结缔组织生长因子在椎间盘纤维化和退变中的表达和作用

目的研究疼痛椎间盘组织中结缔组织生长因子（connective tissue growth factor, CTGF）的表达及其在椎间盘纤维化和退变中的作用。方法收集腰椎后路融合过程中切除的43个疼痛的病理椎间盘，来自于28例行腰椎后路椎体间融合手术的严重椎间盘源性下腰痛患者；同时收集16个在MRIT2加权像信号强度明显减弱的无腰痛症状的退变椎间盘，取自于6例腰椎管狭窄症和8例多节段腰椎后路融合的患者（年龄44～75岁，平均53．5岁，男女比例为8：6）和8个正常对照椎间盘，来自于4具新鲜尸体标本（22～39岁，平均28岁）的L。和蛉．椎间盘。均行组织学检查并用免疫组化方法检测CTGF在不同椎间盘组织的表达。结果组织学检查发现，疼痛椎间盘组织显示不同程度的慢性血管化炎症反应。纤维环组织失去正常的胶原纤维板层结构，板层结构断裂、紊乱或相互交叉融合，正常的成纤维细胞被软骨细胞替代。髓核显示明显纤维化、血管浸润或形成炎性肉芽组织，软骨细胞被成纤维细胞所替代。免疫组化染色显示CTGF在疼痛椎间盘大量表达，无腰痛症状的退变椎间盘有少量表达，正常对照椎间盘没有表达。结论疼痛的退变椎间盘在组织学上明显不同于无腰痛症状的退变椎间盘。CTGF在疼痛椎间盘的大量表达可能与椎间盘纤维化和退变过程密切相关。     

肥大细胞和巨噬细胞在疼痛椎间盘的分布和意义

目的研究肥大细胞和巨噬细胞在疼痛椎间盘的分布并探讨其与椎间盘退变的关系。方法收集腰椎后路切除的15个椎间盘源性下腰痛病人的21个通过腰椎间盘造影术证实的疼痛椎间盘,同时收集16个在M RIT2加权上信号强度明显减弱的无腰痛症状的生理老化椎间盘和10个正常对照椎间盘,行组织学检查并用免疫组化方法观察肥大细胞和巨噬细胞在不同椎间盘的分布。结果免疫组织化学结果显示在疼痛椎间盘的肉芽组织区有大量的肥大细胞和巨噬细胞分布,在肉芽组织邻近区有少量分布,在非肉芽组织区、生理老化椎间盘和正常对照椎间盘没有分布。结论研究结果提示肥大细胞和巨噬细胞在纤维环外层损伤后激发的炎症反应和随之的椎间盘退变过程中起关键作用。     

椎间盘内注射转化生长因子-β1诱导椎间盘退变

目的探讨转化生长因子-β1（transforming growth factorial,TGF-β1）对正常成年的羊椎间盘组织内环境的影响。方法将TGF-β1注射进羊的椎间盘内,生理盐水和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growing factor,bFGF）分别作为阴性和阳性对照。术前及术后2．4．6个月检查腰椎X线及MRI,观察影像学变化;术后6个月处死动物,取出完整的椎间盘组织,观察椎间盘组织学变化。结果羊L5／L6椎间盘在注射转化生长因子6个月后（与对照组相比较）即出现明显退变。结论外源性TGF-β1可以导致正常椎间盘的退变。     

转化生长因子-β、碱性成纤维生长因子和血小板衍生生长因子在大鼠骨折愈合中的表达

目的观察转化生长因子-β（transforminggrowthfactor-β,TGF-β）、碱性成纤维生长因子（basicfi—broblastgrowthfactor,bFGF）和血小板衍生生长因子（platelet—derivedgrowthfactor,PDGF）在大鼠骨折愈合中的表达和分布情况。方法选用SD大鼠制作胫骨骨折模型,伤后不同时期处死取材,分别进行组织学和TGF-β、bFGF和PDGF的免疫组化染色观察。结果（1）伤后3d开始形成原始骨痂。I周时肉芽组织中的间质细胞开始分化为软骨细胞,软骨形成后再进行软骨内化骨。4周时形成连接骨折端的桥接骨痂。（2）伤后早期血肿中炎性细胞表达bF-GF和PDGF。伤后1周骨膜增殖细胞、肉芽组织中的成纤维细胞、内皮细胞、骨端骨细胞以及原始骨痂成骨细胞表达TGF-β、bFGF和PDGF。伤后2周软骨细胞表达TGF-β、bFGF和PDGF。结论TGF-β、bFGF和PDGF有各自的表达和分布特点,并共同调解骨原细胞的增殖和成骨细胞、软骨细胞的分化,最终完成骨折愈合。     

