鱼油制剂对动脉腔内成形术局部平滑肌细胞超微结构影响的实验研究

鱼油制剂对动脉腔内成形术局部平滑肌细胞超微结构影响的实验研究哈尔滨科大学附属第一医院心内科杨树森，黄永麟，孙宝贵，赵进军哈远洋尔滨医科大学附属第一医院药剂部林继红１材料与方法纯系雄性日本大耳白兔８０只，随机分为对照组和鱼油组，每组再分为４个亚组，即成...     

氧化修饰低密度脂蛋白对培养动脉平滑肌细胞超微结构的影响

本文旨在观察氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)对平滑肌细胞(SMCs)形态学的影响,探讨其在动脉粥样硬化形成中的意义.作者用硫酸铜诱导形成OX-LDL,以不同浓度加入培养传至第三代的正常家兔主动脉SMCs中,定期孵育后进行透射电镜观察,并以同样浓度的正常LDL为对照.与对照组比较,OX-LDL有更强的细胞毒性作用,随着浓度的增加,SMCs相继出现基膜及膜下小泡消失,肌丝结构模糊,密斑减少,肌浆网显著扩张,线粒体肿胀,线粒体脊结构消失及空泡状结构等病理变化.结果表明,OX-LDL对培养的动脉SMCs有毒性损伤作用,呈剂量—效应关系.     

射频球囊成形术对血管平滑肌细胞的影响

本研究将射频球囊成形术应用于动脉粥样硬化狭窄模型，观察球囊表面电极直接释放射频能量并结合扩张压力对血管平滑肌细胞增殖作用的影响。另一组利用相同模型行单纯球囊成形术作为对照研究，结果显示，射频球囊成形术后血管平滑肌细胞器变性，线粒体及粗面内质网密度降低，细胞代谢障碍，合成型减少，部分血管平滑肌细胞变性坏死，新生内膜面积减少，对防止血管成形术后再狭窄有一定意义。     

卡托普利和氯沙坦对AngⅡ所致血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在不同浓度和不同作用时间下对血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的作用及卡托普利(CP)和氯沙坦(LT)对其的影响。方法采用流式细胞技术测定在AngⅡ不同浓度和不同作用时间下VSMC凋亡率的变化和CP、LT对其的影响。结果中低剂量AngⅡ对VSMC凋亡无明显作用,大剂量有诱导凋亡的作用;单用LT对VSMC凋亡无明显作用,单用CP有促进凋亡作用,二者合用时明显增加凋亡率。结论 大剂量AngⅡ可明显促进VSMC凋亡,合用CP和LT可明显增加AngⅡ所致VSMC的凋亡率。     

卡托普利对人离体动脉平滑肌细胞肾素－血管紧张素系统的影响

采用高血压患者（ＥＨ）的离体动脉血管，并分离、培养动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）．观察卡托普利对人ＡＳＭＣ合成和分泌肾素的影响。结果表明：体外培养的ＡＳＭＣ能合成和分泌肾素和血管紧张承Ⅱ（ＡｎｇⅡ）。ＥＨ组ＡＳＭＣ及培养液中的肾素活性（ＲＡ）和ＡｎｇⅡ显著高于正常血压组（ＮＴ）；ＲＡ和ＡｎｇⅡ与血压呈显著正相关（ｒ＝０．８４，０．９；Ｐ＜０．０１）。应用卡托普利后，ＥＨ组的ＡＳＭＣ内ＲＡ显著升高，而ＡｎｇⅡ则明显下降。结果提示血管存在着独立的肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ），高血压时血管ＲＡＳ异常活跃，卡托普利长期抗高血压的主要机理之一是抑制血管壁血管紧张素转换酶活性，减少局部ＡｎｇⅡ的产生。     

血管内近距离照射对兔髂动脉术后中膜平滑肌细胞凋亡的影响

目的观察血管内近距离照射（BT）对血管成形术后动脉中膜平滑肌细胞（SMC）凋亡的影响，并观察其量效关系，初步探讨其防治再狭窄的可能机制。方法24只大耳白兔随机分为3组，选择一侧行髂动脉血管成形术并分别给予9．1Gy、21．8Gy和33．4Gy^32 P液体球囊血管内照射治疗，对侧作为对照。术后5周，重复血管造影观察靶血管再狭窄程度，应用三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法（TUNEL法）检测中膜平滑肌细胞凋亡的情况。结果血管造影显示9．1Gy组狭窄与对照血管段无明显差异（P〉0．05）；21．8Gy组为仅轻度狭窄（P〈0．05）；33．4Gy组为重度狭窄（P〈0．05）。TUNEL阳性率在21．8Gy组和33．4Gy组均高于自身对照组（P〈0．01）。3个照射剂量组间，21．8Gy组作用最明显（P〈0．01）。结论^32P放射性液体球囊血管内照射治疗在一定剂量范围内可防止血管成形术后再狭窄的形成，促进血管中膜平滑肌细胞凋亡可能是其作用机制之一。     

