慢性低氧对大鼠血浆尾加压素Ⅱ浓度和右心室尾加压素Ⅱ受体的影响

目的: 探讨尾加压素Ⅱ(UII)受体在慢性低氧性右心室肥大中的作用。方法: 在慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压、右心室肥大的大鼠模型上, 采用放射性配基结合法, 测定不同缺氧时间(2周、4周)右心室肌浆膜上UII受体的结合率, 放免法测定血浆UII的含量。结果: 慢性低氧高二氧化碳大鼠的肺动脉平均压(mPAP)和右心室(RV)与左心室加室间隔(LV+S)重量比(RV/LV+S)明显高于对照组(P<0.01); UII受体结合位点(B_max), 低氧2周组比正常对照组高26.7%(P<0.01), 4周组又比2周组高19.8%(P<0.01), UII受体亲和力(Kd值)3组间无显著差别(P>0.05); 血浆UII水平呈先高后降的双向变化, 2周组比正常组高33.5%(P<0.01), 而4周组比2周组低15.4%(P<0.05), 与正常对照组相近。结论: 慢性低氧高二氧化碳使大鼠右心室肌浆膜上UII受体增加, 其变化可能参与了右室肥大。     

大鼠主动脉球囊成形术后尾加压素II受体的变化

目的 :观察大鼠主动脉球囊成形术后尾加压素II (UII)受体特征的变化及血管对UII收缩效应的改变。方法 :测定大鼠主动脉球囊损伤后 [12 5I]-UII配体结合及血管张力。结果 :球囊成形术后 3d、2 1d时 ,血管对UII的反应性增强 (P <0 0 5 ) ,主动脉UII受体最大结合 (Bmax)较对照组分别高 44 %及 36 % [(35 0 3± 2 41)pmol/gproteinand (33 2 6± 2 40 )pmol/gproteinvs(2 4 37± 3 2 0 )pmol/gprotein ,P <0 0 1],受体与配体解离常数 (Kd)无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :血管球囊损伤后UII受体发生上调 ,受体密度增加 ,血管对UII的反应性增强 ,表明UII可能在血管成形术后再狭窄过程中发挥重要作用。     

大鼠主动脉球囊成形术后尾加压素II受体的变化

目的:观察大鼠主动脉球囊成形术后尾加压素II(UII)受体特征的变化及血管对UII收缩效应的改变。方法:测定大鼠主动脉球囊损伤后[¹²⁵I]-UII配体结合及血管张力。结果:球囊成形术后3d、21d时,血管对UII的反应性增强(P＜0.05),主动脉UII受体最大结合(Bmax)较对照组分别高44%及36%,受体与配体解离常数(Kd)无显著差异(P＞0.05)。结论:血管球囊损伤后UII受体发生上调,受体密度增加,血管对UII的反应性增强,表明UII可能在血管成形术后再狭窄过程中发挥重要作用。     

尾加压素II及其心血管效应

尾加压素II(urotensinII,UII)最早是从鱼尾部下垂体中分离出的神经环肽 ,目前已从人体克隆出来 ,主要分布于神经和心血管组织 ,人体内一种孤立的G蛋白偶联受体GPR14是其特异性受体 ,主要分布于心血管和神经系统。当UII与GPR14结合后 ,引起细胞外Ca2 内流 ,介导一系列生物学效应。在心血管系统 ,小剂量UII引起血流阻力轻度降低 ,心输出量轻度增加 ;大剂量引起心输出量明显减少 ,动脉血管强烈收缩 ,其缩血管效应是内皮素 1的 10余倍 ,是迄今所知最强的缩血管活性肽。     

