大鼠实验性胃溃疡期间胃泌素细胞的免疫组织化学与放射自显影相结合的研究

本实验使用PAP法与离体培养放射自显影术相结合的方式,研究实验性胃溃疡期间幽门窦胃泌素(G)细胞的标记指数及G细胞数目的变化,以便进一步了解G细胞在自身抗病过程中的作用。用成年雄性大鼠16只,分为溃疡组和对照组,后者又分为盐水模拟手术组和正常组。在实验性胃溃疡术后4、6、10和21天取材,     

大鼠实验性胃溃疡期间胃窦粘膜胃泌素细胞的免疫组织化学和放射自显影研究

成年雄性Wistar大鼠16只,分为实验溃疡组和对照组,后者又分为盐水组和空白组。在手术后4、6、10和21天取胃窦粘膜,经离体~3H-TdR掺入,用免疫组织化学和放射自显影方法观察胃泌素细胞(G细胞)的变化。正常大鼠胃窦粘膜G细胞标记指数为1.59±0.78,细胞百分率为4.27±0.27。溃疡组G细胞标记指数在手术后4天比对照组降低,10天的比对照组增高;G细胞百分率在手术后4、6、和10天低于对照组,21天的则高于对照组;经统计学处理,其中21天的G细胞百分率与4或6天的相比有显著性差异。溃疡组手术后6天的新生粘膜内出现G细胞,其数目随时间增加。6、10和21天的新生粘膜内可见少量~3H-TdR标记的G细胞。G细胞形状有多种,有的G细胞伸出突起,与幽门腺其他腺细胞接触。本研究结果提示,在大鼠实验性胃溃疡修复期间,G细胞可能与其他内分泌细胞共同参与了机体自然抗病活动。     

胎儿胃肠道胃泌素细胞与生长抑素细胞的免疫组织化学研究

本文用PAP免疫组织比学法和间接免疫荧光组织化学法,对60例8～38周胎儿胃肠粘膜中胃泌素细胞(G细胞)和生长抑素细胞(D细胞)的发生进行了研究。这两种细胞最早出现于8～9周胎儿十二指肠上皮中,但在固有膜及肌层未观察到。12周后,D细胞出现在胎儿胃肠全长粘膜,G细胞则只见于胃窦及小肠粘膜。本文还对各时期胎儿胃肠粘膜中D细胞和G细胞的分布、数量,以及二者比例变化等进行了观察。胃窦中G细胞与D细胞一样,基底部伸出突起,可能具有旁分泌功能。除胃底腺外,其余部位的D细胞和G细胞多为开放型细胞。本文对这两种细胞在胎儿胃肠发育中的可能功能进行了讨论,并与成人胃窦和十二指肠上部粘膜中G、D细胞的比例进行了对比观察。     

放射自显影术在植块培养(explant culture)中的应用

<正> 由于放射自显影术能够分析细胞内物质代谢与分布的动态过程,较其它细胞化学方法简单而准确,因而非常广泛地应用在各种领域的放射性同位素示踪研究。在组织培养方面,应用放射自显影术,一般都是在单层细胞培养中进行。而在植块法培养中,应用放射自显影术则较少报道。我们在神经组织的植块培养中,曾进行~3H-尿嘧啶核苷和     

离体培养细胞的力学实验方法

细胞力学是组织工程和细胞工程的基础之一，在细胞离体培养过程中对细胞施加不同的机械力以研究应力对细胞的影响是细胞力学的一个重要研究领域， 也是细胞力学的重要研究手段。本文综述了离体培养细胞的力学实验方法，根据不同的载荷施加方式可分为：微吸管吸吮技术、压力载荷法、基底拉伸法和流体剪切法等，并指出了各种方法存在的利与弊。     

介绍一种用小白鼠骨髓细胞离体培养的升白模型

多年来,研究药理的科研工作者测试升高白血球药物的效果,常用小白鼠升白模型。就是用化学药物把小白鼠的白血球降到正常值的1/3～1/2,备作升白药物的试测对象。但是由于小白鼠品系不纯,饲养不善,     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛胃泌素和生长抑素细胞的免疫组织化学研究

目的　探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间 ,胰岛胃泌素免疫反应细胞 (gastrin ,G)和生长抑素细胞(somatostatin ,SSorD)的变化。　方法　免疫组织化学ABC技术。　结果　大部分G细胞免疫反应深浅不一 ;溃疡术后 4、10d ,胰岛G细胞面数密度增高 ,与正常或盐水组相比P <0 0 5。D细胞面数密度于 4d增加 ,P <0 0 5。　结论　成年大鼠胰岛细胞呈胃泌素免疫反应阳性 ;胰岛G细胞和D细胞可能以内分泌或旁分泌调节的途径间接或直接参与大鼠实验性胃溃疡修复的过程。     

介绍一种制备培养细胞电镜标本的方法

在培养细胞电镜标本制备方法中 ,对样品的收集往往要求生活状态较好的贴壁细胞 (悬浮培养细胞例外 )。但对目前研究较多的凋亡细胞来讲 ,若按常规方法收集制备样品 ,往往不能达到满意的结果。因为凋亡细胞或凋亡小体主要漂浮在培养液中 ,如果在收集样品过程中将培养液全部弃掉     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间幽门粘膜上皮及腺细胞的组织化学和放射自显影研究