椎间盘源性下腰痛的发病机制

目的探讨椎间盘源性下腰痛的发病机制。方法收集腰椎后路切除的17例椎间盘源性下腰痛患者的19个经腰椎间盘造影术证实的疼痛腰椎间盘;同时收集12个在MRI T2加权像上信号强度明显减弱、无腰痛症状的生理老化椎间盘和10个正常对照椎间盘,行组织学检查和P物质、神经丝蛋白和血管活性肠肽的免疫组织化学染色检查。结果椎间盘源性下腰痛患者的疼痛椎间盘在组织学上的显著特征表现为,一条从髓核至纤维环外层的血管化肉芽组织条带区,其间伴有1个或多个裂隙;肉芽组织条带区与椎间盘造影术后CT上显示的纤维环裂隙一致,肉芽组织之外的纤维环结构基本正常。生理老化椎间盘和正常对照椎间盘表现为与年龄相关的改变。免疫组织化学染色显示,疼痛椎间盘中P物质、神经丝蛋白和血管活性肠肽3种神经肽阳性神经纤维分布数量和比例,较正常对照椎间盘和生理老化椎间盘明显增多;神经纤维主要沿伴有裂隙的肉芽组织条带区分布;疼痛椎间盘髓核中可见P物质和神经丝蛋白的阳性神经纤维分布。结论椎间盘后方神经分布广泛的肉芽组织条带区是椎间盘造影术疼痛和椎间盘源性下腰痛的起源部位。肉芽组织条带可能起源于椎间盘的创伤修复过程。生理老化椎间盘和疼痛椎间盘的差异是后者形成组织学上的肉芽组织条带区。     

人体退变椎间盘中PDGF-A、PDGFR-α的表达及生物学意义

目的 观察人体退变椎间盘组织中血小板源性生长因子-A(PDGF-A)、血小板源性生长因子受体-α(PDGFR-α)的表达,探讨其生物学意义.方法 免疫组化(S-P)法分别检测PDGF-A、PDGFR-α、增殖细胞核抗原(PCNA)在正常对照组(A组,n=17)、退变椎间盘组(B组,n=51)中的表达;TUNEL法检测两...     

退变腰椎间盘组织中碱性成纤维细胞生长因子的表达研究

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF)在正常和退变椎间盘组织中的表达情况。方法 交30例来源于腰椎间盘突出症患者手术中所取得的椎间盘组织（观察组，男11例，女19例；年龄25－78岁，平均48岁；病程3个月－30年，平均9年11个月）与6例来源于脊柱侧凸患者前路松解术所取得的椎间盘组织（对照组，男女各3例，年龄10－17岁，平均14.2岁）进行对比，首先经病理组织学检查证实为退变椎间盘组织和政党椎间盘组织，然后将两组椎间盘组织分别通过免疫组织化学方法和原位杂交方法，检测各自椎间盘组织中的bFGF及其mRNA的表达。观察组30例均为退变椎间盘组织，免疫组化阳性率为90％（27／30），原位杂交阳性率为20％（6／30）；对照组6例均为正常椎间盘组织，其免疫组及原位杂交均为阴性，两组间免疫组化方法检测阳性率在统计学上差异有非常显著性意义。结论 bFGF在正常和退变椎间盘组织中表达的差异有显著性意义。提示 bFGF可能作为增生刺激因子促进椎间盘组织中的软骨细胞增生和细胞外基质合成，进而加速椎间盘退变。     