球囊血管成形术对血管平滑肌细胞PDGF基因表达的影响

本研究应用核酸探针杂交技术检测球囊血管成形术后不同时期血管平滑肌细胞血小板源生长园子(PDGF)基因表达情况，结果表明，球囊血管成形术后8～12小时，PDGF-A链基因表达达高峰，48小时后明显降低，接近术前水平。PDGF-B链基因呈持续表达，在术后略有增加，至术后两周仍能检出，本结果提示PDGF可能参与血管成形术后平滑肌细胞增殖的调节，在术后再狭窄形成中起重要作用。     

卡托普利对血管成形术后管壁增生影响的实验研究

本实验应用球囊拉伤动脉内膜加高脂饲养的方法建立兔髂动脉粥样硬化模型。对１６只模型兔进行球囊血管扩张术。动物随机分为治疗组（ｎ＝８）和对照组（ｎ＝８）。治疗组动物于术前７天至术后２８天接受卡托普利（１２．５ｍｇ·ｋｇ－１／ｄ）治疗。术后４周处死动物，分离血管，应用流式细胞计数仪分析细胞中ＤＮＡ含量。结果表明，治疗组血管壁细胞增殖周期中增殖细胞数明显低于对照组，提示卡托普利能抑制球囊血管成形术后血管壁增生反应。     

卡托普利抑制自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的机制

卡托普利抑制自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的机制王向宇吴可贵晋学庆许昌声王华军肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）在高血压心血管肥厚中起重要作用。血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）降低血压、逆转心血管肥厚，主要是通过抑制心血管本身ＲＡＳ实现［１］。本实...     

卡托普利对人离体动脉平滑肌细胞肾素—血管紧张素系统的影响

采用高血压患者的离体脉血管，并分离、培养动脉平滑细胞，观察卡托普利对人ＡＳＭＣ合成和分泌肾素的影响。结果表明，体外培养的ＡＳＭＣ能合成和分泌肾素和血管紧张素Ⅱ。ＥＨ组ＡＳＭＣ及培养液中的肾素活性和ＡｎｇⅡ显著高于正常血压组；ＲＡ和ＡｎｇⅡ与血压呈显著正相关。应用卡托普利后。ＥＨ组的ＡＳＭＣ内ＲＡ显著升高，而ＡｎｇⅡ则明显下降。     

槲皮素对兔球囊血管成形术后管壁增生及培养的动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察槲皮素对培养的兔胸主动脉平滑肌细胞增殖及球囊血管成形术后管壁的增生反应。方法：将槲皮素（０．６μｍｏｌ／Ｌ，３．０μｍｏｌ／Ｌ，１５．０μｍｏｌ／Ｌ）加入平滑肌细胞培养液培养后进行细胞计数，并测定氚－胸腺嘧啶脱氧核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）放射性强度。应用球囊损伤动脉内膜加高脂饲养的方法建立髂动脉粥样硬化模型，对２０只模型兔进行球囊血管成形术。其中１０只于术前３天起至术后４周持续腹腔注射槲皮素２００ｍｇ／ｋｇ，每日１次。另１０只为对照组。结果：槲皮素能抑制胸主动脉平滑肌细胞的增殖及３Ｈ－ＴｄＲ的摄取（与对照组相比Ｐ＜０．０５或０．０１）；增加球囊血管成形术后血管腔面积，减少内膜和中膜厚度（与对照组相比Ｐ＜０．０５）。结论：槲皮素能抑制动脉平滑肌细胞增殖，预防血管再狭窄；槲皮素对酪氨酸蛋白激酶的抑制作用可能是其主要机制之一。     

射频球襄成形术预防动脉腔内成形术后再狭窄的实验研究

本文将射频球囊成形术应用于动脉粥样硬化狭窄模型，观察球囊表面电极直接释放射频能量并结合压力对动脉粥样硬化狭窄的作用，同时以单纯球囊成形术为对照。结果表明，射频球囊成形术后血管狭窄程度从平均６０％以上降低至平均１７％以下，明显低于对照组（Ｐ＜０．０５），术后４周再狭窄程度明显低于对照组。超微结构也显示，射频球囊成形术后血管平滑肌细胞增殖数量减少，提示该项技术对防止动脉腔内成形术后再狭窄可能是一项有希望的措施。     

卡托普利对血管平滑肌细胞增殖和PDGF—B、bFGF及相关癌基因的影响

采用内皮素建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型。用氚-胸腺嘧啶核苷（［3H］－TdR）参入法，流式细胞术，免疫细胞化学及NorthemBlot杂交方法，观察卡托普利（Cap）对VSMC增殖的作用及对生长因子PDGF－B，bFGF及其相关癌基因c－sis，c－myc表达的影响。结果发现：Cap能逆转内皮素所致的［3H］－TdR参入量增多，阻止血管平滑肌细胞由静止期（G0／G1期）进入DNA合成期（S期）和有丝分裂（G2／M期），并能逆转内皮素引起的PDGF—B，bFGF抗原，c－sis，c－mycmRNA表达增强。提示：aop有抑制血管平滑肌细胞增殖作用，与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关。     

