm/s. Attachment of MBs to P-selectin was determined with contrast-enhanced ultrasound (CEU) imaging of murine abdominal aorta inflammation. The expression of P-selectin was assessed by immunohistochemistry.

Results

The adhesive efficacy of MB_D was greater than MB_P and MB_CM, but lower than MB_PM under all shear stress conditions (P?<?0.05). The behaviors of fast-binding and rolling slow down were noted in MB_D and MB_PM; meanwhile, magnetic shifting of MBs centerline was presented in MB_PM. Contrast video intensity (VI) from adhered MB_PM to P-selectin of the inflammatory aorta was significantly higher than those from MB_D and MB_P (P?<?0.05).

Conclusions

MB_PM may be a better molecular probe than MB_D for detection of P-selectin on aorta with CEU, likely due to the shifting of axial distribution. Thus, it may improve the detection of the inflammatory profile on large arteries by UMI.

     

VEGFR2-Targeted Molecular Imaging in the Mouse Embryo: An Alternative to the Tumor Model

As a tumor surrogate, the mouse embryo presents as an excellent alternative for examining the binding of angiogenesis-targeting microbubbles and assessing the quantitative nature of molecular ultrasound. We establish the validity of this model by developing a robust method to study microbubble kinetic behavior and investigate the reproducibility of targeted binding in the murine embryo. Vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR2)-targeted (MB_V), rat immunoglobulin G₂ (IgG₂) control antibody-targeted (MB_C) and untargeted (MB_U) microbubbles were introduced into vasculature of living mouse embryos. Non-linear contrast-specific and B-mode ultrasound imaging, performed at 21 MHz with a Vevo-2100 scanner, was used to collect basic perfusion parameters and contrast mean power ratios for all bubble types. We observed a twofold increase (p < 0.001) in contrast mean power ratios for MB_V (4.14 ± 1.78) compared with those for MB_C (1.95 ± 0.78) and MB_U (1.79 ± 0.45). Targeted imaging of endogenous endothelial cell surface markers in mouse embryos is possible with labeled microbubbles. The mouse embryo thus presents as a versatile model for testing the performance of ultrasound molecular targeting, where further development of quantitative imaging techniques may enable rapid evaluations of biomarker expression in studies of vascular development, disease and angiogenesis.     

双靶向超声微泡造影剂评价小鼠缺血再灌注心肌

目的 制备同时携载P选择素和ICAM-1抗体的靶向超声微泡造影剂,以评估小鼠缺血再灌注损伤心肌声学造影显像效果.方法 采用生物素-亲和素方法制备靶向微泡,于激光共聚焦显微镜下观察微泡形态,流式细胞仪检测连接效率.将24只健康昆明小鼠随机分成3组:结合双抗体选择素微泡组(MBd组)10只、结合P选择素单抗组(MBp组)10只,空白微泡组(MBc组)4只.结扎冠状动脉左前降支近左主干分支,制作心肌缺血再灌注模型,60 min后经尾静脉分别注射MBd、MBp及MBc,采集心肌对比造影图像.所有图像均采用Sonomath超声影像分析仪处理.结果 MBd组和MBp组对缺氧内皮细胞的黏附力以及对缺血再灌注区心肌显像增强程度显著高于MBc组(P均＜0.05),MBd组对缺血再灌注区心肌显像延迟时间高于MBp组(P＜0.05).结论 双靶向微泡联合超声造影是检测和评估小鼠缺血再灌注心肌的无创性手段.     

对比液态氟碳脂质纳米粒与全氟丙烷脂质微泡体外显影及耐声压性

目的 与全氟丙烷（C₃F₈）脂质微泡造影剂比较,分析自制液态氟碳（PFOB）脂质纳米粒体外显影及耐声压性的优劣。方法 分别制备生物素化PFOB脂质纳米粒及生物素化C₃F₈脂质微泡,评估其稳定性,并观察其加入亲和素前后的体外显影效果。对2种造影剂在低声压（MI=0.28）及高声压（MI=0.56）环境下进行超声辐照,于辐照前及辐照10、20、30 s后观察显影情况及其差异。结果 2种造影剂加入亲和素后均发生聚集现象,粒径均较加入亲和素前明显增大（P均<0.05）;且加入亲和素前（t=16.225,P<0.001）、后2种造影剂间粒径差异均有统计学意义（t=-5.046,P<0.001）。稳定性观察期间PFOB脂质微粒内浓度无明显改变,而C₃F₈脂质微泡随放置时间延长浓度呈减低趋势。加入亲和素后,PFOB脂质纳米粒回声明显增强;C₃F₈脂质微泡加入亲和素前后显影效果均较好。低声压（MI=0.28）及高声压（MI=0.56）环境下,PFOB脂质纳米粒造影剂显影强度无明显改变,而C₃F₈脂质微泡显影强度随辐照时间延长呈减低趋势。结论 相较于C₃F₈脂质微泡,PFOB纳米脂质纳米粒造影剂粒径小、耐声压性好,更符合靶向超声造影剂的要求。     