成人颈椎间盘中转化生长因子β及其受体的测定及意义

目的：探讨转化生长因子β(TGF-β)及其受体在成人颈椎间盘中的分布规律及其意义。方法：将颈椎病、椎间盘突出症患者及对照组按年龄分为40岁以下组，40～60岁组，60岁以上组，同时采用Chistina椎间盘MRI退变分级法对所有患者进行退变分级，免疫组化染色方法测定椎间盘中的TGF-β及其受体，观察各分组、分级中TGF-β及其受体的分布及变化情况。结果：TGF-β及其受体大量存在于40岁以下患者间盘纤维环纤维软骨细胞中，髓核的脊索样细胞中染色较弱。随着年龄成长，逐渐减少。60岁以上患者间盘中，TGF-β及其受体几乎消失。MRI退变分级为Ⅰ～Ⅱ级的椎间盘TGF-β及受体阳性率高，Ⅲ级以上开始明显减弱。结论：TGF-β及其受体在成人颈椎间盘中的分布与患者年龄、椎间盘退变程度有关。其含量减少可能是颈椎间盘退变原因之一。     

人转化生长因子β1重组腺病毒体外转染羊传代椎间盘及软骨细胞的比较生物学研究

椎间盘及软骨退变的生物治疗是近年来研究的热点。转化生长因子β1（TGF-β1）重组腺病毒作为基因治疗的高效载体，几乎可以转染所有的体细胞表达目的蛋白，而达到生物治疗的目的。我们以人TGF-β1重组腺病毒载体（Ad／hTGF-β1），分别感染体外扩增的取自同一山羊个体的椎间盘及软骨细胞，对转染后的瞬时表达及二者的生物学行为进行了比较研究，为以生物学方法尤其是组织工程技术修复椎间盘退变提供依据。     

生长因子与椎间盘再生

目的：追溯近阶段国内外有关生长因子与椎间盘修复研究的进展。方法：广泛渣阅近期有关生长因子与椎间盘修复的文献，综述生长因子在椎间盘突的表达，生长因子对椎间盘细胞的作用等特点，结果：多种生长因子在椎间盘生长发育和退变过程中表达，外源性生长因子能促进培养的椎间盘细胞分化增殖，合成蛋白多糖和胶原，运用腺病毒可将生长因子基因转染至椎间盘细胞。结论：生长因子在椎间盘的生长发育和退变过程中起调节作用，可望运用生长因子进行椎间盘退变治疗和修复重建。重庆     

转化生长因子-β1在软骨诱导方面的应用进展

组织工程学与基因工程是目前治疗关节软骨及椎间盘退变等退变性疾病的新型治疗方案。其中转化生长因子-β1(Transformation growth factors beta1,TGF-β1)是转化生长因子β超家族成员中研究比较清楚的因子,具有促进细胞增殖生长和分化的作用。在Wehling等[1]于1977年首先提出转基因逆转椎间盘退变的设想之后,TGF-β1在基因转染及联合转染治疗软骨、间盘退变等疾病方面取得长足进展。本文就TGF-β1在软骨诱导方面的应用进展现状进行综述。     

不同月龄兔椎间盘组织中碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的表达

目的:观察不同月龄新西兰大白兔椎间盘组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF) 的表达,探讨其与椎间盘退变的关系.方法:40只健康新西兰大白兔,1、3、6、9、12、18、24、30月龄各5只,每只取椎间盘(L5/6、L6/7和L7/S1)组织制作石蜡切片,行HE染色观察各月龄椎间盘组织结构情况,行免疫组织化学染色检测VEGF和bFGF的表达情况,应用图像分析系统测定染色阳性细胞的累积光密度(integrated optical density,IOD).结果:HE染色显示,低月龄(1、3、6月龄)组椎间盘组织增生活跃,软骨终板均可见血管长入,尤其是1月龄组;中间月龄(9、12月龄)组椎间盘结构完整清晰,未见血管;18月龄组椎间盘出现退变,24月龄组椎间盘退变加重,30月龄组椎间盘结构破坏及老化严重,24、30月龄组椎间盘血管重新长入.免疫组化检查显示,bFGF和VEGF的IOD值在1月龄组表达最高(分别为38.22±14.13和57.67±15.36),随后逐渐下降,12月龄组表达最低(其IOD值分别为7.47±4.08和12.41±3.74),以后随月龄增加表达逐渐增多,30月龄组bFGF和VEGF的IOD值分别为27.93±11.64和37.54±7.32.低月龄组和高月龄组bFGF和VEGF的IOD值与中间月龄组比较均有显著性差异(P<0.01).结论:兔椎间盘的结构及血管的发生都随月龄增加发生相应变化;bFGF和VEGF的表达也随月龄增加发生相应改变,两者变化具有相似性.     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β在溃疡与增生性瘢痕组织中的表达及其对创面修复的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与转化生长因子-β(TGF-β)在溃疡和增生性瘢痕组织中的表达特征以及与修复结果的关系.方法 21例标本包括体表慢性溃疡8例、增生性瘢痕8例和正常皮肤5例.用免疫组织化学法和常规病理技术确定两种生长因子在溃疡和增生性瘢痕的定位与表达量.结果 bFGF和TGF-β在正常皮肤中有少量表达,主要位于表皮基底细胞胞浆和细胞外基质.此外,bFGF还见于真皮毛细血管内皮细胞等.在溃疡组织bFGF与 TGF -β表达量明显增加,其中bFGF的阳性信号主要见于成纤维细胞和毛细血管内皮细胞,而TG F-β则仅见于炎性细胞.在增生性瘢痕TGF-β的表达为阴性,而bFGF则仍呈现出较高的表达量.结论在高浓度生长因子环境下创面修复延迟可能和生长因子与其受体结合障碍有关.研究结果还提示bFGF参与了瘢痕发生的全过程,TGF-β则主要作用于瘢痕形成早期.     