血管成形术后平滑肌细胞增殖的机制

本文介绍冠脉成形术后血管平滑肌细胞增生的细胞生物学机制和影响其增殖程度的相关因素。     

不同龄大鼠血管平滑肌细胞超微结构和钙浓度

检测８，２４和４８ｗ龄ＨＳＲ和ＷＫＹ大鼠主动脉平滑肌细胞钙浓度和观察其超微结构。采用荧光探针结合计算机图像处理技术和电镜。三鼠龄ＷＫＹ ＡＳＭＣ「Ｃａ＾２＋ｉ」之间没差别。     

大黄素对血管平滑肌细胞增殖影响的实验研究

为研究大黄素对血管平滑肌细胞增殖的影响，用兔髂动脉中膜层进行体外血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）培养及氚标记胸苷掺入技术，探讨了中药纯品——大黄素对兔髂动脉正常动脉组ＳＭＣ、动脉硬化并球囊损伤后培养的ＳＭＣ增殖情况。结果表明：大黄素可抑制ＳＭＣ增殖，其主要抑制细胞由Ｇ０期向Ｓ期转化，且抑制作用为剂量依赖性，对动脉硬化并球囊损伤组抑制作用大于对正常细胞作用。本实验为临床可能应用该药抑制ＳＭＣ增殖，预防动脉介入性治疗后再狭窄提供理论依据。     

血管肽对人内乳动脉平滑肌细胞增殖及原癌基因表达的影响

目的 :观察血管肽 (AP)对血小板衍化生长因子 BB(PDGF- BB)刺激下人内乳动脉平滑肌细胞(h IMASMC)增殖及 c- m yb m RNA表达的影响 ,并探讨其作用机制。方法 :采用细胞计数及 3H- Td R掺入法观察细胞增殖及 DNA合成 ;以 N orthern blot观察 c- m yb m RN A表达。结果 :AP对 h IMASMC、DNA合成及 c- m ybm RNA表达具有剂量依赖性抑制作用。结论 :AP可抑制 h IMA SMC增殖 ,其作用与原癌基因表达有关     

不同方法对血管平滑肌细胞表型特性影响的实验研究

目的 通过两种分离方法体外获取血管平滑肌细胞（VSMCs）,比较细胞表型差异及生物学特性,为血管性疾病研究提供精确实验基础.方法 分别采用组织块法及酶消化法获取SD大鼠胸主动脉VSMCs,分为组织块组与酶消化组.倒置显微镜、结晶紫染色观察形态学改变并定量分析;MTT比色法及TransweU细胞迁移实验分别检测分析细胞增殖与迁移活性;流式细胞周期测定细胞周期分布;细胞免疫荧光染色鉴定VSMCs并测定分析收缩型标记蛋白α-平滑肌肌动蛋白（SMA）以及合成型标记蛋白平滑肌胚胎型肌球蛋白重链（SMemb）、原肌球蛋白-4（TPM-4）表达量的变化.结果 两组细胞SMA细胞免疫荧光染色阳性率≥95％,细胞呈现谷峰状结构生长.组织块组与酶消化组两组细胞长径径值分别为（95.10±16.23）μm和（114.67±15.92）μm.与酶消化组相比,组织块组细胞增殖及迁移活性分别增加23.04％和1.54倍（P＜0.05）,S＋G2期所占比例增加49.68％（P＜0.05）,SMA蛋白表达量下降（P＜0.05）,SMemb及TPM-4蛋白表达均增加（P＜0.05）.结论 组织块法获取细胞多以合成表型为主,酶消化法则主要呈收缩表型.伴随细胞形态学、增殖及迁移活性、表型特异性蛋白表达等不同改变,两种细胞获取方法可为不同目的研究提供精确的体外模型.     

葛根素诱导血管平滑肌细胞凋亡的实验研究

目的：观察葛根素促进人脐动脉血管平滑肌细胞凋亡的作用，探讨葛根素抑制平滑肌细胞增殖的机制。方法：分离培养人脐动脉平滑肌细胞，不同浓度葛根素与细胞孵育，TUNEL检测葛根素诱导细胞凋亡，rt-PCR实验检测促凋亡基因Bax和抗凋亡基因Bcl-XL。结果：随着葛根素浓度升高，细胞生长受抑制，TUNEL阳性细胞显著增加。rt-PCR实验发现促凋亡基因Bax随药物浓度和作用时间的增加而上升，而且Bax、Bcl-XL基因表达比例有一定升高。结论：葛根素通过调节经典的Bax、Bcl-XL通路对血管平滑肌细胞凋亡有一定诱导作用。