尾加压素II对大鼠损伤血管基质金属蛋白酶的影响

目的 观察外源性尾加压素 II（UII）及其拮抗剂 Urantide 对大鼠胸主动脉球囊拉伤模型损伤动脉基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、MMP-2 和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）的影响。 方法 构建大鼠胸主动脉球囊拉伤模型,分为 4 组：假拉伤组、单纯拉伤组、拉伤术后持续皮下给予 UII （1 nmol&#8226;kg-1&#8226;h-1）的 UII 组、拉伤术后持续皮下给予 Urantide（10 nmol&#8226;kg-1&#8226;h-1）的 Urantide 组。21 d 后,采用 RT-PCR 方法检测各组 UII 受体 G 蛋白偶联受体-14（GPR-14）的表达,免疫组化和明胶酶谱法检测 MMP-1、MMP-2、TIMP-2 的表达水平与活性。 结果 ①单纯拉伤组血管 GPR-14 mRNA 相对表达量（0.66 ± 0.09）明显高于假拉伤组（0.42 ± 0.06）,为其 1.6 倍（P < 0.05）;②与单纯拉伤组相比,UII 组 GPR-14 mRNA 相对表达量增高（0.93 ± 0.06,P < 0.05）,MMP-1 表达降低（8.3 ± 1.8 vs. 3.3 ± 0.8,P < 0.05）,MMP-2 活性高至其 1.25 倍（137 ± 24 vs. 172 ± 8,P < 0.05）,TIMP-2 表达降低（14.8 ± 2.4 vs. 4.0 ± 0.8,P < 0.05）;③与单纯拉伤组相比,Urantide 组 GPR-14 mRNA 相对表达量降低（0.37 ± 0.08,P < 0.05）,MMP-1 表达差异无统计学意义,MMP-2 活性高至其 1.29 倍（177 ± 21,P < 0.05）,TIMP-2 表达降低 （6.6 ± 1.2,P < 0.05）。 结论 大鼠胸主动脉损伤后局部 GPR-14 mRNA 水平上调,外源性应用 UII 后,GPR-14 mRNA 水平进一步上调,MMP-1 表达下降,TIMP-2 表达减少,MMP-2 活性升高。应用 Urantide（10 nmol&#8226;kg-1&#8226;h-1）能抑制 GPR-14 mRNA 的水平上调,但对 MMP-1 的表达无明显影响,未能表现出拮抗胶原沉积的作用,甚至对 MMP-2/TIMP-2 平衡有类 UII 的作用,其意义有待进一步研究。     

尾加压素Ⅱ及其心血管效应

尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UII)最早是从鱼尾部下垂体中分离出的神经环肽,目前已从人体克隆出来,主要分布于神经和心血管组织,人体内一种孤立的G蛋白偶联受体GPR14是其特异性受体,主要分布于心血管和神经系统.当UII与GPR14结合后,引起细胞外Ca2+内流,介导一系列生物学效应.在心血管系统,小剂量UH引起血流阻力轻度降低,心输出量轻度增加;大剂量引起心输出量明显减少,动脉血管强烈收缩,其缩血管效应是内皮素-1的10余倍,是迄今所知最强的缩血管活性肽.     

尾加压素Ⅱ对大鼠肠系膜微循环的影响

目的: 探讨尾加压素(UII)对于大鼠肠系膜微循环的影响。方法: 采用活体微循环观测技术观察UII对于SD大鼠肠系膜微血管内径、血流速度的作用,采用激光多普勒血流量仪测定肠壁血流量的变化。结果: 正常对照组肠系膜细动脉和细静脉血管内径分别为(21.4±2.3) μm和(38.1±3.6) μm,UII组于滴加UII(10^-7mol/L)后即刻细动脉和细静脉出现收缩,1 min时细动脉和细静脉收缩达到高峰,血管内径分别为(14.1±1.4) μm和(22.2±5.2) μm(与正常对照组比较,P<0.05);细动、静脉内血流速度无明显变化(与正常对照组比较P>0.05);肠壁血流量于滴加UII(10^-7 mol/L)后1 min开始升高,5 min达到高峰 。结论: UII可以使大鼠肠系膜微血管收缩,血流量增加。     