脑胶质瘤增殖活性与转化生长因子-β1的关系

目的 探讨胶质瘤中转化生长因子-β1（TGF-β1）蛋白与增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白在胶质瘤中的表达及相互关系。方法 根据WHO标准进行分类，采用免疫组织化学方法对35例胶质瘤和7例正常脑组织石蜡标本中TGF-β1与PCNA蛋白的表达水平进行检测，并比较两者的相关性。结果 TGF-β1和PCNA蛋白在胶质瘤细胞中有不同程度的表达，两者呈正相关（r=0．78，P＜0．01），且它们在正常脑组织，低、高级别胶质瘤之间两两比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论 人脑胶质瘤TGF-β1蛋白的阳性表达与细胞增殖活性和组织学分级密切相关，它可能参与了人脑胶质瘤细胞的恶性转化。     

转化生长因子-β和碱性成纤维细胞因子在儿童原发性局灶节段性肾小球硬化肾组织中的表达

目的：通过检测转化生长因子-β（TGF-β）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在儿童原发性局灶节段性肾小球硬化（FSGS）肾组织中的表达情况,并分析其与肾小管间质病理变化的关系,以了解TGF-β与bFGF在原发性FSGS发生发展中的作用。方法：选择肾活检明确诊断为原发性FSGS患儿的肾组织共43例,其中不伴有肾小管间质病变的FSGS肾组织共16例,设为实验1组;伴有肾小管间质病变的FSGS肾组织共27例,为实验2组。另将同期因孤立性血尿入院肾活检证实为非FSGS、病理改变较轻的肾组织作为对照组,共17例。采用免疫组化法检测细胞/生长因子TGF-β、bFGF在各组中的表达。通过方差分析（ANOVA）和相关分析法分析细胞/生长因子的表达与FSGS肾组织病理变化的关系以及细胞/生长因子之间的相互作用关系。结果：TGF-β、bFGF在各组肾组织中均有表达,表达量在对照组、实验1组和实验2组中依次升高,各组间的差异均具有统计学意义（P〈0.05）;且TGF-β和bFGF的表达与肾小管间质指数呈正相关,相关系数依次为0.763和0.661。此外,TGF-β和bFGF两者的表达量经相关分析也显示呈正相关,相关系数为0.587。结论：TGF-β和bFGF在原发性FSGS患儿肾组织中高表达;随着FSGS的发展,它们在肾组织中表达量不断增加,促使肾小管间质向纤维化发展,而且两者在促进肾脏纤维化具有一定的协同作用。     