一种新型靶向微泡-干细胞复合体的制备

[摘 要] 目的 制备一种新型靶向微泡-干细胞复合体。方法 采用“生物素-亲和素”桥连法构建携抗ICAM-1抗体的靶向微泡（MBICAM-1）。用带正电荷的多聚赖氨酸（PLL）对MBICAM-1进行包覆和修饰,使靶向微泡表面带正电荷。采用静电吸附法将PLL修饰的MBICAM-1与大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）共同孵育,制备MBICAM-1-MSC复合体,流式细胞仪检测靶向微泡与MSC的结合率。结果 MBICAM-1经PLL修饰后,微泡表面带正电荷,但微泡形态、粒径以及与损伤内皮细胞（HUVEC）的结合率与未经PLL修饰的MBICAM-1无显著性差异（P＞0.05）。PLL修饰的MBICAM-1与MSC结合形成MBICAM-1-MSC复合体,且MSC与MBICAM-1之间的比例为1:40时,二者之间结合率达（29.45±2.88）%。结论 成功制备MBICAM-1-MSC复合体,当MSC与MBICAM-1之间的比例为1:40时,其结合率最大。 [关键词] 靶向微泡;骨髓间充质干细胞;复合体     

应变显像舒张指数评价急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入治疗术后左心室舒张功能延迟恢复

目的 应用二维超声斑点追踪显像(STI)技术检测急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗术(PCI)后不同时期的左心室心肌应变指标的变化,探讨应变显像舒张指数(SI-DI)对定量评价再灌注后局部心肌舒张功能延迟恢复的临床应用价值。方法 选择40例AMI患者,分别在PCI术前、术后1天、7天及1个月接受超声心动图检查,应用二维应变显像技术测定缺血心肌及非缺血心肌的横向应变峰值(Speak)、应变峰值延迟时间(TPS)及SI-DI,并进行比较。结果 冠状动脉的急性闭塞会引起相应灌注区域心肌收缩及舒张功能的显著降低,与非缺血心肌相比较,缺血心肌的Speak显著降低,TPS明显延长,SI-DI显著降低(P均<0.05)。PCI治疗7天及1个月后,与术前比较,缺血心肌的Speak明显升高,TPS明显缩短,SI-DI明显升高(P均<0.05)。代表收缩功能的Speak和TPS两项参数在术后7天恢复至正常,而代表舒张功能的SI-DI在术后1个月恢复至正常。非缺血心肌的各项参数在各时期的改变无明显差异(P均>0.05)。结论 SI-DI可用于评价AMI患者PCI术后左心室局部心肌舒张功能的延迟恢复情况。     

应用自制声学造影剂经静脉心肌造影的实验研究

目的　探讨经静脉注射自制造影剂进行心肌造影的可行性。方法　应用超声粉碎仪振荡 5 %白蛋白和低分子右旋糖酐 (4 0 )混合溶液 ,加入全氟化碳 (C3 F8)气体自制声学造影剂 ;应用HP 5 5 0 0超声诊断系统 ,选择左室短轴乳头肌切面 ,采用Contrast程序 ,双触发间歇二次谐波成像 ,对 14条正常犬进行 32次经静脉心肌造影 ,应用自编Mat lab软件可以定量进行心肌造影强度分析。结果　 32次经静脉注射自制造影剂后 31次获得满意的心肌显影。左室各壁心肌显影最大视频密度值为 4 9.4± 17.3至 117.3± 2 3.4 ,明显高于本底对照 (18.6± 8.11至 86 .3± 15 .6 6 ,P <0 .0 1)。结论　经静脉注射自制造影剂可以成功地进行心肌造影并可对心肌显影强度进行定量研究。     

携带抗P-选择素单抗靶向微泡和对比超声评价肾缺血再灌注损伤

目的探讨携带抗小鼠P-选择素单抗的靶向超声微泡（MBp）和对比超声（CEU）评价肾缺血再灌注损伤的可行性。方法12只实验小鼠随机均分为2组：缺血再灌注（IR组）和假手术组（SH组）,应用＂亲和素-生物素＂桥连法构建MBp。所有小鼠分别随机（间隔30min）经静脉弹丸注射给予普通脂质微泡（MB）和MBp,10min后行肾CEU检查,测量肾显影的声强度（VI）,最后进行肾组织免疫组化检测。结果第一帧CEU图像显示MBp及MB在IR组缺血再灌注肾分别可见显著及轻度的超声显影,而两者在SH组假手术肾均无明显的超声显影。VI值在IR组MBp较IR组MB及SH组MBp均明显增大（P〈0.05）;而在IR组MB较SH组MB轻度增大（P〈0.05）。免疫组化检测显示缺血再灌注肾血管内皮P-选择素表达较假手术肾明显增加。结论应用MBp行CEU检查可有效评价小鼠肾缺血再灌注损伤,将可用于评价微血管炎症或相关的血管内皮反应。