尾加压素Ⅱ对大鼠损伤血管基质金属蛋白酶的影响

目的 观察外源性尾加压素Ⅱ（UII）及其拮抗剂Urantide对大鼠胸主动脉球囊拉伤模型损伤动脉基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、MMP-2和组织基质金属蛋白酶抑制剂．2（TIMP-2）的影响。 方法构建大鼠胸主动脉球囊拉伤模型,分为4组：假拉伤组、单纯拉伤组、拉伤术后持续皮下给予UII（1nmol·kg^-1·h^-1）的UII组、拉伤术后持续皮下给予Urantide（10nmol·kg-1·h^-1）的Urantide组。21d后,采用RT-PCR方法检测各组UII受体G蛋白偶联受体-14（GPR-14）的表达,免疫组化和明胶酶谱法检测MMP-1、MMP-2、TIMP-2的表达水平与活性。 结果①单纯拉伤组血管GPR-14mRNA相对表达量（0．66±0．09）明显高于假拉伤组（0．42±0．06）,为其1.6倍（P〈0．05）;②与单纯拉伤组相比,UII组GPR-14mRNA相对表达量增高（0．93±0．06,P〈0．05）,MMP-1表达降低（8.3±1．8VS3．3±0．8,P〈0．05）,MMP-2活性高至其1．25倍（137±24VS172±8,P〈0．05）,TIMP-2表达降低（14．8±2．4VS4．0±0．8,P〈0．05）;③与单纯拉伤组相比,Urantide组GPR-14mRNA相对表达量降低（0．37±0．08,P〈0．05）,MMP-1表达差异无统计学意义,MMP-2活性高至其1．29倍（177±21,P〈0．05）,TIMP-2表达降低（6．6±1．2,P〈0．05）。 结论大鼠胸主动脉损伤后局部GPR-14mRNA水平上调,外源性应用UII后,GPR,14mRNA水平进一步上调,MMP-1表达下降,TIMP-2表达减少,MMP-2活性升高。应用Urantide（10nmol·kg^=1·h^-1）能抑制GPR-14mRNA的水平上调,但对MMP-1的表达无明显影响,未能表现出拮抗胶原沉积的作用,甚至对MMP-2／TIMP-2平衡有类UII的作用,其意义有待进一步研究。     

血管紧张素在培养乳鼠心肌细胞肥大发生中的作用

本实验观察到血管紧张素Ⅰ、Ⅱ(AngⅠ、AngⅡ)均可促进培养的乳鼠心肌细胞(MC)DNA、RNA和蛋白质的合成。并发现随着AngⅠ和AngⅡ作用时间的延长,对MC的RNA和蛋白质合成的促进作用也逐渐增强,而对其DNA合成的促进作用则有一定的时间界限。此外,还发现在AngⅠ和AngⅡ长期作用下可使MC体积增大。当AngⅠ和血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂同时加入培养基,则无上述结果发生。这提示血管紧张素可能在心肌肥大的发生中起一定作用,而且AngⅠ是通过MC本身的ACE将其转化为AngⅡ后才起作用的。     

PARP-2在大鼠心肌肥大中的作用

目的:在细胞和整体水平研究多聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶2(PARP-2)在心肌肥大过程中表达的变化规律以及PARP-2对心肌肥大的调控作用。方法:健康雄性SD大鼠采用腹主动脉缩窄法(AAC)建立心肌肥大动物模型,采用real-time PCR和Western blot检测PARP-2的mRNA和蛋白表达变化;使用PARP-2特异性的siRNA干扰序列来处理细胞后,通过检测心肌细胞表面积及ANF、BNP和β-MHC的mRNA表达变化来作为评判心肌细胞肥大状况。结果:AAC大鼠心脏组织中PARP-2的蛋白和mRNA表达均显著上调;在AngⅡ诱导的心肌细胞肥大模型中,AngⅡ能时间和剂量依赖性地上调PARP-2的mRNA和蛋白表达;用siRNA干扰序列沉默PARP-2能够逆转AngⅡ所诱导心肌细胞的肥大。结论:在AngⅡ诱导的心肌细胞肥大的体外模型和腹主动脉缩窄诱导的心肌肥大动物的体内模型中,PARP-2的mRNA和蛋白水平均显著上调;特异性沉默PARP-2能够抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。     

Gαq/11信号转导通路在血管紧张素Ⅱ引起心肌肥大中的作用

目的:研究Gαq/11介导的信号转导通路在血管紧张素II(AngII)引起心肌肥大中的作用。方法:复制2K1C肾性高血压大鼠模型,分别在术后1、2、4、8周观察高血压大鼠和卡托普利治疗后大鼠血流动力学的变化;测定心肌肥大指数并用放免法测定心脏AngII含量;采用免疫印迹法测定心脏Gαq/11含量;以[³H]标记的4,5-二磷酸磷脂酰肌醇(PIP₂)为底物,测定磷脂酶C(PLC)活性。培养乳鼠心肌细胞,测定AngII刺激后心肌细胞[³H]-亮氨酸掺入和Gαq/11含量的变化。结果:2K1C大鼠在术后2周血压开始明显升高并从2周开始出现心肌肥大;心脏AngII含量在术后1-8周均明显增高;心脏Gαq/11含量在4周和8周时分别比假手术组高25.0％和35.8%(P＜0.05)。PLC活性在2周、4周和8周时比假手术组分别高12.8%、21.8%和21.0%(P＜0.05)。卡托普利治疗可以降低血压逆转心肌肥大,并抑制Gαq/11含量增加和PLC活化。AngII刺激培养的心肌细胞1h即可引起Gαq/11含量增加,刺激24h-亮氨酸掺入才明显增加。结论:激活Gαq/11及其下游的信号分子是介导AngII引起心肌肥大的重要信号转导途径。     