尿酸性肾病胰岛素样生长因子和成纤维细胞生长因子的表达

目的　探讨胰岛素样生长因子 1(IGF 1)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)与尿酸性肾病病变的关系。方法　采用原位杂交和免疫组织化学 (免疫组化 )方法 ,观察 30只腺嘌呤致尿酸性肾病模型大鼠肾病变发展过程中 ,IGF 1、bFGF、FGF受体 1(FGFR 1)、增殖细胞核抗原 (PCNA)及Ⅲ型胶原的表达。结果　受损伤及再生肾小管上皮细胞和肉芽肿内单个核细胞均有IGF 1mRNA和bFGFmRNA表达及蛋白合成 ,FGFR 1、PCNA和Ⅲ型胶原也广泛表达 ;肾小管间质bFGFmRNA和蛋白、FGFR 1、PCNA和Ⅲ型胶原阳性细胞随病程逐渐增多。结论　尿酸结晶对肾小管的损伤刺激IGF 1、bFGF在肾内表达增强且范围扩大 ,其表达程度与肾病变程度一致 ,提示IGF 1和bFGF在尿酸性肾病发展过程中发挥了重要作用。     

重组腺病毒介导的hTGF-β1基因增加兔髓核组织蛋白多糖合成的研究

椎间盘退变是导致下腰痛及一系列功能障碍的主要致病原因^[1]。髓核组织内的蛋白多糖使椎同盘保持一定的含水量^[2]．因此，蛋白多糖的减少可直接影响椎间盘的生物功能。研究表明，转化生长因子β1(TGF-β1)能促进髓核细胞产生蛋白多糖^[3]。我们用腺病毒作为载体，将人TBF-β1基因转染至兔髓核组织内，使TGF-β1在髓核组织内大量表     

碱性成纤维细胞生长因子在退变椎间盘组织中表达的研究进展

近年来由于CT、MRI等影像学新技术的广泛应用，人们发现在椎间盘突出症患者中，存在着突出椎问盘组织的吸收或缩小现象，研究表明生化机制可能在椎间盘退变中起着更重要的作用，并发现碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)可促进体内、外软骨细胞增生和细胞外基质合成，影响椎间盘退变，这方面的研究国内报道较少。现将bFGF在椎间盘组织中的表达研究作一综述。     

退变腰椎间盘细胞经体外转基因培养生物学活性的实验研究

目的构建转化生长因子（transforming growth factor,TGF-β3的真核表达载体pEGFP-TGF-β3转染椎间盘髓核细胞,研究转基因TGF-β3对退变髓核细胞生物学特性的影响。方法通过手术方法制作椎间盘突变模型,从而获取原代退变椎间盘髓核细胞,通过脂质体将真核载体pEGFP-TGF-β3导入髓核细胞,然后对细胞的形态和增殖活性（MTT法）进行观察,应用Westen Blot检测TGF-β3在髓核细胞的表达含量,应用免疫细胞化学方法检测转染后髓核细胞的Ⅱ型胶原的表达。结果髓核细胞转染后,细胞活性增强,TGF-β3表达增加,并随着时间的延长而增加。Ⅱ型胶原表达增加。结论TGF-β3转染退变髓核细胞可起到维持髓核细胞表型,并在细胞传代后仍发挥调节作用。TGF-β3确实具有促进髓核细胞增殖和Ⅱ型胶原合成的能力,从而有可能延缓甚至逆转椎间盘退变。     

激光对小鼠皮肤碱性成纤维细胞生长因子和β1转化生长因子表达的影响

目的 探讨1320nm波长非剥脱性激光对小鼠皮肤碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、β1转化生长因子（TGF-β1）表达的影响，为非剥脱性激光嫩肤提供实验依据。方法 以昆明小鼠为动物模型，共18只，分为A、B、C3组，每组6只。A组激光照射1次，B组激光照射2次，间隔1min，C组激光照射3次，间隔1min。共4个疗程，每个疗程间隔1周。选择1320nm波长激光，20J／cm^2能量照射小鼠背左侧皮肤，以背右侧作自身对照。用免疫组化法检测bFGF和TGF-β1在受照射小鼠皮肤真皮中的表达。以真皮成纤维细胞胞浆含黄色或棕黄色颗粒为阳性细胞，计算每高倍视野阳性细胞数。结果 1320nm波长激光照射后小鼠皮肤bFGF和TGF-β1表达增加，其中激光照射3次组，每高倍视野阳性细胞数为（1．57±1．12）个，与各组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 小鼠皮肤受1320nm波长激光照射后，其真皮bFGF和TGF-β1表达增加，表达量与激光照射次数有关。