应用组织化学方法和放射自显影术相结合,观察了大鼠实验性胃溃疡术后4、6、10、21 d幽门粘膜上皮和腺细胞标记指数及粘液的组织化学、PAS反应、醛复红染色和Alcian蓝(pH 2.5)染色的变化。结果表明,实验性胃溃疡术后第6、10、21d溃疡组与对照组上皮和腺细胞标记指数相比,第21 d新生上皮和腺细胞标记指数49.05±1.41,与空白组粘膜上皮和腺细胞标记指数10.03±0.40相     

大鼠实验性胃溃疡期间胃窦粘膜上皮及幽门腺的组织化学和放射自显影研究

用成年雄性Wistar大鼠16只,分为溃疡组和对照组,后者又分为盐水组和空白组。在实验性胃溃疡术后4、6、10和21天取胃窦粘膜,经体外培养,~3H-TdR摻入,在放射自显影前后,分别进行PAS反应与醛复红、Alcian蓝(pH2.5)及HE染色,观察胃窦粘膜上皮和幽门腺细胞标记指数、细胞百分率及组织化学变化。正常大鼠胃窦粘膜上皮和幽门腺细胞标记指数为10.03±0.40、细胞百分率为95.73±0.26。溃疡组术后6、10和21天粘膜上皮和腺细胞标记指数增高,与对照组相比有高度显著性差异。21天时新生上皮和腺细胞标记指数增高,与空白组相比,也有高度显著性差异。溃疡组细胞百分率在6天增加,与空白组相比有显著性差异;其中21天与4天和6天相比,均有高度显著性差异。新生粘膜上皮和腺细胞的PAS反应、醛复红和Alcian蓝染色呈强阳性或阳性。本研究的结果提示,实验性胃溃疡自愈期间,胃窦粘膜和新生粘膜上皮及腺细胞增殖活跃,分泌粘液的功能旺盛。上述变化对溃疡局部的修复具有重要作用。     

一种新的培养嗅鞘细胞方法(英文)

为了建立一种新的培养嗅鞘细胞的方法,从而为神经诱导修复材料的研究提供种子细胞。本研究取新生鼠的嗅球最外两层经胰蛋白酶消化成单细胞悬液,经差速贴壁法纯化,观察并记录其形态特征;经HE染色以及神经生长因子蛋白受体p75(NGFR-p75)和S-100免疫组化染色鉴定并计算其纯度。结果显示,获得的嗅鞘细胞突起呈双极或三级,p75和S-100阳性细胞纯度达到91%。上述结果提示该方法经济易行,所获得的嗅鞘细胞纯度高、活性好。     

介绍一种对中枢肽类神经元光、电镜免疫组织化学的改进方法

本实验对大鼠下丘脑生长抑素神经元染色,以5%丙烯醛固定,1 mm~3组织块浸泡2.5小时,入30%蔗糖过夜,冰冻或振荡切片机切片50μm后分别用高碘酸钠、氢硼化钠处理,以去除多余的固定剂,后常规漂浮PAP染色。电镜标本用振荡切片机切片,采用平板包理技术,LKB超薄切片,H-800电镜观察。本实验同时对比了Bouin和多聚甲醛固定剂灌注后PAP染色,并进一步观察了三种条件下对LHRH和NT的PAP染色,结果表明,丙烯醛明显优越于其它二种固定剂,它能很好的显示下丘脑各区的阳性细胞和纤维,尤其是细的纤维,并且背底浅淡。电镜观察结果也进一步证明丙烯醛在较好的保存细微结构的同时,比其它任何一种固定液都显示出更强的     

在体和离体的鸡背根节神经细胞5-羟色胺的免疫组织化学研究

用PAP免疫组织化学方法研究了鸡胚和雏鸡背根节内5-HT神经细胞的形态与胚胎发育,并在离体细胞培养条件下研究了靶周围组织(皮肤)对其胚胎发育的影响。在鸡腰骶部背根节,5-HT免疫反应阳性细胞最先出现于鸡胚13d(E_(13)),占0.4%;孵出后2d(AH_2)占6.2%。阳性细胞主要为大的A类细胞和极少的小B类细胞。免疫反应阳性的周围神经末梢位于皮肤和跟腱中。取自E_9鸡胚的背根节细胞培养7d后有部分出现5-HT阳性免疫反应,取自E_6鸡胚的背根节细胞培养10d仍为阴性反应;然而,当取自E_6鸡胚的背根节细胞与皮肤组织联合培养10d后,则出现5-HT阳性免疫反应细胞。本文还对脊髓5-HT细胞的出现进行了讨论。     