胰岛素促进心肌成纤维细胞增殖和心肌细胞肥大的作用

目的:研究胰岛素对心脏细胞增殖和心肌细胞肥大的影响,探讨其在心肌肥厚中的作用。方法:①乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞的培养及光镜、电镜和免疫细胞化学染色的鉴定。②测定细胞的数量、代谢活性(WST-1)与DNA合成(BrdUELISA法)及细胞周期百分比(流式细胞仪)以反映细胞增殖。③用细胞蛋白含量(考马斯亮蓝法)评估细胞肥大。结果:①培养的细胞分别为心肌细胞和心肌成纤维细胞。②胰岛素处理后,心肌成纤维细胞数量、WST-1与BrdU的吸光值及S+G₂+M期细胞百分比明显升高(P＜0.01或P＜0.05),而心肌细胞的上述参数无明显变化(P＞0.05)。③胰岛素作用下,心肌细胞蛋白含量明显增加,且在10^-10mol/L-10^-7mol/L范围内呈量效关系(P＜0.01或P＜0.05)。结论:在体外胰岛素有促进心肌成纤维细胞增殖和增加心肌细胞蛋白含量(诱导心肌细胞肥大)的作用,可能在体内心肌肥厚的发生发展过程中起重要作用。     

心肌肥厚形成过程中肌醇磷脂途径的作用

目的:探讨肌醇磷脂途径在压力超负荷性心肌肥厚形成中的作用。方法:对SD大鼠行腹主动脉部分缩窄术复制心肌肥厚模型,术后10d、30d时处死动物测全心重/体重比值,以免疫印迹法测左室组织Gαq/11蛋白含量,以放免法测左室组织1,4,5-三磷酸肌醇(IP₃)含量。结果:术后10d和30d时腹主动脉部分缩窄(CA)组全心重/体重比值均高于假手术(SO)组(P＜0.01),在术后10d和30d两个时点两组大鼠左室组织Gαq/11蛋白含量均无显著差异(P＞0.05)。术后10d时CA组大鼠左室组织IP₃含量明显高于SO组(P＜0.05),但术后30d时两组IP₃含量无显著差异(P＞0.05)。结论:肌醇磷脂途径过度激活可能参与压力超负荷性心肌肥厚早期病理过程。     

Stereology of myocardial hypertrophy induced by physical exercise

Summary Twenty young female Sprague-Dawley rats were randomly assigned to 2 groups. Ten animals served as sedentary controls, the 10 experimental animals were subjected to a training program with gradually increasing intensity of 18 weeks duration on a motor-driven treadmill. The rats were fixed by retrograde vascular perfusion via the abdominal aorta under anesthesia. Two transverse and 2 longitudinal sections per animal were selected at random from the left ventricular papillary muscles for light and electron microscopic stereological investigation. Length density and surface density of myocardial cells and capillaries were estimated with correction for partial anisotropy and curvature by means of the mathematical model of a Dimroth Watson orientation distribution. Left and right ventricular weight increased by 20% in the exercise group (P<0.001), whereas body weight remained unchanged. Physical training led to a significant increase of heart muscle fiber cross-sectional area by 17% (P<0.01). The ultrastructural volumetric composition of the myocardial cell cytoplasm by myofibrils, mitochondria, and sarcoplasmic matrix remained unchanged. Volume density, length density and surface density of capillaries, as well as capillary cross-sectional area and capillary anisotropy parameters were not significantly altered by training. From the data one concludes an increase of the 3-dimensional capillary-fiber ratio by 19% (P<0.001). Thus physical training induces mild absolute biventricular cardiac hypertrophy in young female rats, in which capillary proliferation compensates for the increase of mean oxygen diffusion distance resulting from fiber thickening, by supplying each unit of fiber length by more units of capillary length.     

心肌肥厚大鼠心肌组织中5-羟色胺及血管紧张素-Ⅱ含量的变化

目的：观察大鼠发生心肌肥厚时心肌组织中5-羟色胺（5-HT）及血管紧张素-Ⅱ（Ang-Ⅱ）含量的变化，探讨5-HT、Ang-Ⅱ与心肌肥厚发生的关系。方法：采用腹主动脉缩窄法建立压力超负荷心肌肥厚模型；腹腔注射甲状腺素法建立体液性心肌肥厚模型；荧光分光光度法和放射免疫分析法测定5-HT及Ang-Ⅱ含量。结果：大鼠腹主动脉缩窄后8周，心肌肥厚明显，分别于主动脉缩窄后4-8周内处死动物，发现心肌肥厚程度逐渐加重；心肌组中5-HT及Ang-Ⅱ含量也逐渐增加，并与肥厚程度呈正相关。腹腔注射甲状腺素2周后出现心肌肥厚，4周时症状加剧；于2、3、4周时处死动物，发现肥厚心肌组织中5-HT和Ang-Ⅱ含量均显著增加。结论：提示5-HT与心肌肥厚的形成有关，二者之间的相互关系尚待进一步研究。     

甲状腺素性心肌肥大模型的建立

心肌肥大是致心律失常的重要诱因[1] ,一般常用腹主动脉结扎复制心肌肥大动物模型 ,此方法操作复杂 ,对动物损伤较大。本文采用甲状腺素致大鼠心肌肥大 ,对模型动物进行心肌细胞能量代谢、离子分布等方面的检测 ,并对心肌肥大大鼠进行冠脉结扎 -再灌 ,诱发心律失常 ,观察缺血再灌各时点心律失常分数及恶性心律失常室颤 (ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｆｒｉｂｉｌｌａ ｔｉｏｎ)的发生率。材　料　和　方　法1　试剂　　Ｌ -甲状腺素 (Ｌｅｖｏｔｈｙｏｘｉｎｅ)及ＡＤＰ ,Ｓｉｇｍａ公司产品 ;工艺超纯硝酸及工艺超纯高氯酸 ,上海试剂一厂生产 ;…     

大鼠压力负荷性肥大心肌中TNF-α mRNA表达变化

目的：探讨大鼠压力负荷性肥大心肌中TNF-α mRNA表达的变化及卡托普利（captopril）对其的影响。方法：采用腹主动脉缩窄法复制压力超负荷心肌肥大模型，于术后42 d采血、摘取心脏，测定心肌肥大指数并采用酶联免疫法测定血清及左心室肌TNF-α含量；应用心肌原位杂交法结合图像分析系统检测心肌组织中TNF-α mRNA表达的变化，并观测TNF-α mRNA在心肌组织中的定位。结果：术后42 d心肌明显肥大，以左心室为主；主动脉缩窄（aorta-constriction, AC）组心室肌TNF-α含量比假手术（sham-operation, SO）组高98%（P<0.01）；卡托普利干预使心室肌TNF-α含量比AC组低64.14%（P<0.01），但未达到对照水平；心肌组织原位杂交显示TNF-α mRNA表达主要在心肌间质部位，假手术组心肌TNF-α mRNA表达水平极低，明显低于AC术后（P<0.01），captopril干预虽明显抑制AC术后心肌组织中TNF-α mRNA表达，但并未使其达到SO组水平。结论：心肌组织内源性TNF-α的表达增加在压力负荷性心肌肥大中具有重要的调控作用，其过表达可能与RAS激活促心肌间质TNF-α mRNA表达上调有关。     

TGF-β1及其信号蛋白Smad3对大鼠心肌细胞肥大的作用

目的：探讨转化生长因子β1（transforming growth factor,TGF-β1）及其信号蛋白Smad3在诱导大鼠心肌细胞肥大中的作用。 方法： 培养新生大鼠心肌细胞，流式细胞仪检测心肌细胞总蛋白含量，RT-PCR法检测胚胎抗原ANF mRNA（atrial natriuretic factor）及Smad3 mRNA的表达，Western blotting检测Smad3蛋白的表达。 结果： 不同浓度TGF-β1均能明显增加心肌细胞总蛋白含量和ANF mRNA的表达, Smad3基因反义寡核苷酸能抑制TGF-β1诱导的心肌细胞肥大，TGF-β1诱导肥大的心肌细胞内信号蛋白Smad3表达的增加。 结论： TGF-β1及其信号蛋白Smad3可能参与诱导大鼠心肌细胞肥大的病理过程。