一种国产胃泌素释放肽前体化学发光免疫试剂的性能验证

目的 胃泌素释放肽前体(progastrin- releasing peptide,proGRP)是鉴别小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)与非小细胞肺癌(non- small cell lung cancer,NSCLC)及其他良性肺部疾病的重要标志物。长光华医研发生产了proGRP化学发光免疫分析试剂(chemiluminesent immunoassay,CLIA),厂家声明,该试剂精密性<10%,检出限为5pg/mL,回收率在±10%之间,参考区间为<65pg/mL,线性范围为15~3000pg/mL,血清与血浆相关性良好,血清稳定性可达96 h,与Roche电化学发光法proGRP试剂相关性良好。在此对该试剂进行了性能验证。方法 采取美国临床实验室标准化协会(CLSI)文件推荐的方法及美国病理家协会CAP要求,对该国产proGRP检测试剂盒及配套仪器AE- 180检测系统进行精密度、分析灵敏度、回收率、线性范围、参考区间、血清血浆一致性及血清稳定性进行性能验证,并跟罗氏e601系统平行检测199例包括健康体检样本、小细胞肺癌、非小细胞肺癌及良性肺部疾病样本,比较2种检测系统结果的一致性。结果 该国产化学发光proGRP精密性良好,批内变异系数在2.8%~3.2%,总变异系数为4.3%~5.2%;检出限为5pg/mL;回收率在90.6%~105.2%;参考区间为<65 pg/mL;线性范围为15~3000 pg/mL;血清与EDTA血浆相关性良好;血清稳定性可达96 h;与Roche电化学发光法检测结果相关系数为0.99,斜率和截距分别为0.9889和1.28 pg/mL,相关性良好。结论该国产CLIA 法检测proGRP 性能参数和厂商声明一致,其性能可以满足临床要求。     

用免疫组织化学方法显示电生理记录部位神经元的化学性质——离体脑片法研究

500μm厚的冠状脑片取自新鲜大鼠下丘脑前部。在人工孵育条件下进行电生理观察,看到前连合核和第三脑室前部室周区部分神经元的电活动可被人工脑脊液中加入血管紧张素Ⅱ所兴奋,被提高人工脑脊液中的Ca~(++)浓度所抑制。这些电生理反应与大细胞内分泌神经元的电生理特性一致。记录结束时,记录部位用记录电极中的染料标记,脑片浸泡固定4—8h,恒冷箱切片,用抗催产素和抗加压素抗体孵育,ABC反应。结果在记录电极尖端所在部位看到数量不等的催产素或加压素免疫阳性神经元。上述电生理和免疫组化结果表明,研记录到的部分神经元可能含催产素或加压素免疫反应物质。本文报告了用免疫组织化学方法显示离体电生理标本,特别是记录部位神经元的免疫化学特性的实验结果。     

介绍一种获取胎儿细胞的方法

对于那些有遗传病家族史或生育过患儿的孕妇来说，如何能在孕早期确诊胎儿是否异常有十分重要的意义。目前孕早期产前诊断急待解决的问题是取样技术的突破。我们采用套管拭子法在早孕妇子宫腔下部采集脱落细胞，进一步确定胎儿细胞在女性生殖道的存在。     

介绍一种培养细胞简易的HE染色法

<正>在现代医学和生物学研究中培养细胞是非常好的实验对象。固定,染色是细胞培养中常用显示细胞形态的一种有效方法。它能使我们直接观察细胞的生长情况和形态结构,制做好的标本即能长期保存又便于日后观察、分析。我们经过反复的实践和摸索得出一种染色时间短,效果好,步骤简便的培养细胞HE染色示。     

两种体外培养基质对改良Bodian蛋白银染色和放射自显影术的影响

多聚赖氨酸和鼠尾胶原用作体外培养基质,对许多培养的组织块和细胞的贴壁生长起着重要的作用。本文观察和比较了这两种基质对培养物的改良Bodian 蛋白银染色和放射自显影术的影响:(1) 以多聚赖氨酸作为基质的交感神经元分离细胞培养标本,用改良Bodian蛋白银染色,其染色背景(基质部分)呈现较为均匀的淡蓝色,但以鼠尾胶原作为基质的染色标本,染色背景较易出现棕黑色的条纹或细网。(2) 以多聚赖氨酸作为基质的交感神经元分离细胞培养标本进行放射自显影术,被标记神经元的周围较少出现散在性的银粒(即本底),但在以鼠尾胶原作为基质的自显影标本中,被标记神经元的周围较常见到有许多散在性分布的本底。以上实验表明:(1) 以多聚赖氨酸作为基质对改良Bodian 蛋白银的染色效果影响较少,更利于分离培养神经元的形态学研究。(2) 在进行分离培养神经元的放射自显影术时,最好是使用多聚赖氨酸作为基质。已知多聚赖氨酸(poly-L-lysine)和鼠尾胶原两种基质(substratum)对许多体外培养的组织块和细胞,尤其是神经元的贴壁生长起着重要的作用。但是,有关多聚赖氨酸和鼠尾胶原这两种基质对分离培养神经元的形态学研究有何影响的。资料较少。本文从分离培养交感神经元的改良Bodian 蛋白银染色背景和放射自显影术两个方面,观察和比较两种基质的影响情况,为分离培养神经元的形态学研究提供参考资料。